专利名称：一种蓝莓脱色多糖的制备方法
技术领域：
本发明涉及蓝莓加工技术领域，尤其是涉及一种蓝莓脱色多糖的制备方法。
背景技术：
蓝莓(Blueberry)，学名越桔，属于杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Vaccinium spp)植物。蓝莓为小浆果，果实呈蓝色，近圆形，果肉细腻，种子极小，甜酸适度，且具有香爽宜人的香气，可鲜食，也可作为食品、饮料、医药等的原料。蓝莓果实中富含水果中常见的多种营养成分，以及花色素苷、类黄酮等抗氧化剂和细菌生长抑制剂，属高氨基酸、高锌、高铁、高铜、高维生素的果品，具有良好的营养保健作用，包括增强视力、消除眼睛疲劳、防止脑神经老化、抗癌、软化血管、增强人体免疫等，其营养价值远高于苹果、葡萄、橘子等水果， 堪称“世界水果之王”，蓝莓果汁为紫红色，色泽较深，经脱色后能有效地解决其污染皮肤、 口唇、牙齿等特点。多糖(polysaccharide)是指由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个以上的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物。由相同单糖组成的多糖称为纯多糖，如淀粉、纤维素和糖原；以不同单糖组成的多糖称为杂多糖，如阿拉伯胶是由戊糖和半乳糖等组成。多糖不是一种纯粹的化学物质，而是聚合程度不同的物质的混合物。多糖类一般不溶于水，无甜味，不能形成结晶，无还原性和变旋现象。多糖也是糖苷，所以可以水解，在水解过程中，往往产生一系列的中间产物，最终完全水解得到单糖。脱色是指脱去液体或固体物料的色素，现有蓝莓多糖的脱色方法操作较复杂，且制得的多糖纯度较低。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是操作较复杂，且制得的多糖纯度较低。为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案一种蓝莓脱色多糖的制备方法，其包括步骤Sl 将预处理得到的蓝莓果浆加入Vis纤维素酶，在50-60°C条件下搅拌酶解 60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟；步骤S2 将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为5-10g，上样液为稀释5-10倍的蓝莓果汁，上样量为 400-500ml，流速为 l_3ml/min ；步骤S3 将经步骤S2后得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥对-4他，即得到蓝莓脱色多糖粉末。 进一步地，所述步骤Sl中，所述预处理步骤包括取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟，置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎。进一步地，所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为1 5-1 10。进一步地，所述步骤Sl中，酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为1% -5% ml/100ml。进一步地，所述纤维素酶为Vis纤维素酶。进一步地，所述步骤Sl中，所述Vis纤维素酶的活力单位为5.0X104U/g。本发明蓝莓脱色多糖的制备方法应用酶法降解蓝莓纤维并去除蛋白即脱色与蛋白去除相结合制成蓝莓脱色多糖粉末，其操作简单，多糖纯度较高，可达80%-90 %。
图1为本发明蓝莓脱色多糖的制备方法的流程示意图；图2为本发明蓝莓脱色多糖的温度对脱色效果的影响对比示意图；图3为本发明蓝莓脱色多糖的加热时间对脱色效果的影响对比示意图；图4为本发明蓝莓脱色多糖的料液比对脱色效果的影响对比示意图；图5为本发明蓝莓脱色多糖的上样液浓度比对脱色效果的影响对比示意图；图6为本发明蓝莓脱色多糖的流速比对脱色效果的影响对比示意图。
具体实施例方式下面结合附图详细说明本发明的优选实施例。请参阅图1，图1为本发明蓝莓脱色多糖的制备方法的流程示意图。本发明蓝莓脱色多糖的制备方法是应用酶法降解蓝莓纤维并去除蛋白制成蓝莓脱色多糖粉末。所述方法包括下述步骤步骤Sl 将预处理得到的蓝莓果浆加入纤维素酶，在50-60°C条件下搅拌酶解 60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟；步骤S2 将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为5-10g，上样液为稀释5-10倍的蓝莓果汁，上样量为 400-500ml，流速为 l_3ml/min ；步骤S3 将经步骤S2后得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥对-4他，即得到蓝莓脱色多糖粉末。所述步骤Sl中，所述预处理步骤包括取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟， 置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎；所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为 1:5-1: 10。所述步骤Sl中，所述纤维素酶为Vis纤维素酶。所述步骤Sl中，所述Vis纤维素酶的活力单位为5. OX 104U/g，酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为-5%ml/100ml。以下结合具体实施例对本发明做进一步说明。实施例1取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟，置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎；所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为1 5。将预处理得到的蓝莓果浆加入Vis纤维素酶，在50°C条件下搅拌酶解60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟，所述Vis 纤维素酶的活力单位为5. OX 104U/g，酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为 l%ml/100ml ；将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附
