一种超声波辅助提取、酶解制备具有醒酒功能蚬汁的方法
【专利摘要】本发明公开了一种超声波辅助提取、酶解制备具有醒酒功能蚬汁的方法，包括以下步骤：河蚬暂养吐沙，清洗，加入水，超声波辅助提取；真空抽滤，滤液调节pH值，加入胰蛋白酶与碱性蛋白酶的复合型蛋白酶，超声波辅助两种蛋白酶协同酶解；灭酶，超滤膜分离浓缩，得到有醒酒功能的蚬汁。本发明的方法与现有的热水提取法区别在于本发明利用超声波作用将河蚬中水溶性的有效成分充分萃取出来，并利用超声波辅助两种蛋白酶协同酶解得到利于吸收的具有醒酒功能的蚬汁，通过超滤膜分离浓缩技术获得的蚬汁浓缩液有效成分含量高，醒酒作用显著。本发明具有工艺简单、效率高、省时、节能、增收等优点，制备的蚬汁具有显著的醒酒功能，适合工业化生产。
【专利说明】一种超声波辅助提取、酶解制备具有醒酒功能蚬汁的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及超声波辅助水提取、酶解制备蚬汁的方法，属于水产加工领域。
【背景技术】
[0002]河蚬又称黄蚬，是一种淡水贝类，其生长速度快、繁殖能力强，养殖产量大，资源极其丰富。河蚬含有丰富的蛋白质、糖原、必需氨基酸、牛磺酸、多种维生素以及钙、磷、铁、硒等具有特殊生理作用的矿物质，还含有活性肽等生理活性物质，具有很高的保健作用。《本草纲目》中记载，“蚬，主治开胃、压丹石药毒、去暴热、名目、利小便、解酒毒、治目黄”。
[0003]蚬汁味道鲜美，现已有浓缩蚬汁调味品走进市场，其营养丰富、鲜味极浓，有“液体味精”的美誉，是理想的调味品。更重要的是蚬汁被我国民间视为保肝良品，有“喝汤而不吃肉”之说；在台湾、日本及韩国，蚬汁尤其受到人们的喜爱，每年韩国从我国进口数万吨新鲜河蚬作解酒护肝药膳之用。由于蚬汁具有良好的保健作用和药用疗效，可以以蚬汁为原料开发成保健品以及将蚬汁与一定的中药配伍组成复方药。蚬汁味道鲜美，可以制成蚬汁调味料或者火锅底料。
[0004]目前我国有关于河蚬及尤其是蚬汁提取研究较少。蚬汁的提取主要采用热水提取的方式，此方法提取效率低。超声波技术具有省时、节能、避免常规提取法对热敏物质的破坏、提取效率高的优点，广泛应用于多种物质的提取。如专利CN102388987B公开了一种超声波辅助提取茶油的方法，专利CN101863811B公开了一种柑橘类胡萝卜素的绿色超声波辅助提取方法。但通过文献检索，在河蚬蚬汁的制备以超声波辅助提取、酶解技术方面，未见与本发明相同的技术报道。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于为解决热水提取蚬汁技术中存在的效率低、能耗大、耗时长，成本高，蚬汁的有效成分含量低且吸收效率低等技术难题，提供一种超声波辅助提取、酶解具有醒酒作用蚬汁的方法。本发明在保持河蚬原料完整不影响二次使用的前提下，利用超声波作用提高并加快河蚬中水溶性有效成分的溶出，并利用超声波辅助两种蛋白酶协同酶解以达到提高蚬汁吸收率的效果，结合超滤膜分离浓缩技术获得的蚬汁浓缩液有效成分含量高，醒酒作用显著。
[0006]为达到上述目的，本发明的技术方案在于:一种超声波辅助提取、酶解具醒酒作用蚬汁的方法，其步骤包括:
一、超声波辅助水提取:河蚬暂养吐沙，清洗，加入水，超声波辅助提取，得到水提取液；
二、超声波辅助酶水解:真空抽滤水提取液，调节pH值，加入复合型蛋白酶，超声波辅助酶解，灭酶，得到酶解液；
