专利名称：一种混合核苷酸的生产方法
技术领域：
本发明涉及一种混合核苷酸的生产方法，特别是，核苷酸是通过酶法制备 得到的。
背景技术：
目前市场上，核苷酸作为营养品，销售对象主要为婴儿和老人。婴儿用核 苷酸有严格的质量标准，是用经过层析后结晶的单核苷酸再按一定比例混配后 添加入婴儿奶粉中。而作为老年保健品的核苷酸质量就没有标准。曾见到装在 安培瓶中的液态"核苷酸"颜色深似浓茶；还曾对某种品牌的"核苷酸"胶囊 进行质量分析，其中核苷酸含量不足10%。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种混合核苷酸的生产方法，生产周期 短、能耗小、环境污染小、安全性好、产品收率髙、生产成本低。 为解决以上技术问题，本发明采取如下技术方案 一种混合核苷酸的生产方法，依次包括以下步骤
(1) 、制备核糖核酸溶液将核糖核酸加入水中，同时加碱，使核糖核酸
溶解；
(2) 、酶解核糖核酸将所述的核糖核酸溶液调至中性，在一定温度下加 入5'-磷酸二酯酶，核糖核酸被分解成5'-腺苷酸、5' —胞苷酸、5' _尿苷 酸和5—鸟苷酸，得到核苷酸的混合溶液；
(3) 、过滤除去固体杂质，保留滤液；
(4) 、脱色柱脱色，上述滤液通过脱色柱，脱去色素、残存的蛋白质和其 它杂质，得到无色透明的混合核苷酸脱色液；
(5) 、钠滤浓缩上述混合核苷酸脱色液通过钠滤膜，滤除部分水及小分 子量的杂质，得到浓縮液即为混合核苷酸产品。
如果目标产品是固体，则上述步骤(5)所得的浓縮液可进一步经喷雾干燥 获得混合核苷酸粉末。
本发明与用单核苷酸按一定比例混配得到混合核苷酸的方法比较，因为生
产单核苷酸的过程，除了需要除杂质以外，还要将核糖核酸的酶解液通过层析， 分离成四种单核苷酸的溶液；然后分别浓縮，结晶，干燥，这是一个漫长的而
又复杂的过程。与之相比，本发明的技术方案具有以下优势
生产周期约为单核苷酸工艺的三分之一；能耗约为单核苷酸工艺的二分之 一；排污约为单核苷酸工艺的二分之一；安全性好；产品收率大幅度提髙；生 产成本大幅度下降；建厂的投资也大幅度下降。
具体实施例方式
下面对本发明的具体实施方式
进行说明
按照本实施例的混合核苷酸的生产方法，依次包括以下步骤
(1) 、制备核糖核酸溶液将核糖核酸加入水中，同时加碱，使核糖核酸
溶解；
(2) 、酶解核糖核酸将所述的核糖核酸溶液调至pH7左右，在70'C左右 加入5'-磷酸二酯酶，核糖核酸被分解成5，-腺苷酸、5， 一胞苷酸、5，—尿 苷酸和5—鸟苷酸，得到核苷酸的混合溶液；
(3) 、过滤除去固体杂质，保留滤液；
(4) 、脱色柱脱色，上述滤液通过装有酸性脱色树脂或颗粒活性炭的脱色 柱，脱去色素、残存的蛋白质和其它杂质，得到无色透明的混合核苷酸脱色液；
(5) 、钠滤浓縮上述混合核苷酸脱色液通过平均孔径为2纳米的钠滤膜， 滤除部分水及小分子量的杂质，得到浓缩液即为混合核苷酸产品；
(6) 、喷雾干燥浓縮液进一步经喷雾干燥获得混合核苷酸粉末。 首先在严格控制核糖核酸酶解液质量的前提下，经过滤除去固体杂质，得
到清亮、透明但带着原料核糖核酸固有的色素的酶解液；该酶解液经过脱色柱， 脱去由原料核糖核酸带来的色素和溶解态的蛋白质及某些杂质，酶解滤液的质 量进一步提升，得到为无色透明的脱色液；脱色液再通过平均孔径为2纳米的 钠滤膜除去部分水及脱色液中残存的小分子量杂质。在浓縮的同时，溶液得到 进一步净化。
通过以上质量控制过程，针对酶解液中可能存在的杂质的性质，采用各种 不同的方式逐步去除杂质，得到高质量的钠滤浓縮液；再经喷雾干燥，就得到 髙质量的混合核苷酸粉末，本发明的生产核苷酸的工艺，核苷酸可作为营养品。 该工艺路线短，收率高，成本低，排污少；产品含量髙，颜色白，质量好，四 种单核苷酸的比例为天然核苷酸中的比例，是最合理的，从而为制定混合核苷
酸的质量标准，规范核苷酸营养品市场创造了条件。
权利要求
1、一种混合核苷酸的生产方法，其特征在于依次包括以下步骤(1)、制备核糖核酸溶液将核糖核酸加入水中，同时加碱，使核糖核酸溶解；(2)、酶解核糖核酸将所述的核糖核酸溶液调至中性，加入5’-磷酸二酯酶，核糖核酸被分解成5’-腺苷酸、5’—胞苷酸、5’—尿苷酸和5—鸟苷酸，得到核苷酸的混合溶液；(3)、过滤除去固体杂质，保留滤液；(4)、脱色柱脱色上述滤液通过脱色柱，脱去色素、残存的蛋白质和其它杂质，得到无色透明的混合核苷酸脱色液；(5)、钠滤浓缩上述混合核苷酸脱色液通过钠滤膜，滤除部分水及小分子量的杂质，得到浓缩液即为混合核苷酸产品。
2、 根据权利要求1所述的一种混合核苷酸的生产方法，其特征在于该生 产方法还包括步骤(6):由上述步骤(5)所得浓縮液经喷雾干燥制得混合核苷 酸粉末。
全文摘要
本发明涉及一种混合核苷酸的生产方法，依次包括如下步骤制备核糖核酸溶液；酶解核糖核酸溶液；过滤；脱色柱脱色；钠滤浓缩。严格控制核糖核酸溶液酶解反应的工艺条件，使所得的核苷酸混合液的高压液相色谱图中，5’-腺苷酸、5’-胞苷酸、5’-尿苷酸和5-鸟苷酸四个主峰的面积之和达到总峰面积的95％左右；过滤除去固体颗粒；微滤除去颗粒度更小的杂质；脱色柱脱色，同时脱去溶液中残存的蛋白质和其他杂质；钠滤浓缩除去部分水和小分子量的杂质。经再三净化的溶液纯度已经相当高，浓缩液可直接作为混合核苷酸产品使用，也可以进一步通过喷雾干燥制得混合核苷酸粉末。本发明工艺路线短，收率高，成本低，排污少；产品含量高、安全性好。
文档编号C12P19/30GK101376906SQ20081015548
公开日2009年3月4日 申请日期2008年10月6日 优先权日2008年10月6日
发明者张剑秋 申请人:张剑秋