发酵法制备石杉碱甲的培养基优化设计的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种发酵法制备石杉碱甲的培养基优化设计。是以蛇足石杉内生枝顶孢霉(Acremonium?endophytium，保藏号为CCTCC?M206118)为生产菌株，在发酵过程中，通过优化发酵培养基的设计，可使石杉碱甲的发酵产量提高15％-20％，种子培养基配方：玉米粉1.5-2.0％，葡萄糖2％，玉米浆0.8％，酵母粉0.7-1.0％，麸皮0.65％，豆饼粉1.0％，KH2PO4?0.25％，MgSO4.7H2O?0.05％，CaCO3?0.35％。发酵培养基配方：玉米粉3.5-4.5％麦芽糖2％马铃薯1.8％酵母粉0.8-1.5％玉米浆0.6％，麸皮0.55％，豆饼粉1.0％KH2PO4?0.1％，MgSO4.7H2O?0.06％，NaCl?0.05％，CaCO3?0.4％。
【专利说明】发酵法制备石杉碱甲的培养基优化设计
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种抗老年痴呆原料药石杉碱甲的发酵培养基优化技术。
【背景技术】
[0002] 目前，国内外有一些机构和个人在开展利用石杉植物的多种内生菌（包括真菌和 细菌）发酵生产石杉碱甲的技术研究，但实验研究的成品得率一直非常低下，使其难以进 入产业化生产，而我们本技术项目的研究获得了优选的配方和创新工艺，通过优化发酵培 养基的设计，可使石杉碱甲的发酵产量提高15% -20%，具有十分重要的意义。
【发明内容】
[0003] 石杉碱甲是我国首次从蕨类植物蛇足石杉中分离得到的一种活性物质，它对中枢 乙酰胆碱酯酶具有高效、可逆、高选择的抑制作用，有强效、高选择性的抗乙酰胆碱酯酶活 性及提高学习和改善老年人记忆功能的作用。由于石杉碱甲仅存在于石杉科植物中，随着 石杉碱甲被分离并应用于临床，掀起了研究开发的热潮，人们便开始对石杉科植物进行掠 夺式开发，加上该植物对环境要求苛刻、分布星散、生长缓慢、资源更新周期长，使其资源越 来越匮乏。中国作为石杉野生资源主要分布区，其商业可开采量不足200吨，远不能满足市 场对药源的需求，已成为制约石杉碱甲开发的瓶颈。
[0004] 在发酵法制备石杉碱甲的培养基选择和优化过程中，我们通过多次研究实验，以 葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、甘露醇、乳糖、甘油、玉米粉为碳源；以蛋白胨、酵母膏、尿素、硫酸铵、 麸皮、豆柏为氮源；并在确定了碳源、氮源的培养基中加入不同浓度的MgS0 4、KH2P04、NaCl、 CaC03，优化培养基无机盐组成。获得了最佳的培养基配方，可以高效生产石杉碱甲。
[0005] 种子培养基配方：
[0006] 玉米粉1. 5-2. 0 %，葡萄糖2 %，玉米浆0· 8 %，酵母粉0· 7-1. 0 %，麸皮0· 65 %，豆 饼粉 1. 0 %，ΚΗ2Ρ04 0· 25 %，MgS04. 7H20 0· 05 %，CaC03 0· 35 %。
[0007] 发酵培养基配方：
[0008] 玉米粉3. 5-4. 5%麦芽糖2%马铃薯1. 8 %酵母粉0. 8-1. 5%玉米浆0. 6%，麸皮 0.55%，豆饼粉 1.0% ΚΗ2Ρ04 0.1%，MgS04.7H20 0.06%，NaCl 0.05%，CaC03 0 . 4%。
【具体实施方式】
[0009] 实施例1 :
[0010] 种子培养基配方：
[0011] 玉米粉2%，葡萄糖2%，玉米浆0.8%，酵母粉1%，麸皮0.65%，豆饼粉1.0%， ΚΗ2Ρ040· 25%，MgS04. 7H20 0· 05%，CaC03 0· 35%。
[0012] 发酵培养基配方：
[0013] 玉米粉4. 2 %麦芽糖2 %马铃薯1. 8 %酵母粉1. 2 %玉米浆0. 6 %，麸皮0. 55 %，豆 饼粉 1·0%ΚΗ2Ρ04 0.1%，MgS04.7H20 0.06%，NaCl 0.05%，CaC030 . 4%。
【权利要求】
1.发酵法制备石杉碱甲的培养基优化设计，其特征在于包括以下内容： 种子培养基配方：玉米粉1. 5-2. 0 %，葡萄糖2 %，玉米浆0. 8 %，酵母粉0. 7-1. 0 %，麸 皮 0· 65 %，豆饼粉 1. 0 %，ΚΗ2Ρ04 0· 25 %，MgS04. 7H20 0· 05 %，CaC03 0· 35 %。 发酵培养基配方：玉米粉3. 5-4. 5%麦芽糖2%马铃薯1. 8%酵母粉0. 8-1. 5%玉米浆 0.6%，麸皮 0.55%，豆饼粉 1.0% ΚΗ2Ρ04 0.1%，MgS04.7H20 0.06%，NaCl 0.05%，CaC03 0· 4%。
【文档编号】C12P17/12GK104152509SQ201310172209
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2013年5月13日 优先权日:2013年5月13日
【发明者】王玲, 兰时乐, 肖宏 申请人:湖南佰伦科技有限公司