本发明涉及遗传育种技术领域，尤其涉及一种凡纳滨对虾耐低温性状测试方法。
背景技术：
凡纳滨对虾(litopenaeusvannamei)又称南美白对虾，别名白脚虾，隶属于节肢动物门(arthropoda)、甲壳纲(crustacea)、十足目(decapoda)、对虾科(penaeidae)、滨对虾属(litopenaeus)。凡纳滨对虾原产于中南美国家——厄瓜多尔沿岸海域，是一种热带型底栖种类，最适生长水温范围为22-35℃，低于18℃时几乎停止摄食。南美白对虾是世界单一产值最高的水产养殖种类。自1988年引入我国后，因其出肉率高、抗逆性高、适应性强、生长快、耐高密度和低盐度养殖、适合集约化养殖、便于活虾运输、肉质鲜美等优点，迅速遍及全国，我国年产量150万吨以上，占全国对虾养殖总产量的80％以上，年产值600多亿元。
适温范围限制了对虾的养殖季节和地域，也不能应对频发的极端寒流天气；另外，由于冬季及北方气温相对较低，开展凡纳滨对虾养殖会耗费更多的能源，直接影响了对虾养殖产量和经济效益。因此，有必要对凡纳滨对虾进行温度耐受性遗传改良，选育出生长快，同时对低温耐受度较高的优良新品种。可通过科学的测试方法进行人工驯化并实施多代选育，逐渐提高对虾对低温的耐受能力。因此，提供一种合适的测试方法就显得尤为重要。
技术实现要素：
本发明的目的在于解决上述现有技术存在的缺陷，提供一种对虾耐低温性状测试方法。
一种凡纳滨对虾耐低温性状测试方法，包括以下步骤：
1)缓慢降温暂养；
2)低温胁迫处理；
3)数据及样品采集；
其中，步骤1)降温的速度为每天1℃/d；
步骤2)中降温的速度为2℃/d；
步骤3)包括：
采集每尾虾的低温累积存活时间和死亡时温度，计算公式如下：
ti为温度由i+1到i的时间差，t0为初始温度(18℃)，ti为i时刻的温度，k为试验对虾死亡记录检测点，cdh为低温累积存活时间；
根据所述低温累积存活时间和死亡时温度来确定耐低温性能良好的的家系和个体。
进一步地，如上所述的凡纳滨对虾耐低温性状测试方法，步骤1)中，从常温24℃-28℃缓慢降至18℃，然后开始低温胁迫处理。
进一步地，如上所述的凡纳滨对虾耐低温性状测试方法，步骤2)中从18℃降至8℃后并维持8℃。
有益效果：
本发明提供的方法，为提高凡纳滨对虾的耐低温性状提供了一种新方法，在该测试方法下，经累代选育，可显著提高对虾耐低温能力，提高对虾的养殖经济效应。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例：
对虾耐低温性状测试的方法包括：1)缓慢降温暂养；2)低温胁迫处理；3)数据及样品采集。具体步骤如下：
1)缓慢降温暂养
选取规格整齐、体质健康的对虾家系为测试对象，放入合适规格的整理箱中，每个整理箱内安放一个温度计，将整理箱置于72cm×37cm×20cm的冰箱框中，最后将冰箱框放入183cm×84cm×92cm的带有温度传感器且可调节温度的冰箱内充气暂养。在实验开始前，对虾先以每天1℃/d的速率从常温(24℃-28℃)缓慢降至18℃，然后开始低温胁迫处理。
2)低温胁迫处理
对虾耐低温性状测试采用梯度降温的方式进行，即人工调节冰箱温度，以2℃/d的速率，从18℃降至8℃后并维持8℃，至实验结束。实验过程中，每1h监测一次水温，保持上下浮动不超过1℃，每天吸底换水1次，投喂饵料4次。随温度越来越低，应减少饵料的投喂量，以防污染水质。
3)数据及样品采集
从出现第一尾死虾开始，每2h查看一次整理箱，捞取死亡个体，记录其死亡时间、家系信息、死亡温度并测量每尾虾的体重、体长，并于-80℃保存死亡对虾。根据实验记录结果计算每尾虾的低温累积存活时间(cdh)和死亡时温度(tad)，cdh的初始温度为14℃，计算公式如下：
ti为温度由i+1到i的时间差，t0为初始温度(14℃)，ti为i时刻的温度，k为试验对虾死亡记录检测点。
最后根据cdh和tad值来评估各家系的耐低温性状，即cdh值越大，tad值越小的家系，其耐低温性状表现越良好。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。