治疗代谢功能紊乱的番茄红素的制作方法

专利名称：：治疗代谢功能紊乱的番茄红素的制作方法治疗代谢功能紊乱的番茄红素本发明涉及治疗包括胰岛素抵抗、葡萄糖耐受、高血压、多嚢性卵巢综合征、肥胖症、脂肪变性、慢性肝炎和肝硬化的代谢功能紊乱的方法和物质。诸如胰岛素抵抗、葡萄糖耐受不良、高血压、肥胖症及代谢综合征等代谢异常在发达国家变得越来越普遍，据估计，仅在美国就有超过五千万人患有这类功能紊乱。代谢功能紊乱是继发糖尿病、心血管疾病、周围闭塞性疾病、脑部和其他形式的动脉硬化症的重要危险因素。对这些状态的有效治疗方法的进一步开发对全人类的健康具有重大影响。本发明人发现番茄红素在体外，对动物模型和在人类的临床试验中对代谢功能紊乱具有明显效果。本发明一方面提供了治疗代谢功能紊乱的方法，其包括用治疗有效量的番茄红素化合物对需要它的个体给药。番茄红素化合物可以包括番茄红素和具有类似番茄红素生物学性质的番茄红素衍生物。番茄红素是结构I的开链不饱和Qo类胡萝卜素(化学文摘〗良务登记号为502-65-8),其天然地产生于诸如番茄，番石榴，玫瑰实，西瓜和粉红葡萄柚的植物。用于本文所述用途的番茄红素可以包含一种或多种不同的异构体。例如，番茄红素可以包含至少10%,至少20%,至少30%,至少40%,至少50%，至少60%，至少70%,至少80%,至少卯％或者至少95%的(Z)-异构体，(全E)-异构体，或者相对于反式异构体具有改良的生物利用度的顺式异构体，诸如5-顺式-异构体，或9-顺式-异构体，或13-顺式-异构体。反式异构体可以在体内或者在贮存和加工过程中异构化为顺式异构体。具有与番茄红素类似的生物学性质的番茄红素衍生物可以包括，例如，诸如维曱酸、合成无环维曱酸或l-HO-3',4'-双脱氢番茄红素、3，1'-(HO)2-Y-胡萝卜素、U'-(HO)2-3,4,3'，4'陽四脱氢番茄红素和1,l'-(HO)2-3，4-双脱氢番茄红素的类胡萝卜素。用于本文所述用途的番茄红素化合物可以是天然的，即取自天然来源，例如，从诸如番茄或瓜的植物中提取。从植物中提取、浓缩和/或纯化番茄红素化合物的一系列方法是本领域公知的。例如，可以用使用乙醇、二曱基亚砜、乙酸乙酯、己烷、丙酮、大豆或其他的植物油、或非植物油的溶剂提取法。用于本文所述用途的番茄红素化合物可以是合成的，即通过人工手段制备，例如，通过化学合成。番茄红素和其他类胡萝卜素的一系列化学合成方法是本领域公知的。例如，可用基于标准维蒂希烯化反应方案的三级化学合成法合成类胡萝卜素，其中生成溶于二氯曱烷(DCM)的d5膦曱》黄酸盐有机溶液和溶于曱苯的do二醛有机溶液，这两种溶液逐步地与曱醇钠溶液结合且通过缩合反应生成粗制番茄红素。然后可以使用常规技术纯化粗制的番茄红素，例如向混合物中添加水醋酸和去离子水，剧烈搅拌，使水相和有机相分离，并用水萃取含有DCM和粗制番茄红素的有机相。将曱醇加入到有才几相中，并通过减压蒸馏去除DCM。随后将粗制曱醇番茄红素溶液加热并冷却成晶浆，将该晶浆过滤并用曱醇洗涤。随后可以重结晶并用热氮气干燥番茄红素晶体。合成番茄红素也可以从商家(例如，BASFCorp，NJUSA)购买。相对于天然番茄红素，合成番茄红素可以含有更大比例的顺式异构体。例如，合成番茄红素可以含有高达25%的5-顺式异构体、1%的9-顺式异构体、1%的13-顺异构体、3%的其他顺式异构体，而自番茄产生的番茄红素可以含有3%-5%的5-顺式异构体、0%-1%的9-顺式异构体、1%的13-顺式异构体和小于1%的其他顺式异构体。既然顺式番茄红素相对于反式番茄红素具有更高的生物利用度，那么对某些目的而言，合成番茄红素是优选的。对从植物材料中提取的天然番茄红素进行化学修饰来产生。番茄红素化合物可通过任何一种方便的形式或制剂给药。适当的制剂可以促进或增强番茄红素化合物的吸收及其体内生物利用度。例如，番茄红素化合物可以作为药物组合物给药，其包括番茄红素，和一种或多种药学上可接受的载体、佐剂、赋形剂、稀释剂、填充剂、緩冲液、稳定剂、乳化剂、防腐剂、润滑剂或本领域技术人员公知的其他材料，且任选地，和其他治疗性或预防性制剂。例如，在一些实施方式中，番茄红素化合物可以作为药物组合物给药，其包括番茄红素化合物和异黄酮，例如，大豆异黄酮和/或维生素c。如本文所述，适宜的药物组合物可以包含番茄红素化合物作为单一活性组分，也可以通过将番茄红素化合物同一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂、緩沖液、佐剂、稳定剂或其他材料混合来制剂。本文使用的术语"药学上可接受的"涉及化合物、材料、组合物和/或剂型，在合理的医学评价范围内，其适合用于与个体(例如，人类)的组织相接触，而无过多的毒性、刺激性、过敏反应或其他问题或并发症，其与合理的益处/风险比例相称。在同其他制剂成分相容的意义上，每种载体、赋形剂等也都必须是"可接受的"。适宜的载体、赋形剂等可以在标准药学教科书中找到，例如，Remington'sPharmaceuticalSciences(雷氏药学大全)，18thedition,MackPublishingCompany,Easton,Pa.,1990,而且可以包括油类，例如，诸如番茄油、大豆油或花生油的植物油，或者非植物油，甘油，明胶，蔗糖，葡萄糖，抗坏血酸棕榈酸酯，玉米淀粉和二氧化硅。合适的乳化剂包括聚山梨酸酯80。合适的稳定剂可以包括蔗糖酯，卵磷脂，诸如dl-a-生育酚和抗坏血酸棕榈酸酯的抗氧化剂，黄酮，纤维素，蜡，甘露醇，虫胶，云母，磷酸4丐，硬脂酸镁和阿拉伯胶或合金橡胶。例如，番茄红素可以被制剂成珠、药片或者其他固体，其包含约10%的番茄红素、分别为约1.5%和5.0%的抗氧化剂dl-a-生育酚和抗坏血酸棕榈酸酯，此外还有诸如植物油、鱼明胶、蔗糖和玉米淀粉的载体物质。番茄红素的合适制剂可以从商家购买且包括LycoVit百分之十、LycoVit10冷水分散剂(CWD)和LycoVit分散剂百分之二十(全部自BASFCorp，NJ,USA)、Lyc-0-MatoTM(LM)、LycoBeads和Tomato-0-RedTM(DalidarPharma，LycoRedLtdUK)。在一些实施方式中，可将番茄红素化合物和增溶剂一起制剂。增溶剂包括亲水化合物，其可溶于水性溶液，也可以不溶于有机溶剂。适宜的亲水增溶剂包括可溶性蛋白，特别是诸如酪蛋白、P-乳球蛋白、a-乳白蛋白和血清白蛋白的乳蛋白。乳清蛋白可以方便地用作增溶剂。乳清蛋白是从乳清中分离出的许多球状蛋白，它们是从牛奶制造奶酪时的副产品。乳清蛋白是0-乳球蛋白(~65%)、a-乳白蛋白(25。/。)和血清白蛋白(~8%)的混合物，它们的天然形式不依赖于pH而可溶。用乳清蛋白的番茄红素制剂(称作"乳番茄红素(lactolycopene)")是本领域公知的(见，例如，Richellea/J.Nutr.132:404-408,2002andEP-B-1289383(PCT/EP01/06145)),而且可以从商家购买(INNEOV,L'O&al(UK)Ltd,London)。制备用乳清蛋白的番茄红素制剂的方法可以包括，在足以形成混合物的条件下将乳清蛋白和番茄红素混合。