一种检测犬副流感病毒抗体的试纸条的制作方法

本实用新型涉及检测犬副流感病毒抗体的工具，尤其涉及一种检测犬副流感病毒抗体的试纸条。

背景技术：

犬副流感病毒感染是由犬副流感病毒(canine parainfluenza virus，CPIV)是引起犬的重要呼吸道传染病，以突然发热、卡他性鼻炎和支气管炎为特征，目前全球所有养犬的国家几乎都有本病的流行。CPIV能感染各种年龄的犬，幼犬病情较重，死亡率较高。

快速检测犬副流感病毒抗体，不仅可以评价疫苗免疫效果，而且可以辅助临床诊断，是有效控制犬副流感病毒感染的前提。目前检测犬副流感病毒抗体的方法主要有血清中和实验、IFA和ELISA等方法。然而，血清中和实验、IFA和ELISA检测技术操作复杂，需要昂贵的仪器设备、过程较长、耗时费力，需要特定仪器设备和专业技术人员操作，很难在基层普及，不能满足生产一线或疫病现场的快速检测需要。因此，亟待有一种快速检测犬副流感病毒抗体的设备及技术。

技术实现要素：

针对上述技术问题，本实用新型提供了一种可以实现快速检测的，方便进行长度调整的检测犬副流感病毒抗体的试纸条。

本实用新型提供的技术方案为：

一种检测犬副流感病毒抗体的试纸条，包括：

支撑层，其包括多个支撑块，每个支撑块的一侧具有插接槽，相对的另一侧具有插接部，相邻两个支撑块中其中一个支撑块的插接部插入至另一个支撑块的插接槽内，从而使多个支撑块依次连接成为一个整体；

检测层，其包括依次设置于所述支撑层上的样品吸附纤维层、金标纤维层、纤维素膜层以及吸水材料层，其中，所述纤维素膜层上形成有检测印迹和对照印迹，所述金标纤维层上吸附有胶体金标记的犬副流感病毒或胶体金标记的重组犬副流感病毒HN蛋白，所述检测印迹为由纯化的犬副流感病毒抗原液印制而成，所述对照印迹为由羊或兔抗犬副流感病毒IgG溶液印制而成。

优选的是，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述多个支撑块包括四个支撑块，且所述样品吸附纤维层、金标纤维层、纤维素膜层以及吸水材料层依次对应设置在各支撑块上。

优选的是，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述支撑层为由硬质塑胶条制成。

优选的是，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述样品吸附纤维层为由玻璃棉、尼龙纤维或聚酯纤维制成。

优选的是，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述金标纤维层为由玻璃棉制成。

优选的是，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述纤维素膜层为由硝酸纤维素膜、纤维素膜、羧甲基纤维素膜或聚偏二氟乙烯PVDF纤维素膜制成。

优选的是，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述吸水材料层用吸水纸制成。

优选的是，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述样品吸附纤维层、所述金标纤维层上覆盖有第一保护层，所述吸水材料层上覆盖有第二保护层，在所述第一保护层上印制有样品标记线。

优选的是，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，当在所述纤维素膜层上形成有一条检测印迹和一条对照印迹时，所述检测印迹和所述对照印迹的排列方式为||、十十、┬┬、┴┴、├├、┤┤和●●中的任一种；当在所述纤维素膜层上形成有两条检测印迹和一条对照印迹时，两条检测印迹和一条对照印迹依次排列，且排列方式为|||、十十十、┬┬┬、┴┴┴、├├├、┤┤┤和●●●中的任一种。

本实用新型所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条具有以下有益效果：

(1)本实用新型将支撑层设计成由多个支撑块连接连接而成的结构，每个支撑块在彼此相对的一侧具有插接部和插接槽，相邻两个支撑块彼此插接，当需要改变试纸条的长度，即改变支撑层的长度，只需要根据需要增加支撑块的个数即可。本实用新型极大提高了试纸条使用上的方便程度。

(1)检测特异性强，敏感性高。本实用新型提供的试纸条以胶体金标记犬副流感病毒或胶体金标记重组犬副流感病毒HN蛋白为基础制备而成，金标病毒蛋白中金颗粒与病毒蛋白分子之间无共价键形成，二者通过异性电荷间的范德华力相结合，胶体金标对病毒蛋白的特异性和亲和力影响很小，且具有较高的印迹率。

