专利名称：一株嗜氨基氨基杆菌及其菌剂与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一株嗜氨基氨基杆菌及其菌剂与应用，特别是涉及一株嗜氨基氨基杆菌及其菌剂与其在处理污水、粪便及其它有机污染物和废弃物中的应用。
背景技术：
微生物是重要的生物资源，在自然生态系统的物质循环和人类的生产、生活中起到重要作用，并具有巨大的生态环境价值，应用开发前景广阔。
随着我国经济的发展、城市人口密度不断提高，城市有机废弃物急剧增加，全国每年排放的生活垃圾接近2亿吨，“垃圾围城”的现象遍布全国很多城市，全国废水排放总量为415亿吨，废水中化学需氧量(COD)排放总量为1445万吨，给人民生活、健康和环境带来极大的危害，因此有效地处理城市有机废弃物已成为亟待解决的社会问题。按照无害化、减量化、资源化的原则，处理固体废弃物是地球资源可持续利用的重要途径。由于微生物的生活环境和代谢类型多种多样，各种工业和生活污染物、废弃物都有可能被微生物分解，或转化成无害物质。因此利用微生物的降解作用，实现固体废弃物减量化和无害化，不仅可以消灭或大大减少垃圾所携带的人体病原物，消除垃圾恶臭，改善公共卫生条件，节余水资源，减轻环境压力，还可使资源再生，将废弃物中的固体有机物处理成为性质稳定的类似土壤的腐殖物，有效保护土壤资源，改善生态环境。
目前，环境生物技术已成为环境保护的关键技术之一，美国环保局(EPA)在评价环境生物技术时指出“生物治理技术优于其他技术的显著特点在于它是污染物消除技术而不是污染物分离技术”，因此在环境治理中尤其重视微生物菌种的研究和利用。进入20世纪90年代，利用微生物处理城市生活垃圾、污泥、农用废弃物日益得到重视，欧美等国家利用微生物处理有机废弃物约占这些国家城市生活垃圾处理量的2-17％。与传统的填埋或焚烧的垃圾处理方法相比，利用微生物对有机物的矿化作用和腐植化作用处理城市生活废弃物，具有不占或少占耕地、回收氮磷资源、不污染环境等诸多优点。针对有机废弃物处理，开发安全、高效的微生物菌种，既是提高处理效率的重要措施，也是关系到城市生活废弃物处理生态工程成败的关键因素之一。
发明内容
本发明的目的是提供一株对污水、粪便及其它有机污染物和废弃物具有降解作用的嗜氨基氨基杆菌。
本发明所提供的嗜氨基氨基杆菌是(Aminobacter aminovorans)ZL-1006，该菌株已于2006年5月30日保藏于位于中国北京中关村的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.1728。
嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728菌株具有以下特征(1)菌落特征在牛肉汁平板上培养7天的菌落大小为直径1.0-2.0mm，菌落呈圆形，表面光滑，边缘整齐，凸起，白色。
(2)细胞形态特征细胞为杆状，顶端圆钝；革兰氏染色阴性；细胞直径0.6-0.7μm。
(3)生理生化特征好氧生长，接触酶阳性，氧化酶阳性；生长温度从4℃到37℃，45℃不生长，最适生长温度28-30℃；pH生长范围6-10，最适生长pH6.5-7.5；精氨酸双水解酶阴性，脲酶阳性，水解七叶灵，不水解淀粉，不液化明胶，不产生H2S；能利用琥珀酸钠、甘油、丙酸钠、核糖、海藻糖、肌醇、麦芽糖、果糖、乙酸钠、葡萄糖、L-阿拉伯糖、甘露醇、柠檬酸钠、木糖、半乳糖、甘露糖、棉籽糖、山梨醇、山梨糖、蔗糖、水杨苷、纤维二糖、鼠李糖等作为碳源，不能利用蜜二糖、乳糖、卫矛醇、丙酮酸钠和丙二酸钠；可以利用多种有机和无机的含氮化合物，包括铵盐、硝酸盐、尿素和蛋白质等。
本发明的嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter minovorans)ZL-1006CGMCC No.1728能在含碳源、氮源的营养培养基，如营养肉汁培养基、PYG培养基、蛋白胨-糖蜜培养基、LB培养基中生长，以下是这四种培养基的组成(克/升)营养肉汁培养基蛋白胨10.0g，牛肉提取物3.0g，NaCl 5.0g，用蒸馏水定容至1.0升，pH 7.0-7.2。固体培养基再加入15g/L琼脂。
PYG培养基蛋白胨10.0，酵母提取物5.0，葡萄糖1.0，用蒸馏水定容至1.0升，pH 7.0-7.2。固体培养基再加入15.0g/L琼脂。
LB培养基牛肉提取物1.5，酵母提取物1.5，胰蛋白胨5.0，葡萄糖1.0，NaCl3.5，K2HPO44.8，KH2PO41.32，用蒸馏水定容至1.0升，pH 7.0-7.2。固体培养基再加入15.0g/L琼脂。
蛋白胨-糖蜜培养基蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，糖蜜5.0克，NaCl 5g，用蒸馏水定容至1.0升，pH 7.0-7.2。
此外，嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728能够在以琥珀酸钠、甘油、丙酸钠、核糖、海藻糖、肌醇、麦芽糖、果糖、乙酸钠、葡萄糖、L-阿拉伯糖、甘露醇、柠檬酸钠、木糖、半乳糖、甘露糖、棉籽糖、山梨醇、山梨糖、蔗糖、水杨苷、纤维二糖或鼠李糖等为唯一碳源的无机盐基础培养基中生长，所述无机盐基础培养基的组成(克/升)(NH4)2SO42.0，NaH2PO4·H2O 0.5，K2HPO40.5，MgSO4·7H2O 0.2，CaCl20.1，用蒸馏水定容至1.0升，pH 7.0。
嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728可以利用多种有机、无机的含氮化合物作为生长需要的氮源，包括铵盐、硝酸盐和尿素等，因此还可以在以铵盐、硝酸盐或尿素等含氮化合物为唯一氮源的基础培养基上生长，所述含氮化合物的添加量为1-2克/升培养基，所述基础培养基的组成(克/升)葡萄糖10.0，KH2O41.36，Na2HPO42.13，MgSO4·7H2O 0.2，FeSO4·7H2O 0.05，CaCl20.1，用蒸馏水定容至1.0升，pH 7.0。
