专利名称：前列腺癌多基因诊断的纳米金标记芯片的制作方法
技术领域：
本发明涉及基因芯片，尤其涉及前列腺癌多基因诊断的纳米金标记芯片。
背景技术：
纳米金标记芯片具有简单、快速、灵敏度高、特异性强、价廉、样品所需量少等优点，可以进行定性及半定量检测。现在纳米金标记芯片技术存在纳米金与探针结合困难，纳米金浓度及显色条件难掌握，以纳米金为标记物的免疫分析法及其它速测技术的开发过程需投入巨大的资金和较长时间。近年来，我国男性前列腺癌(PCa)发病率呈明显上升趋势，在欧美国家，前列腺癌已连续多年居男性恶性肿瘤发病率首位，其发病率超过肺癌，死亡率在男性恶性肿瘤中居 第二位。我国PCa的发病率虽然较低，但发现时多属中晚期，在中国前列腺癌已经成为常见恶性肿瘤。对前列腺癌的早期诊断有助于早期治疗，提高生存率。基因芯片技术具有高通量、高特异性等特点，在疾病诊断等领域应用前景广泛。纳米金为球状生物相容性物质，由惰性硅质组成，表层通常包被一层薄金，可以作为杂交探针应用于单核苷酸多态性(SNP)研究，或者检测癌症等疾病的分子标记。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术不足而提供本发明提供了一种前列腺癌多基因诊断的纳米金标记芯片，所述芯片包含在前列腺癌和前列腺增生中表达差异明显的11个基因、前列腺癌细胞株RNA、纳米金标寡核苷酸探针，所述 11 个基因为 IGFl、P27、AR、PSMA, KLK3、PCNA, Ki_67、KLK1、KLK2、TMPRSS2 和SREBF2。IGFl是由前列腺基质细胞产生并对雄激素的刺激具有反应并通过旁分泌的形式促进前列腺上皮细胞的增殖的生长因子。P27是细胞周期素依赖激酶抑制剂家族中的一种，P27是一个公认的肿瘤抑制基因。AR为雄激素受体。PSMA是前列腺特异性膜抗原。KLK1/KLK2/KLK3/TMPRSS2 :同属于人激肽释放酶基因家族。Ki-67蛋白是一个可靠而迅速地反映恶性肿瘤增生率的指标。PCNA为非组织酸性核蛋白。SREBF2基因编码一种广泛表达的转录因子，这种转录因子通过刺激固醇调节基因的转录来控制胆固醇的动态平衡。较佳的，所述纳米金标寡核苷酸探针的序列如下表
权利要求
1.一种前列腺癌多基因诊断的纳米金标记芯片，其特征在于，所述芯片包含在前列腺癌和前列腺增生中表达差异明显的11个基因DNA、前列腺癌细胞株RNA、纳米金标寡核苷酸探针，所述 11 个基因为 IGFl、P27、AR、PSMA、KLK3、PCNA、Ki-67、KLKl、KLK2、TMPRSS2 和SREBF2。
2.根据权利要求I所述的前列腺癌多基因诊断的纳米金标记芯片，其特征在于，所述芯片为硝酸纤维素制成的芯片。
3.根据权利要求I所述的前列腺癌多基因诊断的纳米金标记芯片，其特征在于，所述芯片载体为氨基修饰的玻璃芯片。
4.根据权利要求3所述的前列腺癌多基因诊断的纳米金标记芯片，其特征在于，所述纳米金标寡核苷酸探针长度为60-70个碱基。
5.根据权利要求I所述的前列腺癌多基因诊断的纳米金标记芯片，其特征在于，所述芯片的纳米金浓度为O. 250D/ml。
6.根据权利要求I所述的纳米金标记芯片，在诊断前列腺癌和前列腺增生的用途。
全文摘要
本发明公开了一种前列腺癌多基因诊断的纳米金标记芯片，主要包含基于经过基因芯片筛选并经荧光定量PCR验证后得到的在前列腺癌和前列腺增生中表达差异明显的11个基因(IGF1、P27、AR、PSMA、KLK3、PCNA、Ki-67、KLK1、KLK2、TMPRSS2、SREBF2)，前列腺癌细胞株RNA，纳米金标寡核苷酸探针，硝酸纤维素制成的芯片。本发明前列腺癌多基因诊断的纳米金标记芯片可应用于临床上对前列腺癌的早期诊断。
文档编号C12Q1/68GK102888450SQ20121000349
公开日2013年1月23日 申请日期2012年1月5日 优先权日2012年1月5日
发明者陈清标, 陈锡彬, 钟惟德 申请人:广州市第一人民医院, 钟惟德, 陈清标, 陈锡彬