本发明涉及一种老鹳草素含量的方法,更具体地说，它涉及一种利用反相高效液相色谱法检测老鹳草素含量的方法。
背景技术：
老鹳草素是老鹳草主要活性成分，主要有抗氧化，止泻等作用。
老鹳草素，分子式为：c41h28o27，分子量952.64，cas号为60976-49-0。
现有检测方法灵敏度较低、重复性较差，不适合用于检测老鹳草素含量。因此有必要探索出更易操作、更准确的含量测定方法。
技术实现要素：
针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种利用反相高效液相色谱法检测老鹳草素含量的方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：一种利用反相高效液相色谱法检测老鹳草素含量的方法，该方法包括以下步骤：
(1)将老鹳草素用50％乙腈超声溶解配制成约1mg/ml溶液，过膜，得到供试品溶液；
(2)使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的c18色谱柱；
(3)高效液相色谱仪设置如下：采用乙腈-0.2％磷酸水溶液梯度洗脱，0～5min5％乙腈，5～10min5％～10％乙腈，10～11min10％～13％乙腈，11～30min13％乙腈，30～31min13％～90％乙腈，31～41min90％乙腈，41～42min90％～5％乙腈；42～54min5％乙腈；流速为1.0ml/min；柱温35℃；进样量5μl；检测波长uv-270nm；
作为优选的，步骤(1)中，所用的溶剂为50％乙腈，超声时间为5min(500w，40khz)。
作为优选的，步骤(1)中，所用的滤膜为0.45μm。
作为优选的，步骤(2)中，所用的固定相是十八烷基硅烷键合硅胶。
作为优选的，步骤(3)中，所用的流动相为乙腈：0.2％磷酸水溶液，梯度洗脱。
作为优选的，步骤(3)中，样品的进样量可以是5～100μl之间。
作为优选的，步骤(3)中，使用uv-270nm检测器。
本发明相对现有技术相比具有以下优点：(1)准确度高，重现性好，结果可靠；(2)方法操作简便、实用性强，适合于老鹳草素的含量测定。
附图说明
图1为本发明利用反相高效液相色谱法检测老鹳草素含量的方法实施例1的含量测定色谱图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明利用反相高效液相色谱法检测老鹳草素含量的方法实施例做进一步说明。
实施例1：
色谱条件与系统适应性：色谱柱使用welchultimatexbc18(4.6×250mm，5μm)；流动相为乙腈-0.2％磷酸水溶液梯度洗脱，0～5min5％乙腈，5～10min5％～10％乙腈，10～11min10％～13％乙腈，11～30min13％乙腈，30～31min13％～90％乙腈，31～41min90％乙腈，41～42min90％～5％乙腈；42～54min5％乙腈；流速1.0ml/min；柱温为35℃，进样量5μl；
供试品溶液的制备：取老鹳草素3.1mg，称定，置5ml容量瓶中，加入适量50％乙腈，超声处理(500w，40khz)5min，放冷，用50％乙腈定容至刻度，摇匀。用0.45μm的微孔滤膜过滤，即得。
空白溶液的制备：取50％乙腈，即得。
测定法：精密吸取供试品和空白溶液各5μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。