本发明的第二个目的是提供一种嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728菌剂。
本发明所提供的嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCCNo.1728菌剂，其活性成分为嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728。
所述嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728菌剂的制备方法可为将嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCCNo.1728接种于上述培养基中，在30-35℃下振荡培养30-36小时，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728液态菌剂。以经灭菌的木屑为载体，吸附上述发酵菌液，室温凉干，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacteraminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728氨基杆菌固态菌剂。
在上述嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728菌剂的制备方法中，所述振荡培养时的振速为150-250转/分。
为获得更好的生物降解效果，所述嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728菌剂中还添加有巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)ZL-1010CGMCC No.1724，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZL-1007CGMCC No.1725，球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)ZL-1008CGMCC No.1726和环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)ZL-1009CGMCC No.1727，五种菌的混合比例为0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5。
所述嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728复合菌剂中五种菌的混合比例优选为1∶1∶1∶1∶1。
所述嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728复合菌剂的制备方法可为将嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCCNo.1728，巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)ZL-1010CGMCC No.1724，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZL-1007CGMCC No.1725，球形芽孢杆菌(Bacillussphaericus)ZL-1008CGMCC No.1726和环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)ZL-1009CGMCC No.1727分别接种于上述培养嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728所用的培养基中，在35-37℃下振荡培养30-36小时，将五种菌的发酵液按0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5的体积比混合，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728液态复合菌剂。以经灭菌的木屑为载体，吸附上述发酵菌液，室温凉干，得到五种单一菌的固态菌剂，再将五种单一菌的固态菌剂按0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5的重量份数比混合，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCCNo.1728氨基杆菌固态复合菌剂。
在上述嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728复合菌剂的制备方法中，所述振荡培养时的振速为150-250转/分，所述五种菌的混合比例优选为1∶1∶1∶1∶1。
本发明提供了嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCCNo.1728。该菌及以该菌为活性成分的菌剂可应用于处理污水、粪便及其它有机污染物和废弃物，并具有以下优点1)分解效率高；2)分解过程卫生清洁、无臭味、节水、不排放，少量残杂物还可作为有机肥料被继续利用；3)符合了就地资源化、无害化和减量化的原则；4)发酵周期短，菌剂制备工艺简单，具有工业化生产的可能性。本发明在有机污染物和废弃物(特别是城市生活有机废弃物)的生物降解处理中具有广阔的应用前景。