例如，将乳清蛋白溶于水，将番茄红素溶于诸如丙酮、乙醇或异丙醇的溶剂，合并两溶液，蒸发所述溶剂至乳-番茄红素组合物形成。可选择地，可以这样形成组合物将番茄红素和溶剂混合以形成第一混合物，将该第一混合物与粉状或者水性溶液形式的乳清蛋白混合以形成第二混合物，蒸发第二混合物的溶剂以产生作为分散剂的组合物。适合的溶剂包括丙酮、乙醇和异丙醇。将水相和溶剂混合时，可方便地-使用60:40顺序的溶剂水体积比。组合物可包含至多50。/0的番茄红素化合物和至多90%的乳清蛋白。该分散剂可任选地经热处理以产生凝胶或者经喷雾千燥或冷冻干燥以产生粉末。如上所述，该组合物随后可连同载体、赋形剂、稳定剂和乳化剂制剂。例如，适宜的乳番茄红素制剂可以包含重量百分比(w/w)为2%的番茄红素、^。/。(w/w)的乳清蛋白、S0j。/。(w/w)的微晶纤维素、5%(w/w)的二氧化^f圭、3。/。(w/w)的聚山梨醇酯80和1.5。/。(w/w)的大豆卵磷脂。用于本文所述用途的乳番茄红素制剂可以如上所述地获得或可获得。可以用本文所述的番茄红素治疗的代谢功能紊乱可以包括肥胖症、胰岛素抵抗、葡萄糖耐受降低、多嚢性卵巢综合征(PCOS)、高血压、诸如脂肪变性、慢性肝炎、肝的纤维化和硬化的肝症状，以及代谢综合征。在一些实施方式中，依照本方法治疗的个体并非糖尿病人(即未患1型或2型糖尿病)，和/或未患有诸如CHD、中风或周围血管疾病的动脉粥样^_化状态。肥胖症是以过剩的身体脂肪为特征的状态。例如，肥胖个体可具有大于30的体重指数(BMI:体重/身高2)。肥胖是一系列医学状态的风险因素，所述状态包括糖尿病和诸如动脉粥样石更化、缺血性(冠状动脉)心脏病、心肌缺血(心绞痛)和中风的心血管症状。肥胖症可包括腹部肥胖，其一般地被定义为欧洲男人腰围超过94厘米，欧洲女人腰围超过80厘米，南亚男人腰围超过卯厘米，南亚女人腰围超过80厘米，日本男人腰围超过85厘米，日本女人腰围超过90厘米。本文所述方法可以用于体重控制和肥胖症治疗。胰岛素抵抗是指细胞、组织或者整个身体对给定量的胰岛素不能够表现出生理反应。结果是相对于对照，需要更大量的胰岛素以达到胰岛素的生理效果。胰岛素抵抗存在于25%的非糖尿病人群中，而从胰岛素抵抗状态到2型糖尿病的估计转化速率为每年2%-12%。如果在120分钟的口服葡萄糖耐受试验后，血浆中的葡萄糖浓度持续高于7.8mmo1,则发生了葡萄糖耐受降低。葡萄糖耐受降低同胰岛素抵抗和高血糖症相关联。多嚢性卵巢综合征(PCOS)是影响5%-10%女性的内分泌症状，其中卵巢嚢泡干扰了正常的荷尔蒙产生的卵巢循环。PCOS经常同胰岛素抵抗、补偿性高胰岛素血症、代谢综合征、肥胖症和高雄性激素血症相关4关。高血压以血压持续性升高超过140mmHg及卯mmHg为特征，(>140的收缩压；>卯的舒张压)。肝症状包括脂肪变性、慢性肝炎、肝脏的纤维化和硬化。肝脏脂肪变性以可以由脂肪酸氧化降低和/或脂蛋白合成及释放下降造成的肝异常脂类积累为特征。脂肪变性可继发性地转化为肝脏的纤维化和硬化。肝纤维化以纤维组织在肝的生长为特征。纤维化会导致硬化，其中肝功能会降低且肝永久性地结疤，变得纤维性且多脂。慢性肝炎是指肝的炎症，其可以由细菌或病毒感染、寄生虫侵袭、酒精、药物、毒素或非相容性血的输血造成。代谢综合征是以肥胖以及胰岛素抵抗、高血压、血液中高血甘油三酯水平和/或低HDL胆固醇水平中的一种或者多种为特征的状态。例如，IDF(国际糖尿病联合会)将代谢综合征定义为腹部肥胖连同以下的任两个升高的甘油三酯水平(超过1.7mmol/L)，降低的HDL胆固醇(男人处于或j氐于0.9mmol/L,女人处于或4氐于1.1mmol/L),升高的血压(高于130/85)和升高的空腹血浆葡萄糖(超过5.6mmol/L)。诸如代谢综合征的代谢功能紊乱也可同一系列的状态相关联，所述状态包括高胆固醇血症、低HDL胆固醇(例如，男人，<0.9mmol/l;女人，<1.0mmo1/1)、高甘油三酯血症(例如，血浆TAG的，$1.7mmol/1)和微蛋白尿(例如，尿白蛋白分泌速率^20叱/min;球蛋白肌酸酐比^30mg/min)。本文所述方法可用于与代谢功能紊乱相关联的状态的治疗。例如，治疗同代谢功能紊乱相关联的状态的方法可以包括使用番茄红素化合物对需要它的个体给药。同代谢功能紊乱相关联的状态可以包括高胆固醇血症、低HDL胆固醇、高甘油三酯血症和微蛋白尿。本发明的方法也可以具有预防性应用。例如，防止或延迟代谢功能紊乱发作的方法可以包括使用番茄红素化合物对需要它的个体给药。适合经历本文所述防止或延迟代谢功能紊乱发作的方法的个体可以有患代谢功能紊乱的风险或是代谢功能紊乱易感，例如，该个体可具有一种或多种同代谢功能紊乱发作相关的风险因素。本文所述方法可以包括连同他汀(statin)(即3-羟基-3-曱基戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶抑制剂)给药番茄红素化合物。适合的他汀包括普伐他汀(PRAVACHOL)、洛伐他汀(MEVACORTm)、辛伐他汀(ZOCORTM)、西立伐他汀(LIPOBAYTm)、氟伐他汀(LESCOI/m)、阿托伐他汀(LIPITORTM)、美伐他汀和罗苏伐他汀(CrestorTM)。其他适合的他汀在本领域公知并且可使用本领域公知的HMG-CoA还原酶分析轻松地鉴定。这些分析的实例已公开于美国专利第4,231,938号。本发明的另一方面提供了番茄红素化合物在制备用于治疗上述代谢功能紊乱或同代谢功能紊乱相关的状态，或者防止或延迟代谢功能紊乱或同代谢功能紊乱相关的状态发作的药物中的用途。本发明的另一方面提供了用于治疗代谢功能紊乱或同代谢功能紊乱相关的状态的番茄红素化合物，以及用于防止或延迟代谢功能紊乱或同代谢功能紊乱相关的状态发作的番茄红素化合物。包含番茄红素化合物的组合物或药物还可以包含他汀(即3-羟基-3-曱基戊二酰辅酶A(HMGCoA)还原酶抑制剂)。适合的他汀的实例已在上文中述及。可以用于本发明方法的其它他汀对于技术人员是显而易见的。本发明的另一方面是试剂盒，其包括联用以治疗代谢功能紊乱的番茄红素化合物和他汀。试剂盒还可以包含一种或多种用于进行本发明方法的其它物品和/或试剂，所述物品和/或试剂诸如用注射器将番茄红素化合物单独或与其它化合物组合给药的装置(这些组分一般是无菌的)。该试剂盒还可以包含进行全部或部分本发明方法的说明，例如番茄红素化合物和/或他汀的给药制度。然而本发明的另一方面是番茄红素化合物和他汀的组合在制备治疗上述代谢功能紊乱或同代谢功能紊乱相关的状态，或者防止或延迟代谢功能紊乱或同代谢功能紊乱相关的状态发作的药物中的用途。且可使用药学领域公知的任何制药方法制备。此类方法包括使活性化合物和构成一种或者多种助剂的载体联合的步骤。一般地，该制剂的制备是通过使活性化合物和液体载体或良好分开的固体载体或这两者均一且紧密地联合，而后如有必要使产品成形。制剂的形式可以是液体、溶液、悬浮液、分散剂、乳剂、酏剂、糖浆、片剂、锭剂、粒剂、粉剂、胶嚢、扁嚢剂、3朱、药丸、安瓿、栓剂、阴道栓剂、药膏、凝胶、糊剂、霜剂、喷雾剂、雾剂(mists)、泡沫剂、洗剂、油剂、丸剂、药糖剂或气溶胶。