4树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为5g，上样液为稀释5倍的蓝莓果汁，上样量为450ml， 流速为lml/min ；再将经上述步骤得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥对-4他，即得到蓝莓脱色多糖粉末。实施例2取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟，置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎；所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为1 10。将预处理得到的蓝莓果浆加入Vis纤维素酶，在60°C条件下搅拌酶解60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟，所述 Vis纤维素酶的活力单位为5. 0万U/g，酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为 5% ml/100ml ；将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为10g，上样液为稀释5倍的蓝莓果汁，上样量为500ml， 流速为3ml/min ；再将经上述步骤得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥对-4他，即得到蓝莓脱色多糖粉末。实施例3取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟，置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎；所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为1 7。将预处理得到的蓝莓果浆加入Vis纤维素酶，在55°C条件下搅拌酶解60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟，所述Vis 纤维素酶的活力单位为5. O万U/g，酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为3% ml/100ml ；将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为6g，上样液为稀释10倍的蓝莓果汁，上样量为400ml，流速为2ml/min ；再将经上述步骤得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥 24-48h,即得到蓝莓脱色多糖粉末。实施例4取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟，置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎；所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为1 8。将预处理得到的蓝莓果浆加入Vis纤维素酶，在58°C条件下搅拌酶解60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟，所述Vis 纤维素酶的活力单位为5. O万U/g，酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为3% ml/100ml ；将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为6g，上样液为稀释6倍的蓝莓果汁，上样量为460ml，流速为2ml/min ；再将经上述步骤得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥 24-48h,即得到蓝莓脱色多糖粉末。实施例5取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟，置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎；所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为1 6。将预处理得到的蓝莓果浆加入Vis纤维素酶，在58°C条件下搅拌酶解60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟，所述Vis 纤维素酶的活力单位为5. O万U/g，酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为4% ml/100ml ；将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为8g，上样液为稀释5倍的蓝莓果汁，上样量为500ml，流速为3ml/min ；再将经上述步骤得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥 24-48h,即得到蓝莓脱色多糖粉末。
实施例6取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟，置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎；所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为1 10。将预处理得到的蓝莓果浆加入Vis纤维素酶，在59°C条件下搅拌酶解60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟，所述 Vis纤维素酶的活力单位为5. 0万U/g，酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为 3% ml/100ml ；将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为10g，上样液为稀释8倍的蓝莓果汁，上样量为430ml， 流速为2ml/min ；再将经上述步骤得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥对-4他，即得到蓝莓脱色多糖粉末。实施例7取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟，置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎；所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为1 10。将预处理得到的蓝莓果浆加入Vis纤维素酶，在52°C条件下搅拌酶解60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟，所述 Vis纤维素酶的活力单位为5. O万U/g,酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为 4% ml/100ml ；将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为10g，上样液为稀释5倍的蓝莓果汁，上样量为500ml， 流速为3ml/min ；再将经上述步骤得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥对-4他，即得到蓝莓脱色多糖粉末。