一种脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物的分析方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于分析化学领域，具体涉及一种脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物的分 析方法。
【背景技术】
[0002] 脱氧雪腐镰刀菌烯醇属于真菌毒素，真菌毒素是由产毒真菌在适宜的环境条件下 产生的有毒代谢产物，脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人类危害特别大且污染频率高，国内外对粮 谷、食品和饲料中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇制定了严格的限量标准。
[0003] 在中国专利201210029115"一种谷物中结合态脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的检测方 法"中公开了通过TFMSA催化水解检测差值来确定含量；在中国专利201010209190. X "一 种检测中药中雪腐镰刀菌烯醇和脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素的方法"中，公开了通过高效液 相色谱-质谱联用法在全扫描模式下确证毒素；在中国专利201110370420. 5 "小麦中几种 真菌毒素含量的检测方法"中，公开了通过高效液相色谱-质谱联用法检测，通过毒素浓度 对于峰面积的回归方程计算DON、T-2毒素的含量；现有文献中缺乏分析降解产物的时候考 虑溶剂辐照后对产物分析的影响。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种避免溶剂辐照后对降解产物分析结果干扰的脱氧雪腐 镰刀菌烯醇辐照降解产物的分析方法。
[0005] 实现本发明目的的技术方案是一种脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物的分析方 法，包括下列步骤：（1)配制脱氧雪腐镰刀菌烯醇的标准品溶液和相应的溶剂空白，对标准 品溶液和相应的溶剂空白均经辐照范围是〇_9kGy的辐照处理，通过液相色谱一串联质谱 法对脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物进行解析；(2)用全扫描模式检测溶剂空白经相应 剂量的辐照后图谱的变化；（3)分析脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物时，将辐照后标准 品溶液图谱与经相同剂量辐照的溶剂空白的图谱及未辐照的标准品溶液图谱进行比较，剔 除相同干扰峰，仅分析辐照后标准品溶液图谱中特有的特征峰。
[0006] 优选的所述辐照的辐照源是γ射线，所述液相色谱一串联质谱法的色谱条 件：采用Thermo Finnigan液相色谱系统，其液相条件包括色谱柱是Sepax BR-C18柱 100 X 2. 1mm，5 μ m ;流动相是A :甲醇，B :水，在流速250 μ L/min和进样量25 μ L条件下，进 行梯度洗脱；具体洗脱梯度是：
[0007]
【主权项】
1. 一种脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物的分析方法，其特征在于：包括下列步骤： (1)配制脱氧雪腐镰刀菌烯醇的标准品溶液和相应的溶剂空白，对标准品溶液和相应的溶 剂空白均经辐照范围是〇-9kGy的辐照处理，通过液相色谱一串联质谱法对脱氧雪腐镰刀 菌烯醇辐照降解产物进行解析；（2)用全扫描模式检测溶剂空白经相应剂量的辐照后图谱 的变化；（3)分析脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物时，将辐照后标准品溶液图谱与经相 同剂量辐照的溶剂空白的图谱及未辐照的标准品溶液图谱进行比较，剔除相同干扰峰，仅 分析辐照后标准品溶液图谱中特有的特征峰。
2. 根据权利要求1所述的脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物的分析方法，其特征在 于：所述辐照的辐照源是Y射线，所述液相色谱一串联质谱法的色谱条件：采用Thermo Finnigan液相色谱系统，其液相条件包括色谱柱是SepaxBR-C18柱100X2.lmm，5ym;流动 相是A:甲醇，B:水，在流速250yL/min和进样量25yL条件下，进行梯度洗脱；具体洗脱梯 度是：
所述液相色谱一串联质谱法的质谱条件：采用ThermoTSQUltra三重四级杆质谱系 统，一级质谱条件包括离子化方式是ESI，喷雾电压是2500V，极性模式是负离子，雾化温度 是400°C，鞘气是48arb，辅助气是lOarb，离子传输管温度是400°C，扫描宽度是0.Olm/z，扫 描时间是〇.ls，扫描范围是m/z50-60,分辨率是Q1 = 0. 7FWHM，Q3 = 0. 7FWHM;离子对信 息，其中*为定莖尚子对：
二级质谱条件包括离子化方式是ESI，喷雾电压是2500V，极性模式是负离子，雾化温 度是400°C，鞘气是48arb，辅助气是lOarb，离子传输管温度是400°C，扫描宽度是0.Olm/z， 扫描时间是〇.ls，分辨率是Q1 = 0. 7FWHM，Q3 = 0. 7FWHM，扫描方式是全扫描，扫描范围是 m/z50-373,母离子是m/z373. 5,碰撞能量是15-35eV。
3. 根据权利要求1所述的脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物的分析方法，其特征在 于：所述步骤（1)中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的标准品溶液的配制是选用美国Sigma纯度为 99. 1 %的每瓶5mg的脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准品，以6. 25mL乙酸乙酯为溶剂，配成浓度为 0. 8mg/mL的脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准品乙酸乙酯溶液，将脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准品乙酸 乙酯溶液分装至具盖玻璃检测瓶中，分装15瓶，350yL/瓶；所述相应的溶剂空白是将空白 溶剂乙酸乙酯分装15瓶，350yL/瓶。
4. 根据权利要求1所述的脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物的分析方法，其特征在 于：所述步骤（1)中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的标准品溶液的配制是选用美国Sigma纯度为 99. 1 %的每瓶5mg的脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准品，以6. 25mL市售娃哈哈纯净水为溶剂，配 成浓度为〇. 8mg/mL的脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准品水溶液，将脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准品 水溶液分装至具盖玻璃检测瓶中，分装15瓶，350yL/瓶；所述相应的溶剂空白是将空白溶 剂水分装15瓶，350yL/瓶。
5. 根据权利要求3或4所述的脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物的分析方法，其特征 在于：所述辐照是采用辐照剂量为〇、3、5、7及9kGy，每个剂量处理重复3次。
6. 根据权利要求5所述的脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物的分析方法，其特征在 于：辐照后的脱氧雪腐镰刀菌烯醇的标准品溶液存在主要降解产物m/z= 373. 5,以m/z= 373. 5为母离子进行二级质谱检测，得到主要碎片子离子m/z= 327. 4和m/z= 165. 2,所 述主要碎片子离子m/z= 327. 4的碰撞能量是15eV，m/z= 165. 2的碰撞能量是25eV。
【专利摘要】本发明涉及一种脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物的分析方法，包括下列步骤：(1)配制脱氧雪腐镰刀菌烯醇的标准品溶液和相应的溶剂空白，对标准品溶液和相应的溶剂空白均经辐照范围是0-9kGy的辐照处理，通过液相色谱—串联质谱法对脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物进行解析；(2)用全扫描模式检测溶剂空白经相应剂量的辐照后图谱的变化；(3)分析脱氧雪腐镰刀菌烯醇辐照降解产物时，将辐照后标准品溶液图谱与经相同剂量辐照的溶剂空白的图谱及未辐照的标准品溶液图谱进行比较，剔除相同干扰峰，仅分析辐照后标准品溶液图谱中特有的特征峰；解决了缺乏分析降解产物的时候考虑溶剂辐照后对产物分析的影响问题；避免溶剂辐照后对降解产物分析结果干扰。
【IPC分类】G01N30-02
【公开号】CN104777252
【申请号】CN201510182667
【发明人】冯敏, 朱佳廷, 杨萍, 王德宁, 顾贵强
【申请人】江苏省农业科学院
【公开日】2015年7月15日
【申请日】2015年4月16日