专利名称：一种根瘤菌接种剂剂型的制作方法
技术领域：
本发明专利涉及一种根瘤菌接种剂剂型。
背景技术：
目前，公知的根瘤菌接种剂剂型主要是以固体或者液体作为载体混合根瘤菌菌液制成。根瘤菌制剂产业化存在一个问题就是在包装、储藏和运输过程中，随着时间延长根瘤菌活菌数量下降，为了延缓根瘤菌活菌数量的下降，需要选择良好载体，添加保护剂、抑菌齐U，低温保藏。固体载体以草炭效果最好，但是草炭是不可再生资源，国家已有对草炭资源保护的要求，因而草炭作载体的根瘤菌剂剂型前景不佳。用海藻糖作保护剂，用羟甲基纤维素作抑菌剂，用阿拉伯胶作黏附剂添加到液体菌剂中，通过拌种方式接种应用效果不理想。根瘤菌菌剂应用具有季节性,一般为一年一次。快生根瘤菌代时为3 6小时,慢生根瘤菌代时为8 10小时，甚至更长。一个根瘤菌制剂生产周期需要3 5天，有的达到7天。根瘤菌菌剂生产需要保持纯培养，因而发酵过程和通气调控需要保持严格无菌状态。因此，根瘤菌菌剂的生产周期长，对生产设备的性能要求高。这些因素都影响根瘤菌菌剂的生产应用。现有根瘤菌接种剂技术都存在下列缺点:需要选择菌剂载体、需要设计发酵工艺、根瘤菌活菌数量随储藏时间延长而下降、成本较高、根瘤菌活力不足。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供一种无需载体、无需发酵工艺、活菌数量不受储藏时间限制、成本低廉、根瘤菌活力提高的根瘤菌接种剂剂型。本发明的目的是通过以下关键技术方案实现的:一种根瘤菌接种剂剂型将根瘤菌培养基药品和菌种分开包装， 按配方提供根瘤菌培养基所需药品，在豆科作物苗期使用，临用前用烧开的水配制培养基，冷却后接种根瘤菌，发酵至菌液浑浊，稀释后施用于苗期豆科作物根部。通过临用前直接配制根瘤菌培养基，可节省现有技术必需的载体和发酵工艺，节省生产时间，降低成本，避免根瘤菌随保藏时间延长活菌数量下降，提高根瘤菌活力。将根瘤菌活化时间与豆科作物苗期生根时间对接，有利于促进结瘤。本发明的有益效果是:无需载体和发酵工艺，成本低廉、保质期长、使用方便、高质闻效。
具体实施例方式 下面结合实施例对本发明进一步说明，但不限于此。实施例1
用1.5升离心管装YMA固体培养基0.8升，接种根瘤菌后压盖密封制成根瘤菌菌种。袋装根瘤菌培养基药品，袋装接种勺。将根瘤菌菌种、袋装根瘤菌培养基药品和袋装接种勺用一个塑料袋封装在一起构成本发明一个实施例。临用前2天用10升开水冲泡药品配制成10升培养基，冷却后用接种勺挖出离心管中根瘤菌菌种倒入新配培养基，培养至菌液浑浊。稀释菌液以浇水的方式直接接种到豆科作物苗根部。一种根瘤菌接种剂剂型实施例1中根瘤菌培养基袋装药品组分如下:
甘露醇100克
酵母粉10克
硫酸镁2克
磷酸氢二钾 5克 氯化钠I克
氯化钙0.5克
硼酸0.2克
钥酸钠0.2克
实施例2
配制YMA固体培养基倒平皿，接种根瘤菌液于平皿上制成根瘤菌菌苔，将根瘤菌菌苔切割成小块封装塑料袋内制成根瘤菌菌种。袋装根瘤菌培养基药品。袋装接种勺。将根瘤菌菌种、袋装根瘤菌培养基药品和袋装无菌接种勺用一个塑料袋封装在一起构成本发明一个实施例。临用前2天用开水10升冲泡药品配制成10升培养基，冷却后将根瘤菌菌种袋撕开，将根瘤菌菌种放入新配培养基，培养至菌液浑浊。稀释菌液以浇水的方式直接接种到豆科作物苗根部。
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一种根瘤菌菌剂剂型实施例2中根瘤菌培养基袋装药品组分如下:
蔗糖100克
酵母粉10克
硫酸镁2克
磷酸氢二钾 5克 氯化钠I克
氯化钙0.5克
硼酸0.2克
钥酸钠0.2克
一种根瘤菌接种剂剂型实施例1和实施例2中YMA固体培养基pH:6.8-7.0，配方如
下:
琼脂粉15.0克
甘露醇10.0克
酵母粉1.0克
硫酸镁0.2克
磷酸氢二钾0.5克
氯化钠0.1克
氯化钙0.05克
Rh微量兀素液4.0晕升
水1000毫升
上述Rh微量元素液配方如下:
硼酸5.0克钥酸钠5.0克
水1000毫升
根瘤菌有鞭 毛，可运动，一个根瘤是由一个根瘤菌侵入后形成，根瘤菌刚培养时处于活化状态，因而活力更强，并且豆科作物苗已长根，因而更容易形成根瘤。以YMA固体培养基在平皿上培养的根瘤菌菌苔用塑料膜密封保藏3年再接种新配培养基，结果根瘤菌成功长出菌落，说明根瘤菌菌苔可保藏3年。 本发明实施例1和实施例2中根瘤菌菌种只要有存活的根瘤菌就可接种成功，因而避免了现有根瘤菌制剂技术活菌数量随时间下降问题和根瘤菌活菌因长期保存被添加的保护剂、抑菌剂抑制根瘤菌活力下降问题。根瘤菌培养基所需的化学固体袋装药品保质期不受保藏时间限制。在豆科作物苗期使用，临用前配制培养基接种根瘤菌发酵扩增，避免现有根瘤菌制剂生产技术所必需的复杂发酵设备和工艺流程，避免使用载体，因而可降低成本。
权利要求
1.一种根瘤菌接种剂剂型将根瘤菌培养基药品和菌种分开包装，按配方提供根瘤菌培养基所需药品，在 豆科作物苗期使用，临用前用烧开的水配制培养基，冷却后接种根瘤菌，发酵至菌液浑浊，稀释后施用于苗期豆科作物根部。
全文摘要
本发明涉及一种根瘤菌接种剂剂型，用于豆科作物苗期根部接种根瘤菌促进结瘤固氮。本发明将根瘤菌培养基药品和菌种分开包装，按配方提供根瘤菌培养基所需药品，在豆科作物苗期使用，临用前用烧开的水配制培养基，冷却后接种根瘤菌，发酵至菌液浑浊，稀释后施用于苗期豆科作物根部。本发明无需载体和发酵工艺，可节省生产时间，降低成本，解决现有根瘤菌菌剂随保藏时间延长活菌数量下降问题，将根瘤菌活化时间与豆科作物苗期生根时间对接，有利于促进结瘤。
文档编号A01P21/00GK103238632SQ20131020295
公开日2013年8月14日 申请日期2013年5月28日 优先权日2013年5月28日
发明者刘保平 申请人:东北农业大学