一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基，由以下组分组成：硝酸铵，硝酸钾，氯化钙，硫酸镁，磷酸二氢钾，碘化钾，硼酸，硫酸锰，硫酸锌，钼酸钠，硫酸铜，氯化钴，乙二胺四乙酸铁钠，肌醇，烟酸，盐酸吡哆醇，盐酸硫胺素，蔗糖，琼脂，水。使用本发明的培养基能促使马铃薯组培苗的生长速度，从接种之日起到株高长至8厘米所需要的时间仅为20天，大大提高了组培苗剪切、转接的工作效率。
【专利说明】一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种培养基，具体涉及一种能促进马铃薯组培苗快速生长的培养基。【背景技术】
[0002]目前，国内外进行马铃薯组培苗快速生长所使用是MS培养基，但是一般情况下在MS培养基上生长的组培苗需30天左右株高才能够长至8厘米，且主茎较细弱，分枝细长且较多，交织在一起，不利于剪切转接操作，导致转接时工作效率低，同时由于组培苗长势较弱，假植或移栽时缓苗时间较长，成活率相对也较低。由于传统的MS培养基存在以上缺点，国内外的研究人员也对其配方进行了各种改良，但是效果并不明显。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种促进马铃薯组培苗快速生长的 培养基。
[0004]为实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现:
[0005]一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基，以IL培养基计，由以下组分组成:硝酸铵(NH4NO3) 1567.5 ~1732.5mg,硝酸钾(KNO3) 1805 ~1995mg,氯化钙(CaCl2.2Η20) 418 ~462mg,硫酸镁(MgSO4.7H20) 399 ~441mg,磷酸二氢钾(KH2PO4) 162 ~178mg,碘化钾(KI)0.79 ~0.87mg,硼酸(H3BO3) 5.9 ~6.5mg,硫酸锰(MnSO4.4H20) 16.1 ~17.7mg,硫酸锌(ZnSO4.7H20) 8.2 ~9.0mg,钥酸钠(Na2MoO4.2H20) 0.24 ~0.26mg，硫酸铜(CuSO4.5H20) 0.024 ~0.026mg,氯化钴(CoCl2.6H20) 0.024 ~0.026mg,乙二胺四乙酸铁钠(FeNa2EDTA.Η20) 72 ~78mg，肌醇(C6H12O6) 95 ~105mg,烟酸(C6H5NO2) 0.48 ~0.52mg，盐酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.48 ~0.52mg，盐酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.09 ~0.1lmg,蔗糖(C12H22O11) 28500 ~31500mg,琼脂 6650 ~7350mg,余量为水。
[0006]优选的是:以IL培养基计，由以下组分组成:硝酸铵(NH4NO3) 1650mg,硝酸钾(KNO3) 1900mg,氯化钙(CaCl2.2H20)440mg,硫酸镁(MgSO4.7H20)420mg,磷酸二氢钾(KH2PO4) 170mg,碘化钾(KI)0.83mg，硼酸(H3BO3)6.2mg，硫酸锰(MnSO4.4H20) 16.9mg，硫酸锌(ZnSO4.7H20) 8.6mg，钥酸钠(Na2MoO4.2H20) 0.25mg，硫酸铜(CuSO4.5H20) 0.025mg,氯化钴(CoCl2.6H20) 0.025mg,乙二胺四乙酸铁钠(FeNa2EDTA.H2O) 75mg,肌醇(C6H12O6) IOOmg,烟酸(C6H5NO2) 0.5mg,盐酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.5mg,盐酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.lmg，蔗糖(C12H22O11) 30000mg，琼脂 7000mg，余量为水。
[0007]—种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基的制备方法，包含以下步骤:
[0008]a、准确称取除琼脂外的培养基其余组分，加蒸馏水充分溶解后，定容；
[0009]b、准确称取琼脂并加入到定容好的溶液中，加热至70~90°C至琼脂完全溶解；
[0010]C、分别用lmol/1的硝酸或lmol/1的氢氧化钠溶液将培养基的pH值调节至5.5-5.7 ；
[0011]d、将配制好的培养基分装至组织瓶中，于121~125°C、103.43kPa下灭菌20~30分钟，制得本发明的培养基。
[0012]进一步地:步骤a后不加入琼脂，制得本发明的不含琼脂的培养基。
