专利名称：一种水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法
技术领域：
本发明涉及提取海洋蛋白质领域,特别是涉及水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法.背景技术近年来胶原蛋白质及其胶原肽的抗氧化、降压、抗肿瘤等保健功能，已被越来越多 的人所认识，市场上包括食品、化妆品、医疗保健等领域对胶原蛋白及胶原肽的需求日 益旺盛。然而由于胶原肽原料尤其是水生原料在水解后得到的胶原蛋白和胶原肽液有着 令人不愉快的气味和颜色，是其推广的一大障碍。为使人们能够更加容易的接受这种具 有营养性、功能性的产品，对其进行脱色脱腥的研究，是继大豆蛋白水解脱色脱腥之后 的又一新课题。通常，人们使用的脱色脱腥法有微生物发酵法，理化吸附法，酸碱处理法，溶剂萃 取法，分子包埕法，掩蔽法以及几种方法结合的复合处理法等。水产品加工下脚料水解 液的色、腥味成分与其他海洋类生物的色腥味一样，成分复杂，颜色成分除包括未离心 分离掉的色素成分外，还有蛋白酶的发酵粉载体颜色。腥味成分主要是下脚料降解后产 生的含氮化合物的胺类，酸类，羰基化合物、含硫化合物及其他的烃醇、酚、醛类物质 等。这些成分种类众多，变化多样，而且在处理过程中还要求对酶解液的营养和活性成 分进行最大限度的保护，这就要求脱色剂不仅要具有广泛性、适用性，而且还要温和、 安全、经济等特点。 发明内容本发明的目的在于发明人适合目前市场对胶原蛋白及其胶原肽的需求日益旺盛，寻 找经济实用的水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法。本发明提供的水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法，其特征在于包括 酶解液的制备将经预处理的水产品加工下脚料在蛋白酶例如海洋碱性蛋白酶894存在下于水中进 行酶解，酶解温度30 60"c、 pH7.5 12. 5、酶料质量比1:1000至1:25、料水质量比 1:150至1:1的条件下水解10-60分后于沸水浴灭酶，冷却后于4°C,以10000rpm离心 30min得酶解液的上清夜。脱色脱腥将水产品加工下脚料酶解液的上清液于活性炭中进行脱色脱腥反应，反应温度 20-50('C'优选为30-40°C更优选为37t， pH为3-6，优选为4-5，更优选为4. 0。活性 炭添加量为酶解液重量的0.3-1.5重量％，优选为0. 5-L 0重量％，更优选为0.8重量％; 作用时间为20-70分钟，优选为30-40分钟，更优选为30分钟，其脱色脱腥后感观值 达到85，活性回收率为90.87%，综合值为87.35。按照本发明提供的水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法中，所述酶解液是指用蛋 白酶(市售产品)例如海洋碱性蛋白酶894水解经预处理的水产品加工下脚料得到的抗 氧化胶原肽的上清液(简称酶解液)，其酶解液的制备方法为预处理将水产品加工下 脚料用水洗净，搅碎如使用高速组织搅碎机DS-1-15000转/分，剪切搅碎后，经碱浸泡 脱杂蛋白，如0. lmol/L的NaOH或KOH于20倍质量水产品加工下脚料进行脱杂蛋白， 脱色，异丙醇脱脂(如用10% (wt)异丙醇)，然后沉淀物质反复冲洗至无异味，后再 脱水。酶解将上述预处理的水产品加工下脚料在蛋白酶存在下于水中进行酶解(水解)， 酶解温度30-60°C， pH7. 5-12. 5，蛋白酶与预处理水产品加工下脚料沉淀物质质量比(简称酶料比)为1: 1000至1: 25，预处理水产品加工下脚料与水质量比(简称料水比)1:150至l: 1，水解时间10-60分钟，水解后产物迅速于沸水中灭酶，冷却后于4。C离心 (10000rpm) 30分钟得抗氧化胶原肽上清液(简称酶解液)。 抗氧化活性的测定釆用Feton法检测采用亚铁离子催化过氧化氢产生羟自由基(Fenton反应)，该 反应产生的羟自由基可使番红花红O褪色，抗氧化剂可清除羟自由基，抑制番红花红O 褪色。取0. 025mol/L,pH7. 4的磷酸缓冲液lml, 40ug/ml的番红花红lml,供试样品 0. 5ml， 1%过氧化氢lml (新鲜配制)，0. 945mmol/LEDTA-Fe (11) lml (新鲜配制)，混匀后 在37。C水浴中反应30min，在520nm测定吸光植。空白组0. 5ml蒸镏水代替供试样品， 对照组1. 5ml蒸镏水代替EDTA-Fe(ll)和供试样品。