一种文心兰快速繁殖培养基配方的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种文心兰快速繁殖培养基配方，包括原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基三个阶段的配方，本发明的配方培养的文心兰，三至四个月左右的时间，就能将外植体的文心兰原球茎，经历原球茎增值培养、壮苗培养和生根培养三个阶段，变成为移栽成活率较高的生根的文心兰，提高了文心兰优质种苗快速繁育能力，并增强了文心兰种苗环境适应能力，从而提高了文心兰的组培苗抗性和移栽成活率，其移栽成活率达97%以上，使文心兰在国内得到普遍推广应用。
【专利说明】一种文心兰快速繁殖培养基配方
【技术领域】
[0001]本发明涉及植物组织培养【技术领域】，特别是涉及一种文心兰快速繁殖培养基配方。
【背景技术】
[0002]文心兰(Oncidium)又名舞女兰、跳舞兰、瘤瓣兰，属兰科文心兰属。全属有原生种400多个，原产于墨西哥、西印度群岛、巴西等地，分布地域广阔，品种众多，生长习性差异极大，是兰花中的大属之一。品种大多为金黄色，并有褐色斑点。在研究中通过种间和属间杂交培育出粉色、紫红色、纯黄、葡萄酒红等多种花色优美、常年开花的优良品种。文心兰特殊的形态加上直长的花梗、丰富的色彩、花期又长，因此作为重要的切花和盆花种，市场需求量急剧增加，成为洋兰类的新宠之一。
[0003]我国近年来引进不少文心兰品种，但是种苗生产主要靠分株，不但繁殖速度慢，而且病毒不断积累严重影响植株生长与花的观赏性。利用植物组织培养技术可以解决文心兰优质种苗快速繁殖的问题，目前国内对文心兰组织培养又有报道和专利，但是培养效果并不理想，组培苗抗性差，移栽死亡率高。
【发明内容】
[0004]为了克服上述现有技术的不足，本发明提供了一种文心兰快速繁殖的培养基配方，以提高文心兰 优质种苗快速繁育能力，并增强文心兰种苗环境适应能力，从而提高文心兰的组培苗抗性和移栽成活率，使文心兰在国内得到普遍推广。
[0005]本发明所采用的技术方案是:一种文心兰快速繁殖培养基配方，包括原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基三个阶段的配方，其中:
1)原球茎增殖培养基由MS+6-BA (1.5-4.5) mg/L、NAA (0.15-0.35) mg/L、椰汁(50-200) ml/L 和蔗糖(10-45) g/L 组成；
2)壮苗培养基由MS+蛋白胨(1.0-3.5) g/L、香蕉(15-45) g/L、土豆(10-40) g/L和蔗糖(15-40) g/L 组成；
3)生根培养基由1/2MS+NAA (0.1-0.4) mg/L、蛋白胨(0.3-2.0) g/L、香蕉(15-45) g/L、土豆(10-40) g/L、蔗糖(10-45) g/L 和 AC (0.5-1.5) g/L 组成；
本发明的配方培养的文心兰，三至四个月左右的时间，就能将外植体的文心兰原球茎，经历原球茎增值培养、壮苗培养和生根培养三个阶段，变成为移栽成活率较高的生根的文心兰，提高了文心兰优质种苗快速繁育能力，并增强了文心兰种苗环境适应能力，从而提高了文心兰的组培苗抗性和移栽成活率，使文心兰在国内得到普遍推广应用。
[0006]优选地，原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基的配方，为以下的组份和含量时，具有更高的抗性和成活率，如下:
I)原球茎增殖培养基由 MS+6-BA (2.0-3.5) mg/L,NAA (0.2-0.3) mg/L、椰汁(80-150)ml/L和鹿糖(25-35) g/L组成；2)壮苗培养基由MS+蛋白胨(1.5-2.5) g/L、香蕉(25-35) g/L、土豆(25-35) g/L和蔗糖(20-30) g/L 组成；
3)生根培养基由1/2MS+NAA (0.15-0.3)mg/L、蛋白胨(0.7-1.2)g/L、香蕉(20-35) g/L、土豆(25-35) g/L、蔗糖(20-30) g/L 和 AC (0.8-1.2) g/L 组成。
[0007]优选地，原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基的配方，使用下述含量的组份时，文心兰的种苗具有最高的抗性和成活率，具体的成分是:
1)原球茎增殖培养基由MS+6-BA3.0mg/L、NAA 0.25mg/L、椰汁100 ml/L和蔗糖30g/L组成；
2)壮苗培养基由MS+蛋白胨2.0g/L、香蕉30g/L、土豆30g/L和蔗糖25g/L组成；
3)生根培养基由1/2MS+NAA0.2mg/L、蛋白胨1.0g/L、香蕉30 g/L、土豆30g/L、蔗糖25g/L 和 AC 1.0g/L 组成。
[0008]优选地，原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基的PH均为5.5-6.0,从而文心兰的种苗生长提供良好的酸性环境。
