专利名称：一种具有ACE抑制活性的plastein反应修饰肽的制备方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域,具体涉及ー种具有ACE抑制活性的plastein反应修饰肽的制备方法。
背景技术：
高血压是引起心血管 疾病的主要因素，与心血管疾病发生的危险性是正相关。血管紧张素转换酶(ACE)在人体血压调节过程中起重要作用，ACE抑制剂通过抑制血管紧张素I向血管紧张素II转换，以及阻止ACE降解缓激肽而起到降血压的作用。由于化学合成的ACE抑制剂对人体健康存在潜在危害，如引发蛋白尿、白细胞减少、停药综合症等，其应用必将受到越来越严格的限制，寻找安全高效的ACE抑制剂已成为当前医学界面临的主要课题。大分子的蛋白质中存在着某些具有ACE抑制活性的肽片段，可以通过酶水解释放出来。蛋白质酶解制备出的ACE抑制肽，其活性相比于蛋白质和氨基酸往往更为显著。目前，利用不同来源蛋白质酶解制备具有ACE抑制活性肽的研究已被广泛开展，先后从日本清酒、沙丁鱼、蛋黄、酸奶、鲣鱼等食品原料中获得ACE抑制活性肽。然而，研究表明绝大多数蛋白质酶解肽的ACE抑制活性都较低，与同浓度化学合成的ACE抑制剂(卡托普利、依那普利等)的活性相差几倍到几百倍左右。因此，酶法制备ACE抑制肽的较低活性已成为其研究与开发的瓶颈。类蛋白(plastein)反应是浓缩的蛋白水解物在合适条件下经蛋白酶作用形成凝胶状物质的反应，它通常被认为是蛋白质水解反应的逆反应。plastein反应在改善多肽功能性和食物蛋白营养性方面显示出巨大的潜力，而且在plastein反应中无需添加任何有机溶剂或化学试剂，一般具有较高的安全性，其必将成为食品エ业的研究热点。plastein反应修饰是改善多肽ACE抑制活性的新途径。
发明内容
本发明的目的是提供ー种具有ACE抑制活性的plastein反应修饰肽的制备方法，以克服现有技术的不足。本发明的技术方案海參和蒸馏水按I : 8-10g/ml的比例匀浆，浆液在45_50°C的温度下搅拌6-8小时，离心得蛋白溶液；将蛋白溶液的pH值调为7. O后加入胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量都为蛋白溶液中蛋白质量的1%，在50°C的温度下酶解3-4小时；将上述所得酶解液浓缩至质量浓度为30% -40%后加入木瓜蛋白酶，加入量为酶解液中蛋白质量的1%，在40-55°C的温度下plastein反应修饰1_2小时制得。本发明以低值海參(爺參)为原料，利用plastein反应修饰制备ー种高活性的ACE抑制肽，所得活性肽安全、无毒，在食品和药品领域具有广阔的应用前景。
具体实施例方式海參和蒸馏水按I : 8-10g/ml (最好是I : 10g/ml)的比例匀浆，浆液在45-500C (最好是45°C )的温度下搅拌6-8小时(最好是7小时)，离心得蛋白溶液；将蛋白溶液的PH值调为7. O后加入胰蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量都为蛋白溶液中蛋白质量的I %，在50°C的温度下酶解3-4小时(最好是4小吋)；将上述所得酶解液浓缩至质量浓度为30% -40% (最好是35% )后加入木瓜蛋白酶，加入量为酶解液中蛋白质量的1%，在40-550C (最好是45°C )的温度下plastein反应 修饰1_2小时(最好是I小时)制得。
权利要求
1.ー种具有ACE抑制活性的plastein反应修饰肽的制备方法，其特征在于海參和蒸馏水按I : 8-10g/ml的比例匀浆，浆液在45-50°C的温度下搅拌6_8小时，离心得蛋白溶液；将蛋白溶液的pH值调为7. O后加入膜蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量都为蛋白溶液中蛋白质量的I %，在50°C的温度下酶解3-4小时；将上述所得酶解液浓缩至质量浓度为30% -40%后加入木瓜蛋白酶，加入量为酶解液中蛋白质量的I %，在40-55°C的温度下plastein反应修饰1-2小时制得。
全文摘要
本发明涉及一种具有ACE抑制活性的plastein反应修饰肽的制备方法，其特征在于以低值海参(茄参)为原料，利用plastein反应修饰的方法制备一种高活性的ACE抑制肽，所得活性肽安全、无毒，在食品和药品领域具有广阔的应用前景。
文档编号C12P21/06GK102690855SQ20121017901
公开日2012年9月26日 申请日期2012年5月24日 优先权日2012年5月24日
发明者刘伟航, 刘尊英, 曾名湧, 朱晓杰, 沈晴晴, 董士远, 赵元晖 申请人:中国海洋大学