本发明属于中草药种植技术领域，具体涉及一种白芨组培的生根培养基及其育苗方法。
背景技术：
白芨为兰科白芨属多年生草本植物，亦作白及、连及草、甘根，分布于中国至朝鲜、日本，我国产于华东、华南及河南、陕西、四川、云南等地。白芨的块茎为我国传统中药，早在《神农本草经》中就有记载，《中国药典》中所收载具有补肺、消肿、生肌、止血、敛疮等功效，用于治疗肺伤咳血、金疮出血、溃疡疼痛、汤火灼伤、手足皲裂等症。此外，白芨花色艳丽，也是一种很好的景观植物，因此市场对白芨的需求十分旺盛。
由于市场需求的扩大，近年来我国大部分地区的野生白芨遭到过度采挖，导致其野生自然资源急剧减少，濒临灭绝，被国家列为重点保护的野生药用植物之一。为保护白芨野生资源，人工繁育和栽培白芨势在必行。白芨的种子非常细小且无胚乳，因此在自然状况下很难萌发和生长，实生苗的栽培较为困难，传统栽培主要靠分株繁殖。但分株繁殖周期长，繁殖效率低，而且耗种量大，很难满足大量栽培的需要。
组织培养技术可以快速繁殖大量种苗，远较分株繁殖快捷高效。近年来我国学者开始探索白芨组织培养技术，以便为白芨栽培提供种源，实现人工种植，摆脱对野生资源的依赖。如发明专利cn201510253683.6，公开了一种白芨组培快繁培养基，它包括白芨种子播种培养基、继代培养基、生根定植培养基；所述生根定植培养基以ms培养基为基本培养基，在每升基质中含有：花宝i号2g、花宝ii号1g、琼脂8g、白糖20g、活性炭1g、香蕉肉40g、马铃薯泥20g，培养基的ph值为5.4。该配方中缺少促进白芨根叶生长的微量元素，白芨生根的长势不好。
技术实现要素：
基于以上技术问题，本发明提供了一种白芨组培的生根培养基。得到白芨生根的质量更高，成活率更高。
本发明的技术方案如下：
一种白芨组培的生根培养基，按重量计，包括以下原料：硝酸钾25-30份、硝酸铵22-26份、硫酸镁5-8份、氯化钙6-9份、磷酸二氢钾1-3份、naa15-30份、ba0.5-0.8份，香蕉300-400份、洋芋200-300份、白糖700-800份、琼脂150-180份、碳粉10-20份、微量元素水溶液60-80份、铁盐水溶液120-160份、有机水溶液25-35份和肌醇水溶液25-35份。
优选地，一种白芨的生根培养基，按重量计，包括以下原料：硝酸钾28.5份、硝酸铵25份、硫酸镁5.5份、氯化钙6.6份、磷酸二氢钾2.5份、naa24份、ba0.6份，香蕉350份、洋芋250份、白糖750份、琼脂160份、碳粉15份、微量元素水溶液75份、铁盐水溶液150份、有机水溶液30份和肌醇水溶液30份。
培养基中添加洋芋和香蕉等有机附加物，主要是由于他们含有丰富的糖、蛋白质、各种无机盐、维生素以及各种活性物质。
为了促进根叶的生长，本发明的生根培养基中还添加了促进白芨根叶生长的微量元素。考虑到母液稳定性的问题，根据化学反应原理，若阴离子的浓度高，对微量素中的金属离子来说是过量的，若混合在一起，微量素中的金属离子会很容易发生水解反应，生成沉淀，从而失效。长时间使用这样的母液，就会发生生理病害，比如缺素症产生黄叶，叶不展，萎缩变脆等，因此本发明对微量素的用量进行了严格控制。
所述的微量元素包括碘化钾0.15-0.2份、硼酸1-1.1份、硫酸锰0.002-0.005份、硫酸锌1.5-1.8份、钼酸钠0.03-0.05份、硫酸铜0.001-0.003份和氯化钴0.002-0.006份。
所述的铁盐包括硫酸亚铁2.2-2.8份和乙二氨四乙酸二钠3.2-3.6份。铁盐是植物生长中必须的矿物元素，加入乙二氨四乙酸二钠与铁盐形成螯合物防止氧化形成三价铁盐。
所述的有机成分包括烟酸0.3-0.5份、维生素b60.3-0.5份、维生素b10.1-0.3份和甘氨酸1.5-2份。小分子有机物是多种氨基酸的混合物，对胚状体、不定芽及细胞的分化有良好的促进作用。
