本发明属于保健品领域，具体涉及一种含有青梅的抗氧化保健食品组合物及其制备方法。
背景技术：
：青梅，又称果梅，酸梅，为蔷薇科植物，是我国盛产的特色水果之一。它是一种药食两用果实，不仅营养丰富，还具有许多保健功能。青梅果实含有多种有机酸、氨基酸、酚类及人体必需的微量元素，具有延缓衰老、调节肠胃、生津止渴、消除疲劳、抗过敏、抗氧化等功效。青梅果实具有高酸、低糖的特点，糖酸比为0.2，不宜鲜食，主要作为加工各种梅制品的原料使用，如乌梅干、果脯、蜜饯、饮料、果酒等。氧化应激是由活性氧自由基和活性氮自由基的产生和清除失衡引起。近年来，体内过剩自由基引起的心脑血管疾病，癌症，骨质疏松的病人日渐增加，通过抗氧化物质的作用清除体内过量的自由基是减少此类疾病发生的最主要而有效的方法。然而，体内自然产生的抗氧化物质的数量会随着年龄的增长逐年减少，导致机体出现明显的衰老和非健康状态，中老年人体内产生的抗氧化物质明显不足，需要摄入外援的抗氧化物质补充。研究表明黄酮类、异黄酮类、多酚类、芪类化合物、甘草水提取物等多种天然的物质均具有显著的抗氧化活性，这些天然存在的氧化功效能力不一，但若对这些天然产物加强综合利用对预防相关疾病具有非常重要的意义。中国专利申请200910037257.3公开了一种具有增强免疫力和抗氧化功能的保健食品，该保健食品的活性组分及其重量份配比是：灵芝30～150、白术3～50、茯苓3～50、薏苡仁3～50、黄精3～50、枸杞子3～50、麦冬3～35、党参3～35。该发明保健食品具有提高免疫力，增强抗氧化，促进健康状况的作用。中国专利申请201510701312.X公开了一种抗氧化功能的保健食品，包括以下重量份的原料：灵芝提取物1～30份、茯苓提取物1～30份、猴头提取物1～60份、枸杞提取物1～60份、亮菌提取物1～30份、玛卡提取物1～30份、肉豆蔻提取物1～30份、马勃提取物1～30份。该发明保健食品精选天然提取物，安全无毒作用，具有抗氧化的保健功能。技术实现要素：为了解决现有技术存在的技术问题，本发明的目的在于提供一种含有青梅的抗氧化保健食品组合物及其制备方法，所述的抗氧化保健食品组合物风味较佳，能有效地清除体内过量的自由基，具有较好的抗氧化作用，对黄褐斑的治疗效果较佳，且易于保存。本发明通过如下技术方案以实现上述目的：一种含有青梅的抗氧化保健食品组合物由以下重量份数的制备原料组成：青梅原汁30～40份、仙人掌果实萃取物20～30份、桦褐孔菌发酵菌粉10～15份、燕麦β-葡聚糖10～15份和L-赖氨酸10～15份。优选地，所述的抗氧化保健食品组合物由以下重量份数的制备原料组成：青梅原汁35份、仙人掌果实萃取物30份、桦褐孔菌发酵菌粉10份、燕麦β-葡聚糖15份和L-赖氨酸10份。进一步地，所述的仙人掌果实萃取物的制备方法包括以下步骤：取仙人掌果实洗净，按料液比为1:8的比例加入水，进行匀浆处理，加入0.05％wt混合酶，搅拌均匀，于45～50℃保温进行酶解60min，加入2％wt稳定剂，在85℃条件下回流提取2次，过滤，合并滤液，往滤液中加入乙醇直至含醇量为90％，静置12h后，在10000r/min，4℃条件下离心15min得沉淀，将沉淀冷冻干燥得到仙人掌果实萃取物。进一步地，所述的仙人掌果实萃取物制备方法中的混合酶为纤维素酶和甘露聚糖酶以(2～4):(0.5～1)的质量比组成；稳定剂为β-环糊精和海藻糖以(0.5～1):(2～6)的质量比组成。优选地，所述的仙人掌果实萃取物制备方法中的混合酶为纤维素酶和甘露聚糖酶以3:1的质量比组成；稳定剂为β-环糊精和海藻糖以1:4的质量比组成。