一种鹿角胶的制备方法及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了以鹿托盘熬制鹿角胶方法和鹿角胶对肥胖的作用。其特征是以鲜该鹿角胶充分保留了鹿托盘中的营养物质，该鹿角胶加入到药品食品中能起到抑制胰脂肪酶活性的作用，可用于抗肥胖的药品中应用。该鹿角胶能够有效的抑制胰脂肪酶的活性，从而使食物脂肪的吸收受到抑制而达到抗肥胖的作用，适合药品食品应用。该物质可应用于预防及治疗肥胖类疾病。
【专利说明】一种鹿角胶的制备方法及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种鹿角胶的制备方法及其在抗肥胖方面的应用。
[0002]肥胖是一种确定为体内脂肪过量的慢性病。对于全世界肥胖症人口的快速增长，世界卫生组织(WHO)已将肥胖病确定为全球的流行病。在全世界，5亿多人的体重超重，SP体重指数(BMI)为30及以上者。目前肥胖病人口的增长在人类历史上首次超过了患营养不良和传染病的人数。在我国的发病率为10% — 20%，在经济发达国家发病率高达20% —30%或更高。在欧洲某些地区，年龄在55 — 64岁的人群中，约70%的女性和超过70%的男性为肥胖病人或体重过重者。
[0003]随着社会生产力的进步和发展，物质越来越丰富，人们日常生活水平得到改善，尤其是在饮食方面[I]。居民膳食结构和生活习惯发生了很大的变化，随之而来的是糖尿病、高血压、血脂异常等慢性疾病的发病率急剧增加[2]。肥胖作为一种疾病，同时也是许多慢性疾病的重要危险因素，比如，II型糖尿病、心血管病、骨关节病、高血压、免疫功能受损等[3-5]。随着体重的增加，患病的概率也在上升。世界卫生组织已宣布肥胖是最大的全球成年人慢性疾病。肥胖的发生率在发达国家中明显地增长。而在不发达国家中目前增长的比率也很高，美国肥胖的流行比例最高，有35%的人口确定为肥胖。至少有9700万美国人，为超重或肥胖，从I960年以来这个数字在持续增长，趋势不会减慢。在欧洲，英国是肥胖增长率最高的国家之一，为18%。紧接着是法国和德国，在全世界总共有2.5亿以上的人口遭受肥胖。而且，肥胖与死亡率和发病率有关，仅在美国每年它就能够引起300，000多人死亡。超重的人不仅在生理上而且在心理上都会受到不利影响，所以随着肥胖患者的增加，肥胖已日益受到人们的重视[6]。
[0004]市场上销售的减肥药种类繁多，最著名的是Servier公司的左旋酚氟拉明，1996年上市后引起媒体的关组并带来巨大销售额，后因报告有严重的副作用(心脏阀门问题和初期的肺部高血压)，该药在1997年9月被撤销。1997年，美国食品药品监督管理局批准盐酸西布曲明上市，该药可通过其次级(Ml)和初级(M2)胺类代谢产物抑制去甲肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺的再摄取，增加饱食感。2001年在我国进行的西步曲明上市前临床验证结果显示:经过24周的治疗，患者体重可降低(6.52±3.95 ) kg,并能够显著降低空腹和餐后Ih血糖。但大量临床研究发现，服用此类药物较易出现头痛、头晕、口干、口苦、便秘和失眠等不良反应，特别是关于西布曲明对心血管事件的影响一直存有争议。2010 年，SCOUTs ( Sibutramine Cardiovascular Outcomes Trial)公布了其研究结果，这是纳入患者最多、研究时间最长的有关西步曲明心血管安全性的随机双盲安慰剂对照研究，近10000例患者纳入本研究，平均随访3-4年，它评价了已经存在心血管高危因素的肥胖症患者使用西步曲明减重对心血管问题的影响。结果发现，与安慰剂组相比，西步曲明组患者主要终点事件停复苏等)的风险增加了 16%，并由此推断体重下降并未降低心血管疾病的风险。鉴于此结果，西步曲明被宣布撤市，我国食品药品监督管理局也在2010年底宣布停止西步曲明的生产和临床使用[7]。