适宜口服(例如，通过摄取)的制剂可以以诸如胶嚢、扁嚢剂或片剂的离散单元存在，每一均包含预定量的活性化合物；所述制剂可以以粉剂或粒剂存在；以水性或非水性液体的溶液或悬浮液存在；或者以水包油液体乳剂或油包水液体乳剂存在；以丸剂存在；以药糖剂存在；或者以糊剂存在。液体药物组合物一般包含诸如水、石油、动物或植物油、矿物油或者合成油的液体载体。可以包含生理盐溶液、葡萄糖或其它糖类溶液，或者诸如乙二醇、丙二醇或聚乙二醇的二元醇。片剂可以通过常规手段制备，例如，任选地连同一种或多种助剂压片或成型。可通过在适宜的机器中将诸如粉剂或粒剂的自由流动形式的活性化合物压片而制备被压片的片剂，所述活性化合物任选地与一种或者多种粘合剂(例如，聚维酮、明胶、合金橡胶、山梨醇、黄芪胶、羟丙基曱基纤维素)，填充剂或者稀释剂(例如，乳糖、微晶纤维素、磷酸氢钩)，润滑剂(例如，硬脂酸镁、云母、硅石)，分解质(例如，羟基乙酸淀粉钠、交联聚维酮、交联羧曱基纤维素钠)，表面活性剂或者分散剂或者润湿剂(例如，十二烷基硫酸钠)和防腐剂(例如，对-羟基苯曱酸曱酯、对-幾基苯曱酸丙酯、山梨酸)相混合。可在适宜的机器内成型经惰性液体稀释剂润湿的粉状化合物的混合物来制备成型的片剂。片剂可任选地被包衣或刻痕，并且可以被制剂以提供緩释或控释的活性化合物，其中使用，例如，各种比例的羟丙基曱基纤维素从而提供所需的释放型。片剂可以任选地用肠包衣提供，以便提供在肠的部分而非在胃的部分的释放。对于静脉、皮肤或皮下注射，或着在病痛部位的注射，活性成分会以不经肠可接受的水性溶液的形式，其不含热原且具有适当的pH、等渗性和稳定性。利用例如等渗媒介，本领域相关技术人员完全能制备适当的溶液，所述等渗媒介诸如氯化钠注射液、林格注射液、乳酸林格注射液。根据需要，可以包含防腐剂、稳定剂、緩冲液、抗氧化剂和/或其他添加剂。上述技术和操作的实例可在Remington'sPharmaceuticalSciences(雷氏药学大全)，16thedition,Osol,A.(ed),1980中找到。优选使用"治疗有效量，，给药，这足以表现对个体的益处。可以理解，活性化合物和含活性化合物的组合物的适宜剂量可因患者而不同。确定最适剂量一般会涉及本发明治疗方法的治疗性益处的水平和任何风险或毒副作用的平衡。所选剂量水平会取决于各种因素，包括但不限于特定化合物的活性，给药途径，给药时间，化合物排出速率，治疗持续时间，联用的其他药物、化合物和/或材料，以及年龄、性别、体重、状态、总体健康状况和患者先前的医药史。虽然剂量一般会在作用部位达到能得到预期效果，而不会产生实质上有害或有毒的副作用的局部浓度，但是化合物的量和给药途径最终还是由医师来确认。在整个疗程中可一剂地、连续地或间歇地(例如，按适当间隔以分开的剂量)实现体内给药。最有效给药手段及剂量的确定方法对本领域技术人员是公知的，且会因疗法所用制剂、疗法目的、受治靶细胞以及受治个体而不同。单一给药或多给药可以根据治疗医师所选择的剂量水平和类型来进行。一般地，番茄红素的适当剂量是每天每千克个体体重约100吗至约250mg。如果活性化合物是盐、S旨、药物前体或类似物，给药量是以母体化合物为基础来计算的，所以待用的实际重量成比例地增加。包含诸如番茄红素的番茄红素化合物的组合物可以单独给药或者同时地或顺序地与其他治疗联用给药，这取决于受治状态。番茄红素化合物可被包含在食品中。例如，它可被包含在面包、谷类、饼干、黄油、涂抹物(如人造黄油)、奶酪、酸奶或者饮料当中。其他适宜的食品对于本领域技术人员是明显的。番茄红素化合物可以在烹饪(如烘焙)前与食品的成分相混合和/或在烹饪后加入食品。本文的数据表明可以将番茄红素化合物并入食品而不损失食物质量，并且在被烹饪进食品后保持活性。优选地，异源番茄红素化合物被包含在食品中。例如，上述的合成番茄红素化合物或不是天然存在于该食品中的天然番茄红素化合物。例如，来自水果或者蔬菜的番茄红素化合物可一皮并入面包或者谷类。因此，本发明更进一步的方面是包含治疗代谢功能紊乱的番茄红素化合物的食品，其中所述番茄红素化合物不是天然存在于该食品。食品可以向食品添加番茄红素化合物或用番茄红素化合物增强食品。在一些优选实施方式中，向食品添加番茄红素化合物，所述番茄红素化合物如上所述用食品乳清蛋白制剂("乳番茄红素")。还提供了制备治疗或延迟或阻止代谢功能紊乱发作的食品的方法，所述方法包括(i)提供食品成分；(ii)将番茄红素化合物和所述成分相混合；(iii)将所述食品成分和所述番茄红素化合物制剂进食品。看过本公开内容后，本发明的各种进一步的方面和实施方式对于本领域技术人员是明显的。在本申请文件中提及的所有文件均通过引用其整体而并入本文。本发明的某些方面和实施方式会以实例的方式并参考下述的图而说明。图1表明番茄红素对HepG2细胞的膜和核组分中的SREBP-1和SREBP-2的量的影响。图2表明经番茄红素处理过的Zucker肥胖大鼠(ZFR)和瘦型大鼠(ZLR)肝脏的膜和核4是耳又物中SREBP-1、SREBP-2和LDL-R的免疫印迹分析。表1表明固醇存在和不存在时，用10(iM番茄红素孵育的HepG2细胞的mRNA变化。表2表明100nM胰岛素存在和不存在时，用10pM番茄红素孵育的大鼠原代肝细胞中mRNA的变化。表3表明经0.2%番茄红素餐处理的Zucker肥胖大鼠(ZFR)和Zucker瘦型大鼠(ZLR)的生理参数(用4只大鼠作4次测量得出M±m)。表4表明经0.2%番茄红素餐处理的Zucker肥胖大鼠(ZFR)和Zucker瘦型大鼠(ZLR)肝脏中的mRNA变化。表5表明乳番茄红素LL对人类志愿者血脂水平的影响。表6表明在用LL治疗两个月后，LL对人类志愿者血脂的平均水平的影响。表7表明Lyc-O-Mato,LM对人类志愿者血脂水平的影响。表8表明在用LM治疗两个月后，LM对人类志愿者的血脂的平均水平的影响。表9表明LL对糖尿病患者的血清葡萄糖浓度的影响。表10表明LM对糖尿病患者的血清葡萄糖浓度的影响。表11表明乳番茄红素LL对人类志愿者的血清胰岛素水平的影响。表12表明LL和LM对人类志愿者体重的影响。表13表明Lipitor-Liprimar(阿托伐他汀)对人类志愿者的血脂水平的影响。表14表明不同的经烘焙的含有乳番茄红素(LL)的食品基质(面包块和烤饼)的体外抗氧化活性。表15表明乳番茄红素(LL)对人类血清脂类代谢参数的影响。表16表明乳番茄红素(LL)对人类血浆葡萄糖水平的影响。实验材料使用标准分子生物学技术。用RNA-STAT-60分离试剂(Tel-Test，Inc，USA)提取来自培养的细胞和大鼠肝脏的总RNA。SYBRGreenqPCR试剂系统(Invitrogen,USA)被用于RNA定量分析。血浆胰岛素水平用ELISA试剂盒(LincoResearch,USA)测量，血浆葡萄糖用比色法测量。除非另外声明，番茄红素是乳清蛋白结合的乳番茄红素制剂(LL)，其以商业形式(INNEOV，L'Oreal(UK)Ltd,London)使用，所述形式另外包含作为添加剂的大豆异黄酮和维生素C，或者以分离形式(INDENA)使用，其产生是通过将20g番茄提取物(包含10%乳番茄红素)和20g乳清蛋白、50.5g微晶纤维素、5g二氧化硅、3g聚山梨酸酯80和1.5g大豆卵磷脂混合而产生100g乳番茄红素制剂。