糖尿病肾病早期检测试纸盒、生物标志物检测方法及应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物检测领域，尤其是涉及一种糖尿病肾病早期检测试纸盒、生物标 志物检测方法及应用。
【背景技术】
[0002] 糖尿病肾病是糖尿病最严重的慢性微血管并发症之一，并最终引起终末肾衰竭， 是糖尿病患者死亡的主要原因。据世界卫生组织2013年统计，全世界约有3. 47亿人患有 糖尿病，其中超过80%的糖尿病死亡病例发生在发展中国家。同时，世界卫生组织预测到 2030年，全球因糖尿病死亡的人数将翻一番，其中30%~40%的2型糖尿病人将发展为糖 尿病肾病，20%~40%的1型糖尿病患者在15~30年后也将发展为糖尿病肾病，造成了巨 大且沉重的社会经济负担。
[0003] 然而，糖尿病肾病早期很难发现，且临床糖尿病肾病诊断黄金标准肌酐和蛋白尿 也只能间接反映肾脏实质性病变（肾小球系膜细胞扩增、基底膜加厚、足细胞损伤、肾小管 上皮细胞及间质细胞损伤等），无法诊断早期糖尿病肾病（正常蛋白尿期，见下表1)。
[0004] 表1 :糖尿病肾病临床分期（基于Mogensen分期法）
【主权项】
1. 一种糖尿病肾病早期检测试纸盒，其特征在于，包括检测试剂和捕获试剂； 所述检测试剂包括第一检测试剂、第二检测试剂、第三检测试剂和第四检测试剂中的 二个或三个，所述第一检测试剂的溶质为第一足糖萼蛋白抗体，所述第二检测试剂的溶质 为第一IV型胶原蛋白抗体，所述第三检测试剂的溶质为第一肝型脂肪酸结合蛋白抗体，所 述第四检测试剂的溶质为第一中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白抗体； 所述捕获试剂的溶质包括结合了第一可检测标记成分的第二足糖萼蛋白抗体、结合了 第二可检测标记成分的第二IV型胶原蛋白抗体、结合了第三可检测标记成分的第二肝型脂 肪酸结合蛋白抗体和结合了第四可检测标记成分的第二中性粒细胞明胶酶相关脂质运载 蛋白抗体中的二种或三种； 所述检测试剂与所述捕获试剂相互匹配。
2. 如权利要求1所述的糖尿病肾病早期检测试纸盒，其特征在于，所述检测试剂包括 所述第一检测试剂和所述第四检测试剂； 所述捕获试剂的溶质包括所述结合了第一可检测标记成分的第二足糖萼蛋白抗体和 所述结合了第四可检测标记成分的第二中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白抗体。
3. 如权利要求1所述的糖尿病肾病早期检测试纸盒，其特征在于，所述检测试剂包括 所述第二检测试剂、所述第三检测试剂和所述第四检测试剂； 所述捕获试剂的溶质包括所述结合了第二可检测标记成分的第二IV型胶原蛋白抗体、 所述结合了第三可检测标记成分的第二肝型脂肪酸结合蛋白抗体和所述结合了第四可检 测标记成分的第二中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白抗体。
4. 如权利要求1所述的糖尿病肾病早期检测试纸盒，其特征在于，所述糖尿病肾病早 期检测试纸盒还包括足糖萼蛋白标准品、IV型胶原蛋白标准品、肝型脂肪酸结合蛋白标准 品和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白标准品。
5. 如权利要求1所述的糖尿病肾病早期检测试纸盒，其特征在于，所述第一足糖萼蛋 白抗体为单克隆抗体，所述第二足糖萼蛋白抗体为多单克隆抗体； 所述第一IV型胶原蛋白抗体为单克隆抗体，所述第二IV型胶原蛋白抗体为多克隆抗 体； 所述第一肝型脂肪酸结合蛋白抗体为单克隆抗体，所述第二肝型脂肪酸结合蛋白抗体 为多克隆抗体； 所述第一中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白抗体为单克隆抗体，所述第二中性粒细 胞明胶酶相关脂质运载蛋白抗体为多克隆抗体。