下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。
具体实施例方式
下述实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法，所有百分比浓度如无特别说明均为质量百分比浓度，所有培养基中的溶剂均为水，所用引物均由上海生工合成。
营养肉汁培养基蛋白胨10.0g，牛肉提取物3.0g，NaCl 5.0g，用蒸馏水定容至1.0升，pH 7.0-7.2。固体培养基再加入15g/L琼脂。115℃灭菌30min。
蛋白胨-糖蜜培养基蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，糖蜜5.0克，NaCl 5.0g，用蒸馏水定容至1.0升，pH 7.0-7.2。115℃灭菌30min。
基础培养基葡萄糖10.0，KH2PO41.36，Na2HPO42.13，MgSO4·7H2O 0.2，FeSO4·7H2O0.05，CaCl20.1，用蒸馏水定容至1.0升，pH 7.0。115℃灭菌30分钟。
实施例1、嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728的分离、鉴定及保藏从城市生活污水中分离到一菌株，命名为ZL-1006，用下述方法对其进行鉴定一、16S rRNA的PCR扩增及序列分析1)提取菌株ZL-1006的RNA将菌株ZL-1006接种于营养肉汁液体培养基中，在28℃下培养，生长至对数晚期时，取发酵液，5000转/分钟离心5分钟，弃上清，用TES溶液(50mM Tris，50mM EDTA-Na2，50mM NaCl，pH 8.0-8.2)洗3遍；用0.5mL TES溶液将菌体混匀，加入溶菌酶，37℃保温2小时；加入0.2mL 20％SDS，60℃保温10分钟；加入0.3mL 5M NaClO4，混匀；加入等体积酚-氯仿-异戊醇(25∶24∶1)，轻摇5分钟，5000转/分钟离心5分钟，吸取上清液，再用酚-氯仿-异戊醇(25∶24∶1)处理一遍；然后依次用氯仿-异戊醇(24∶1，V/V)处理两遍，直到没有蛋白膜出现；上清液加入20μl 0.2％RNA酶37℃保温30分钟，氯仿-异戊醇(24∶1，V/V)处理一遍；上清液加入20μl蛋白酶K(50-70μg/mL)，37℃保温1小时，用氯仿-异戊醇(24∶1，V/V)处理一遍；向上清液中加入2倍体积冰乙醇沉淀DNA，再将沉淀用70％(V/V)冰乙醇溶液浸泡5分钟，晾干后溶于TE溶液，得到菌株ZL-1006的RNA。
2)16S rRNA的PCR扩增及序列分析以菌株ZL-1006的RNA为模板，在正向引物nt 8-375’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAGAACGAACGCT-3’和反向引物nt 1479-15065’-TACGGCTACCTTGTTACGACTTCACCCC-3’(分别对应于大肠杆菌16S rRNA序列自5’端第8-37位和第1479-1506位碱基)的引导下PCR扩增其16S rRNA序列，50μl PCR反应体系为10×PCR缓冲液5μl，25mmol/L MgCl24μl，10mmol/L dNTPs 1μl，30pmol/L正、反向引物各1μl，ddH2O 36μl，Taq DNA酶1μl，模板1μl。PCR反应条件为先95℃10min；然后95℃1min，55℃1min，72℃1min，共30个循环；最后72℃10min，4℃保存。反应结束后，对PCR扩增产物进行0.8％琼脂糖凝胶电脉检测，结果PCR扩增出大小约为1.4kb的片段。用试剂盒E.Z.N.A.(Omega Bio-tec，USA)对该片段进行回收及纯化后，将其连接入经限制性内切酶EcoR V酶切的克隆载体pBluescript SK II(+)(Stratagene)中，再将连接产物转化大肠杆菌(Escherichiacoli)DH5α感受态细胞，筛选阳性克隆，提质粒，用ABI BigDye3.1测序试剂盒(AppliedBiosystems)和DNA自动测序仪(model ABI3730；Applied Biosystems)进行测序，测序结果表明所克隆的菌株ZL-1006的16S rRNA具有序列表中序列1的核苷酸序列，长度为1391bp。采用BLAST软件对该16S rRNA片段的核苷酸序列进行同源性比较，结果与菌株嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)16S rRNA序列(GenBank登录号AJ011759)的相似性为100％。
二、形态及生理生化特征分析依据《Bergey’s Mannual of Systematic Bacteriology》(第二版)对ZL-1006进行形态及生理生化特征分析，方法及结果如下将ZL-1006菌株接种于营养肉汁培养基中，在28-30℃下培养，该菌具有以下特征(1)菌落特征在牛肉汁平板上培养5天的菌落直径为1.0-2.0mm，菌落呈圆形，表面光滑，边缘整齐，凸起，白色。(2)细胞形态特征细胞为杆状，顶端圆钝；革兰氏染色阴性；细胞直径0.6-0.7μm。(3)生理生化特征好氧生长，接触酶阳性，氧化酶阳性；生长温度从4-37℃，45℃不生长，最适生长温度28-30℃；pH生长范围6-10，最适生长pH6.5-7.5；精氨酸双水解酶阴性，脲酶阳性，水解七叶灵，不水解淀粉，不液化明胶，不产生H2S；能利用琥珀酸钠、甘油、丙酸钠、核糖、海藻糖、肌醇、麦芽糖、果糖、乙酸钠、葡萄糖、L-阿拉伯糖、甘露醇、柠檬酸钠、木糖、半乳糖、甘露糖、棉籽糖、山梨醇、山梨糖、蔗糖、水杨苷、纤维二糖、鼠李糖等作为碳源，不能利用蜜二糖、乳糖、卫矛醇、丙酮酸钠和丙二酸钠；可以利用多种有机和无机的含氮化合物，包括铵盐、硝酸盐、尿素等。