(2)操作简便，快速。本实用新型的试纸条在使用时无需附加任何其它仪器和试剂，只要将其测试端插入待检样品液中30秒左右，5分钟左右即可判定检测结果。

(3)结果显示直观、准确。本实用新型的试纸条以显示棕红色的检测印迹和对照印迹作为检测的阳性和阴性印迹，即在纤维素膜上显示两条棕红色印迹，表示在被检测样品中有病毒抗体检出，结果为阳性；在纤维素膜上只显示一条棕红色对照印迹C，表示在被检测样品液中未检出病毒抗体，结果为阴性。结果判定直观、准确，简单明了，不易出现假阴性和假阳性误判。

(4)减少投资和检测成本。本实用新型的试纸条在使用时，不需另配其它仪器、设备和试剂，节省大量仪器、设备和附加试剂费用；专业和非专业人士均可随时随地进行现场检测，无需支付专家诊断检查费或送样品去诊断室的路费，节省检测成本，检测费用低。

(5)应用范围广，便于普遍推广应用。本实用新型提供的试纸条操作简单，成“一步式”或“傻瓜式”，而且方便携带和保存，能满足不同层次人员的需要，包括专业化验、海关检疫、卫生防疫、质量监测、畜产品加工、集约化养殖到个体养殖等，具有广阔的市场前景和较好的经济、社会效益。

(6)本实用新型根据ELISA的基本原理，用免疫层析试纸检测病毒抗体，利用微孔滤膜的渗滤浓缩和毛细管作用，将抗原-抗体反应由ELISA的传统液相环境转到固相滤膜上快速进行，并采用胶体金印迹代替酶印迹，凭肉眼直接观察胶体金的显色状况，即时获得检测结果，因此该方法比ELISA等血清学方法更为简便、快速。

附图说明

图1为本实用新型所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条的俯视图；

图2为本实用新型所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条的侧面视图；

图3为本实用新型所述的支撑层的结构示意图。

具体实施方式

下面结合附图对本实用新型做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

如图1和图2所述，本实用新型提供一种检测犬副流感病毒抗体的试纸条，包括：支撑层1，其包括多个支撑块11，每个支撑块的一侧具有插接槽13，相对的另一侧具有插接部12，相邻两个支撑块中其中一个支撑块的插接部插入至另一个支撑块的插接槽内，从而使多个支撑块依次连接成为一个整体；检测层，其包括依次设置于所述支撑层上的样品吸附纤维层、金标纤维层、纤维素膜层以及吸水材料层，其中，所述纤维素膜层上形成有检测印迹和对照印迹，所述金标纤维层上吸附有胶体金标记的犬副流感病毒或胶体金标记的重组犬副流感病毒HN蛋白，所述检测印迹为由纯化的犬副流感病毒抗原液印制而成，所述对照印迹为由羊或兔抗犬副流感病毒IgG溶液印制而成。

请查阅图1，图中支撑层1为以塑胶薄片条制成，样品吸附纤维层2为以玻璃棉制成，金标纤维层3为附着有胶体金标记的犬副流感病毒或胶体金标记的重组犬副流感病毒HN蛋白的玻璃棉制成的，纤维素膜层4为硝酸纤维素膜制成的，吸水材料层5为由吸水滤纸制成的，将上述各层依次粘贴在支撑层1上，彼此拼接的交界处纤维互相交叉渗透。在纤维素膜层4上，以纯化的犬副流感病毒抗原液标记检测印迹6，代号T，以羊或兔抗犬副流感病毒IgG溶液标记对照印迹7，代号C；检测印迹与对照印迹的排列形式为“||”。

如图2所示，第一保护层8为覆盖在样品吸附纤维层2和金标纤维层3上面的测试端的白色保护膜，在样品吸附层2和金标纤维层3交界处对应的白色保护膜上偏向于样品吸附纤维层2一侧0.5cm处印有印迹线9，印迹线的右端印有箭头及MAX字样，位于手柄端的吸水层5上覆盖有其它颜色例如黄色保护膜10。

请查阅图3，图3给出支撑层的结构示意图。本实用新型的支撑层包括多个支撑块，并且每个支撑块彼此相对的两侧分别形成有插接部和插接槽，相邻两个支撑块中一个支撑块的插接部插接至另一个支撑块的插接槽内，从而实现二者的插接。当需要改变试纸条的长度，就需要改变支撑层的长度。通过增加或减少支撑块的个数，即可以实现对支撑层长度的改变。