6. -种生物标志物检测方法，采用如权利要求1~5中任一项所述的糖尿病肾病早期 检测试纸盒，其特征在于，包括如下步骤： 提供设有检测位点的基板，将检测试剂滴加在检测位点上，充分反应后将所述检测位 点洗绦干净； 将洗涤干净后的所述检测位点封闭，封闭完成后将所述检测位点洗涤干净； 将待检测样本滴加在封闭完成并洗涤干净的所述检测位点上，充分反应后将所述检测 位点洗绦干净； 将捕获试剂滴加在所述检测位点上，充分反应后将所述检测位点洗涤干净；以及 检测所述检测位点是否含有所述第一可检测标记成分、所述第二可检测标记成分、所 述第三可检测标记成分和所述第四可检测标记成分，并且根据检测结果得到所述待检测样 本中足糖萼蛋白、IV型胶原蛋白、肝型脂肪酸结合蛋白和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载 蛋白的含量。
7. 如权利要求6所述的生物标志物检测方法，其特征在于，还包括如下步骤：将得到的 所述待检测样本中的足糖萼蛋白、IV型胶原蛋白、肝型脂肪酸结合蛋白和中性粒细胞明胶 酶相关脂质运载蛋白的含量与截断值进行对比，当所述待检测样本中的足糖萼蛋白、IV型 胶原蛋白、肝型脂肪酸结合蛋白和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的含量均在截断值 以上时判定为阳性，此外则判定为阴性。
8. 如权利要求6所述的生物标志物检测方法，其特征在于，还包括如下步骤：将得到的 所述待检测样本中的足糖萼蛋白、IV型胶原蛋白、肝型脂肪酸结合蛋白和中性粒细胞明胶 酶相关脂质运载蛋白的含量与截断值进行对比，当所述待检测样本中的足糖萼蛋白、IV型 胶原蛋白、肝型脂肪酸结合蛋白和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的含量至少有一个 在截断值以上时判定为阳性，此外则判定为阴性。
9. 如权利要求6所述的生物标志物检测方法，其特征在于，所述待检测样本包括治疗 前样本和治疗后样本； 将得到的治疗前样本中足糖萼蛋白、IV型胶原蛋白、肝型脂肪酸结合蛋白和中性粒细 胞明胶酶相关脂质运载蛋白的含量与治疗后样本中的足糖萼蛋白抗体、IV型胶原蛋白、肝 型脂肪酸结合蛋白和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的含量进行对比，根据比对结果 评估治疗方法的有效性。
10. 足糖萼蛋白、IV型胶原蛋白、肝型脂肪酸结合蛋白和中性粒细胞明胶酶相关脂质运 载蛋白中的二个或三个，作为生物标志物在制备肾损伤诊断试剂或肾损伤诊断装置中的应 用。
【专利摘要】本发明公开了一种糖尿病肾病早期检测试纸盒，包括检测试剂；所述检测试剂包括第一检测试剂、第二检测试剂、第三检测试剂和第四检测试剂中的二个或三个；所述第一检测试剂的溶质为第一足糖萼蛋白抗体，所述第二检测试剂的溶质为第一Ⅳ型胶原蛋白抗体，所述第三检测试剂的溶质为第一肝型脂肪酸结合蛋白抗体，所述第四检测试剂的溶质为第一中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白抗体。这种糖尿病肾病早期检测试纸盒通过足糖萼蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、肝型脂肪酸结合蛋白和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白中的二种或三种作为生物标志物，可以根据实际检测结果，为肾损伤提供辅助判断，从而为区分早期糖尿病肾病提供辅助。
【IPC分类】G01N33-577, G01N33-68
【公开号】CN104764886
【申请号】CN201510130731
【发明人】张贯京, 张俊然, 谷东风, 克里斯基捏·普拉纽克, 艾琳娜·古列莎, 波达别特·伊万, 刘遥峰, 卢卡·穆桑特, 杨轶, 石江波, 朱孔林
【申请人】深圳市贝沃德克生物技术研究院有限公司, 深圳市易特科信息技术有限公司, 深圳市前海安测信息技术有限公司
【公开日】2015年7月8日
【申请日】2015年3月24日