综合上述菌株ZL-1006的16S rRNA序列分析和形态、生理生化特征分析结果，将菌株ZL-1006鉴定为嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)。该菌株已于2006年5月30日保藏于位于中国北京中关村的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.1728。
实施例2、嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728菌剂的制备及其细菌总数的测定一、制备菌剂将嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728接种于蛋白胨-糖蜜培养基中，在30℃下摇床(200转/分)振荡培养30小时，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728液态菌剂。再以经灭菌的木屑为载体，吸附发酵菌液，室温凉干，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacteraminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728氨基杆菌固态菌剂。
二、菌剂的细菌总数测定取步骤一制备的固态菌剂10克，加入到90mL无菌生理盐水的三角瓶中，放置在摇床上震荡30分钟(200转/分钟)，备用。取装有9mL无菌生理盐水的试管7支，精确吸取1mL三角瓶中的菌液，加入到第一支试管，采用10倍稀释法，依次稀释至第7支试管，备用。从第5、6、7支试管中各吸取0.5mL稀释菌液，涂布于营养肉汁固体培养平板上，每个稀释度3个重复，置于35℃温箱中培养30-36小时，统计培养皿上的菌落数(小于30或大于300个菌落的培养皿不统计)，并计算每克复合菌剂样品的细菌总数。结果菌剂中的细菌总数应大于108/克，符合要求。
实施例3、嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728复合菌剂的制备及其细菌总数的测定将嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728及其它四株芽孢杆菌巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)ZL-1010(CGMCC No.1724)，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZL-1007(CGMCC No.1725)，球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)ZL-1008(CGMCC No.1726)和环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)ZL-1009(CGMCC No.1727)分别接种于添加2g/L(NH4)2SO4的基础培育基中，在35℃下摇床(200转/分)振荡培养36小时，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacteraminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728氨基杆菌液态复合菌剂。再以经灭菌的木屑为载体，吸附发酵菌液，室温凉干，得到5种单一菌的固态菌剂，再将5种单一固态菌剂等量混合，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728氨基杆菌固态复合菌剂。
用与实施例2相同的方法测定菌剂的细菌总数，结果菌剂中的细菌总数应大于108/克，符合要求。
实施例4、用嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728菌剂及其复合菌剂进行污水处理1、用嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728菌剂取1L生活污水，用常规方法检测污水的COD和BOD含量，结果为COD含量为356.77mg/L，BOD含量为208.94mg/L，然后将实施例2制备的嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728液态菌剂接种于生活污水中，0.05mL菌剂/L污水，在35℃下培养，分别于12、24、48h后测定发酵液的COD和BOD含量，结果COD含量依次为133.74mg/L、132.46mg/L、60.47mg/L，BOD含量依次为77.59mg/L、76.85mg/L、30.79mg/L，表明本发明的嗜氨基氨基杆菌(Aminobacteraminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728菌剂对污水中的有机污染物具有降解作用，可应用于处理污水、粪便及其它有机污染物和废弃物。