根据EP1289383所述制备乳番茄红素制剂。其它的一4殳试剂自Sigma(USA)获得。细胞培养以1百万个细胞/100mm培养皿的密度，建立单层人类肝细胞瘤细胞系HepG2，并将其在37。C和6%C02下，使用添加10%FCS和青霉素(IOO单位/ml)及链霉素(100pg/ml)的DMEM培养。48小时后，使用PBS清洗细胞两次，并在存在或不存在固醇(lpig/ml25-羟基胆固醇和10吗/ml胆固醇)下，将其转至含有5%脂蛋白-缺乏血清、50(iM曱羟戊酸酯和50|iM康百汀(Compactin)(内酯形式)的DMEM。一半的培养皿还接受溶于四氢呋喃的INNEOV乳番茄红素，其终浓度多达10jaM。另外一半接受只有溶剂的等分试样。18小时后，收获细胞用于免疫印迹分析和RNA提取。原代肝细胞是使用胶原酶消化法从非空腹Spraque-Dawley大鼠的大鼠肝脏中分离出的。在氟烷麻醉下，随后用肝灌注培养基和肝消化培养基(Gibco/BRL,USA)通过门静脉原位灌注每个肝脏。切除肝脏，分离肝细胞，并以每个培养皿6百万个细胞的密度，于含有5%胎牛血清和青霉素(IOO单位/ml)及链霉素(100吗/ml)的DMEM，将其接种至100mm月交原蛋白I包谬皮的培养皿(BectonDickinsonLabware，USA)。三小时的附着之后，将所述细胞转至无血清DMEM，其添加100nM地塞米松、lnM胰岛素、100nM三硤曱腺原氨酸、100单位/ml青霉素、100吗/ml链霉素。用台盼蓝排除测试法计数活细胞。拥有至少85%活细胞的肝细胞被用于研究。经孵育过夜后，在存在或不存在100nM胰岛素下，加入溶于四氢呋喃的乳番茄红素(INNEOV)溶液，其终浓度达10jiM。对照培养皿只接受四氢呋喃。在向肝细胞添加番茄红素和/或胰岛素18小时后，进行RNA分离。动物和治疗8-9周龄的Zucker肥胖大鼠(fa/fa)和其瘦型同窝出生仔畜被用于实验。大鼠被饲养在群居笼(colonycage)中，保持12小时光/12小时暗周期并且喂食常规食物餐。对群居环境适应IO天之后，给大鼠换用添加0.2。/。乳番茄红素(INNEOV)的常规食物餐。随意喂食动物，使其24小时可得到所述食物。每日监测显示经过/未经番茄红素处理的大鼠组间在食物摄取上没有实质差别。8天的饮食处理后，氟烷麻醉下处死大鼠。收集血液样品并记录身体/肝脏重量。RNA分析提取培养细胞和大鼠肝脏的总RNA，从每个样品中取2吗RNA合成cDNA,—式三份进行RT-PCR反应。使用公共数据库Genebank为每个单独的基因设计引物。和特异引物孵育的每个RNA样品的实时CT值都参照于管家基因-GAPDH或36B4(内对照)的CT值，对每一实验都显示其绝对CT值。观察不存在固醇下，HepG2细胞的每一基因的标准化CT值，并将其设为1.00。其它组的mRNA水平变化参照于1.00，且代表相对该对照值(1.00)的倍数变化。免疫印迹从所培养的细胞和大鼠肝脏制备核提取物和膜组分用于免疫印迹分析。让所述细胞通过22.5号针，在低渗緩沖液(IOmMHepes-KOH,pH7.4)中破碎细胞。如另外所述，分离来自大鼠肝脏的核提取物和膜组分。临床试-验本临床试验的目的是，在不考虑乳番茄红素的特定制剂下，研究乳番茄红素自身是否影响人类的代谢参数。为本试验，征募了14例临床上健康的志愿者。其中的12例有一种或者另一种形式的血脂异常，其中的3例还另外有升高的空腹葡萄糖，1例只有升高的空腹葡萄糖，1例没有任一的这些代谢症状。以300mg的LL或6mg的HPLC番茄红素的剂量对7例志愿者给药，以800mg的LL或14mg的HPLC番茄红素的剂量对另外7例志愿者给药。将该产品给药两个月，每天一次和食物一同口服。测试并比较志愿者在试马全前和结束时的血液。结果实施例1人类肝细胞瘤细胞系HepG2已被用于揭示乳番茄红素对所培养细胞脂类代谢的转录调节的作用。由表1可见，实验的所有组中，基本管家基因的mRNA水平几乎不变，从17.54到17.73不等。这证实了无药物毒性、该细胞单层的RNA降解和健康状态。由表1可见，在存在或不存在固醇下，添加10(iM的乳番茄红素并不显著影响SREBP-1mRNA水平。无^r乳番茄红素是否存在，两组中应答于固醇的SREBP-2mRNA的降低是一样的。已知固醇会阻断所培养细胞中SREBP-2的转录，导致继发的胆固醇生物合成降低和生胆固醇酶mRNA的降低。表1显示了，对HepG2细胞添加固醇有效降低了SREBP-2及胆固醇生物合成的主要酶——FPPS、HMG-CoARed和HMG-CoASyn的mRNA。然而，在仅用10乳番茄红素孵育的HepG2细胞中，即使在无固醇下，SREBP-2的mRNA水平也明显降低了(降低42%)。在乳番茄红素存在下，降低的SREBP-2水平并不影响大多数生胆固醇和生脂的mRNA。然而在乳番茄红素存在下，大多数的生脂基因(FAS，ACC,HMG-CoASyn和HMG-CoARed)表现出稍高的固醇敏感性。单独的乳番茄红素降低SCAP的mRNA，无对SCAPmRNA的固醇作用的增强。唯一被乳番茄红素影响的SREBP-1下游基因是INSIG-1,其mRNA几乎下降了基础水平的2/3。免疫印迹数据(图l)确认并且阐释了mRNA结果。在不存在固醇下，在HepG2细胞的膜组分中没有SREBP-1和SREBP-2的可片企出前体形式。然而，当在固醇存在下SREBP-1切割停止，乳番茄红素存在下的SREBP-1蛋白量明显更高，这反映了约1.4SREBP-1mRNA上调。免疫印迹结果也确认了在用乳番茄红素孵育的HepG2细胞中所见的SREBP-2mRNA水平的下降——用乳番茄红素孵育的HepG-2细胞中，SREBP-2前体形式和成熟形式的量明显更低。在用相同操作进行的单独的研究组中，我们已确认并再现了乳番茄红素对于SCAPmRNA和INSIG-1mRNA的抑制作用。乳番茄红素减少主要的生胆固醇转录因子SREBP-2和胰岛素可诱导基因-l(INSIG-l)的mRNA,从而赋予人类肝细胞瘤细胞系HepG2中生脂基因的稍微更高的固醇敏感性。总之，我们的结果指出乳番茄红素影响脂类生成的一些转录机制以及可能的人类肝细胞的肝特异性胰岛素应答。实施例2由于番茄红素对HepG2细胞中一些胰岛素调节的基因(SREBP-1和INSIG-1)具有引人注目的作用，选择大鼠原代肝细胞系统和胰岛素处理操作以进一步研究乳番茄红素的生理学性质。由表2可见，用10(iM乳番茄红素处理原代大鼠肝细胞对主要管家基因一36B4的绝对CT值并无大的影响。这证实了不存在毒性作用、原代肝细胞的可接受的存活力和从所述细胞提取的RNA的良好质量。结果表明，胰岛素选择性地上调主要肝特异性生脂转录因子一SREBP-lc的mRNA,其CT校正值多达基础水平的56.5倍。乳番茄红素自身使SREBP-lc基础水平增强4倍。同时，添加乳番茄红素使利用胰岛素的SREBP-lc诱导降低了2倍之多(只有27.5倍)。类似于HepG-2研究，发现乳番茄红素的存在減少了主要的生胆固醇转录因子一SREBP-2的mRNA,特别是在胰岛素存在下。在乳番茄红素存在下，SREBP-lc对胰岛素应答的迟钝以及SREBP-2对胰岛素的水平降低，在原代肝细胞中看上去是功能显著的并且具有代谢后果。