[0009]此外，为了加快文心兰的繁殖速度，原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基均以琼脂为支撑物的固体培养基，且原球茎增殖培养基阶段为(25-40) d,壮苗培养基阶段为(25-40) d,生根培养基阶段为(45-70) d。
[0010]最后为了，快 速繁殖得到抗性好、移栽成活率高的文心兰种苗，在培养文心兰时的环境，最佳选择为:光照强度(2000-2800) LX，周期13h/d，温度(23±1)°C，湿度35%_50%。[0011 ] 与现有技术相比，本发明的有益效果是:本发明的配方培养的文心兰，三至月个月左右的时间，就能将外植体的文心兰原球茎，经历原球茎增值培养、壮苗培养和生根培养三个阶段，变成为移栽成活率较高的生根的文心兰，提高了文心兰优质种苗快速繁育能力，并增强了文心兰种苗环境适应能力，从而提高了文心兰的组培苗抗性和移栽成活率，其移栽成活率达97%及97%以上，使文心兰在国内得到普遍推广应用。
[0012]本发明的配方，提高了文心兰优质种苗快速繁育能力，并增强了文心兰种苗环境适应能力，从而提高了文心兰的组培苗抗性和移栽成活率。
【具体实施方式】
[0013]为了加深对本发明的理解，下面结合实施例对本发明进一步说明，该实施例仅用于解释本发明，并不对本发明的保护范围构成限定。
[0014]实施例1
繁殖对象:文心兰外植体的原球茎 培育过程，分为三个阶段，如下所示:
第一阶段:培育原球茎增殖培养基，将文心兰原球茎接种到原球茎增殖培养基中培养，培养基配方为:MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.25mg/L+ 椰汁 100ml/L+ 蔗糖 30g/L+ 琼脂 5.5g/L，PH 5.5 ;增殖培养15d-25d，原球茎增殖培养结束。
[0015]第二阶段:壮苗培养，将原球茎接到壮苗培养基上培养，培养基配方为:MS+蛋白胨 2.0g/L+ 香蕉 30g/L+ 土豆 30g/L+ 蔗糖 25g/L+ 琼脂 5.5g/L，PH 6.0 ;壮苗培养 25d_35d，
壮苗培养结束。
[0016]第三阶段:生根培养，将壮苗培养得到的高度Icm以上的单株组培苗接种到生根培养基中培养，培养基配方为:1/2MS+NAA 0.2mg/L+蛋白胨1.0g/L+香蕉30g/L+土豆30g/L+蔗糖25g/L+AC 1.0g/L+琼脂5.5g/L，PH 5.8 ;经过50d_70d时间完成生根培养，组培苗的高度3cm-5cm,根长2cm-3cm,便可以进行文心兰移栽种苗。
[0017]培养环境条件:光照强度(2000_2800)LX，光照周期:13h/d ;温度(23±1) °C;湿度35%-50%。
[0018]培育成果:历经三至四个月时间，文心兰种苗移栽的成活率高达100%。
[0019]实施例2
繁殖对象:文心兰外植体的原球茎 培育过程，分为三个阶段，如下所示:
第一阶段:原球茎增殖培养基，将文心兰原球茎接种到原球茎增殖培养基中培养，培养基配方为:MS+6-BA 3.5mg/L+NAA 0.3mg/L+ 椰汁 150ml/L+ 蔗糖 35g/L+ 琼脂 5.5g/L，PH
5.8 ;增殖培养15d-25d，原球茎增殖培养阶段结束；
第二阶段:壮苗培养，将原球茎接到壮苗培养基上培养，培养基配方为:MS+蛋白胨2.5g/L+ 香蕉 35g/L+ 土豆 35g/L+ 蔗糖 30g/L+ 琼脂 5.5g/L，PH 6.0 ;壮苗培养 30d_35d，培养得到Icm以上的单株组培苗，壮苗培养结束。
[0020]第三阶段:生根培养，将壮苗培养得到的高度Icm以上的单株组培苗接种到生根培养基中培养，培养基配方为:1/2MS+NAA 0.3mg/L+蛋白胨1.2g/L+香蕉35g/L+土豆35g/L+蔗糖30g/L+AC 1.2g/L+琼脂5.5g/L，PH 5.8 ;45d_60d完成生根培养，组培苗的高度3cm_5cm,根长 2cm-3cm。
[0021]培养环境条件:光照强度(2000-2800) LX，光照周期:13h/d ;温度(23±1) V ;湿度 35%-50%。
[0022]培育成果:历经三至四个月时间，文心兰种苗移栽的成活率高达98%。
[0023]实施例3
繁殖对象:文心兰外植体的原球茎 培育过程，分为三个阶段，如下所示:
第一阶段:原球茎增殖培养基，将文心兰原球茎接种到原球茎增殖培养基中培养，培养基配方为:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L+椰汁 80ml/L+蔗糖 25g/L+琼脂 5.5g/L，PH 5.5 ；增殖培养18d-30d。
[0024]第二阶段:壮苗培养，增殖培养18d-30d后，将原球茎接到壮苗培养基上培养，培养基配方为:MS+蛋白胨1.5g/L+香蕉25g/L+ 土豆25g/L+蔗糖20g/L+琼脂5.5g/L，PH