当支撑层的长度确定好，再在支撑层上设置检测层，最终即得到所需长度的试纸条。

本实用新型结构简单，使用方便，成本低廉，检测效果好。

以下说明所述试纸条的检测操作方法：

a检测样品液的制备：无菌取被检动物的血液，并分离血清，以生理盐水作1:200倍的稀释血清，得到待测样品；

b检测操作：将该试纸条测试端插入待检测样品中，插入深度不超过印迹线，约30秒后取出试纸条，水平放置约1-5分钟，同时观察结果。

c结果判断：如果在试纸条的纤维素膜上只显示出一条棕红色对照印迹C，表示测检结果呈阴性，说明在被检样品液中未检测出犬副流感病毒抗体；如果试纸条上的纤维素膜出现棕红色的对照印迹C和检测印迹T，表示检测结果呈阳性，即在待检样品中检出犬副流感病毒抗体；如果纤维素膜上没有任何棕红色印迹显示，则表明试纸条已失效或操作有误。

本发明所述试纸条的检测原理为：

当试纸条测试端即吸附纤维层插入待检测样品溶液后，待检溶液通过层析作用带动待检犬副流感病毒抗体及金标纤维膜中的金标抗原一起向纤维素膜扩散，并最终渗入手柄端的吸水层中，扩散过程中待检病毒抗体可与该病毒抗体相对应的金标病毒或金标重组蛋白HN相结合，进而与纤维素膜上检测印迹中的病毒结合，从而显示出棕红色的检测印迹T；而对照印迹中的羊或兔抗犬副流感病毒IgG则可与金标犬副流感病毒或金标重组犬副流感病毒VP1蛋白结合，形成棕红色对照印迹C。如果待检样品液中没有CPIV抗体，试纸条只显示出一条棕红色对照印迹C；如果纤维素膜上没有任何棕红色印迹显示，则表明试纸条已失效或操作失误。

在一个优选的实施例中，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述样品吸附纤维层和所述金标纤维层之间的衔接线与分别位于所述样品吸附纤维层和所述金标纤维层下方的两个支撑块的接合线对齐，所述金标纤维层和所述纤维素膜层之间的衔接线与分别位于所述金标纤维层和所述纤维素膜层下方的两个支撑块的接合线对齐，所述纤维素膜层和吸水材料层之间的衔接线与分别位于所述纤维素膜层和吸水材料层下方的两个支撑块的接合线对齐。

即，在各层的下方均设置有一个或多个完整的支撑块。比如，在样品吸附纤维层下方有三个支撑块，在金标纤维层下设置有一个支撑块，在纤维素膜层的下方对应设置有三个支撑块，在吸水材料层对应设置有五个支撑块。当测试完成，可以通过拔动支撑块，而将样品吸附纤维层、金标纤维层以及吸水材料层拆下来，仅保留中间具有检测印迹的纤维素膜层。本实用新型进一步提高了试纸条在使用上的灵活性和方便性。

在一个优选的实施例中，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述支撑层为由硬质塑胶条制成。

在一个优选的实施例中，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述样品吸附纤维层为由玻璃棉、尼龙纤维或聚酯纤维制成。

在一个优选的实施例中，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述金标纤维层为由玻璃棉制成。

在一个优选的实施例中，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述纤维素膜层为由硝酸纤维素膜、纤维素膜、羧甲基纤维素膜或聚偏二氟乙烯PVDF纤维素膜制成。

在一个优选的实施例中，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述吸水材料层用吸水纸制成。

在一个优选的实施例中，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，所述样品吸附纤维层、所述金标纤维层上覆盖有第一保护层，所述吸水材料层上覆盖有第二保护层，在所述第一保护层上印制有样品标记线。

在一个优选的实施例中，所述的检测犬副流感病毒抗体的试纸条中，当在所述纤维素膜层上形成有一条检测印迹和一条对照印迹时，所述检测印迹和所述对照印迹的排列方式为||、十十、┬┬、┴┴、├├、┤┤和●●中的任一种；当在所述纤维素膜层上形成有两条检测印迹和一条对照印迹时，两条检测印迹和一条对照印迹依次排列，且排列方式为|||、十十十、┬┬┬、┴┴┴、├├├、┤┤┤和●●●中的任一种。

尽管本实用新型的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本实用新型的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本实用新型并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。