[0013]一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基的使用方法，在无菌操作台上，每50ml含有琼脂的培养基中扦插入10-12个马铃薯组培苗茎段，在环境温度20-22°C、24小时光照的组培室内培养10天后再加入IOml不含琼脂的培养基，继续培养10天。
[0014]与现有技术相比，本发明的培养基，能快繁马铃薯组培苗，在24小时光照、室内温度20-22°C的条件下，组培苗生长迅速，从接种之日起到株高长至8厘米所需要的时间为20天，植株生长健壮，叶色浓绿，茎杆粗壮，分枝少，大大提高了组培苗剪切、转接的工作效率，同时也大幅提高了其假植、移栽的成活率。
【具体实施方式】
[0015]下面结合实施例对本发明的【具体实施方式】做进一步说明。
[0016]本发明提供一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基，以IL培养基计，由以下组分组成:硝酸铵(NH4NO3) 1567.5~1732.5mg,硝酸钾(KNO3) 1805~1995mg,氯化钙(CaCl2.2H20)418 ~462mg，硫酸镁(MgSO4.7H20) 399 ~441mg，磷酸二氢钾(KH2PO4) 162 ~178mg，碘化钾(KI)0.79 ~0.87mg，硼酸(H3BO3) 5.9 ~6.5mg，硫酸锰(MnSO4.4Η20) 16.1 ~17.7mg，硫酸锌(ZnSO4.7H20) 8.2 ~9.0mg，钥酸钠(Na2MoO4.2H20) 0.24 ~0.26mg，硫酸铜(CuSO4.5H20) 0.024 ~0.026mg,氯化钴(CoCl2.6H20) 0.024 ~0.026mg,乙二胺四乙酸铁钠(FeNa2EDTA.Η20) 72 ~78mg，肌醇(C6H12O6) 95 ~105mg,烟酸(C6H5NO2) 0.48 ~0.52mg，盐酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.48 ~0.52mg，盐酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.09 ~0.1lmg,蔗糖(C12H22O11) 28500 ~31500mg,琼脂 6650 ~7350mg,余量为水。
[0017]其制备方法为:
[0018]a、准确称取除琼脂外的培养基其余组分，加蒸馏水充分溶解后，定容；
[0019]b、准确称取琼脂并加入到定容好的溶液中，加热至70~90°C至琼脂完全溶解；
[0020]C、分别用lmol/1的硝酸或lmol/1的氢氧化钠溶液将培养基的pH值调节至
5.5-5.7 ；
[0021]d、将配制好的培养基分装至组织瓶中，于121~125°C、103.43kPa下灭菌20~30分钟，制得本发明的培养基。
[0022]进一步地:步骤a后不加入琼脂，制得本发明的不含琼脂的培养基。
[0023]实施例1:
[0024]一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基，以IL培养基计，由以下组分组成:硝酸铵(NH4NO3) 1650mg,硝酸钾(KNO3) 1900mg,氯化钙(CaCl2.2H20)440mg,硫酸镁(MgSO4.7H20)420mg，磷酸二氢钾(KH2PO4) 170mg，碘化钾(KI)0.83mg，硼酸(H3BO3)6.2mg,硫酸锰(MnSO4.4H20) 16.9mg，硫酸锌(ZnSO4.7H20) 8.6mg，钥酸钠(Na2MoO4.2H20) 0.25mg，硫酸铜(CuSO4.5H20) 0.025mg,氯化钴(CoCl2.6H20) 0.025mg,乙二胺四乙酸铁钠(FeNa2EDTA.H2O) 75mg，肌醇(C6H12O6) IOOmg,烟酸(C6H5NO2) 0.5mg，盐酸吡哆醇(C8H11NO3-HCl)0.5mg，盐酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.lmg，蔗糖(C12H22O11) 30000mg，琼脂7000mg,余量为水。
[0025]上述培养基的制备方法，包含以下步骤:[0026]a、准确称取除琼脂外的培养基其余组分，加蒸馏水充分溶解后，定容；
[0027]b、准确称取琼脂并加入到定容好的溶液中，加热至70~90°C至琼脂完全溶解；
[0028]C、分别用lmol/1的硝酸或lmol/1的氢氧化钠溶液将培养基的pH值调节至5.5-5.7 ；
[0029]d、将配制好的培养基分装至组织瓶中，于121~125°C、103.43kPa下灭菌20~30分钟，制得本发明的培养基。
[0030]进一步地:步骤a后不加入琼脂，制得本发明的不含琼脂的培养基。