2、用嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728复合菌剂进行污水处理试验取1L生活污水，用常规方法检测污水的COD和BOD含量，结果为COD含量为356.77mg/L，BOD含量为208.94mg/L，然后将实施例3制备的嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728液态复合菌剂接种于生活污水中，0.05mL菌剂/L污水，在35℃下培养，分别于12、24、48h后测定发酵液的COD和BOD含量，结果COD含量依次为133.72mg/L、132.45mg/L、60.44mg/L，BOD含量依次为77.56mg/L、76.82mg/L、30.76mg/L，表明本发明的嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728菌剂对污水中的有机污染物具有降解作用，可应用于处理污水、粪便及其它有机污染物和废弃物。
序列表<160>1<210>1<211>1391<212>RNA<213>嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)<400>1ggctacacac gtgctacaat ggtggtgaca gtgggcagcg agaccgcgag gtcgagctaa 60tctccaaaag ccatctcagt tcggattgtg gcggcaggct taacacatgc aagtcgagcg120ccccgcaagg ggagcggcag acgggtgagt aacgcgtggg aatctaccca gctctacgga180ataactcagg gaaacttgtg ctaataccgt atacgtccga taggagaaag atttatcgga240gttggatgag cccgcgttgg attagctagt tggtggggta atggcctacc aaggcgacga300tccatagctg gtctgagagg atgatcagcc acactgggac tgagacacgg cccagactcc360tacgggaggc agcagtgggg aatattggac aatgggcgca agcctgatcc agccatgccg420cgtgagtgat gaaggcccta gggttgtaaa gctctttcac cggtgaagat aatgacggta480accggagaag aagccccggc taacttcgtg ccagcagccg cggtaatacg aagggggcta540gcgttgttcg gaattactgg gcgtaaagcg cacgtaggcg gattgttaag ttaggggtga600aatcccaggg ctcaaccctg gaactgcctt taatactggc aatctcgagt ccgagagagg660tgagtggaat tccgagtgta gaggtgaaat tcgtagatat tcggaggaac accagtggcg720aaggcggctc actggctcgg tactgacgct gaggtgcgaa agcgtgggga gcaaacagga780ttagataccc tggtagtcca cgccgtaaac tatgagagct agccgtcggc aagtttactt840gtcggtggcg cagctaacgc attaagctct ccgcctgggg agtacggtcg caagattaaa900actcaaagga attgacgggg gcccgcacaa gcggtggagc atgtggttta attcgaagca960acgcgcagaa ccttaccagc ccttgacatc ccggtcgcgg tttccagaga tggatccctt 1020cagttcggct ggaccggtga caggtgctgc atggctgtcg tcagctcgtg tcgtgagatg 1080ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaacct tcgcccttag ttgccatcat taagttgggc 1140actctaaggg gactgccggt gataagccgc gaggaaggtg aagatgacgt caagtcctca 1200tggcccttac gggctgcact ctgcaactcg agtgcatgaa gttggaatcg ctagtaatcg 1260cagatcagca tgctgcggtg aatacgttcc cgggccttgt acacaccgcc cgtcacacca 1320tgggagttgg ttttacccga aggcactgtg ctaaccgcaa ggaggcaggt gaccacggta 1380gggtcacgac t139权利要求
1.嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006 CGMCC No.1728。
2.以嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006 CGMCC No.1728为活性成分的菌剂。
3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于所述菌剂为固态或液态的。
4.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于所述菌剂中还添加有巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)ZL-1010 CGMCC No.1724，枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)ZL-1007 CGMCC No.1725，球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)ZL-1008CGMCC No.1726和环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)ZL-1009 CGMCC No.1727，五种菌的混合比例为0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5；所述菌剂为固态或液态的。
