专利名称：蝮蛇活肝酶及其制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种蝮蛇活肝酶及其制备工艺。
背景技术：
蛇毒有液体黄金之称，医用价值早有报道，其医用价值概括有四大功能即抗凝溶栓、抗癌镇痛、促进神经生长与止血、抗衰扶正。从事蛇毒研究的国内外科研机构较多，发表的论文也较多。由于蛇毒成份复杂，中国科学家从上世纪六十年代就开始对蛇毒进行了系统的研究，而蛇毒因含有对人体有害的神经毒和出血毒，如不能充分去除，会给人体造成危害，并且由于其成分单一，也会影响疗效，而且因其分子量太大，会给用药者带来不安全隐患。
发明内容
本发明的目的是提供一种用药安全，疗效高的蝮蛇活肝酶及其制备工艺。
本发明的目的是这样实现的蝮蛇活肝酶，其组成包括复合酶，所述的复合酶是从蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的复合酶为溶血因子、克癌因子、神经生长因子的混合物。
上述的蝮蛇活肝酶的制备工艺，按上述所述的重量份数取冻干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值为7.5，摩尔浓度为0.005的三羟基甲基甲烷盐酸缓冲液，充分溶解，经10000转高速离心30分钟，取上清液，用阴离子交换柱纯化，收集活性组份，透析冻干，过分子筛进一步纯化，去除一些大分子及小分子，最后再经阳离子交换纯化，得到分子量为2.5～3.5万的溶血因子、克癌因子、神经生长因子三种复合酶，药品每只含量为0.25μg，一日一次，每次0.5μg，静脉滴注，每盒10支*0.25μg。
上述的蝮蛇活肝酶的制备工艺，所述的阴离子交换采用阴离子交换柱，洗脱液用柠檬酸钠溶液，其PH值为6.5～6.8，摩尔浓度为0.05，分子筛为凝胶过滤柱，洗脱液用碳酸氢钠溶液，摩尔浓度为0.05，采用的阳离子交换柱，洗脱液用醋酸钠溶液，其PH值为5.8，摩尔浓度为0.02。
本发明的优点在于1.本发明的蝮蛇活肝酶，彻底去除了蝮蛇毒中所含有的大量有害有毒物质，保留了有效组分，其分子量严格控制在2.5万～3.5万之间，从而达到了用药即安全、疗效又高的目的。
2.本产品是从蝮蛇毒中提取的一种复合酶，经离子交换、分子筛透析、冻干等技术制备而成，主要含有三种复合酶，其中一种酶具有生物活性，本复合酶经体外、体内试验表明，具有较强的杀死肝炎病毒及肝癌细胞的作用，并能抑制再生，而且还具有疏通微循环，改善肝细胞血液供应，保护肝细胞等功能。该产品的问世，是治疗各种肝病的首选药物。
3.本产品的制备工艺先进，科学合理，并易于掌握。
实施例1蝮蛇活肝酶及其制备工艺，其组成包括复合酶，所述的复合酶是从蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的复合酶包括溶血因子、克癌因子、神经生长因子，其重量份数为蝮蛇毒100。其制备工艺是按上述所述的重量份数取冻干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值为7.5，摩尔浓度为0.005的三羟甲基氨基甲烷盐酸(Tris-HCl)缓冲液，充分溶解，经10000转高速离心30分钟，取上清液，用阴离子交换柱纯化，收集活性组份，透析冻干，过分子筛进一步纯化，去除一些大分子及小分子，最后再经阳离子交换纯化，得到分子量为2.5万的溶血因子、克癌因子、神经生长因子三种复合酶，药品每只含量为0.25μg，一日一次，每次0.5μg，静脉滴注，每盒10支*0.25μg。
实施例2蝮蛇活肝酶及其制备工艺，其组成包括复合酶，所述的复合酶是从蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的复合酶包括溶血因子、克癌因子、神经生长因子，其重量份数为蝮蛇毒100。其制备工艺是按上述所述的重量份数取冻干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值为7.5，摩尔浓度为0.005的三羟甲基氨基甲烷盐酸(Tris-HCl)缓冲液，充分溶解，经10000转高速离心30分钟，取上清液，用阴离子交换柱纯化，收集活性组份，透析冻干，过分子筛进一步纯化，去除一些大分子及小分子，最后再经阳离子交换纯化，得到分子量为3.5万的溶血因子、克癌因子、神经生长因子三种复合酶，药品每只含量为0.25μg，一日一次，每次0.5μg，静脉滴注，每盒10支*0.25μg。
