一种油脂过氧化值检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于油脂检测技术领域，尤其是一种油脂过氧化值检测方法。
【背景技术】
[0002] 油脂的氧化所产生的过氧化物虽然本身无色无味无毒，对油脂质量的影响不大。 但是，过氧化物很不稳定，易分解为许多二级氧化产物，如醛类、酮类、醇类等，其中的一些 化合物对人体会产生一定的危害。所以测定油脂的过氧化值很有必要。如果过氧化值大于 800meq/kg，则表明油脂严重氧化，品质发生了改变，对人体产生毒性。油脂在食品的口感、 风味以及物理性质方面起着重要的作用，油脂的品质影响着含油食品的质量与安全。
[0003] 目前常用的是碘量法，碘量法准确、成本低，但由于操作繁琐，使用大量有机溶剂， 且作误差较大，不适合现场实时监测。。分光光度法快速、简单、容易操作、成本低，但随着各 种科技的发展，已经不能满足测定要求。仪器分析（高效液相色谱、气相色谱、红外光谱等） 法虽然灵敏度高，但成本一般都比较高，而且操作相对麻烦。
[0004] 专利CN102706872A公开了一种氧化还原法检测油脂的方法，在氧化还原反应， 产生络合物以后采用比色法检测络合物，检测准确性欠缺。
【发明内容】
[0005] 本发明将氧化络合与分光光度法结合在一起，比一般的分光光度法简单，成本低， 检测快速准确，且具有较高的选择性和灵敏度，为检测油脂的过氧化值提供了一种十分可 靠的方法。
[0006] 过氧化氢异丙苯（CHP)是由枯烯的氧化溶液或乳浊液衍生的一种无色至淡黄色 液体。溶于醇、丙酮、酯类、烃类和氯烃类，微溶于水。有研究采用过氧化氢异丙苯作为内 标物，因此本实验采用过氧化氢异丙苯作为标品。
[0007] 本发明提出的技术方案是：一种油脂过氧化值检测方法，包括如下步骤：
[0008] 步骤1 :过量二茂铁溶液和油中过氧化氢异丙苯发生氧化络合反应，生成二茂铁 异丙苯醚；
[0009] 步骤2 :使用分光光度法检测络合物的浓度。
[0010] 步骤1中发生氧化络合反应，生成的二茂铁异丙苯醚的最大吸收波长是318nm，选 择318nm作为分光光度法检测吸收波长。
[0011] 进一步，所述步骤1中二茂铁溶液使用异丙醇作为溶剂配制，二茂铁溶液浓度为 29mmol/L。二茂铁溶液浓度的选择：精确称取0.lg过氧化氢异丙苯，置于10ml容量瓶中， 用异丙醇定容到刻度，配制得到母液，再取lml到10ml容量瓶中，用异丙醇定容至刻度，加 0.5ml甲酸（在酸性条件下反应顺利进行，调节pH值），即为A液。分别准确移取0.27g、 0.54g二茂铁移至100mL的容量瓶中，然后用异丙醇定容至刻度。配制得到浓度分别为 14. 5mm〇l/L、29mm〇l/L的二茂铁溶液，分别是B液、C液。精确吸取lml的A液和lmlB液 /C液的于干燥的比色管中，用异丙醇定容到5mL，充分摇匀，均置于恒温水浴锅中，温度设 为50°C，各做三次平行实验，完全反应60min后，以异丙醇试剂作为空白调零，测定各管在 318nm处的吸光度值，观察吸光度值的变化规律。选择氧化络合反应中二茂铁溶液的最佳浓 度值。