特别地，乳番茄红素的存在完全消除了主要的生脂mRNA—FAS、SCD-1、ACL和INSIG-1的胰岛素应答，所述基因已知是SREBP的靶基因。用乳番茄红素治疗时，这些mRNA水平被修正至接近对照值。乳番茄红素作用的另一重要特征是调节对主要的糖质新生酶一PEPCK和G-6-Pase的活性，其mRNA水平在单独用乳番茄红素时相应地降至66.0%和70%。胰岛素将PEPCK的mRNA几乎降低了90%且在乳番茄红素存在下显示同样能力。相反，G-6-Pase对胰岛素的应答并不那么显著。令人注意的是，使用乳番茄红素孵育赋予了G-6-Pase更高的胰岛素敏感性。单独使用胰岛素，该mRNA只略樣i减少(达到对照水平的90%),但在胰岛素和乳番茄红素两者存在下，下降得更显著(达到对照水平的62%)。乳番茄红素增强与糖质新生无关的一些其它胰岛素靶基因的胰岛素敏感性。当原代肝细胞在乳番茄红素存在下暴露于胰岛素时，胰岛素对INSIG-2、IRS-2和IGFBP-1的mRNA具有更加深刻的负作用。因此，在大鼠原代肝细胞中，乳番茄红素降低在胰岛素存在下的生脂转录应答和SREBP-2mRNA，提供糖质新生酶更高的胰岛素敏感性。实施例3为进一步研究乳番茄红素对肝代谢的作用机制，我们进行了使用Zucker肥胖大鼠(ZFR)的研究，已知其显示了代谢综合征的最重要特征。年幼(9周大)ZFR雄性及匹配对照(Zucker瘦型同窝出生仔畜)被用于总结于表3的实验。表3表明，即使在9周大时，ZFR具有显著升高的体重和肝重，升高的血浆甘油三酯和胆固醇。然而，血浆葡萄糖浓度仍保持对照水平，尽管胰岛素水平被实质诱导。虽然乳番茄红素(Inneov)并未降低所述瘦型大鼠的体重，但是使用乳番茄红素的8天饮食处理导致了ZFR体重和肝重引人注目的降^^。在用乳番茄红素处理的对照动物(ZLR)中也看到一些肝重下降。最显著的变化发生在血浆甘油三酯和胆固醇水平上——在用乳番茄红素处理时它们两者分别下降了83.1%和64.3%。使用乳番茄红素餐的ZFR的血浆胰岛素水平也有统计上的显著下降。由表4可见，ZFR具有增加量的SREBP-lc转录本及主要生脂酶一FAS、SCD-1、ACL的升高的mRNA。乳番茄红素处理减少了生脂mRNA的诱导，尽管该作用是部分的，从而反映了使用乳番茄红素餐的ZFR的尚存的高胰岛素血症。图2所展示的免疫印迹结果显示，ZFR肝脏核提取物具有显著更高水平的SREBP-1蛋白水平，而且该量不因乳番茄红素处理而变化。唯一的下降至对照值的mRNA是脂肪酸合酶。肝ACL和SCD-1mRNA相对于ZFR非处理组下降了2倍之多。生脂mRNA的这些变化解释了经乳番茄红素处理的ZFR的血浆甘油三酯水平的下降并且证实了实施例2所示数据。在非处理ZFR的肝脏中，不变的SREBP-2水平与生胆固醇酶(HMG-CoA-R和HMG-CoA-S)的正常值是一致的，且经免疫印迹数据证实(见图2)。因此，年幼ZFR的高胆固醇血症归因于肝脏中减少的LDL再摄取，而不是肝细胞中胆固醇生物合成的活化。不考虑表型，乳番痴红素处理降低了胆固醇生物合成的主要转录激活物一SREBP-2的mRNA水平(约2倍)。该发现支持了如实施例1和2所示的来自HepG2和原代肝细胞研究的结果。然而，在糖尿病和非糖尿病动物肝脏中，SREBP-2mRNA的减少对于HMG-CoA-R和HMG-CoA-S转录本有不同作用。肥胖大鼠显示HMG-CoA-R和HMG-CoA-S两者mRNA水平均显著降低，而瘦型同窝出生仔畜具有接近对照水平的水平。还有引人注目的LDR-R蛋白诱导，这被经乳番茄红素处理的ZFR肝脏的免疫印迹分析所证实(图1)。本观察解释了乳番茄红素餐对ZFR血浆脂类水平显著的正常化作用。在动物肝脏中，LDL受体的周转被SREBP-2所调节。在经乳番茄红素处理的ZFR的肝脏中，存在SREBP-2核形式的实质上调。该增加可以解释使用乳番茄红素的肝LDL受体激活才几制。乳番茄红素餐对于负责将胆固醇分泌到胆汁的酶Cyp7-a的mRNA没有作用。已知Zucker肥胖大鼠是显示异常低的胆汁胆固醇分泌速率的独特动物模型。该问题的出现是由于其肝脏中CYP-7a转录速率的降低。的确，由表4可见，CYP7amRNA水平在ZFR中下降且不考虑所进行的处理，保持在几乎同样的水平。选择Zucker肥胖大鼠是由于其极端且快速地形成表型，其类似于人类的代谢综合征，并导致高胰岛素血症、体重增加、高脂血症和脂肪变性。所有这些特征都在一定程度上被乳番茄红素处理所修正。然而，由表3可见，尽管有高胰岛素血症，9周大的ZFR仍保持血糖量正常。这说明了，用于本研究的动物还未发展激活的糖质新生，其为2型糖尿病的关键特征并且是另一紧密相关的Zucker大鼠品系一Zucker糖尿病大鼠(ZDR)的明显特征。作为胰岛素敏感性受损(但仍然有功能)的后果，在未经处理的ZFR的肝脏中，胰岛素敏感性mRNA(PEPCK，G-6-Pase,IGFBP-l,IRS-2)显著减少。因此，ZFR肝的这样受保持的胰岛素应答水平不允许我们评价大鼠原代肝细胞研究(实施例2)中所见的乳番茄红素对糖质新生和肝脏胰岛素敏感性机制的可能的体内作用。在人肝细胞瘤细胞系HepG2(见实施例l)中，乳番茄红素抑制调节胆固醇动态平衡的主要基因一SREBP-2的转录。使用另一类型的细胞一大鼠原代肝细胞证实这一观察(见实施例2)。在Zucker肥胖大鼠中也再现了乳番茄红素对SREBP-2的作用，所述大鼠的血浆胆固醇和甘油三酯水平在8天的0.2%乳番茄红素餐处理后下降到近于对照值。我们认为，乳番茄红素对血浆脂类水平的正常化作用不只与肝脏中SREBP-2水平下降相关，还与在使用乳番茄红素餐的动物中观察到的肝LDL-R(mRNA和蛋白)水平增强相关。因此，实施例l，2和3揭示了，乳番茄红素在不同水平上影响胆固醇的动态平衡，所述不同水平指SREBP-2的转录、LDL受体表达的调节、对SCAPmRNA水平的影响和总体胆固醇合成速率。在独立研究中出乎意料地发现且再现了，使用乳番茄红素孵育HepG2细胞导致了对胰岛素可诱导基因-l(INSIG-l)的抑制。我们认为乳番茄红素可以在所培养细胞和在肝脏中调节肝特异性胰岛素应答。乳番茄红素对INSIG-1mRNA的负作用在大鼠原代肝细胞中也被观察到了，特别是在胰岛素存在下。令我们惊讶的是，我们还观察到，使用乳番茄红素的短期饮食处理降低Zucker肥胖大鼠的体重和肝重、血浆胰岛素水平并导致血浆脂类谱的正常化。因此，INNEOV乳番茄红素制剂对代谢综合征的多种特征具有深刻影响一经乳番茄红素处理的Zucker肥胖大鼠的肝脏中血浆胰岛素水平、血浆脂类、肝重/体重比的降低，生脂基因转录的正常化和LDL受体蛋白的增多。实施例4A.乳番茄红素产物对血浆脂类、葡萄糖和胰岛素水平的作用在人类志愿者中研究乳番茄红素产物对血浆脂类、葡萄糖和胰岛素水平的作用，结果示于表5-表11。为该临床试验，选出16例年龄处于45-62岁的志愿者(8例男性和8例女性)。用乳番茄红素(INNEOV,L'0&al(UK)Ltd，London)LL对他们中的12例给药(6例男性和6例女性)，用Lyc-O-Mato,LM(VitaHealthcare)对他们中的4例给药(2例男性和2例女性)。