一种提高发芽花生中γ-氨基丁酸含量的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种一种提高发芽花生中γ-氨基丁酸含量的方法，特别涉及一种采用脉冲强光提高发芽花生中γ-氨基丁酸含量的方法。
【背景技术】
[0002]植物种子处于旱涝、低温、缺氧、热激、冷激及机械等逆境时，常发生不同程度的伤害而导致植物生理生化过程的变化，进而影响其营养物质的生成。在逆境条件下，植物体会受到危害，比如植物体的吸水能力降低，体内水分缺乏，生长抑制物质增多。
[0003]植物种子体内的代谢强度和其抗逆性有密切的联系，适当的强度和物理能量可以加速植物种子的代谢过程和呼吸速率，加速细胞内的氧化磷酸化过程，促进细胞内ATP合成，并可提高体内许多酶活性，过氧化物酶(peroxidase，POD)、过氧化氢酶(catalase，CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)等，从而加快了一些活性氧与自由基的清除，消除他们在组织内的不良影响，提高植物的抗逆性。以物理方法提高植物的抗逆性，对植物组织不会产生任何副作用，并可有效减轻农药残留对环境的污染以及因食用受污染的食品而给人们健康造成的伤害。研宄表明，植物受到低氧、缺氧、冷激、热激、盐胁迫以及机械刺激等逆境胁迫时，植物体内γ_氨基丁酸(GABA)含量会有一定的提升，但是γ-氨基丁酸含量的提升并不能够得到稳定的控制。
[0004]脉冲强光技术是通过光化学效应、光热效应、物理效应等综合作用杀死物料表面的致病菌以及腐败微生物，是一种非热杀菌技术，它由一个动力单元和一个惰性气体单元灯组成，动力单元是一个能够提供高电压高电流的脉冲部件，为惰性气体灯提供所需的能量，惰性气体灯能发出由全波长的光线，其光谱与太阳光十分相近，但强度却是太阳光的数千甚至数万倍。由于脉冲强光技术只处理物料表面的致病菌，因此对植物体内的营养物质产生的伤害较小。
【发明内容】
[0005]本发明要解决的技术问题是提供一种提高发芽花生中γ-氨基丁酸含量的方法，该方法处理花生种子不仅可以缩短花生发芽的时间，还可以提高花生发芽过程中活性物质的含量，进而使花生中γ-氨基丁酸含量具有稳定提高。
[0006]为达到以上目的，本发明所采取的技术方案是:
一种提高发芽花生中γ-氨基丁酸含量的方法，其具体步骤是:
1.1、花生前处理
选取生长良好的花生米，用水洗去灰尘，再用蒸馏水清洗，沥干；用体积分数0.8%?1.2%的次氯酸钠溶液浸泡1min?15min消毒后，用蒸馏水清洗3次?5次，置于28°C?32°C避光条件下，放入水中浸泡8h?12h ；
1.2、花生脉冲强光处理将浸泡好的花生进行脉冲强光处理，脉冲强光能量为100J?500J，脉冲距离为8cm?13cm，脉冲频次为I次/s?4次/s，处理时间为0.5min?3min ；
1.3、发芽处理
将脉冲处理后的花生使用蒸馏水清洗3次?5次，加入与花生等质量的水，于28°C?32°C避光条件下浸泡24h?48h使其发芽；每隔2.5h?3h喷淋蒸馏水一次，待花生发芽到芽长至1mm?25mm，得到发芽花生，在100°C?120°C进行灭酶5min?1min ;真空冷冻干燥并真空包装，在10°C以下的冷库中贮藏。
[0007]真空冷冻干燥时，使发芽花生的水分含量为8%?12%，以使花生易于贮藏且避免花生中γ-氨基丁酸的活性降低。
[0008]花生前处理时，浸泡时间小于8h，花生中的蛋白不能充分吸水，活性酶类不能被脉冲强光激发，浸泡时间大于12h，花生种的可溶性蛋白及营养物质会水解，并溶于水中，造成营养物质流失，影响花生的中GABA的富集。
[0009]发芽处理是时，发芽时间小于24h，花生内的活性酶类未达到活性最大值，GABA未能达到富集最大量，发芽时间大于48h，花生由于自身生长需要会消耗产生的活性成分，造成活性物质GABA的流失。
[0010]本发明的有益效果:
使用脉冲强光物理方式处理，操作简单，可以杀死花生表面的微生物及影响花生内酶活的变化，改善花生种子体内的生理生化代谢，使得花生种子体内酶含量增加，提高酶的活性，激活花生内部的蛋白酶和谷氨酸脱羧酶，加速蛋白质分解，增强了花生种子的长势和抗逆性，经过本方法脉冲强光处理生产出的发芽花生GABA含量可达280mg/100g以上。
【具体实施方式】
[0011]实施例1
实施例1
1.1、花生前处理
将花生中的杂质、发霉籽粒及成熟度差的花生米颗粒剔除，选取生长良好的花生米，用自来水洗去灰尘，再用蒸馏水清洗，沥干；用体积分数0.8%的次氯酸钠溶液浸泡1min消毒后，用蒸馏水清洗3次，置于28°C避光条件下，放入水中浸泡8h ;
1.2、花生脉冲强光处理
打开脉冲强光实验柜，运行1min后仪器保持稳定启动，根据实验条件设置脉冲参数，脉冲闪照能量300J，脉冲距离11cm，频次为I次/s，时间为30s，将步骤1.1经浸泡的花生均匀的分布在脉冲强光实验柜内灯管正下方的无菌石英板的中央处，关上柜门，开始脉冲强光处理；
1.3、发芽处理
将脉冲处理后的花生使用蒸馏水清洗3次，加入与花生等质量的水，于28°C避光条件下浸泡24h使其发芽；每隔2.5h喷淋蒸馏水一次，待花生发芽到芽长至10mm，在100°C进行灭酶5min，得到发芽花生；真空冷冻干燥使发芽花生的水分含量为8 %，并真空包装，在10°C以下的冷库中贮藏。
[0012]花生中GABA含量的测定:
流动相A为:醋酸钠2.72g(20mmol/L醋酸钠缓冲液，pH7.3)，三乙胺200 μ L，加超纯水至1L，调节pH值为7.3 ；
流动相B为乙腈，其中流动相A与流动相B的体积比为4:1;
衍生试剂为邻苯二甲醛(OPA) 20mg，加β -巯基乙醇20 μ L，乙腈5mL，混匀即可；
硼酸缓冲液为硼酸24.7g加超纯水至1L，调节pH值为10.4 ；
将发芽花生样品干燥粉碎，过60目筛，于双层密封袋4°C保存；准确称取2.5g发