室内辅助鉴定甘薯耐旱性的方法
【专利摘要】本发明涉及一种甘薯耐旱性鉴定方法，具体是一种室内辅助鉴定甘薯耐旱性的方法，属甘薯耐旱性鉴定【技术领域】。通过选取继代培养≥50d的试管苗茎段为外植体，切取单节段，接种于高渗鉴定培养基，接种处理30d后，调查各品种相对生根数系数，根据不同品种相对生根数系数判断耐旱性等级(相对生根数系数≥1.0的品种，耐旱性强；0.5＜相对生根数系数＜1.0的品种，耐旱性中等；相对生根数系数≤0.5的品种，耐旱性较差)。该方法操作简单，灵活方便，适宜大量材料的初筛，减轻田间耐旱鉴定的工作量，提高工作效率。
【专利说明】室内辅助鉴定甘薯耐旱性的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种甘薯耐旱性鉴定方法，具体涉及一种室内辅助鉴定甘薯耐旱性的 方法，属甘薯耐旱性鉴定【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 甘薯耐旱性鉴定的目的主要是从已育成的甘薯品种中筛选适宜旱区栽培的品种 和促进耐旱、优质、高产专用新品种的选育。甘薯作为新型能源原材料及加工材料为一体 的多元化作物，针对当前耕地紧张，为做到"不与人争粮，不与粮争地"，并且甘薯是一种适 应性及抗逆性较强的粮食作物，内陆盐碱、干旱等边际土地及丘陵山地为未来甘薯产业拓 展的新天地。为促进甘薯耐旱资源等材料的筛选、鉴定，前人已通过遮雨模拟干旱处理，进 行甘薯耐旱性鉴定，但是这都需要花费大量人力物力，工作量非常大，并且由于处理区域有 限，难以满足大量材料的初筛、鉴定。而通过研究胁迫及对照处理条件下，抗氧化生理指标 等变化与甘薯耐旱相关性的关系，由于难以用少数生理指标直接判定甘薯耐旱性，并且生 理指标的检测，工作量也比较大，气候等多种因素都有可能影响到其检测的准确性及重复 性，从而影响对对耐旱性结果的判定。总之，耐旱鉴定效率的低下极大影响了耐旱甘薯材料 的筛选及耐旱新品种选育的进程。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是为了克服上述已有方法的不足，提供一种室内辅助鉴定甘薯耐旱 性的方法，该方法具有快速、高效，不受外界其他环境条件影响，保证鉴定材料所处环境条 件一致，可真实反应材料的耐旱性。
[0004] 本发明是以如下技术方案实现的：一种室内辅助鉴定甘薯耐旱性的方法，通过取 继代培养> 50d的甘薯试管苗为外植体，切取单节段，接种于高渗鉴定培养基（按照W/V 为l〇〇g/L，在无菌条件下，将聚乙二醇8000溶解于1/2MS液体培养基（经高温灭菌但未添 加琼脂粉），然后将含聚乙二醇8000的1/2MS液体培养基按照V/V为1:1. 5,分装入1/2MS 固体培养基培养皿，平衡24h，然后将固体培养基上方剩余的液体培养基清除，这样配置的 1/2MS固体培养基为鉴定培养基），接种30d后调查相对生根数，计算相对生根数系数，据相 对生根数系数判定品种的耐旱性类别。具体按如下步骤进行：
[0005] (I) 1/2MS固体培养基的配置：MS基本培养基大量、微量元素减半，添加蔗糖30g/ L，Phytagel 5g/L，灭菌前调PH 5. 7 ;灭菌后分装入直径为90mm培养皿，冷却待用。
[0006] (2)配置高渗鉴定培养基：首先，按照W/V为100g/L，在无菌条件下，将聚乙二醇 8000溶解于经高温灭菌但未添加琼脂粉的1/2MS液体培养基，然后将含聚乙二醇8000的 1/2MS液体培养基装入有1/2MS固体培养基的培养皿，平衡24h，然后将固体培养基上方剩 余的液体培养基清除，备用；所述的含聚乙二醇8000的1/2MS液体培养基与1/2MS固体培 养基的V/V比为1:1.5 ;
[0007] (3)茎段接种：选取继代培养> 50d不同品种试管苗材料，切取单节段，接种于高 渗鉴定培养基培养；
[0008] (4)相对生根数系数调查：接种30d后，调查各处理材料及相应对照的生根数，计 算相对生根数系数；相对生根数系数=高渗处理品种生根数/对照品种生根数；
[0009] (5)相对生根数系数彡I. 0的品种，耐旱性强；0. 5 <相对生根数系数< I. 0的品 种，耐旱性中等；相对生根数系数< 〇. 5的品种，耐旱性较差。
[0010] 本发明的优点是：该方法可操作性强，简单易行，高效快捷，不受季节限制，并且可 排除外界环境条件差异对耐旱鉴定结果的影响，是一种室内辅助初筛耐旱性甘薯品种的有 效方法。
【具体实施方式】