在前面一组有2例糖尿病患者，后面一组有2例糖尿病患者。对于这些糖尿病患者，除脂类水平外，也监测葡萄糖浓度。对全部16例患者也监测胰岛素浓度。用LL对3例患者给药一每次一个糖衣丸，每天两次，和食物共服；用LL对另外9例患者给药一每次一个糖衣丸，每天三次，和食物共服。LM以每天三个胶嚢且与食物共服而给药。在治疗前和开始后的每两周从患者血液中收集血清样品。使用两种番茄红素产物的治疗持续两个月。LL和LM对这些志愿者的血脂参数的影响的结果示于表5、表6、表7和表8。这些结果表明，每天2个或3个糖衣丸的LL的给药(表5和表6)或者每天3个胶嚢的LM的给药(表7和表8)导致了总胆固醇和甘油三酯的浓度的下降。单独LL的给药还导致CH-LDL浓度的显著下降(p〈0.05)。志愿者的其它脂类参数未被显著影响。令人感兴趣地注意到，该治疗前这些脂类的水平越高，观察到的血清中其浓度的下降就越深刻。例如，对于第9号患者，在用LL治疗仅两周后，总胆固醇水平便从247mg/dL降至158mg/dL，下降了几乎36%(表5)。使用番茄红素不同制备物给药的效果的比较显示，对于血清总胆固醇、LDL胆固醇和甘油三酯的水平，LL具有比LM更深刻的效果。29此外，也重要的是，使用可吸收即生物可利用的番茄红素制备物LL或LM制剂导致具有升高水平的血清葡萄糖的患者中血清葡萄糖浓度的降低(表9和表10)。令人感兴趣地观察到，用LL或LM给药不影响非高血糖症患者血清的葡萄糖生理水平，但能够在高血糖症患者中将其降低或正常化(粗体数)。高血糖症患者是具有高于6mmo1/1的血清葡萄糖浓度的那些。使用番茄红素不同制备物给药的效果的比较显示，LL能够将高血糖症患者的血浆葡萄糖浓度平均降低28%,而LM只可将此参数降低16%。对于胰岛素水平，也观察到LL的类似效果。在胰岛素水平升高的患者中，两周的LL给药导致其正常化(粗体数)。然而，该制备物并未影响具有正常生理水平的胰岛素的患者中的胰岛素浓度(表11)。B.番茄红素产品对人类体重的作用第二临床试验研究了番茄红素产物对体重的作用，该试验涉及18例志愿者，他们是10例男性和8例女性，年龄在45岁至62岁。用1个糖衣丸的Lacto-Lycopene(INNEOV，L'Or6al(UK)Ltd,London)LL对9例志愿者(5例男性和4例女性)给药，每日三次，和食物共服。用1个胶嚢的Lyc-0-MatoTM,LM(VitaHealthcare)对另外9例(5例男性和4例女性)给药，每日三次，和食物共服。试验持续两个月，在试验前和试验后对志愿者称重。试验结果示于表12。IX和LM两者给药两个月导致每一治疗组中分别有5例和3例志愿者体重下降。然而，整个LL组的总体重下降比LM组多3倍，即前者15kg而后者5kg。平均起来，LL组每人减重1.7kg，而LM组每人减重0.6kg。令人感兴趣地注意到，超重志愿者/人LL的这种作用中获益更显著。他们中的五分之四减重2kg至5kg。LM组中，5例超重者中只有1例减重了。因此，番茄红素治疗减少了患者中代谢综合征的基本临床特征(高胆固醇血症、高甘油三酯血症和高血糖症)。这些临床数据支持了在体外实验和动物实验中观察到的实验结果，并说明了可吸收和生物可利用形式的乳番茄红素制备物可以是有效的治疗性产物，其可用于治疗代谢综合征、胰岛素抵抗(包括重度胰岛素抵抗综合征)、葡萄糖耐受、多嚢性卵巢综合征(PCOS)、高血压、脂肪变性、慢性肝炎、肝的纤维化、硬化，以及用于体重控制及用于治疗肥胖症。C.他汀对血脂的作用在人类志愿者中研究了Lipitor-Liprimar(阿托伐他汀)对血脂水平的作用，结果示于表13。为本临床试验，选择了10例志愿者，他们是5例男性和5例女性，年龄在45-55岁。每日用40mgLipitor-Liprimar对每例患者口服给药，与食物共服，给药两个月。在治疗前和两个月的治疗后从患者血液中收集血清样品。Lipitor-Liprimar对这些志愿者中血脂水平的影响的结果示于表13。该表所示l史据i正明，Lipitor-Liprimar这种HMGCoA还原酶抑制剂，比LL更好地降低了CH-LDL(前者35%而后者13.3%)。然而，相比他汀，乳番茄红素将总胆固醇和甘油三酯两者降到了一个更低的水平对于Lipitor，总胆固醇(CH)下降了17%,而对LL是27%;对于Lipitor,甘油三酯(TG)下降了22%，而对LL是34%(表6和表13)。不只是在降低血脂水平上不够有效，已知他汀还对0.5%到2.0%的患者具有一些副作用。例如，他汀可导致转氨酶水平升高或者肌肉疼痛、触痛或无力。在一些患者中，这些症状可以伴随发热或流感样症状、腹痛或无法解释的疲劳(unexplainedfatigue)。此外，肝脏疾病和肌炎属于服用他汀的禁忌症，并且在孕期不应开他汀。另一方面，长期给药乳番茄红素制备物没有已知的禁忌症或副作用。结合以上所示数据，这说明诸如LL的乳番茄红素制剂可以在治疗包括代谢综合征、胰岛素抵抗、葡萄糖耐受不良、高血压、多嚢性卵巢综合征、肥胖症、脂肪变性、慢性肝炎和肝硬化在内的各种症状中用作他汀的替代品。另外，诸如LL的乳番茄红素制剂可以与他汀联用，这可以降低后者的治疗性剂量。这会使他汀的禁忌症减少并将其可能的副作用最小化。D另外的制剂在人类志愿者中研究了分离的乳番茄红素制剂(INDENA)对血脂水平的作用，结果示于表15和表16。这些结果显示，乳番茄红素制剂(INDENA)降低了血脂水平，但对人类血浆中葡萄糖水平没有显著作用。然而，它使具有升高水平的总胆固醇和甘油三酯的所述个体的血清中总胆固醇和甘油三酯的浓度正常化。治疗前这些参数的水平越高，观察到的降低就越显著。例如，总胆固醇250mg/dL以上的个体平均降低94mg/dL或降低超过35%。初始浓度250mg/dL以下但仍高于200mg/dL正常水平的个体平均降低54mg/dL或降低25。/c)。对于甘油三酯，观察到相似的类型。甚至在具有生理学正常水平的这些脂类的个体中，观察到了两种参数的降低一总胆固醇15%而甘油三酯20%。对于CH-HDL和CH-LDL的浓度，观察到不那么深刻的作用。在前者水平降低的5例个体中，4例在治疗后具有正常化的所述脂类水平。在CH-LDL水平初始升高的4例个体中，只有2例的该参数被正常化。实施例5将乳番茄红素并入食物基质一块面包的配方是酵母一3/4茶匙，高筋白面粉一400g，糖一l茶匙，黄油一15g,奶粉一l茶勺，盐一l茶匙，280ml溶解了乳番茄红素(LL)(INNEOV)糖衣丸的水。烘焙四块一块(对照)不含LL,第二块含5个糖衣丸的LL,第三块含10个糖衣丸的LL，第四块含20个糖衣丸的LL。测试蒙眼测试所述面包的5例志愿者未发现所有这四块之间在质地或香味上有区别。此外，测试了面包的抗氧化活性。遵照在厂商说明书中陈述的操作，使用AtheroAbzymeELISA试剂盒(CTL,UK)将其完成。包含乳番茄红素的面包具有抗氧化活性，而对照面包没有(表14)。实施例6将番茄红素并入食物基质一批的4个烤饼的配方是自发面粉一175g，发酵粉一l茶匙，一撮食盐，细白砂糖一20g,无盐黄油一37g,卯ml溶解了INNEOV糖衣丸形式的LL的牛奶。