实施例3蝮蛇活肝酶及其制备工艺，其组成包括复合酶，所述的复合酶是从蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的复合酶包括溶血因子、克癌因子、神经生长因子，其重量份数为蝮蛇毒100。其制备工艺是按上述所述的重量份数取冻干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值为7.5，摩尔浓度为0.005的三羟甲基氨基甲烷盐酸(Tris-HCl)缓冲液，充分溶解，经10000转高速离心30分钟，取上清液，用阴离子交换柱纯化，收集活性组份，透析冻干，过分子筛进一步纯化，去除一些大分子及小分子，最后再经阳离子交换纯化，得到分子量为3万的溶血因子、克癌因子、神经生长因子三种复合酶，药品每只含量为0.25μg，一日一次，每次0.5μg，静脉滴注，每盒10支*0.25μg。
实施例4上述的蝮蛇活肝酶的制备工艺，所述的阴离子交换采用阴离子交换柱(DEAE-52纤维素柱)，洗脱液用柠檬酸钠溶液，其PH值为6.5，摩尔浓度为0.05，分子筛为凝胶过滤柱(sephadex-75)，洗脱液用碳酸氢钠(NaHCO3)溶液，摩尔浓度为0.05，采用的阳离子交换柱(CM Sepharose C1-6B)，洗脱液用醋酸钠溶液，其PH值为5.8，摩尔浓度为0.02。
实施例5上述的蝮蛇活肝酶的制备工艺，所述的阴离子交换采用阴离子交换柱(DEAE-52纤维素柱)，洗脱液用柠檬酸钠溶液，其PH值为6.8，摩尔浓度为0.05，分子筛为凝胶过滤柱(sephadex-75)，洗脱液用碳酸氢钠(NaHCO3)溶液，摩尔浓度为0.05，采用的阳离子交换柱(CM Sepharose C1-6B)，洗脱液用醋酸钠溶液，其PH值为5.8，摩尔浓度为0.02。
实施例6上述的蝮蛇活肝酶的制备工艺，所述的阴离子交换采用阴离子交换柱(DEAE-52纤维素柱)，洗脱液用柠檬酸钠溶液，其PH值为6.6，摩尔浓度为0.05，分子筛为凝胶过滤柱(sephadex-75)，洗脱液用碳酸氢钠(NaHCO3)溶液，摩尔浓度为0.05，采用的阳离子交换柱(CM Sepharose C1-6B)，洗脱液用醋酸钠溶液，其PH值为5.8，摩尔浓度为0.02。
权利要求
1.一种蝮蛇活肝酶，其组成包括复合酶，其特征是所述的复合酶是从蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的复合酶为溶血因子、克癌因子、神经生长因子的混合物。
2.一种根据权利要求1所述的蝮蛇活肝酶的制备工艺，其特征是按上述所述的重量份数取冻干蝮蛇毒并按1∶4的比例加入PH值为7.5，摩尔浓度为0.005的三羟甲基氨基甲烷盐酸缓冲液，充分溶解，经10000转高速离心30分钟，取上清液，用阴离子交换柱纯化，收集活性组份，透析冻干，过分子筛进一步纯化，去除一些大分子及小分子，最后再经阳离子交换纯化，得到分子量为2.5～3.5万的溶血因子、克癌因子、神经生长因子三种复合酶的混合物。
3.根据权利要求2所述的蝮蛇活肝酶的制备工艺，其特征是所述的阴离子交换采用阴离子交换柱，洗脱液用柠檬酸钠溶液，其PH值为6.5～6.8，摩尔浓度为0.05，分子筛为凝胶过滤柱，洗脱液用碳酸氢钠溶液，摩尔浓度为0.05，采用的阳离子交换柱，洗脱液用醋酸钠溶液，其PH值为5.8，摩尔浓度为0.02。
全文摘要
蝮蛇活肝酶及其制备工艺。蛇毒有液体黄金之称，医用价值早有报道，从事蛇毒研究的国内外科研机构较多。由于蛇毒成分复杂，中国科学家从上世纪六十年代就开始对蛇毒进行了系统的研究，最近才发现对病毒性肝炎及肝硬化等有较好的疗效，而蛇毒因含有对人体有害的神经毒和出血毒，如不能充分去除，会给人体造成危害，并且由于其成分单一，也会影响疗效，而且因其分子量太大，会给用药者带来不安全隐患。蝮蛇活肝酶，其组成包括复合酶，所述的复合酶是从蝮蛇蛇毒中提取而成，所述的复合酶为溶血因子、克癌因子、神经生长因子的混合物。本产品用于治疗各种类型肝炎及肝癌。
文档编号C12N9/00GK1673363SQ20041001363
公开日2005年9月28日 申请日期2004年3月23日 优先权日2004年3月23日
发明者王旺新, 赵凤和 申请人:郭秀华