本发明属于无糖培养微繁殖技术领域，涉及一种培养基，尤其涉及一种植物无糖组培专用培养基。
背景技术：
微繁殖的目标是在短时间内获得大量的遗传相同、生理一致、生长发育正常的植株。然而，在传统的植物组织培养微繁殖中，小植株生长的碳源主要依赖于培养基中的糖，但糖促进了微生物的污染；为避免污染，不得不使用密闭的小容器进行培养，导致植株生理紊乱、种苗品质差、移栽成活率低等问题突出。而且，小容器操作繁琐，人力资源消耗大，机械化程度低，难以实现植物组培快繁的工厂化生产。
植物无糖培养微繁殖是以co2替代培养基中的糖作为碳源，采用人工环境控制手段，为容器中小植株的生长提供适宜的光照、温度、湿度、co2浓度、营养等条件，从而促使植物的生长发育和快速繁殖。克服了传统组培中污染率高，植物生长发育不良，生理形态紊乱，畸形，生长发育延缓或死亡等问题；可显著提高种苗质量，缩短培养周期，提高劳动生产率，降低生产成本。
植物无糖培养的实质是小植物由原来异养和兼养的方式转为自养,即自身进行光合作用,合成碳水化合物及其所需物质进行生长和发育,所以原有的以糖作为碳源的植物组织培养用的培养基，例如ms，white,b5,n6培养基等，已不能适用于植物无糖培养,其营养已不能满足小植物进行光合作用和生长发育的需求。
有鉴于此，如今迫切需要设计一种新的培养基，以便克服现有培养基存在的上述缺陷,适应小植株进行光自养生长发育的需求。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是：提供一种植物无糖组培专用培养基，可保证植物在培养过程中，所需的各种元素得到充分的满足，特别是可满足植物进行光合作用的培养基,实现了小植物快速健壮的生长和发育，改善植株品质,缩短培养周期。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
一种植物无糖组培专用培养基，不含糖和琼脂，ph在5.6～6.0之间；
所述植物无糖培养专用培养基包括常量营养元素、微量营养元素和蛭石作为培养基质；
其中，所述常量营养元素的组分和其对应的浓度如下：
硝酸钾900～1800mg/l；
硝酸铵800～1750mg/l；
七水硫酸镁370～740mg/l；
无水磷酸二氢钾170～340mg/l；
二水氯化钙200～440mg/l；
乙二胺四乙酸二钠27.8～70mg/l；
七水硫酸亚铁37.3～93mg/l；
所述微量营养元素的组分和其对应的浓度如下：
四水硫酸锰22.3mg/l；
硫酸锌8.6mg/l；
硼酸6.2mg/l；
碘化钾0.83mg/l；
钼酸钠0.25mg/l；
硫酸铜0.025mg/l；
氯化钴0.025mg/l。
本发明的有益效果在于：本发明提出的植物无糖组培专用培养基，通过选择改良ms培养基作为基础培养基，减去了ms培养基中的有机物和糖,从而减少了微生物的污染；增加了植物光合作用需求量较大的mg+2,po4-,fe+2,使其可以充分满足植物光合作用的需求,促进植株的生长和发育,改善植物品质,缩短培养周期30-50％.