[0011] 下面结合实施例进一步说明本发明的方法和效果，但不限制本发明的保护范围。
[0012] 实施例1、
[0013] 1?试验材料和方法
[0014] 1. 1试验材料：试验所选材料为经过新疆耐旱鉴定基地，连续两年鉴定为耐旱性 强、中、差的6份材料。其中：
[0015] 耐旱性强：万紫56、广薯87 ;
[0016] 耐旱性中等：徐薯18、徐20-1 ;
[0017] 耐旱性差：宁紫薯1号、日紫0602。
[0018] 1.2试验方法：
[0019] 1/2MS固体培养基的配置：MS基本培养基大量元素和微量元素减半，添加蔗糖 30g/L，Phytagel 5g/L，灭菌前调PH 5. 7;灭菌后分装入直径为90mm培养皿，冷却待用。
[0020] 高渗鉴定培养基的配置：首先，按照W/V为50g/L、100g/L、200g/L、300g/L，在无菌 条件下，将聚乙二醇8000溶解于1/2MS液体培养基（经高温灭菌但未添加琼脂粉），然后 将含聚乙二醇8000的1/2MS液体培养基按照V/V为1:1. 5,分装入1/2MS固体培养基培养 皿，平衡24h，然后将固体培养基上方剩余的液体培养基清除，备用。
[0021] 茎段接种：选取继代培养30d、40d、50d、60d不同品种试管苗材料，切取单节段，接 种于高渗鉴定培养基培养。
[0022] 1. 3调查及数据统计：接种30d后，调查各处理材料及相应对照的生根数，计算相 对生根数系数，相对生根数系数=高渗处理品种生根数/对照品种生根数。
[0023] 2?结果与分析
[0024] 2. 1不同继代培养时间试管苗对高渗胁迫的反应
[0025] 选取耐旱性差的日紫0602不同继代培养时间的试管苗茎段，接种于不同浓度高 渗鉴定培养基，筛选在较高渗透浓度下，日紫0602试管苗成活率为100 %的继代培养试管 苗材料，结果表明：在50g/L处理浓度下，不同继代培养时间茎段的成活率可达100 ;随着处 理浓度的提高，茎段成活率呈下降趋势，甚至全部死亡；随着茎段继代时间延长，以及茎段 内部纤维等发育，具有较高抗逆能力，当不同继代培养时间的茎段接种于l〇〇g/L高渗培养 基后，继代培养30d、40d的试管苗茎段成活率低于100%，当继代培养大于等于50d后，试 管苗茎段的成活率达到了 100% ;如果高渗浓度进一步提高，试管苗茎段将无法适应这一浓 度，成活率低于50 %，甚至失水干枯死亡；因此，相比较而言，继代培养大于等于50d试管苗 茎段为高渗处理的适宜外植体。具体见表I.
[0026] 表1 :不同继代天数茎段对不同渗透处理的反应
【权利要求】
1. 一种室内辅助鉴定甘薯耐旱性的方法，通过取继代培养> 50d的甘薯试管苗为外植 体，切取单节段，接种于高渗鉴定培养基，接种30d后调查相对生根数，计算相对生根数系 数，根据相对生根数系数判定品种的耐旱性类别；具体按如下步骤进行： (1) 配置1/2MS固体培养基：MS基本培养基大量元素和微量元素减半，添加蔗糖30g/ L，Phytagel 5g/L，灭菌前调PH 5. 7 ;灭菌后分装入直径为90mm培养皿，冷却待用； (2) 配置高渗鉴定培养基：首先，按照W/V为100g/L，在无菌条件下，将聚乙二醇8000 溶解于经高温灭菌但未添加琼脂粉的1/2MS液体培养基，然后将含聚乙二醇8000的1/2MS 液体培养基装入有1/2MS固体培养基的培养皿，平衡24h，然后将固体培养基上方剩余的液 体培养基清除，备用；所述的含聚乙二醇8000的1/2MS液体培养基与1/2MS固体培养基的 V/V 比为 1:1. 5 ; (3) 茎段接种：选取继代培养> 50d的不同品种试管苗材料，切取单节段，接种于高渗 鉴定培养基培养； (4) 相对生根数系数调查：接种30d后，调查各处理材料及相应对照的生根数，计算相 对生根数系数； (5) 相对生根数系数彡1. 0的品种，耐旱性强；0. 5 <相对生根数系数< 1. 0的品种，耐 旱性中等；相对生根数系数< 〇. 5的品种，耐旱性差。
2. 根据权利要求1所述的室内辅助鉴定甘薯耐旱性的方法，所述的相对生根数系数= 高渗处理品种生根数/对照品种生根数。
【文档编号】A01H4/00GK104255449SQ201410439300
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年8月29日 优先权日:2014年8月29日
【发明者】周志林, 金平, 唐君, 刘恩良, 曹清河, 赵冬兰, 张安, 孙书军, 项彩云 申请人:江苏徐淮地区徐州农业科学研究所, 新疆农业科学院粮食作物研究所