烘焙四批烤饼一批(对照)不含LL，第二批含有每只烤饼0.5个糖衣丸的LL，第三批含有每只烤饼1个糖衣丸的LL，第四批含有每只烤饼2个糖衣丸的LL。测试蒙眼测试这些烤饼的5例志愿者未发现所有这四批之间在质地或香味上有区别。此外，测试了这些烤饼的抗氧化活性。遵照在厂商说明书中陈述的操作，使用AtheroAbzymeELISA试剂盒(CTL,UK)将其完成。包含乳番茄红素的烤饼具有抗氧化活性，而对照烤饼没有(表14)。<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>缩写GAPDH—甘油醛-3-磷酸脱氢酶；SREBP-1—固醇调节元件结合蛋白-l;SREBP-2—固醇调节元件结合蛋白-2;FPPS—法呢基二磷酸合酶；HMG-CoASyn—HMG-CoA合酶；HMG-CoARed—HMG-CoA还原酶；SCD-l—硬脂酰-辅酶A-去饱和酶-l;FAS—脂肪酸合酶；ACC—乙酰辅酶A羧化酶；SCAP—固醇切割激活蛋白；INSIG-l—胰岛素可诱导基因-l;INSIG-2—胰岛素可诱导基因-2<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>缩写36B4—酸性核糖体磷蛋白；SREBP-1—固醇调节元件结合蛋白-1;SREBP-2—固醇调节元件结合蛋白-2;FAS—脂肪酸合酶；SCD-l—硬脂酰-辅酶A-去饱和酶-l;ACL—ATP-柠檬酸裂解酶；PEPCK—磷酸烯醇丙酮酸羧激酶；IGFBP-1—胰岛素样生长因子结合蛋白；G-6-Pase—葡萄糖-6-磷酸酶；IRS-2—胰岛素受体底物2;INSIG-1—胰岛素可诱导基因-1;INSIG-2—胰岛素可诱导基因-2;胰岛素-R-胰岛素受体表2<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>表3<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>缩写36B4—酸性核糖体磷蛋白；SREBP-1—固醇调节元件结合蛋白-1;SREBP-2—固醇调节元件结合蛋白-2;FAS—脂肪酸合酶；SCD-l—硬脂酰-辅酶A-去饱和酶-l;ACL—ATP-柠檬酸裂解酶；PEPCK—磷酸烯醇丙酮酸羧激酶；IGFBP-1—胰岛素样生长因子结合蛋白；G-6-Pase—葡萄糖-6-磷酸酶；IRS-l—胰岛素受体底物1;IRS-2—胰岛素受体底物2;INSIG-2—胰岛素可诱导基因-2;LDL-R—低密度脂蛋白受体；CYP-7a—7a-鞋化酶；INSIG-1—胰岛素可诱导基因-1;HMG-CoA-S—HMG-辅酶A合酶；HMG-CoA-R—HMG-辅酶A还原酶；INSIG-1—胰岛素可诱导基因；INSIG-1—胰岛素可诱导基因-l表4<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table>*统计上显著的表6<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>*每日给药胶嚢数(每个胶嚢15mg番茄红素)"CH—总胆固醇，TG—甘油三酯表7<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>表9<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>*每日口月艮Lipitor40mg表13<table>tableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table>表14<table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>异常的过高或过低水平的脂类参数用粗体*患者号表15<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>权利要求1.治疗代谢功能紊乱的方法，包括将治疗有效量的番茄红素化合物给药于需要它的个体。2.如权利要求l所述的方法，其中所述番茄红素化合物是番茄红素。3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述代谢功能紊乱选自肥胖症、胰岛素抵抗、葡萄糖耐受降低、多嚢性卵巢综合征、高血压、脂肪变性、慢性肝炎、肝纤维化、硬化和代谢综合征。4.如权利要求1至3中的任一项所述的方法，其中用乳清蛋白配制所述番茄红素化合物。5.如权利要求1至3中的任一项所述的方法，其中用油配制所述番茄红素化合物。6.如权利要求1至5中的任一项所述的方法，其中用一种或多种异黄酮配制所述番茄红素化合物。7.如权利要求1至6中的任一项所述的方法，其中所述番茄红素化合物及药学上可接受的赋形剂被包含在药物组合物中。8.如权利要求1至7中的任一项所述的方法，其中所述番茄红素化合物被包含在食品中。9.如权利要求8所述的方法，其中所述食品是面包、谷物、饼干、黄油、涂抹物、奶酪、酸奶或者饮料。10.如权利要求1至9中的任一项所述的方法，其中所述番茄红素化合物用于与他汀联合给药。11.如权利要求1至8中的任一项所述的方法，包括将所述番茄红素化合物与他汀联用给药。12.番茄红素化合物在制备治疗代谢功能紊乱的药物中的用途。13.如权利要求12所述的用途，其中所述番茄红素化合物是番茄红素。14.如权利要求12或13所述的用途，其中所述代谢功能紊乱选自肥胖症、胰岛素抵抗、葡萄糖耐受降低、多嚢性卵巢综合征、高血压、脂肪变性、慢性肝炎、肝纤维化、硬化和代谢综合征。15.如权利要求12至14中的任一项所述的用途，其中用乳清蛋白配制所述番痴红素化合物。16.如权利要求12至14中的任一项所述的用途，其中用油配制所述番茄红素化合物。17.如^l利要求12至16中的任一项所述的用途，其中用一种或多种异黄酮配制所述番茄红素化合物。18.如权利要求12至17中的任一项所述的用途，其中所述番茄红素化合物及药学上可接受的赋形剂被包含在药物组合物中。19.如权利要求12至17中的任一项所述的用途，其中所述番茄红素被包含在食品中。20.如权利要求18所述的用途，其中所述食品是面包、谷物、饼干、黄油、涂抹物、奶酪、酸奶或者饮料。21.如^l利要求12至20中的任一项所述的用途，其中所述药物用于和他汀给药。22.如权利要求12至21中的任一项所述的用途，其中所述药物还包含〗也汀。23.与代谢功能紊乱相关的状态的治疗方法，包括将治疗有效量的番茄红素化合物给药于需要它的个体。24.如权利要求23所述的方法，其中所述番茄红素化合物是番茄红素。25.如权利要求23或24所述的方法，其中与代谢功能紊乱相关的状态选自血压升高、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、高LDL胆固醇和/或低HDL胆固醇以及微蛋白尿。26.如权利要求23至25中的任一项所述的方法，其中用乳清蛋白配制所述番茄红素化合物。27.如权利要求23至25中的任一项所述的方法，其中用油配制所述番茄红素化合物。28.如权利要求23至25中的任一项所述的方法，其中用异黄酮配制所述番茄红素化合物。