β-胡萝卜素含量的测定方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种β_胡萝卜素含量的测定方法，特别是β_胡萝卜素微囊中所含 的β-胡萝卜素含量的测定方法。
【背景技术】
[0002] β_胡萝卜素是类胡萝卜素之一，也是橘黄色脂溶性化合物，它是自然界中最普遍 存在也是最稳定的天然色素，许多天然食物中皆存有丰富的β_胡萝卜素。β_胡萝卜素 是一种抗氧化剂，具有解毒作用，是维护人体健康不可缺少的营养素，在抗癌、预防心血管 疾病和白内障以及抗氧化上有显著的功能。另外一个重要特点是β_胡萝卜素在进入人体 后可以转变为维生素 Α，体摄入过量的维他命A会造成中毒，只有当有需要时，人体才会将 β -胡萝卜素转换成维他命Α，不会有因过量摄食而造成维生素 A累积中毒现象，这一个特 征使β-胡萝卜素成为维他命A的一个安全来源。
[0003] 随着保健食品领域的广泛应用，β -胡萝卜素含量的高低直接影响着产品的质量， 因此，β_胡萝卜素含量的准确程度成为检测方法较为重要的评判标准。在已知的β_胡 萝卜素含量的测定方法中，HPLC法、紫外分光光度法和纸层析法为较为常见的方法，但是 HPLC法需要特定的分析仪器及相应的标准物质，分析成本高；纸层析法操作步骤多、时间 长，易造成β_胡萝卜素分解，在实际生产中受到一定的限制。紫外分光光度法操作过程简 便有效，利用β_胡萝卜素在最大吸收波长时固有的百分吸收系数，通过测定样品溶液的 吸收度即可进行样品含量的计算。但是β_胡萝卜素微囊是通过特有方法而生产的，常用 的微囊化壁材为明胶等，相当于β-胡萝卜素涂了一层明胶保护膜，所以如何使包埋在明 胶里的β_胡萝卜素充分溶解提取出来，是测定其含量的关键。β_胡萝卜素微囊虽然能够 溶于水但溶解时间长并溶出度不高，而常用的有机溶剂直接萃取法不适合微囊化后β -胡 萝卜素的提取，从而造成β_胡萝卜素微囊中β_胡萝卜素含量检测结果精密度不高，故需 对β-胡萝卜素微囊的溶解方法进行改进。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是对β -胡萝卜素微囊常用溶解方法进行改进，以二甲基亚砜溶剂 破坏微囊的囊壁，使其快速崩解溶解，同时二甲基亚砜是重要的极性非质子溶剂，它可与许 多有机溶剂及水互溶，提供了一种简便、快速、准确的测定β-胡萝卜素微囊中β-胡萝卜 素含量方法。
[0005] 本发明的技术方案：为了解决以上技术问题本发明提供了一种β_胡萝卜素含量 的测定方法，包括以下步骤： 步骤1.样品的处理： 精确称量样品置于棕色容量瓶中，加入二甲基亚砜，超声5分钟，再加入60°C纯化水及 蛋白酶溶液并在60°C水浴中超声5分钟，加入无水乙醇和二氯甲烷再次水浴超声5分钟，冷 却至室温后加二氯甲烷稀释至刻度，摇匀； 步骤2.样品溶液的处理： 从容量瓶中取出部分内容物置具塞离心管中离心处理，离心结束后吸取离心管中的 上清液1.0 Oml于50ml容量瓶中，加无水乙醇-环己烷溶液稀释至刻度，摇匀； 步骤3.吸光度的测量： 以无水乙醇-环己烷溶液为空白，用分光光度计测量溶液在455nm处的吸光度A (吸光 度读数必须在0. 300~0. 700范围内，否则控制稀释倍数使吸光度读数在允许范围内，计算 含量时要参考）； 步骤4.根据所测样品的吸光度进行计算：
【主权项】
1. β -胡萝卜素含量的测定方法，其特征在于：包括以下步骤： 步骤1.样品的处理： 精确称量样品置于棕色容量瓶中，加入二甲基亚砜，超声5分钟，再加入60°C纯化水及 蛋白酶溶液并在60°C水浴中超声5分钟，加入无水乙醇和二氯甲烷再次水浴超声5分钟，冷 却至室温后加二氯甲烷稀释至刻度，摇匀； 步骤2.样品溶液的处理： 从容量瓶中取出部分内容物置具塞离心管中离心处理，离心结束后吸取离心管中的 上清液1.0 Oml于50ml容量瓶中，加无水乙醇-环己烷溶液稀释至刻度，摇匀； 步骤3.吸光度的测量： 以无水乙醇-环己烷溶液为空白，用分光光度计测量溶液在455nm处的吸光度A ; 步骤4.根据所测样品的吸光麼讲行计笪：
其中A :吸光度值；W :样品的重量，g ;2500 : β -胡萝卜素的百分吸收系数。
2. 根据权利要求1所述的β -胡萝卜素含量的测定方法，其特征在于：所述的无水乙 醇-环己烷溶液的无水乙醇与环己烷的体积比为1 :9。
3. 根据权利要求1所述的β_胡萝卜素含量的测定方法，其特征在于：离心条件为：时 间为 5 min，转速为 3000 r/min ~4000r/min。
4. 根据权利要求1所述的β_胡萝卜素含量的测定方法，其特征在于：样品重量在 〇. 5g以下，加入的二甲基亚砜、纯化水、蛋白酶、无水乙醇、二氯甲烷的体积比例为5 :5 :1 : 100 :89。
5. 根据权利要求1所述的β -胡萝卜素含量的测定方法，其特征在于：所述的棕色容 量瓶是200ml。
【专利摘要】本发明公开了对β-胡萝卜素微囊常用溶解方法进行改进的方法，以二甲基亚砜溶剂破坏微囊的囊壁，使其快速崩解溶解，同时二甲基亚砜是重要的极性非质子溶剂，它可与许多有机溶剂及水互溶，提供了一种简便、快速、准确的测定β-胡萝卜素微囊中β-胡萝卜素含量方法。本发明以二甲基亚砜溶剂破坏微囊的囊壁，使其快速崩解溶解，同时根据相似相溶原理，确保溶解后的二甲基亚砜溶液与水互溶，便于蛋白酶对微囊的彻底溶解；利用无水乙醇能与水、二甲基亚砜和二氯甲烷有机溶剂以任意比例互溶的特性，解决了样品在混合溶剂中溶解均匀的问题，同时无水乙醇-环己烷溶液也确保了稀释后的样品溶液澄清；本发明精确度良好。
【IPC分类】G01N21-31
【公开号】CN104634749
【申请号】CN201310559205
【发明人】陈惠勋, 奚栋梁
【申请人】江苏艾兰得营养品有限公司
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2013年11月12日