一种有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基，其特征在于：其各组分比例按每1升培养基中含量如下：硝酸钠 1.3g?1.4g；碳酸钠0.13g?0.15g；硫酸镁0.15g?0.25g；磷酸氢二钾0.05g?0.10g；柠檬酸铁铵0.009g?0.019g；柠檬酸0.010g?0.050g；山梨酸钾0.025g?0.035g；乙二胺四乙酸二钠0.001g?0.010g；硫酸锌0.000222g?0.001000g；硼酸0.00286g?0.00586g氯化锰0.0018g?0.0036g；硝酸钴0.000494g?0.000894g；钼酸钠0.00039g?0.00089g；硫酸铜0.000079g?0.000150g；醋酸钠0.1g?1.0g；琼脂粉15g?17g；生物素0.025g?0.050g；维生素B1 2?5ml；维生素B12 5?10ml。本发明的目的是提供一种雨生红球藻固态保种培养基的新配方以及制备方法，解决现有配方抑制雨生红球藻繁殖，生长因子不够或过量，易污染细菌等弊端，达到延长雨生红球藻藻种保存时间的效果。
【专利说明】
一种有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基及其制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及培养基配方技术领域，尤其涉及一种有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基，以及该培养基的制备方法。
[0002]
【背景技术】
[0003]雨生红球藻是一种生活在淡水中的单红胞绿藻，又称湖生红球藻或湖生血球藻，是一种普遍存在的绿藻，该藻能大量累积虾青素而呈现红色，故名红球藻，因为是绿藻中的雨生种，又称雨生红球藻。雨生红球藻中的虾青素是类胡萝卜素的一种，也是迄今发现的类胡萝卜素合成的最高级别产物，在自然界具有最强的抗氧化性，因此被誉为21世纪抗氧化的革命性产品。人体的衰老，主要是由于自由基所造成的氧化所至。而红球藻萃取物特殊的分子构造，可以穿越人体细胞外壁，直接清除细胞内的氧自由基，增强细胞再生能力，维持人体机能平衡和减少衰老细胞的堆积，由内而外保护细胞和NDA健康。抗氧化的成分一直都在进步:第一代抗氧化的成分是维生素类，第二代抗氧化是B-胡萝卜素，辅酶QlO、SOD之类，第三代抗氧化是花青素、葡萄籽、蓝莓提取物、绿茶素、硫辛酸、番茄红素之类，第四代抗氧化成分就是天然虾青素。研究表明，雨生红球藻中虾青素的抗氧化活性是B-胡萝卜素的10倍、葡萄籽的17倍、硫辛酸的75倍、叶黄素的200倍、维生素E的1000倍。同样，雨生红球藻如同其他藻类，富含多种氨基酸、不饱和脂肪酸、维生素、矿物质等。然而，其特有的虾青素等橙系色素，是其他微藻所不具备的，这也正是真正的健康价值所在!随着现代社会下，人类对健康生活的高追求，抵抗衰老、永葆青春等保健理念的产品越来越收到广大消费者的青睐，而作为自然界中抗氧化能力最强的生物代谢产物，雨生红球藻含量极高的天然虾青素的经济价值将是未来不可估量的巨大财富！随着雨生红球藻养殖企业数量的增加，一份优秀的藻种将对一个企业的产量产生巨大的影响，所以对雨生红球藻藻种的筛选及保藏越来越受到重视，目前现有企业对藻种的保存主要通过固态培养基保种方式，这种方式保种迅速，恢复扩种便捷，但是目前技术下其培养基配方设计不够合理，常存在抑制雨生红球藻繁殖，生长因子不够或过量，易污染细菌等弊端。
[0004]
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种雨生红球藻固态保种培养基的新配方，解决现有配方抑制雨生红球藻繁殖，生长因子不够或过量，易污染细菌等弊端，达到延长雨生红球藻藻种保存时间的效果。
[0006]本发明的技术方案为:一种有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基，其各组分比例按每I升培养基中含量如下:硝酸钠1.38-1.48;碳酸钠0.138-0.158;硫酸镁0.15g-0.25g ；磷酸氢二钾0.05g-0.1Og;柠檬酸铁铵 0.009g-0.019g；柠檬酸 0.0lOg-0.05(^;山梨酸钾0.0258-0.0358;乙二胺四乙酸二钠0.0018-0.01(^;硫酸锌0.0002228-0.0OlOOOg ；硼酸0.00286g-0.00586g氯化锰0.0018g_0.0036g ；硝酸钴0.000494g-0.000894g ；钼酸钠 0.00039g-0.00089g ；硫酸铜 0.000079g_0.000150g ；醋酸钠 0.lg-1.0g；琼脂粉 15g-17g;生物素0.025g-0.050g;维生素BI 2_5ml;维生素B12 5-lOml。
[0007]在上述的有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基中，还包括余量的超纯水。
[0008]同时，本发明还公开了上述的有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基的制备方法，包括以下步骤:
步骤1:量取I升超纯水；
步骤2:将上述的组分加入到超纯水中，并使各组分溶解；
步骤3:将步骤2得到的溶液加入到高压灭菌锅中在115-125°C的条件下灭菌18-22min，然后保存在无菌环境中，保存温度为38-42°C。
[0009]
本发明的有益效果如下:
