一种赭曲霉毒素和t-2毒素的辐照降解处理法
【专利摘要】本发明涉及一种赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法；包括下列步骤：（1）对赭曲霉毒素OTA和T-2毒素的标准品配制标准溶液，对标准溶液经辐照范围是0-200kGy辐照处理，通过液相色谱—串联质谱法对OTA和T-2的含量进行测定；（2）对带毒样品经辐照范围是0-9kGy的辐照后进行预处理，通过液相色谱—串联质谱法对OTA和T-2的降解效果进行测定；（3）选取浓度最高的OTA和T-2标准溶液作为样品，经辐照范围是0-200kGy的辐照处理后通过液相色谱—串联质谱法进行检测分析降解产物；解决了对缺乏辐照降解OTA和T-2降解产物的研究及环保应用；降解效果好且实现对霉变农产品废物环保脱毒处理。
【专利说明】一种赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法
【技术领域】
[0001]本发明属于分析化学领域，具体涉及一种赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法。
【背景技术】
[0002]赭曲霉毒素和T-2毒素属于真菌毒素，真菌毒素是由产毒真菌在适宜的环境条件下产生的有毒代谢产物，赭曲霉毒素和T-2毒素对人类危害特别大且污染频率高，国内外对粮谷、食品和饲料中的赭曲霉毒素和T-2毒素制定了严格的限量标准。
[0003]在中国专利201110000805.2 “免疫亲和柱净化高效液相色谱检测中药酒剂中赭曲霉毒素A的方法”中，公开了通过高效液相色谱-质谱联用法来对阳性结果进行确证；在中国专利201010209190.X “一种检测中药中雪腐镰刀菌烯醇和脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素的方法”中，公开了通过高效液相色谱-质谱联用法在全扫描模式下确证毒素；在中国专利201110370420.5 “小麦中几种真菌毒素含量的检测方法”中，公开了通过高效液相色谱-质谱联用法检测，通过毒素浓度对于峰面积的回归方程计算DON、T-2毒素的含量；在中国专利201210054250.4 “液相色谱-串联质谱法测定五加科植物中真菌毒素含量的方法”中，公开了可准确，灵敏地测定五加科植物中真菌毒素的多成分残留量；在中国专利201210361145.5 “用电子束辐照降解水中藻毒素的方法”中，公开了当辐射剂量是5kGy时，能抑制藻毒素的产生；在中国专利2009100787702.0 “降解伏马菌素的方法”中公开了辐照可使伏马菌素B1降解率达63.47%;在中国专利200910078703.5 “一种降解伏马菌素的方法”中公开了辐照可使伏马菌素B1降解率达59.03% ;在中国专利200910078708.8 “降解黄曲霉毒素的方法”中公开了辐照去毒无工业污染；在中国专利200910078707.3 “一种降解黄曲霉毒素的方法”中公开了辐照可使黄曲霉毒素B1降解率达71.51%。
[0004]现有的相关技术有:张喜春等报道3kGy?5kGy的福照剂量对霉菌和霉菌毒素的降解有较明显的作用；杨静等研究表明质量浓度为0.lmg/L的黄曲霉毒素BI溶液在4kGy时降解率可以达到80%以上，6kGy时降解率达到96%，0.lmg/L的伏马菌素BI溶液在IOkGy时降解率达到90%以上；尹青岗的研究结果表明当辐照剂量为ISkGy时，粉末态玉米中玉米赤霉烯酮降解率可达74.9%,当福照剂量为IOkGy,整粒玉米中玉米赤霉烯酮降解率可达
94.1%,福照剂量为5kGy时,30.0mg/kg玉米赤霉烯酮水溶液的降解率达到了 90% ;迟蕾等人发表了 Y射线对赭曲霉毒素A的辐照降解的论文，文中提到降解产物结构解析的方法、降解的可能机理，但没有报道降解的产物。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种降解效果好、实现对农产品废物环保脱毒处理的赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法。
[0006]实现本发明目的的技术方案是一种赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法；包括下列步骤:(I)对赭曲霉毒素OTA和T-2毒素的标准品配制标准溶液，对标准溶液经辐照范围是0-200kGy辐照处理，通过液相色谱一串联质谱法对OTA和T-2的含量进行测定；(2)对带毒样品经辐照范围是0-9kGy的辐照后进行预处理，通过液相色谱一串联质谱法对OTA和T-2的降解效果进行测定；(3)选取浓度最高的OTA和T-2标准溶液作为样品，经辐照范围是0-200kGy的辐照处理后通过液相色谱一串联质谱法进行检测分析降解产物。