[0005]立莫纳班是第1个选择性大麻素受体I阻断剂，能够通过抑制食欲并增加外周脂肪组织脂联素mRNA的表达来改善肥胖相关的胰岛素抵抗等，被认为是具有良好临床应用前景的减重药物，但由于其中枢神经系统的不良反应，如抑郁和自杀倾向等，始终未能在美国和中国获准入市，仅从2006年起在56个欧洲等国家上市，并于2009年撤市。
[0006]由于这些药品有着的严重副作用，包括涉及到主动脉阀门泄漏和二尖瓣阀门泄漏的心脏阀门损坏。其它更严重的副作用包括呼吸短促，头晕眼花和死亡，这些副作用的严重性，已促使在2000年欧洲委员会决定从2001年4月开始在欧盟禁止销售食欲抑制剂药物。这已明显地减少了世界范围对抗肥胖药物的接受。
[0007]新的观点认为，肥胖是一种有着复杂病理生理原因并需要长期用药才能适当控制的慢性疾病，这样就为新药带来安全性问题。关于目前减肥药不对症的问题，有关专家认为主要是这些药无助于多数病人长期减肥，而且仅有少数病人从其原来的体重减了 5% —10%。毫不奇怪，肥胖药的研究与开发愈来愈强大，目前在开发中的抗肥胖制剂就有200多种，但多数都处在早期阶段。所以，开发出一种安全和真正有效的减肥药将会得到巨大的回报。根据抗肥胖药研究专家的观点，从减肥药市场的发展来看，减肥药有着较大的发展空间，并且需要多种减肥药。
[0008]由于减肥药物越来越多的出现毒副作用的问题，人们也在寻找能代替药物的天然健康的产品，所以市面出现的一些减肥茶等产品，但此类产品减肥的效果不是很理想。人们对减肥产品的需求迫切，本研究旨在应用天然药物生产无毒副作用的减肥产品，达到让人们轻松减肥，健康瘦身的目的。
[0009]鹿角为鹿科动物马鹿或梅花鹿已骨化的角或锯茸后翌年春季脱落的角基，分别习称马鹿角、梅花鹿角、鹿角脱盘。归肝肾经；温肾阳，强筋骨，行血消肿；用于阳痿遗精，腰脊冷痛，阴疽疮疡，乳痈初起，淤血肿痛[8]。现代研究证明，鹿角中胶质25%，磷酸钙50%-60%，碳酸钙及氮化物。另含氨基酸等营养成分。鹿角胶始载于《神农本草经》，名为“白胶”，列为上品[8]。鹿角胶的应用有2000多年的历史，其主要氨基酸应为L -羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸和L -脯氨酸，其中羟脯氨酸为胶原蛋白主要组成成分[9、10]。中医用之补益气血、滋肾生精；主治肾气不足、阳痿羸瘦、精血虚亏、神倦目昏、腰膝无力、妇女血闭不妊、子宫虚冷、崩漏带下等症[11]。
[0010]鹿角胶的现代研究应用
现代研究证明，鹿角胶为鹿角加水煎熬浓缩而成的固体胶，呈黄棕色，上部有黄白色泡沫层，质脆，易碎，断面光亮。其性温，味微甜，有补肾阳、生精血、托疮生肌的作用，适合肾阳不足、畏寒肢冷、阳痿早泄、腰酸腿软者服用，也可用于咯血、尿血、月经过多、偏于虚寒，以及阴疽内陷等病证[15]。
[0011]近年来，鹿角胶由于具有温补肝肾、益精养血的功效，被广泛应用于各类药品中，有文献报道，鹿角胶钙颗粒剂，以鹿角粉制成颗粒剂，具有补钙，温肾阳，强筋骨等功效[16]。采用白茅根、鹿角胶为基本方加味治疗，在临床上观察研究，证明取得了一定的疗效[17]，鹿角胶在妇科临床上也有一定的应用，。适用于肾阳不足，精血亏虚，虚劳羸瘦，吐血尿血之偏于虚寒者，以及阴疽内陷等症，妇人血闭无子，胎动不安，崩中不止。阴虚火旺忌用。[18]鹿角胶是一味兼具滋阴补阳功效的中药，滋而不腻，温而不燥，故亦常在调补气血阴阳，止血熄风中配伍应用，优于在滋阴中加入附、桂等温燥药。[19]临床应用鹿角胶治疗血小板减少症、白细胞减少症、再生障碍性贫血等，能使血象及临床症状获得不同程度的好转，治疗体质虚弱、畏寒肢冷及慢性循环障碍，可使血压上升，体力恢复。
[0012]近年来，鹿角胶配伍小柴胡汤，辨证治疗艾滋病以低热不退、畏寒肢冷为主证者，可明显改善临床症状，对控制艾滋病发展有一定的疗效。
[0013]鹿角胶为助阳之品，虽有甘温之润之特点，但久用或应用不应当常会导致阳升风动，易伤阴动血，故阴虚阳亢、血分有热及胃火炽盛、外感热病均应忌用，且多以开火或黄酒溶代或入丸散、膏剂[20]。
