一种乳腺癌干细胞冻存保护剂及制成的冻存保护试剂盒的制作方法

文档序号:11113518阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种乳腺癌干细胞冻存保护剂,用于冻存保护MCF-7乳腺癌干细胞,其特征在于:由无血清培养基冻干粉和胎牛血清FBS组成;所述无血清培养基冻干粉由如下方法制备:在DMEM/F12培养液中添加常规生长因子、加兰他敏和石蒜碱,常规生长因子包括重组人表皮生长因子EGF、牛血清白蛋白BSA、胰岛素和B27,配制成EGF浓度为15-25g/L、BSA浓度为3-5g/L、胰岛素浓度为4-6mg/L、浓度为1.5-2.5%、加兰他敏浓度为50-100nmol/L、石蒜碱浓度为50-100nmol/L的培养液,于37℃、5%CO2条件下摇床保存20-28h,冷冻干燥。

2.根据权利要求1所述的乳腺癌干细胞冻存保护剂,其特征在于:所述无血清冻干粉浓度为60-90g/L。

3.根据权利要求2所述的乳腺癌干细胞冻存保护剂,其特征在于:由无血清培养基冻干粉和胎牛血清FBS组成,无血清冻干粉浓度为75g/L;所述无血清培养基冻干粉由如下方法制备:在DMEM/F12培养液中添加常规生长因子、加兰他敏和石蒜碱配制成EGF浓度为20g/L、BSA浓度为4g/L、胰岛素浓度为5mg/L、浓度为2%、加兰他敏浓度为75nmol/L、石蒜碱浓度为75nmol/L的培养液,于37℃、5%CO2条件下摇床保存24h,冷冻干燥。

4.一种乳腺癌干细胞冻存保护试剂盒,用于与胎牛血清FBS配合使用冻存保护MCF-7乳腺癌干细胞,其特征在于:包括分装的无血清培养基冻干粉,无血清培养基冻干粉由如下方法制备:在DMEM/F12培养液中添加常规生长因子、加兰他敏和石蒜碱配制成EGF浓度为20g/L、BSA浓度为4g/L、胰岛素浓度为5mg/L、浓度为2%、加兰他敏浓度为75nmol/L、石蒜碱浓度为75nmol/L的培养液,于37℃、5%CO2条件下摇床保存24h,冷冻干燥。

5.根据权利要求4所述的乳腺癌干细胞冻存保护试剂盒,其特征在于:还包括干燥剂或防腐剂或抗氧化剂。

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