实施例8取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟，置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎；所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为1 9。将预处理得到的蓝莓果浆加入Vis纤维素酶，在60°C条件下搅拌酶解60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟，所述Vis 纤维素酶的活力单位为5. O万U/g，酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为4% ml/100ml ；将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为7g，上样液为稀释5倍的蓝莓果汁，上样量为400ml，流速为3ml/min ；再将经上述步骤得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥 24-48h,即得到蓝莓脱色多糖粉末。请参阅图2-图6，本发明对于脱色所用的大孔吸附树脂依据为脱色率的大小测定实验。取未脱色及脱色后的果汁anl，至于25mL容量瓶中，加去离子水，以去离子水做参比，对脱色率供试品进行全波长扫描，确定最大波长为523nm，以此波长为检测波长，检测供试品溶液的吸光度，并计算脱色率。脱色率=(脱色前吸光度-脱后吸光度/脱前吸光度)X 100% (I)实验材料为稀释五倍的蓝莓果汁以及三种大孔吸附树脂分别为AB-8、LKS05、 LKSO1。a)温度对脱色效果的影响因为实验材料为果汁，温度过高会影响果汁的有效成分，故只选择30°C、4(TC、 50°C三个温度进行试验，3g湿树脂中加入40ml果汁，水浴1小时，带入式⑴测脱色率。结果如图2所示。
从图2中可以看出LKSOl的脱色效果比LKS05、AB_8好，且最佳的温度为50°C。b)加热时间对脱色效果的影响因为实验材料为果汁，长时间加热会影响果汁的有效成分，故在50°C下，3g湿树脂中加入40ml果汁，每隔IOmin测一次吸光度。结果如图3所示。从图3可以看出LKSOl的脱色效果比LKS05、AB-8好，考虑到果汁不易长时间加热，因此最佳加热时间选择40min。c)料液比对脱色效果的影响3g湿树脂中分别加入30、40、50、60、70ml稀释五倍的果汁，以130r/min，在50°C下水浴40min，在523nm下测吸光度，带入式(I)得脱色率。结果如图4所示。从图4可以看出树脂LKS01、LKS05、AB_8的脱色效果相差不是很大，综合前面两个单因素，脱色效果最好的树脂为LKSOl。d)浓度对脱色率的影响将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为5g，上样液为稀释1、3、5倍的蓝莓果汁，上样量为400ml， 收集时间为8min/管，流速为3ml/min ；从图5可以看出，上样液浓度为稀释5倍的果汁时，脱色效果最好，因此上样液最佳浓度为稀释5倍的果汁。e)流速对脱色率的影响将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为5g，上样液为稀释5倍的蓝莓果汁，上样量为400ml，收集时间为8min/管，流速为l、2、3ml/min ；从图6可以看出，在上样液流速为lml/min时，脱色率最大，故流速选择lml/min。综上，蓝莓多色粗多糖制备的最佳条件为上样液为稀释5倍的蓝莓果汁，上样液流速为lml/min，大孔吸附树脂为5g湿LKS01，收集时间为Smin/管。在最佳条件下，5g湿树脂(LKSOl)可吸附400ml果汁，脱色率达90. 28%。本发明蓝莓脱色多糖的制备方法应用酶法降解蓝莓纤维并去除蛋白即脱色与蛋白去除相结合制成蓝莓脱色多糖粉末，其操作简单，多糖纯度较高，可达80%-90 %。这里本发明的描述和应用是说明性的，并非想将本发明的范围限制在上述实施例中。这里所披露的实施例的变形和改变是可能的，对于那些本领域的普通技术人员来说实施例的替换和等效的各种部件是公知的。本领域技术人员应该清楚的是，在不脱离本发明的精神或本质特征的情况下，本发明可以以其它形式、结构、布置、比例，以及用其它组件、 材料和部件来实现。在不脱离本发明范围和精神的情况下，可以对这里所披露的实施例进行其它变形和改变。
权利要求
1.一种蓝莓脱色多糖的制备方法，其特征在于，其包括步骤Sl 将预处理得到的蓝莓果浆加入纤维素酶，在50-60°C条件下搅拌酶解60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟；步骤S2 将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKSOl大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为5-10g，上样液为稀释5-10倍的蓝莓果汁，上样量为 400-500ml，流速为 l_3ml/min ；步骤S3 将经步骤S2后得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥 24-48h,即得到蓝莓脱色多糖粉末。
2.根据权利要求1所述的蓝莓脱色多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤Sl中，所述预处理步骤包括取适量蓝莓果于沸水中烫1-2分钟，置于常温下冷却后用组织捣碎机捣碎。
3.根据权利要求1或2所述的蓝莓脱色多糖的制备方法，其特征在于，所述蓝莓经预处理后所得沉淀与水的重量比为1:5-1: 10。
4.根据权利要求1所述的蓝莓脱色多糖的制备方法，其特征在于，所述步骤Sl中，酶液体积与蓝莓果浆体积的百分含量(添加量)为-5%ml/100ml。
5.根据权利要求1所述的蓝莓脱色多糖的制备方法，其特征在于，所述纤维素酶为Vis 纤维素酶。
6.根据权利要求5所述的蓝莓脱色多糖的制备方法，其特征在于，所述Vis纤维素酶的活力单位为5.0X104U/go
全文摘要
本发明公开了一种蓝莓脱色多糖的制备方法，包括步骤S1将预处理得到的蓝莓果浆加入纤维素酶，在50-60℃条件下搅拌酶解60-90分钟，酶解后将酶解液置于沸水灭酶1-2分钟；步骤S2将灭酶后的酶解液进行离心，取上清液，将所述上清液通过LKS01大孔吸附树脂进行脱色，其中，大孔树脂装柱为5-10g，上样液为稀释5-10倍的蓝莓果汁，上样量为400-500ml，流速为1-3ml/min；步骤S3将经步骤S2后得到的脱色的多糖溶液浓缩至固含值为15-20后，再冷冻干燥24-48h，即得到蓝莓脱色多糖粉末。本发明蓝莓脱色多糖的制备方法操作简单，多糖纯度较高，可达80％-90％。
文档编号C12P19/14GK102337315SQ20111029617
公开日2012年2月1日 申请日期2011年10月8日 优先权日2011年10月8日
发明者王昌涛, 许小征 申请人:江苏世东野宝植物资源开发有限公司