6.0 ;壮苗培养30d-40d，得到高度Icm以上的单株组培苗。
[0025]第三阶段:生根培养，将高度Icm以上壮苗培养得到的单株组培苗接种到生根培养基中培养，培养基配方为:1/2MS+NAA 0.15mg/L+蛋白胨0.7g/L+香蕉20g/L+土豆25g/L+蔗糖20g/L+AC 0.8g/L+琼脂5.5g/L，PH 5.5。60d_70d完成生根培养，组培苗的高度3cm_5cm,根长 2cm-3cm。
[0026]培养环境条件:光照强度(2000-2800) LX，光照周期:13h/d ;温度(23±1) V ;湿度 35%-50%。
[0027]培育成果:历经三至四个月时间，文心兰种苗移栽的成活率高达97%。
[0028]说明:上述三个实施例中，为了加快文心兰的繁殖速度，原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基均以琼脂为支撑物的固体培养基。
[0029]在本发明中，6-BA为6-苄氨基腺嘌呤，NAA为萘乙酸，AC为活性炭。
[0030]本发明的配方，提高了文心兰优质种苗快速繁育能力，并增强了文心兰种苗环境适应能力，从而提高了文心兰的组培苗抗性和移栽成活率。
[0031] 本发明的实施例公布的是较佳的实施例，但并不局限于此，本领域的普通技术人员，极易根据上述实施例，领会本发明的精神，并做出不同的引申和变化，但只要不脱离本发明的精神，都在本发明的保护范围内。
【权利要求】
1.一种文心兰快速繁殖培养基配方，包括原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基，I)原球茎增殖培养基由 MS+6-BA (1.5-4.5)mg/L、NAA (0.15-0.35)mg/L、椰汁(50-200)ml/L和蔗糖(10-45) g/L组成； 2)壮苗培养基由MS+蛋白胨(1.0-3.5) g/L、香蕉(15-45) g/L、土豆(10-40) g/L和蔗糖(15-40) g/L 组成； 3)生根培养基由1/2MS+NAA (0.1-0.4) mg/L、蛋白胨(0.3-2.0) g/L、香蕉(15-45) g/L、土豆(10-40) g/L、蔗糖(10-45) g/L 和 AC (0.5-1.5) g/L 组成。
2.根据权利要求1所述的一种文心兰快速繁殖培养基配方，其特征在于:所述原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基的配方，优选为:1)原球茎增殖培养基由MS+6-BA(2.0-3.5) mg/L、NAA (0.2-0.3) mg/L、椰汁(80-150) ml/L 和蔗糖(25-35) g/L 组成； 2)壮苗培养基由MS+蛋白胨(1.5-2.5) g/L、香蕉(25-35) g/L、土豆(25-35) g/L和蔗糖(20-30) g/L 组成； 3)生根培养基由1/2MS+NAA (0.15-0.3)mg/L、蛋白胨(0.7-1.2)g/L、香蕉(20-35) g/L、土豆(25-35) g/L、蔗糖(20-30) g/L 和 AC (0.8-1.2) g/L 组成。
3.根据权利要求1或2所述的一种文心兰快速繁殖培养基配方，其特征在于:所述原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基的配方，优选为:1)原球茎增殖培养基由MS+6-BA 3.0mg/L、NAA 0.25mg/L、椰汁 100 ml/L 和蔗糖 30g/L 组成； 2)壮苗培养基由MS+蛋白胨2.0g/L、香蕉30g/L、土豆30g/L和蔗糖25g/L组成； 3)生根培养基由1/2MS+NAA0.2mg/L、蛋白胨1.0g/L、香蕉30 g/L、土豆30g/L、蔗糖25g/L 和 AC 1.0g/L 组成。
4.根据权利要求3所述的一种文心兰快速繁殖培养基配方，其特征在于:所述原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基的PH均为5.5-6.0。
5.根据权利要求3所述的一种文心兰快速繁殖培养基配方，其特征在于:所述原球茎增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基均以琼脂为支撑物的固体培养基。
6.根据权利要求3任意一项所述的一种文心兰快速繁殖培养基配方,其特征在于:所述配方在培养文心兰时的原球茎增殖培养基阶段、壮苗培养基阶段和生根培养基阶段中，每一个阶段的环境均为:光照强度(2000-2800) LX，周期13h/d，温度(23± I) °C，湿度35%-50%。
【文档编号】A01H4/00GK104026014SQ201410275168
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2014年6月19日 优先权日:2014年6月19日
【发明者】张本厚, 胡燕花, 陈集双 申请人:南京工业大学大丰海洋产业研究院