[0007]优选的所述辐照源是Y射线，所述液相色谱一串联质谱法的色谱条件:采用Thermo Finnigan液相色谱系统,其液相条件包括色谱柱是Sepax BR-C18柱100X2.1mm,5μ m;流动相是A:甲醇，B:醋酸铵-甲酸水溶液，在流速250 μ L/min和进样量25 μ L条件下，进行梯度洗脱；具体洗脱梯度是:
[0008]
【权利要求】
1.一种赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法；其特征在于:包括下列步骤:(1)对赭曲霉毒素OTA和T-2毒素的标准品配制标准溶液，对标准溶液经辐照范围是0-200kGy辐照处理，通过液相色谱一串联质谱法对OTA和T-2的含量进行测定；(2)对带毒样品经辐照范围是0-9kGy的辐照后进行预处理，通过液相色谱一串联质谱法对OTA和T-2的降解效果进行测定；(3)选取浓度最高的OTA和T-2标准溶液作为样品，经辐照范围是0-200kGy的辐照处理后通过液相色谱一串联质谱法进行检测分析降解产物。
2.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法，其特征在于:所述福照源是Y射线，所述液相色谱一串联质谱法的色谱条件:采用Thermo Finnigan液相色谱系统，其液相条件包括色谱柱是S印ax 81?-(:18柱100\2.1mm，5 μ m ;流动相是A:甲醇，B:醋酸铵-甲酸水溶液，在流速250 μ L/min和进样量25 μ L条件下，进行梯度洗脱；具体洗脱梯度是:时间Α% Β%0.00 15~ 85~2.00 15~ 85~2.10 90~10~5.00 90~10~5.10 15~85~ 7.00 15~ 85~ 所述液相色谱一串联质谱法的质谱条件:采用Thermo TSQ Ultra三重四级杆质谱系统，其质谱条件包括离子化方式是ESI，喷雾电压是3000V，极性模式是正离子，雾化温度是4000C，鞘气是48arb，辅助气是IOarb，离子传输管温度是400°C，扫描宽度是0.01m/z，扫描时间是 0.ls，分辨率是 Ql=0.7FWHM, Q3=0.7FWHM ； 离子对信息，其中*为定量离子对:化合物+叹离了 m/z了离了 m/z碰摘!能讀V
_221__33_ OTA404.1_239f__21_____358.3'16
185-20 T-2484.3_245.3__26_
305.1*13
3.根据权利要求2所述的赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法，其特征在于:所述步骤(1)中的标准样品是
4.根据权利要求2所述的赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法，其特征在于:所述步骤(2)中带毒样品有6个，分别是霉变玉米种子样品2个(编号为A、B)、大米样品2个(编号为C、D)、小麦(编号为E)和黄豆样品各1个(编号为F);预处理方法是准确称取样品5.0Og (±0.05g)于50mL的离心管中，加入10mL86%乙腈水溶液，涡旋30s，超声30min,4000r/min离心5min，转移上清液至试管中，再次用10mL86%乙腈水溶液提取，合并两次提取液，用氮气在45°C下吹干，再用乙腈+水(体积比50:50)定容至lmL，涡旋30s，用0.22 μ m微孔滤膜过滤，以备进样；辐照剂量为0、3、5、7及9kGy。
5.根据权利要求2所述的赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法，其特征在于:所述步骤(3)中对OTA浓度最高的0.7mg/mL和T-2浓度最高的0.9mg/mL的标准溶液，分别采用辐照剂量0、3、5、7、9、20、50、100及200kGy进行辐照处理后，用全扫描模式进行检测，观察有无特征峰的形成。
6.根据权利要求2所述的赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法，其特征在于:当辐照剂量是3-9kGy时，可对具有商用价值农产品进行脱毒处理，当辐照剂量是20-200kGy时，可对无商用价值的霉变农产品和\或其它霉变物质进行集中脱毒处理。
7.根据权利要求6所述的赭曲霉毒素和T-2毒素的辐照降解处理法，其特征在于:当辐照剂量是7-9kGy时，可对具有商用价值农产品进行脱毒处理，当辐照剂量是100-200kGy时，可对无商用价值的霉变农产品和\或其它霉变物质进行集中脱毒处理。
【文档编号】G01N1/44GK103698441SQ201310719162
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月23日 优先权日:2013年12月23日
【发明者】王玲, 朱佳廷, 李澧, 顾贵强, 冯敏, 杨萍, 王德宁 申请人:江苏省农业科学院