本发明采用蛭石代替琼脂作为培养基质，克服了传统琼脂在植物组织培养中不利于根系生长的固有缺陷，促进试管苗根系的活力和生长,促进根的形成和代谢活动，增强光合作用，改善植物品质，提高植物对营养元素的吸收。
本发明解决了传统组织培养中存在的植物生长发育不良，生理形态紊乱，畸形，生长发育延缓或死亡等问题，可显著促进小植株的生长,种苗质量显著提高，培养周期缩短,降低生产成本，有利于植物快繁的规模化、工厂化生产。由于培养基中不加糖和采用蛭石作为培养基质,可以有效的促进植株进行自养生长,促进根系的形成和生长,因此,生根培养可以不加入生长素。
具体实施方式
下面是本发明的优选实施例。
实施例一
以马铃薯组培苗为实施例
上述无糖培养专用培养基包括大量营养元素、微量营养元素和蛭石作为培养基质。其中，所述的常量营养元素的组分和其对应的浓度如下：
硝酸钾1800mg/l；硝酸铵1750mg/l；七水硫酸镁592mg/l；无水磷酸二氢钾272mg/l；二水氯化钙440mg/l；乙二胺四乙酸二钠55.6mg/l；七水硫酸亚铁74.6mg/l。
所述的微量营养元素的组分和其对应的浓度如下：四水硫酸锰22.3mg/l；硫酸锌8.6mg/l；硼酸6.2mg/l；碘化钾0.83mg/l；钼酸钠0.25mg/l；硫酸铜0.025mg/l；氯化钴0.025mg/l。
将配制好的液体培养基和蛭石分别放置在高压灭菌锅中121-123℃下灭菌20分钟；冷却后将液体培养基和蛭石在培养容器中混合后备用；
将马铃薯外植体节段接种在配制好的培养基上进行培养，培养条件为:温度23℃,光照强度:100umolm-2s-1,光周期：16h/d,co2浓度1000ppm。
培养结果为：15天植株长至12cm,可以进行下一次的培养,增殖倍数为5～6倍，茎叶伸展，叶片嫩绿，植株健壮。
而传统的有糖培养基的培养期为30天,增殖倍数在3～5倍，且容易出现植株瘦弱,叶片发黄，植株畸形化的问题。
实施例二
以苹果组培苗为实施例
上述无糖培养专用培养基包括常量营养元素、微量营养元素和蛭石作为培养基质。其中，所述的常量营养元素的组分和其对应的浓度如下：
硝酸钾900mg/l；硝酸铵800mg/l；七水硫酸镁370mg/l；无水磷酸二氢钾170mg/l；二水氯化钙200mg/l；乙二胺四乙酸二钠27.8mg/l；七水硫酸亚铁37.3mg/l。
所述的微量营养元素的组分和其对应的浓度如下：四水硫酸锰22.3mg/l；硫酸锌8.6mg/l；硼酸6.2mg/l；碘化钾0.83mg/l；钼酸钠0.25mg/l；硫酸铜0.025mg/l；氯化钴0.025mg/l；不添加任何生长调节剂。
将配制好的液体培养基和蛭石分别放置在高压灭菌锅中121-123℃下灭菌20分钟；冷却后将液体培养基和蛭石在培养容器中混合后备用；
将苹果外植体苗接种在配制好的培养基上进行培养，培养条件为:温度23℃,光照强度:70～100umolm-2s-1,光周期：16h/d,co2浓度1000ppm。
培养结果为：10天左右植株生根,25天植株叶片嫩绿,生长健壮,可以进行移栽炼苗,且成活率高。而传统的有糖培养基的培养期为40天左右,添加了生长调节剂,例如naa,iaa,iba等,但仍生根困难，且根部有愈伤，炼苗成活率低。
综上所述，本发明的有益效果在于：本发明提出的植物无糖培养专用培养基，通过选择改良ms培养基作为基础培养基，减去了ms培养基中的有机物和糖,从而减少了微生物的污染；增加了植物光合作用需求量较大的mg+2,po4-,fe+2,使其可以充分满足植物光合作用的需求,促进植株的生长和发育,改善植物品质,缩短培养周期30-50％。
本发明采用蛭石代替琼脂作为培养基质，克服了传统琼脂在植物组织培养中不利于根系生长的固有缺陷，促进试管苗根系的活力和生长,促进根的形成和代谢活动，增强光合作用，改善植物品质，提高植物对营养元素的吸收。
本发明解决了传统组织培养中存在的植物生长发育不良，生理形态紊乱，畸形，生长发育延缓或死亡等问题，可显著促进小植株的生长,种苗质量显著提高，培养周期缩短,降低生产成本，有利于植物快繁的规模化、工厂化生产。由于培养基中不加糖和采用蛭石作为培养基质,可以有效的促进植株进行自养生长,促进根系的形成和生长,因此,生根培养可以不加入生长素。
这里本发明的描述和应用是说明性的，并非想将本发明的范围限制在上述实施例中。这里所披露的实施例的变形和改变是可能的，对于那些本领域的普通技术人员来说实施例的替换和等效的各种部件是公知的。本领域技术人员应该清楚的是，在不脱离本发明的精神或本质特征的情况下，本发明可以以其它形式、结构、布置、比例，以及用其它组件、材料和部件来实现。在不脱离本发明范围和精神的情况下，可以对这里所披露的实施例进行其它变形和改变。