三、分离浓缩:超滤膜分离浓缩酶解液，得到有醒酒作用的蚬汁。
[0007]优选地，步骤一所述的河蚬为经人工挑拣去除蚬壳和其他杂物的新鲜河蚬，按料液比1:1-1:3加入水，超声波辅助提取的条件为温度80-100 °C，超声波功率100-700 ff/Kg河蚬，超声波频率20 KHZ，时间3-15 min。
[0008]优选地，步骤二所述的真空抽滤的真空度为0.1 MPa, pH值调节至7.0-8.0，加入胰蛋白酶(Trypsase):碱性蛋白酶(Alcalase) =3:1的复合型蛋白酶,复合型蛋白酶的加入量为1500-2000 U/mL蚬汁，超声波辅助酶解的条件为温度50-55 °C，超声波频率20 KHZ,超声波功率250-500 W，时间6-10 min，灭酶的条件是100 °C下加热5 min。
[0009]优选地，步骤三所述的超滤膜分离浓缩条件为截留分子量为5 kDa的聚砜中空纤维超滤膜，以0.4-0.5 MPa压力，30 °C下超滤浓缩，保留透过液得到蚬汁。
[0010]本发明的有益效果是:根据本发明，能够提供提取效率高、能耗低、提取时间短、吸收率高、有效成分含量高、醒酒作用显著的蚬汁。
【具体实施方式】
[0011]采用微量凯氏定氮法测定蚬汁的氮含量；采用波美比重计测定蚬汁的波美度；采用气象色谱法测定小鼠血清中乙醇浓度。
[0012]实施例1
新鲜河蚬经人工挑拣去除蚬壳和其他杂物，放入暂养池，进行暂养吐沙，吐沙完毕后倒入清洗池中进行清洗，称取清洗干净的河蚬于超声波提取容器中，按料液比1: 3加入水，在超声波功率500 W/Kg河蚬、频率20 KHZ,90 °C条件下，超声波辅助提取5 min，得到水提取液；在真空度0.1 Mpa条件下，真空抽滤水提取液，得到抽滤液，调节pH值至7.2，加入1500 U/mL蚬汁的复合型蛋白酶(复合型蛋白酶的组成为:胰蛋白酶(Trypsase):碱性蛋白酶(Alcalase) =3:1)，在超声波功率300 W、频率20 KHZ,55 °C条件下，超声波辅助酶水解
7min,在100 °C下加热灭酶5 min,得到酶水解液；采用截留分子量为5 kDa的聚砜中空纤维超滤膜，以0.4 MPa压力，30 °C下超滤浓缩酶水解液，保留透过液得到蚬汁。蚬汁的氮含量为79.4% ;波美度为34° Bx ；50% (v/v)乙醇模型(12mL乙醇/kg体重)小鼠(体重约20g)灌胃蚬汁0.4 mL, Ih后小鼠血清乙醇清除率达到28.8%。
[0013]实施例2
新鲜河蚬经人工挑拣去除蚬壳和其他杂物，放入暂养池，进行暂养吐沙，吐沙完毕后倒入清洗池中进行清洗，称取清洗干净的河蚬于超声波提取容器中，按料液比1:2加入水，在超声波功率400 W/Kg河蚬、频率20 KHZ,90 °C条件下，超声波辅助提取10 min，得到水提取液；在真空度0.1 Mpa条件下，真空抽滤水提取液，得到抽滤液，调节pH值至7.4，加入1800 U/mL蚬汁的复合型蛋白酶(复合型蛋白酶的组成为:胰蛋白酶(Trypsase):碱性蛋白酶(Alcalase) =3:1)，在超声波功率400 W、频率20 KHZ,52 °C条件下，超声波辅助酶水解