[0012] 进一步，所述步骤1中发生氧化络合反应的温度是50°C。反应温度的优化：精确 称取0.lg过氧化氢异丙苯，置于l〇ml容量瓶中，用异丙醇定容到刻度，配制得到母液，再取 lml到10ml容量瓶中，用异丙醇定容至刻度，加0. 5ml甲酸（在酸性条件下反应顺利进行， 调节pH值），为A液。分别准确移取0. 54g二茂铁移至100mL的容量瓶中，然后用异丙醇 定容至刻度。配制得到浓度分别为29mmol/L的二茂铁标准溶液，为B液备用。分别精确吸 取lml的A液和lml的B液于干燥的比色管中，用异丙醇定容到5mL，充分摇匀，置于恒温水 浴锅，温度分别设为20 °C、30 °C、40 °C、50 °C、60 °C，各做三次平行实验，完全反应60min后， 以异丙醇试剂为空白调零，测定各管在318nm处的吸光度值，观察吸光度值的变化规律。选 择氧化络合反应的最佳反应温度。
[0013] 进一步，所述步骤1中发生氧化络合反应的时间是60min。氧化络合反应时间的选 择：精确称取〇.lg过氧化氢异丙苯，置于l〇ml容量瓶中，用异丙醇定容到刻度，配制得到母 液，再取lml到10ml容量瓶中，用异丙醇定容至刻度，加0.5ml甲酸（反应在酸性条件下进 行，调节pH值），为A液。分别准确移取0. 54g二茂铁移至100mL的容量瓶中，然后用异丙 醇定容至刻度。配制得到浓度分别为29mmol/L的二茂铁标准溶液，为B液备用。分别精确 吸取lml的A液和lml的B液于干燥的比色管中，用异丙醇定容到5mL，充分摇匀，置于恒温 水浴锅 50°C，分别完全反应 10min、20min、30min、40min、50min、60min、70min、80min，各做 三个平行实验，以异丙醇试剂为空白调零，测定各管在318nm处的吸光度值，观察吸光度值 的变化规律。选择氧化络合反应的最佳反应时间。
[0014] 本发明的反应原理是：反应第一步：在微量氢离子存在的条件下，二茂铁与油脂 中的过氧化物反应生成不稳定的二茂铁鑰离子[(n5_C5H5)2Fe3+]+，流程图如图1 ;反应第二 步：环戊二烯的双键的α位发生去质子化反应，与过氧化氢异丙苯发生反应，生成稳定的 二茂铁异丙苯醚，流程图如图2。
[0015] 本发明的优点和积极效果是：
[0016] ⑴二茂铁易溶于甲醇、乙醇、乙醚、汽油、苯、柴油等有机溶剂，与酸、碱、紫外线不 发生反应，具有极高的热稳定性和耐辐射性。
[0017] ⑵本发明生产的氧化络合物，比较稳定，相对于国标法（硫氰酸铁法）溶液中的 氧气会影响测定结果，且应注意铁离子的污染，二氯化铁要新鲜配制，且实验过程要求避光 进行，否则因为空气中氧气、光照等影响空白值，从而影响结果的准确性。本发明在反应完 全后，在室温下放置一段时间，检测结果基本不变。
[0018] ⑶二茂铁具有疏水性，低毒性，能顺利通过细胞膜，与细胞内各种酶、DNA、RNA等物 质作用，因而有可能作为治疗某些疾病的药物。此外，在生物酶的作用下，二茂铁及其衍生 物能参与各种新陈代谢作用；它具有一定厚度的夹心结构，能够阻止其接近某些酶的活性 部位，因而具有较强选择性；基于这些特性，二茂铁具有抗肿瘤、杀菌、杀虫、治贫血、抗炎、 调节植物生长、抗溃疡、酶抑制剂等生理活性，使其在生物学、医学、微生物学等领域有着广 泛的应用前景。
【附图说明】
[0019] 图1二茂铁由油脂中的过氧化物氧化生成不稳定的二茂铁鑰离子 [(n5-C5H5)2Fe3+]+流程图；
[0020] 图2生成稳定的二茂铁异丙苯醚流程图
[0021] 图3络合物二茂铁异丙苯醚吸收曲线
[0022] 图4氧化络合法的标准曲线
【具体实施方式】[0023] 实施例1
[0024] 标准曲线制作