[0031]将上述制备方法制得的培养基，用于繁殖马铃薯组培苗，其方法为:在无菌操作台上，每50ml含有琼脂的培养基中扦插入10-12个马铃薯组培苗茎段，在环境温度20_22°C、24小时光照的组培室内培养10天后再加入IOml不含琼脂的培养基，继续培养10天。
[0032]使用本实施例中的培养基，对不同的马铃薯组培苗进行培养，其典型结果如下:
[0033]1、宣威市马铃薯种薯研发中心组培室利用本实施例的培养基和方法快繁马铃薯组培苗，2011年3月17日剪切接种，室内温度设定为22°C，24小时光照，2011年4月6日组培苗株高长至 厘米，生长时间是20天，组培苗生长健壮，叶色浓绿，茎杆粗壮，平均茎粗
0.19厘米，平均每株苗茎节数4.5个。
[0034]2、云南农业大学薯类作物研究所组培室利用本实施例的培养基和方法快繁马铃薯组培苗，2011年3月6日剪切接种，室内温度设定为20°C，24小时光照，2011年3月27日组培苗株高长至8厘米，生长时间是21天，组培苗生长健壮，叶色浓绿，茎杆粗壮，平均茎粗0.17厘米，平均每株苗茎节数4.7个。
[0035]3、云南农业大学农学与生物技术学院组培室利用本实施例的培养基和方法快繁马铃薯组培苗，2011年4月7日剪切接种，室内温度设定为21°C，24小时光照，2011年4月27日组培苗株高长至8厘米，生长时间是20天，组培苗生长健壮，叶色浓绿，茎杆粗壮，平均茎粗0.18厘米，平均每株苗茎节数4.6个。
[0036]相同条件下，使用MS培养基保存的马铃薯组培苗，2011年4月7日剪切接种，2011年5月7日组培苗株高长至8厘米，生长时间是31天，组培苗生长较弱，叶色淡绿，茎杆细弱弯曲，分枝较多且细弱，平均茎粗0.12厘米，平均每株苗茎节数4.1个。
[0037]本发明所描述的具体实施例只用于对该培养基的具体实现过程的详细描述，而不是对该培养基的限定。任何对此产品进行的修饰与改良，在专利范围或范畴内同类或相近物质的替代与使用，均属于本发明专利范围，受此专利保护。
【权利要求】
1.一种促进马铃薯组培苗快速生长的培养基，其特征在于:以IL培养基计，由以下组分组成:硝酸铵(NH4NO3) 1567.5~1732.5mg,硝酸钾(KNO3) 1805~1995mg,氯化钙(CaCl2.2H20)418 ~462mg，硫酸镁(MgSO4.7H20) 399 ~441mg，磷酸二氢钾(KH2PO4) 162 ~178mg，碘化钾(KI)0.79 ~0.87mg，硼酸(H3BO3) 5.9 ~6.5mg，硫酸锰(MnSO4.4Η20) 16.1 ~17.7mg，硫酸锌(ZnSO4.7H20) 8.2 ~9.0mg，钥酸钠(Na2MoO4.2H20) 0.24 ~0.26mg，硫酸铜(CuSO4.5H20) 0.024 ~0.026mg,氯化钴(CoCl2.6H20) 0.024 ~0.026mg,乙二胺四乙酸铁钠(FeNa2EDTA.H2O) 72 ~78mg，肌醇(C6H12O6) 95 ~105mg,烟酸(C6H5NO2) 0.48 ~0.52mg，盐酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.48 ~0.52mg，盐酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.09 ~0.1lmg,蔗糖(C12H22O11) 28500 ~31500mg,琼脂 6650 ~7350mg,余量为水。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，以IL培养基计，由以下组分组成:硝酸铵(NH4NO3) 1650mg,硝酸钾(KNO3) 1900mg,氯化钙(CaCl2.2H20)440mg,硫酸镁(MgSO4.7H20)420mg，磷酸二氢钾(KH2PO4) 170mg，碘化钾(KI)0.83mg，硼酸(H3BO3)6.2mg,硫酸锰(MnSO4.4H20) 16.9mg，硫酸锌(ZnSO4.7H20) 8.6mg，钥酸钠(Na2MoO4.2H20) 0.25mg，硫酸铜(CuSO4.5H20) 0.025mg,氯化钴(CoCl2.6H20) 0.025mg,乙二胺四乙酸铁钠(FeNa2EDTA.H2O) 75mg，肌醇(C6H12O6) IOOmg,烟酸(C6H5NO2) 0.5mg，盐酸吡哆醇(C8H11NO3-HCl)0.5mg，盐酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.lmg，蔗糖(C12H22O11) 30000mg，琼脂7000mg,余量 为水。
【文档编号】A01H4/00GK103931500SQ201410165582
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年4月19日 优先权日:2013年4月19日
【发明者】张新永, 包媛媛, 宋雷 申请人:云南农业大学