所述肌醇水溶液的质量百分数为3-4％。
本发明白芨的生根培养基的ph值为6.0-6.3。培养基灭菌后ph会降低0.2左右，其主要原因就是有机物的分解，特别是维生素、氨基酸和糖。6.0-6.3是白芨生根生长的最适酸碱度。
本发明还提供了一种白芨组培的育苗方法，包括以下步骤：
a、生根培养基的制备
分别配制微量元素水溶液、铁盐水溶液、有机水溶液和肌醇水溶液；
取硝酸钾25-30份、硝酸铵22-26份、硫酸镁5-8份、氯化钙6-9份、磷酸二氢钾1-3份、naa15-30份、ba0.5-0.8份，香蕉300-400份、洋芋200-300份、白糖700-800份、琼脂150-180份、碳粉10-20份、微量元素水溶液60-80份、铁盐水溶液120-160份、有机水溶液25-35份和肌醇水溶液25-35份，混合得到生根培养基；
b、将种籽移植于组培瓶中播种
所述种籽先放入无菌水中清洗，再放入消毒液中泡洗20-40分钟后用于播种；所述组培瓶中含有步骤a的生根培养基，高压灭菌120-125分钟，冷却后拿到无菌工作台上用于播种；
c、出瓶驯化
播种两个月后，部分种子已开始长出根、叶，由原来的黄金色变成绿色，以一分十的量开始分瓶，无限分瓶培养，直到长出根茎6-8公分就出瓶驯化。
由于培养基中的微量元素、铁盐、有机成分和肌醇直接混合在一起容易发生化学反应产生沉淀而不能使用，因此先用纯净水分别配制成四种母液后再混合。另外，由于肌醇容易发霉或变质，如果与其他的成分在一起，在夏天只能保存五天左右，因此单独配制可以保存15天左右。
优选地，所述组培瓶中含有50-80ml的生根培养基。
本发明的有益效果在于：
1、本发明的组培生长周期比一般培养基要多两周左右，主要是提高植株生根的根系生长及让根系进一步适应自然环境，提高炼苗的成活率，成活率可以达到95-99％。
2、同等条件下采用不同培养基培养的小苗，本培养基的植株鲜重更大，叶片明显宽大，根系的条数增多，植株的生根率更高达到90％以上。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的实质性内容作进一步详细的描述。
实施例1
一种白芨组培的生根培养基，按重量计，包括以下原料：硝酸钾30g、硝酸铵26g、硫酸镁8g、氯化钙9g、磷酸二氢钾3g、naa30ml、ba0.8ml，香蕉400g、洋芋300g、白糖800g、琼脂180g、碳粉20g、微量元素水溶液80ml、铁盐水溶液160ml、有机成分水溶液35ml和肌醇水溶液35ml。
实施例2
一种白芨组培的生根培养基，按重量计，包括以下原料：硝酸钾28.5g、硝酸铵25g、硫酸镁5.5g、氯化钙6.6g、磷酸二氢钾2.5g、naa24ml、ba0.6ml，香蕉350g、洋芋250g、白糖750g、琼脂160g、碳粉15g、微量元素水溶液75ml、铁盐水溶液150ml、有机水溶液30ml和肌醇水溶液30ml。
实施例3
一种白芨组培的生根培养基，按重量计，包括以下原料：硝酸钾250g、硝酸铵220g、硫酸镁50g、氯化钙60g、磷酸二氢钾10g、naa150ml、ba5ml，香蕉3000g、洋芋2000g、白糖7000g、琼脂1500g、碳粉100g、微量元素水溶液600ml、铁盐水溶液1200ml、有机成分水溶液250ml和肌醇水溶液250ml。
所述的微量元素包括碘化钾1.5g、硼酸10g、硫酸锰0.02g、硫酸锌15g、钼酸钠0.3g、硫酸铜0.01g和氯化钴0.02g。
所述的铁盐包括硫酸亚铁22g和乙二氨四乙酸二钠32g。
所述的有机成分包括烟酸3g、维生素b63g、维生素b11g和甘氨酸15g。
所述肌醇水溶液的质量百分数为3％。
该生根培养基的ph值为6.0。