[0014]鹿角胶的药理研究:性激素样作用:鹿角胶给大鼠灌胃，可显著缩短电刺激诱发阴茎勃起的潜伏期限，对雄性大鼠精液囊和前列腺有明显的增重作用，并对雄鼠交配能力有增强趋势。[21]
鹿角胶的补血功效:鹿角胶给贫血小鼠灌胃，可明显增加血红蛋白含量，对红细胞、白细胞、血球压积有不同程度的提高趋势。[22]
鹿角胶的抗疲劳，增强机体免疫能力:鹿角胶可显著提高鼠持续游时间，有明显抗疲劳作用。
[0015]有实验证实鹿角胶溶液能够降低胃黏膜损伤程度，减少溃疡，实验通过肉眼观察，并测量损伤指 数，可见鹿角胶组大鼠胃黏膜充血、水肿、坏死、糜烂程度明显减轻，与无水乙醇组差异有显著性(P〈0.01)，与氢氧化铝组无明显差异(P>0.05)。实验提示鹿角
胶溶液对强烈的胃黏膜损伤剂-无水乙醇造成的大白鼠胃黏膜损伤，能够降低胃黏膜
损伤指数，增强胃黏膜屏障，具有显著的保护作用[23]。
[0016]鹿角胶是临床常用的补益之品，具有补肾阳、益精血之功效，广泛用于肾虚及气血虚寒证。临床配伍得当，可起沉疴于指间。现代实验研究为临床应用提供了新的依据。
[0017]近年来治疗肥胖的各种新方法中有许多是通过抑制胰脂肪酶的活性从而抑制膳食中甘油三酯的吸收。主要原因在于膳食中的甘油三酯大多只有经过食道中脂肪酶作用，降解为甘油二酯、单甘油酯、甘油和脂肪酸后才被人体吸收，而在这些脂肪酶中，胰脂肪酶负责50 %~70 %膳食脂肪类物质的分解和消化。因此有效抑制胰脂肪酶活性，就可达到减少脂肪吸收、控制和治疗肥胖之目的[24]。
[0018]胰脂肪酶是人类消化脂肪的主要酶。胰脂肪酶由胰腺所分泌，至少有三种形式。①甘油一酯水解酶，在胆盐和表面活化剂的作用下，能水解在水油界面上的多种不溶性的甘油酯；②胆固醇酯酶，能水解二级醇和胆固醇酯；③脂肪酶，可水解水溶性酯类。它是胃肠道内主要的脂肪分解酶。由胰腺腺泡细胞分泌。在有胆盐存在时活性增加，分解脂肪为甘油和脂肪酸。最适pH为7~9。应用胰脂肪酶抑制剂可有效抑制胰脂肪酶对脂肪的分解催化作用，达到减少脂肪吸收、控制和治疗肥胖的目的。同单一地调整饮食结构减肥相t匕，脂肪酶抑制剂除了可减轻体重，还对一些肥胖并发症如高血压、高胆固醇和糖尿病有明显的改善作用[25]。
[0019]鹿角胶的抗肥胖作用尚未见有文献报告，本专利为鹿角胶的抗肥胖作用提供了依据。
【发明内容】
[0020]本发明提供了一种具有抗肥胖作用的鹿角胶的制备方法。该种鹿角胶具有显著的抑制胰脂肪酶的作用。它具有能够抑制体重增加，起到预防和治疗肥胖疾病的作用。
[0021 ] 本发明提供了一种鹿角胶的制备方法，适用于工业化生产。
[0022]本发明公开了鹿角胶在抗肥胖药品食品中的应用。
[0023]本发明可以用在抗肥胖类药品食品可接受的载体中。
[0024]本发明的鹿角胶具有抗肥胖作用，鹿角胶能够有效的抑制胰脂肪酶的活性，从而使食物脂肪的吸收受到抑制而达到抗肥胖的作用。本发明所提供的鹿角胶可以在抗肥胖药品食品中应用。
[0025]本发明提供了鹿角胶的制备方法，其特征在于:
选取1000g鹿托盘样品(未粉碎)，加入3倍蒸馏水，放入高压锅中进行提取，每次30min，一天提取8次，提取3天，直至水变清为止。过滤，合并滤液。将滤液浓缩至30(T500ml，放凉，将胶切成Icm3的小块，放入冻干机中冻干3天，即得鹿角胶。
[0026]本发明鹿角胶的抗肥胖作用，其特征在于:
该鹿角胶充分保留 了鹿托盘中的营养物质，该鹿角胶加入到药品食品中能起到抑制胰脂肪酶活性的作用，可用于抗肥胖的药品中应用。该鹿角胶能够有效的抑制胰脂肪酶的活性，从而使食物脂肪的吸收受到抑制而达到抗肥胖的作用，适合药品食品应用。
[0027]本发明的积极效果在于:
应用鹿托盘熬制成的鹿角胶，使得鹿角胶中含有鹿托盘的有效成分。该鹿角胶具有抗肥胖的作用，可以在药品食品的制备中起到抗肥胖的作用。该鹿角胶有能够有效的抑制胰脂肪酶的活性的作用，应用在药品食品中具有使食物脂肪的吸收受到抑制而达到抗肥胖的作用。
[0028]实验例一鹿角胶的制备方法