本发明公开的一种雨生红球藻固态保种培养基的新配方提供了足量的氮源、磷源、碳源为藻细胞的长期生长繁殖提供足够生长条件，其PH值可长期维持在6.5-8.0之间，适合微藻的分裂生长，添加的柠檬酸、山梨酸钾可在不影响微藻生长的情况下，有效抑制细菌的生长。用此配方制作的固态保种培养基可完善保存雨生红球藻藻种6-10个月左右，因为固体保种的便捷性，在使用藻种时可方便快捷进行微藻增养殖，迅速的投入生产线。
【具体实施方式】
[0010]下面结合【具体实施方式】，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
[0011]实施例1
一种有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基的制备方法，包括以下步骤:
步骤1:量取I升超纯水；
步骤2:将硝酸钠1.4g;碳酸钠0.13g;硫酸镁0.25g;磷酸氢二钾0.05g;柠檬酸铁铵0.0198;柠檬酸0.01(^8;山梨酸钾0.0358;乙二胺四乙酸二钠0.01(^;硫酸锌0.0002228;硼酸0.00586g氯化锰0.0018g；硝酸钴0.000894g ；钼酸钠0.00039g ；硫酸铜0.000150g ；醋酸钠0.18;琼脂粉178;生物素0.0258;维生素81 5ml;维生素B12 5 ml加入到超纯水中，并使各组分溶解；
步骤3:将步骤2得到的溶液加入到高压灭菌锅中在120°C的条件下灭菌20min，然后保存在无菌环境中，保存温度为40°C。
[0012]
实施例2
一种有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基的制备方法，包括以下步骤:
步骤1:量取I升超纯水；
步骤2:将硝酸钠1.35g;碳酸钠0.Hg;硫酸镁0.2g;磷酸氢二钾0.0Sg;柠檬酸铁铵0.014g;柠檬酸0.03g;山梨酸钾0.03g ；乙二胺四乙酸二钠0.005g ；硫酸锌0.0007g ；硼酸0.0045g氯化锰0.0028g ；硝酸钴0.0006g ；钼酸钠0.0006g ；硫酸铜0.0OO12g ；醋酸钠0.8g;琼脂粉16g;生物素0.035g;维生素BI 4ml;维生素B12 6ml加入到超纯水中，并使各组分溶解；步骤3:将步骤2得到的溶液加入到高压灭菌锅中在120°C的条件下灭菌20min，然后保存在无菌环境中，保存温度为40°C。
[0013]
实施例3
一种有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基的制备方法，包括以下步骤:
步骤1:量取I升超纯水；
步骤2:将硝酸钠1.3g;碳酸钠0.15g;硫酸镁0.15g;磷酸氢二钾0.1Og;柠檬酸铁铵
0.0098;柠檬酸0.05(^;山梨酸钾0.0258;乙二胺四乙酸二钠0.0018;硫酸锌0.00100(^;硼酸0.00286g氯化锰0.0036g ；硝酸钴0.000494g ；钼酸钠0.00089g ；硫酸铜0.000079g ；醋酸钠1.0g；琼脂粉15g;生物素0.050g;维生素BI 2ml;维生素B12 I Oml加入到超纯水中，并使各组分溶解；
步骤3:将步骤2得到的溶液加入到高压灭菌锅中在120°C的条件下灭菌20min，然后保存在无菌环境中，保存温度为40°C。
[0014]实施例1-3提供了足量的氮源、磷源、碳源为藻细胞的长期生长繁殖提供足够生长条件，其PH值可长期维持在6.5-8.0之间，适合微藻的分裂生长，添加的柠檬酸、山梨酸钾可在不影响微藻生长的情况下，有效抑制细菌的生长。用此配方制作的固态保种培养基可完善保存雨生红球藻藻种6-10个月左右，因为固体保种的便捷性，在使用藻种时可方便快捷进行微藻增养殖，迅速的投入生产线。
[0015]以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基，其特征在于:其各组分比例按每I升培养基中含量如下:硝酸钠1.3g-l.4g;碳酸钠0.13g-0.15g;硫酸镁0.15g_0.25g;磷酸氢二钾0.05g-0.1g;柠檬酸铁铵0.009g-0.019g ;柠檬酸0.0lOg-0.050g ；山梨酸钾0.025g-0.035g;乙二胺四乙酸二钠 0.0Olg-0.0lOg；硫酸锌 0.000222g-0.0OlOOOg ；硼酸0.00286g-0.00586g氯化锰0.0018g_0.0036g ；硝酸钴0.000494g_0.000894g ；钼酸钠0.00039g-0.00089g ；硫酸铜 0.000079g_0.000150g ；醋酸钠 0.lg-1.0g；琼脂粉 15g_17g ；生物素(h025g-(h050g;维生素BI 2-5ml;维生素B12 5-lOml。2.根据权利要求1所述的有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基，其特征在于，还包括余量的超纯水。3.—种如权利要求1所述的有利于长期储存雨生红球藻藻种的固态培养基的制备方法，其特征在于:包括以下步骤: 步骤1:量取I升超纯水； 步骤2:将权利要求1所述的组分加入到超纯水中，并使各组分溶解； 步骤3:将步骤2得到的溶液加入到高压灭菌锅中在115-125°C的条件下灭菌18-22min，然后保存在无菌环境中，保存温度为38-42°C。
【文档编号】C12R1/89GK105907644SQ201610369738
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年5月30日
【发明人】闫潍皓, 史会帅
【申请人】广东海融环保科技有限公司