并按下式计算清除率清除率(7) J样品 加x酵o式中A样品、A加、A对照分别为样品、空白和对照的吸光值。 活性回收率的计算活性回收率(^收)=^l^xK)0%〃处理前脱色效果的估测脱色效果感观值XO. 6+活性回收率(il回收)X100X0.4 感观值评定评定人员按照食品感观质量评定操作要求进行打分，打分参考表l表1感观值打分表感观性状分值备注淡乳黄色，淡而厚鱼腥味 30亮而乳黄色，淡而有鱼腥味 30-40淡乳白色，淡而微腥 40-50微亮黄色，淡而微腥 50-60微亮黄至清亮色，淡而无味 60-100酶解液其中对脱色脱腥效果的评定综合指标法，综合指标为感观值与活性回收率的加权和。本发明提供的酶解液脱色脱腥方法中，随着活性炭用量的增加脱色脱腥酶解液活性 有一定损失，但能够实现良好的脱色脱腥的效果，其中最经济的脱色脱腥效果优选为温 度30"C、 pH4.0的环境下，活性炭添加量为0.5% (wt)，反应30分钟，最经济点虽然 能起到合格脱色脱腥效果，为使效果达到最佳为温度37nC， PH4.0，活性炭添加量0.8% (wt)，反应30分钟，使感观值达到85，活性回收率为90.87%，综合值为87.35，实 现了脱色脱腥又最大限度的保留抗氧化胶原肽的活性，是一种工艺简单，效果好的水产 品加工下脚料酶解液的脱色脱腥方法。
具体实施方式
本发明用下列实施例来进一步说明本发明，但本发明的保护范围不限于下列实施例。将经预处的水产品加工下脚料1000克在海洋碱性蛋白酶894 (黄海水产研究所)存 在下于45。C、 pH8.0、酶料质量比l: 150、料水质量比l: 4的条件下水解30分后于沸 水浴灭酶5分钟，冷却后于4。C， 10000rpm离心30分钟，取上清液。在上述上清液100克加入8克活性炭于37flC， pH4. 0作用30分钟，脱色脱腥后其感 观值为85，活性回收率为90.87%，综合值为87.35。
权利要求
1、一种水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法，其特征在于将活性炭添加于经预处理的水产品加工下脚料酶解液中进行脱色脱腥反应，反应温度为20-50℃，pH为3-6，活性炭添加量为酶解液重量的0.3-1.5％，反应时间20-70分钟。
2、 根据权利要求1的水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法，其特征在于反应温 度30-40"C、 pH为4-5，活性炭添加量为酶解液重量的0.5-1.0%，反应时间30-40分钟。
3、 根据权利要求2的水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法，其特征在于反应温 度37t, pH为4.0，活性炭添加量为酶解液重量0.8%，反应时间30分钟。
4、 根据权利要求1-3任一的水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法，其特征在于 所述经预处理的水产品加工下脚料为水产品加工下脚料用水洗净搅碎后，经碱浸泡脱杂 白蛋、脱色、异丙醇脱脂后，沉淀物经反复冲洗至无异味，后再脱水；所述酶解液为将经 预处理的水产品加工下脚料在蛋白酶存在下于水中进行酶解，酶解温度30-60"C， pH7.5-12.5，蛋白酶与经预处理的水产品加工下脚料质量比1:1000至1:25，经预处理 的水产品加工下脚料与水的质量比1:150至1:1进行水解10-60分钟后于沸水浴灭酶5 分钟，冷却后于4"C，以10000转/分钟，离心30分钟，取上清液为酶解液。
5、 根据权利要求4的水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法，其特征在于所述蛋 白酶为海洋碱性蛋白酶894。
全文摘要
本发明涉及一种水产品加工下脚料酶解液脱色脱腥方法，该方法包括用水产品加工下脚料经预处理、酶解后得酶解液在活性炭存在下于20-50℃，pH为3-6，活性炭添加量0.3-1.5％，作用时间20-70分钟进行脱色脱腥，其脱色脱腥后感观值达到85，活性回收率为90.87％，综合值为87.35，该方法工艺简单，效果好，是一种有效可靠的水产品加工下脚料酶解液的脱色脱腥方法。
文档编号C12P21/06GK101230376SQ20081005797
公开日2008年7月30日 申请日期2008年2月22日 优先权日2008年2月22日
发明者刘均忠, 谧 孙, 王海英, 王跃军 申请人:中国水产科学研究院黄海水产研究所