选取1000g鹿托盘样品(未粉碎)，加入3倍蒸馏水，放入高压锅中进行提取，每次30min，一天提取8次，提取3天，直至水变清为止。过滤，合并滤液。将滤液浓缩至30(T500ml，放凉，将胶切成Icm3的小块，放入冻干机中冻干3天，即得鹿角胶。
[0029]
实验例二鹿角胶对胰脂肪酶的抑制实验
1、实验材料
N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸，氢氧化钠，氯仿，正庚烷，甲醇，硝酸铜，三乙醇胺，氯化钠，羟基苯甲醚，浴铜灵，三油酸甘油酯，磷脂酰胆碱，牛黄胆酸钠，猪胰脂肪酶，
胰脂肪酶抑制率的测定
2、溶液的配制
2.1 TES缓冲盐的配制
取0.005ml的N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸(溶于50ml 0.lmol/L)的NaCl溶液中，制成0.lmol/L的TES缓冲盐，用NaOH调PH值至7.0。
[0030]2.2氯仿正庚烷混合液(溶液二)
分别取氯仿(三氯甲烷)、正庚烷49ml混匀加入2ml甲醇。
[0031]2.3铜试剂的配制(溶剂三)
分别取硝酸铜2.42g,氢氧化钠0.48g，三乙醇胺2.94ml，加三重水200ml，再加入66g的氯化钠用磁力搅拌器振摇混匀而成。
[0032]2.4羟基苯甲醚溶液(溶剂四)
取0.05g羟基苯甲醚溶于100ml氯仿混匀，再加0.1g浴铜灵。
[0033]2.5脂肪乳液
取0.087ml三油酸甘油酯，IOmg磷脂酰胆碱，5mg牛黄胆酸钠溶于9mlTES缓冲盐，超声使其溶解
2.6酶液的配制 用三重水配成lmg/ml
2.7样品用TES缓冲液分别配成浓度为0.5mg/ml, lmg/ml, 2mg/ml.3.实验过程 空白组
脂肪乳液(0.1ml) +三重水(0.05ml)+TES缓冲液(0.1ml) — 37°C水溶加热30min —加入溶剂二 3ml —振摇IOmin —离心IOmin (2000*g)—移除上层液一加入溶剂三Iml —振摇IOmin —离心IOmin (2000*g)—吸取上层液一加入溶剂四1.5ml —在480nm处测定吸光度酶组
脂肪乳液(0.1ml) +酶(0.05ml)+TES缓冲液(0.1ml) — 37°C水溶加热30min —加入溶剂二 3ml —振摇IOmin —离心IOmin (2000*g)—移除上层液一加入溶剂三Iml —振摇IOmin —离心IOmin (2000*g)—吸取上层液一加入溶剂四1.5ml —在480nm处测定吸光度
样品组
脂肪乳液(0.1ml) +酶(0.05ml) +样品溶液(0.1ml) — 37°C水溶加热30min —加入溶剂二 3ml —振摇IOmin —离心IOmin (2000*g)—移除上层液一加入溶剂三Iml —振摇IOmin —离心IOmin (2000*g)—吸取上层液一加入溶剂四1.5ml —在480nm处测定吸光度
4.实验结果
【权利要求】
1.一种具有抗肥胖作用的鹿角胶的制备方法 具体方法:选取1000g鹿托盘样品(未粉碎)，加入3倍蒸馏水，放入高压锅中进行提取，每次30min，一天提取8次，提取3天，直至水变清为止，过滤，合并滤液，将滤液浓缩至30(T500ml，放凉，将胶切成lcm3的小块，放入冻干机中冻干3天，即得鹿角胶。
2.根据权利要求1，所得的鹿角胶具有抗肥胖的作用。
3.根据权利要求1，所得的鹿角胶可用于制作预防或治疗肥胖的药物或健康食品。
4.根据权利要求1，所得的鹿角胶可以制成鹿角膏，鹿角胶软糖，鹿角胶饮料，鹿角胶巧克力等具有抗肥胖作用的健康功能性`食品。
【文档编号】A23L2/38GK103768098SQ201210408029
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2012年10月23日 优先权日:2012年10月23日
【发明者】郑毅男, 高畅, 张传奇, 王全凯 申请人:郑毅男