[0025] (1)取0· 54g二茂铁定容到100ml容量瓶中定容，此溶液为A液。
[0026] (2)称取0.lg过氧化氢异丙苯于10ml容量瓶中定容，此溶液作为母液，再取1ml 母液到20ml比色管中，加9ml异丙醇和0. 5ml甲酸（反应在酸性条件下进行，调节pH值）， 混匀后，此溶液为B液。
[0027] (3)取1mlA液和1mlB液定容到5ml后，在50°C加热lh后冷却，以异丙醇试剂 为空白调零。
[0028](4)分别取6个比色管，分别精确移入B液0· 0ml，0· 3ml，0· 5ml，0· 8ml，1. 0ml， 1. 5ml于20ml的比色管中，各加入lmlA液后，定容至5ml，于50°C加热lh后，反应完成后， 立即移入lcm比色皿中，以异丙醇试剂为空白调零，在318nm波长下测定各管的吸光度，制 作标准曲线，如图3。
[0029] 实施例2
[0030] 样品的检测：
[0031] (1)取0. 5g油样于10ml容量瓶中定容，加0. 5ml甲酸（在酸性条件下反应顺利进 行，调节pH值），取lml于20ml比色管中，再加入lmlA液，定容至5ml，每个样品做三个 平行，在50°C加热lh后，反应完成后，立即移入lcm比色皿中，以异丙醇试剂为空白调零，在 318nm波长下测定各管的吸光度。
[0032] (2)将测得的吸光值代入公式1，计算即可得油样的过氧化值（即油样中所含过氧 化氢异丙苯的毫摩尔数）。
[0033] 油脂过氧化值计算公式：
[0035] 式中字母代表：
[0036] X，油脂的过氧化值（mmol/kg)
[0037] A= 0. 1101B= 0.2553
[0038] Y，代表油样检测到的吸光度值；
[0039] Μ,代表所取油样的质量（g)。
【主权项】
1. 一种油脂过氧化值检测方法，其特征在于，包括如下步骤： 步骤1:过量二茂铁溶液和油中过氧化氢异丙苯发生氧化络合反应，生成二茂铁异苯 丙醚； 步骤2 :使用分光光度法检测络合物的浓度。2. 根据权利要求1所述的一种油脂过氧化值检测方法，其特征在于，所述步骤1中二茂 铁溶液使用异丙醇作为溶剂配制，二茂铁溶液浓度29mmol/L。3. 根据权利要求1所述的一种油脂过氧化值检测方法，其特征在于，所述步骤1中发生 氧化络合反应的温度是50°C。4. 根据权利要求1所述的一种油脂过氧化值检测方法，其特征在于，所述步骤1中发生 氧化络合反应的时间是60min。5. 根据权利要求1所述的一种油脂过氧化值检测方法，其特征在于，所述步骤2使用分 光光度法检测络合物浓度在318nm处检测。
【专利摘要】本发明涉及一种油脂过氧化值检测方法，包括如下步骤：步骤1：过量二茂铁溶液和油中过氧化氢异丙苯发生氧化络合反应，生成络合物；步骤2：使用分光光度法检测络合物的浓度。本发明的优点本发明生产的氧化络合物，比较稳定，相对于国标法(硫氰酸铁法)溶液中的氧气会影响测定结果，且应注意铁离子的污染，二氯化铁要新鲜配制，且实验过程要求避光进行，否则因为空气中氧气、光照等影响空白值，从而影响结果的准确性。本发明在反应完全后，在室温下放置一段时间，检测结果基本不变。
【IPC分类】G01N21/75, G01N21/31
【公开号】CN105241832
【申请号】CN201510658657
【发明人】李昌模, 王蕊, 王冠华, 王硕
【申请人】天津科技大学
【公开日】2016年1月13日
【申请日】2015年10月12日