实施例4
一种白芨组培的生根培养基，按重量计，包括以下原料：硝酸钾260g、硝酸铵230g、硫酸镁60g、氯化钙80g、磷酸二氢钾20g、naa180ml、ba7ml，香蕉3500g、洋芋2500g、白糖7600g、琼脂1600g、碳粉120g、微量元素水溶液950ml、铁盐水溶液1500ml、有机成分水溶液280ml和肌醇水溶液280ml。
所述的微量元素包括碘化钾1.8g、硼酸10.5g、硫酸锰0.03g、硫酸锌16g、钼酸钠0.4g、硫酸铜0.02g和氯化钴0.05g。
所述的铁盐包括硫酸亚铁25g和乙二氨四乙酸二钠33g。
所述的有机成分包括烟酸4g、维生素b64g、维生素b12g和甘氨酸18g。
所述肌醇水溶液的质量百分数为4％。
该生根培养基的ph值为6.1。
实施例5
一种白芨组培的生根培养基，按重量计，包括以下原料：硝酸钾29g、硝酸铵25g、硫酸镁6.5g、氯化钙8g、磷酸二氢钾2.5g、naa20ml、ba0.7ml，香蕉360g、洋芋220g、白糖760g、琼脂165g、碳粉12g、微量元素水溶液90ml、铁盐水溶液130ml、有机成分水溶液32ml和肌醇水溶液32ml。
所述的微量元素包括碘化钾0.17g、硼酸1.06g、硫酸锰0.004g、硫酸锌1.6g、钼酸钠0.035g、硫酸铜0.0015g和氯化钴0.004g。
所述的铁盐包括硫酸亚铁2.3g和乙二氨四乙酸二钠3.4g。
所述的有机成分包括烟酸0.35g、维生素b60.4g、维生素b10.15g和甘氨酸1.8g。
所述肌醇水溶液的质量百分数为3.5％。
该生根培养基的ph值为6.3。
实施例6
实施例2的白芨生根培养基的育苗方法，包括以下步骤：
a、生根培养基的制备
分别配制微量元素水溶液、铁盐水溶液、有机水溶液和肌醇水溶液；按配方比例混合后，得到生根培养基；
b、将种籽移植于组培瓶中播种
所述种籽先放入无菌水中清洗，再放入消毒液中泡洗20分钟后用于播种；所述组培瓶中含有步骤a的生根培养基，高压灭菌120分钟，冷却后拿到无菌工作台上用于播种；
c、出瓶驯化
播种两个月后，部分种子已开始长出根、叶，由原来的黄金色变成绿色，以一分十的量开始分瓶，无限分瓶培养，直到长出根茎6公分就出瓶驯化。
实施例7
实施例3白芨生根培养基的育苗方法，包括以下步骤：
a、生根培养基的制备
分别配制微量元素水溶液、铁盐水溶液、有机水溶液和肌醇水溶液；按配方比例混合后，得到生根培养基；
b、将种籽移植于组培瓶中播种
所述种籽先放入无菌水中清洗，再放入消毒液中泡洗40分钟后用于播种；所述组培瓶中含有步骤a的生根培养基，高压灭菌125分钟，冷却后拿到无菌工作台上用于播种；
c、出瓶驯化
播种两个月后，部分种子已开始长出根、叶，由原来的黄金色变成绿色，以一分十的量开始分瓶，无限分瓶培养，直到长出根茎8公分就出瓶驯化。
实施例8
实施例4白芨生根培养基的育苗方法，包括以下步骤：
a、生根培养基的制备
分别配制微量元素水溶液、铁盐水溶液、有机水溶液和肌醇水溶液；按配方比例混合后，得到生根培养基；
b、将种籽移植于组培瓶中播种
所述种籽先放入无菌水中清洗，再放入消毒液中泡洗30分钟后用于播种；所述组培瓶中含有步骤a的生根培养基，高压灭菌122分钟，冷却后拿到无菌工作台上用于播种；
c、出瓶驯化
播种两个月后，部分种子已开始长出根、叶，由原来的黄金色变成绿色，以一分十的量开始分瓶，无限分瓶培养，直到长出根茎7公分就出瓶驯化。
同等条件下采用不同培养基培养的小苗，本培养基的植株鲜重更大，叶片明显宽大，根系的条数增多，植株的生根率更高达到90％以上。
以上所述实施例仅表达了本发明的具体实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。