29.如权利要求24至28中的任一项所述的方法，其中所述番茄红素化合物及药学上可接受的赋形剂被包含在药物组合物中。30.如权利要求24至29中的任一项所述的方法，其中所述番茄红素被包含在食品中。31.如权利要求30所述的方法，其中所述食品是面包、谷物、饼干、黄油、涂抹物、奶酪、酸奶或者饮料。32.如权利要求24至31中的任一项所述的方法，其中所述番茄红素化合物用于和他汀给药。33.如权利要求24至32中的任一项所述的方法，包括与他汀联用给药所述番茄红素化合物。34.番茄红素化合物在制备用于治疗与代谢功能紊乱相关的状态的药物中的用途。35.如权利要求34所述的用途，其中所述番茄红素化合物是番茄红素。36.如权利要求34或35所述的用途，其中所述与代谢功能紊乱相关的状态选自血压升高、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、高LDL胆固醇和/或低HDL胆固醇以及微蛋白尿。37.如权利要求34至36中的任一项所述的用途，其中用乳清蛋白配制所述番茄红素化合物。38.如权利要求34至36中的任一项所述的用途，其中用油配制所述番茄红素化合物。39.如权利要求34至36中的任一项所述的用途，其中用异黄酮配制所述番茄红素化合物。40.如权利要求35至39中的任一项所述的用途，其中所述番茄红素化合物及药学上可接受的赋形剂被包含在药物组合物中。41.如权利要求35至40中的任一项所述的用途，其中将所述番茄红素配制于食品中。42.如权利要求41所述的用途，其中所述食品是面包、谷物、饼干、黄油、涂抹物、奶酪、酸奶或者饮料。43.如权利要求35至42中的任一项所述的用途，其中所述药物用于和他汀给药。44.如权利要求33至39中的任一项所述的用途，其中所述药物还包含卩也汀。45.试剂盒，包含治疗代谢功能紊乱的联合使用的番茄红素化合物和他汀的。46.如权利要求45所述的试剂盒，其中所述番茄红素化合物是番茄红素。47.如权利要求45或46所述的试剂盒，其中所述代谢功能紊乱选自肥胖症、胰岛素抵抗、葡萄糖耐受降低、多嚢性卵巢综合征、高血压、脂肪变性、慢性肝炎、肝纤维化、硬化和代谢综合征。48.如权利要求45至47中的任一项所述的试剂盒，其中用乳清蛋白配制所述番茄红素化合物。49.如权利要求45至47中的任一项所述的试剂盒，其中用油配制所述番茄红素化合物。50.如权利要求45至47中的任一项所述的试剂盒，其中用异黄酮配制所述番茄红素化合物。51.如权利要求46至50中的任一项所述的试剂盒，其中所述番茄红素化合物及药学上可接受的赋形剂被包含在药物组合物中。52.试剂盒，包含治疗与代谢功能紊乱相关的状态的联合使用的番茄红素化合物和他汀。53.如权利要求52所述的试剂盒，其中所述番茄红素化合物是番茄红素。54.如权利要求52或53所述的试剂盒，其中所述状态选自肥胖症、胰岛素抵抗、葡萄糖耐受降低、多嚢性卵巢综合征、高血压、脂肪变性、慢性肝炎、肝纤维化、硬化和代谢综合征。55.如权利要求52至54中的任一项所述的试剂盒，其中用乳清蛋白配制所述番茄红素化合物。56.如权利要求52至54中的任一项所述的试剂盒，其中用油配制所述番茄红素化合物。57.如权利要求52至54中的任一项所述的试剂盒，其中用异黄酮配制所述番茄红素化合物。58.如权利要求52至57中的任一项所述的试剂盒，其中所述番茄红素化合物及药学上可接受的赋形剂被包含在药物组合物中。59.番茄红素化合物和他汀的组合在制备用于治疗代谢功能紊乱的药物中的用途。60.如权利要求59所述的用途，其中所述番茄红素化合物是番茄红素。61.如权利要求59或60所述的用途，其中所述与代谢功能紊乱相关的状态选自血压升高、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、高LDL胆固醇和/或低HDL胆固醇以及微蛋白尿。62.如权利要求59至61中的任一项所述的用途，其中用乳清蛋白配制所述番茄红素化合物。63.如权利要求59至61中的任一项所述的用途，其中用油配制所述番茄红素化合物。64.如权利要求59至61中的任一项所述的用途，其中用一种或多种异黄酮配制所述番茄红素化合物。65.如权利要求61至64中的任一项所述的用途，其中所述番茄红素化合物及药学上可接受的赋形剂被包含在药物组合物中。66.如权利要求60至65中的任一项所述的用途，其中将所述番茄红素配制于食品中。67.如权利要求66所述的用途，其中所述食品是面包、谷物、饼干、黄油、涂抹物、奶酪、酸奶或者饮料。68.番茄红素化合物和他汀的组合在制备用于治疗与代谢功能紊乱相关的状态的药物中的用途。69.如权利要求68所述的用途，其中所述番茄红素化合物是番茄红素。70.如权利要求68或69所述的用途，其中所述与代谢功能紊乱相关的状态选自血压升高、高甘油三酯血症、高胆固醇血症、高LDL胆固醇和/或低HDL胆固醇以及微蛋白尿。71.如权利要求68至70中的任一项所述的用途，其中用乳清蛋白配制所述番茄红素化合物。72.如权利要求68至70中的任一项所述的用途，其中用油配制所述番茄红素化合物。73.如权利要求68至70中的任一项所述的用途，其中用一种或多种异黄酮配制所述番茄红素化合物。74.如权利要求69至73中的任一项所述的用途，其中所述番茄红素化合物及药学上可接受的赋形剂被包含在药物组合物中。75.如权利要求69至74中的任一项所述的用途，其中将所述番茄红素配制于食品中。76.如权利要求75所述的用途，其中所述食品是面包、谷物、饼干、黄油、涂抹物、奶酪、酸奶或者饮料。77.包含治疗代谢功能紊乱的番茄红素化合物的食品，其中所述番茄红素化合物并非天然存在于所述食品。78.如权利要求77所述的食品，其中所述食品是面包、谷物、饼干、黄油、涂抹物、奶酪、酸奶或者饮料。79.如权利要求77或78所述的食品，其中所述番茄红素化合物是番茄红素。80.如权利要求77至79中的任一项所述的食品，其中所述代谢功能紊乱选自肥胖症、胰岛素抵抗、葡萄糖耐受降低、多嚢性卵巢综合征、高血压、脂肪变性、慢性肝炎、肝纤维化、硬化和代谢综合征。81.如权利要求77至80中的任一项所述的食品，所述食品还包含他汀。82.制备治疗代谢功能紊乱的食品的方法，包括(i)提供食品成分；(ii)将番茄红素化合物与所述成分混合；(iii)将所述成分和所述番茄红素化合物配制到食品中。83.如权利要求82所述的方法，其中所述食品是面包、谷物、饼干、黄油、涂抹物、奶酪、酸奶或者饮料。84.如权利要求82或83所述的方法，其中所述番茄红素化合物是番茄红素。85.如权利要求82至84中的任一项所述的方法，其中所述代谢功能紊乱选自肥胖症、胰岛素抵抗、葡萄糖耐受降低、多嚢性卵巢综合征、高血压、脂肪变性、慢性肝炎、肝纤维化、硬化和代谢综合征。全文摘要本发明涉及使用番茄红素化合物治疗代谢功能紊乱和与代谢功能紊乱相关的症状。本发明提供了治疗方法以及番茄红素化合物在这种方法中的用途。文档编号A23L1/30GK101453914SQ200780019884公开日2009年6月10日申请日期2007年4月13日优先权日2006年4月13日发明者乔治·巴什,伊万·佩蒂娅申请人:凯米迪卡有限公司