5.一种制备权利要求3所述的液态型菌剂的方法，是将嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006 CGMCC No.1728接种于培养基中，在30-35℃下振荡培养30-36小时，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006CGMCC No.1728液态型菌剂。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述培养基为营养肉汁培养基、PYG培养基、蛋白胨-糖蜜培养基、LB培养基，或以琥珀酸钠、甘油、丙酸钠、核糖、海藻糖、肌醇、麦芽糖、果糖、乙酸钠、葡萄糖、L-阿拉伯糖、甘露醇、柠檬酸钠、木糖、半乳糖、甘露糖、棉籽糖、山梨醇、山梨糖、蔗糖、水杨苷、纤维二糖或鼠李糖为唯一碳源的无机盐基础培养基，或以有机、无机含氮化合物为唯一氮源的基础培养基，所述含氮化合物包括铵盐、硝酸盐和尿素，添加量为1-2克/升；所述振荡培养时的振速为150-250转/分。
7.一种制备权利要求3所述的固态型菌剂的方法，是以经灭菌的木屑为载体，吸附用权利要求5或6所述方法得到的嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006 CGMCC No.1728液态型菌剂，室温凉干，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacteraminovorans)ZL-1006 CGMCC No.1728氨基杆菌固态菌剂。
8.一种制备权利要求4所述的液态型菌剂的方法，将嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006 CGMCC No.1728，巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)ZL-1010 CGMCC No.1724，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ZL-1007CGMCC No.1725，球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)ZL-1008 CGMCC No.1726和环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)ZL-1009 CGMCC No.1727分别接种于培养嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006 CGMCC No.1728所用的培养基中，在35-37℃下振荡培养30-36小时，再将五种菌的发酵液按0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5的体积比混合，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacteraminovorans)ZL-1006 CGMCC No.1728液态菌剂；所述培养嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006 CGMCC No.1728所用的培养基为营养肉汁培养基、PYG培养基、蛋白胨-糖蜜培养基、LB培养基，或以琥珀酸钠、甘油、丙酸钠、核糖、海藻糖、肌醇、麦芽糖、果糖、乙酸钠、葡萄糖、L-阿拉伯糖、甘露醇、柠檬酸钠、木糖、半乳糖、甘露糖、棉籽糖、山梨醇、山梨糖、蔗糖、水杨苷、纤维二糖或鼠李糖为唯一碳源的无机盐基础培养基，或以有机、无机含氮化合物为唯一氮源的基础培养基，所述含氮化合物包括铵盐、硝酸盐和尿素，添加量为1-2克/升；所述振荡培养时的振速为150-250转/分。
9.一种制备权利要求4所述的固态型菌剂的方法，是以经灭菌的木屑为载体，吸附用权利要求8所述方法得到的发酵菌液，室温凉干，得到五种单一菌的固态菌剂，再将五种单一菌的固态菌剂按0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5的重量份数比混合，得到嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006 CGMCCNo.1728氨基杆菌固态菌剂。
10.权利要求2-4任一所述的嗜氨基氨基杆菌(Aminobacter aminovorans)ZL-1006 CGMCC No.1728菌剂在处理有机污染物及废弃物中的应用。
全文摘要
本发明公开了嗜氨基氨基杆菌(Aminobacteraminovorans)ZL－1006 CGMCCNo.1728。该菌及以该菌为活性成分的菌剂可应用于处理污水、粪便及其它有机污染物和废弃物，并具有以下优点1)分解效率高；2)分解过程卫生清洁、无臭味、节水、不排放，少量残杂物还可作为有机肥料被继续利用；3)符合了就地资源化、无害化和减量化的原则；4)发酵周期短，菌剂制备工艺简单，具有工业化生产的可能性。本发明在有机污染物和废弃物(特别是城市生活有机废弃物)的生物降解处理中具有广阔的应用前景。
文档编号C12N11/00GK1916163SQ200610112850
公开日2007年2月21日 申请日期2006年9月5日 优先权日2006年9月5日
发明者周宇光, 魏隆基 申请人:北京中科隆泰生物科技有限公司