8min,在100 °C下加热灭酶5 min,得到酶水解液；采用截留分子量为5 kDa的聚砜中空纤维超滤膜，以0.4 MPa压力，30 °C下超滤浓缩酶水解液，保留透过液得到蚬汁。蚬汁的氮含量为84.2% ;波美度为36° Bx ；50% (v/v)乙醇模型(12mL乙醇/kg体重)小鼠(体重约20g)灌胃蚬汁0.4 mL, Ih后小鼠血清乙醇清除率达到30.8%。
[0014]实施例3
新鲜河蚬经人工挑拣去除蚬壳和其他杂物，放入暂养池，进行暂养吐沙，吐沙完毕后倒入清洗池中进行清洗，称取清洗干净的河蚬于超声波波提取容器中，按料液比1:1加入水，在超声波功率600 W/Kg河蚬、频率20 KHZ,90 °C条件下，超声波辅助提取6 min，得到水提取液；在真空度0.1Mpa条件下，真空抽滤水提取液，得到抽滤液，调节pH值至7.8，加入1600 U/mL蚬汁的复合型蛋白酶(复合型蛋白酶的组成为:胰蛋白酶(Trypsase):碱性蛋白酶(Alcalase) =3:1)，在超声波功率400 W、频率20 KHZ,50 °C条件下，超声波辅助酶水解
8min,在100 °C下加热灭酶5 min,得到酶水解液；采用截留分子量为5 kDa的聚砜中空纤维超滤膜，以0.4 MPa压力，30 °C下超滤浓缩酶水解液，保留透过液得到蚬汁。蚬汁的氮含量为75.6% ;波美度为33° Bx ；50% (v/v)乙醇模型(12mL乙醇/kg体重)小鼠(体重约20g)灌胃蚬汁0.4 mL, Ih后小鼠血清乙醇清除率达到26.2%。
[0015]以上所述，仅为本发明的【具体实施方式】，并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种超声波辅助提取、酶解具醒酒功能蚬汁的方法，包括以下步骤: (1)河蚬暂养吐沙，清洗，加入水，超声波辅助提取蚬汁； (2)真空抽滤，调节pH值，加入胰蛋白酶与碱性蛋白酶的复合型蛋白酶，超声波辅助两种蛋白酶协同酶解，灭酶； (3)超滤膜分离浓缩酶解液，得到有醒酒作用的蚬汁。
2.根据权利要求1所述的超声波辅助提取、酶解具醒酒功能蚬汁的方法，其特征在于:步骤(I)所述的河蚬为经人工挑拣去除蚬壳和其他杂物的新鲜河蚬，按料液比1:1-1:3加入水，超声波辅助提取的条件为温度80-100 V，超声波功率100-700 ff/Kg河蚬，超声波频率20 KHZ，提取时间3-15 min。
3.根据权利要求1所述的超声波辅助提取、酶解具醒酒功能蚬汁的方法，其特征在于:步骤(2)所述的真空抽滤的真空度为0.1 MPa, pH值调节至7.0-8.0，加入胰蛋白酶(Trypsase):碱性蛋白酶(Alcalase) =3:1的复合型蛋白酶，复合型蛋白酶的加入量为1500-2000 U/mL蚬汁，超声波辅助酶解的条件为温度50-55 °C，超声波频率20 KHZ，超声波功率250-500 W，时间6-10 min，灭酶的条件是100 °C下加热5 min。
4.根据权利要求1所述的超声波辅助提取、酶解具醒酒功能蚬汁的方法，其特征在于:步骤(3)所述的超滤膜分离浓缩条件为截留分子量为5 kDa的聚砜中空纤维超滤膜，以0.4-0.5 MPa压力，30 °C下超滤浓缩，保留透过液得到蚬汁。
【文档编号】A23L1/221GK104366416SQ201410546863
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2014年10月16日 优先权日:2014年10月16日
【发明者】朱小燕, 李相前, 顾姝妮 申请人:淮阴工学院