进一步地，所述的桦褐孔菌发酵菌粉的制备方法包括以下步骤：(1)取桦褐孔菌菌株接种于PDA斜面培养基中，28℃避光培养至菌丝长满斜面，然后取约1cm2斜面菌丝接种于装有100mL液体种子培养基的500mL三角瓶中，置于旋转式摇床，200rpm，28℃下培养1周，即得液体种子；(2)将液体种子按10％接种量转入装有3L发酵培养基的发酵罐(8L)中，通气量150L/h，搅拌转速150r/min，28℃下培养1周，即得桦褐孔菌发酵液；(3)将桦褐孔菌发酵液冷冻干燥，即得桦褐孔菌发酵菌粉；所述步骤(1)中的液体种子培养基的配方为：葡萄糖2～4％w/v、蛋白胨0.5～1％w/v、酵母膏0.1～0.3％w/v、柠檬酸铵0.1～0.3％w/v、KH2PO40.2～0.4％w/v、MgSO40.2～0.4％w/v，溶剂为水，用柠檬酸调节pH至4.5；所述步骤(2)中的发酵培养基的配方为：黄豆粉2～4％w/v、麦芽糖2～4％w/v、酵母膏0.2～0.5％w/v、柠檬酸铵0.1～0.3％w/v、KH2PO40.2～0.4％w/v、MgSO40.2～0.4％w/v、CaCO30.02～0.05％w/v、维生素B10.005～0.01％w/v，溶剂为水，用柠檬酸调节pH至4.5。本发明所述的桦褐孔菌菌株购自中国林业微生物菌种保藏管理中心，所述的PDA培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基，为市售产品，购自上海博微生物科技有限公司。进一步地，所述的青梅原汁制备方法为：取青梅，洗净，在沸水中热烫3～5min，放凉后去核，将果肉连同果皮切成小块，进行匀浆处理，再用胶体磨研磨1～2次，得青梅原汁。此外，本发明还提供一种所述的抗氧化保健食品组合物的制备方法，包括以下步骤：往青梅原汁加入水以1:10～1:15的比例进行稀释，加入L-赖氨酸，搅拌均匀，在真空度0.08MPa，温度50℃条件下进行浓缩15～20min，然后加入仙人掌果实萃取物、桦褐孔菌发酵菌粉和燕麦β-葡聚糖，混匀，在4℃，45～50MPa的条件下均质10～20min，然后在4℃，15～20MPa的条件下均质50～100min，冷冻干燥，即得抗氧化保健食品组合物，其中，所述的青梅原汁、仙人掌果实萃取物和桦褐孔菌发酵菌粉均由上述方法制备而成。进一步地，本发明所述的抗氧化保健食品组合物还可添加适当的辅料，制成颗粒剂、片剂、胶囊剂等常见的剂型，方便服用。本发明将青梅原汁稀释后，加入L-赖氨酸，在真空条件下进行浓缩，大大降低了青梅的苦涩味，并较好地保持青梅原汁的颜色，改善风味。仙人掌果实萃取物含有丰富的植物营养素和抗氧化性，但由于其细胞粗大，壁厚，且黏度较高，其有效成分的萃取效率往往比较低。纤维素酶可以分解仙人掌果实的细胞壁纤维，使有效成分易于从胞内扩散出来，从而有效地被萃取，而甘露聚糖酶可作用于仙人掌果实黏液中多糖的糖苷键，使复杂的多糖降解为低分子糖类，进而降低黏度，当纤维素酶和甘露聚糖酶以3:1的质量比组成时，提高仙人掌果实萃取物的萃取效果最佳。此外，在萃取过程中添加β-环糊精和海藻糖作为稳定剂，利用β-环糊精的孔腔结构可进一步降低仙人掌果实萃取液的黏度，并防止回流萃取过程中有效成分形成凝胶，发生絮凝现象，而海藻糖具有优异的生物学保护特性，可有效地防止蛋白质变性，保护仙人掌果实萃取物中超氧化物歧化酶(SOD)的活性。与现有技术相比，本发明的有益效果为：(1)本发明在制备仙人掌果实萃取物过程中添加纤维素酶和甘露聚糖酶进行酶解后，再进行回流萃取，并在萃取过程中添加β-环糊精和海藻糖作为稳定剂，大大提高了仙人掌果实萃取物的萃取效率，并且有效地保存萃取物中的活性成分。(2)本发明提供的抗氧化保健食品组合物配伍科学，各组分相互协调，全面而系统地发挥清除体内过量自由基的效果，具有较好的抗氧化作用，对黄褐斑的治疗效果较佳。具体实施方式以下通过具体实施方式进一步描述本发明，但本发明不仅仅限于以下实施例。实施例1桦褐孔菌发酵菌粉制备本发明桦褐孔菌发酵菌粉的制备方法包括以下步骤：(1)培养基配制：液体种子培养基的配制：取葡萄糖3g、蛋白胨0.6g、酵母膏0.2g、柠檬酸铵0.1g、KH2PO40.3g、MgSO40.3g，溶于100mL水，用柠檬酸调节pH至4.5；发酵培养基的配制：取黄豆粉90g、麦芽糖90g、酵母膏12g、柠檬酸铵6g、KH2PO49g、MgSO49g、CaCO31.2g、维生素B10.15g，溶于3L水，用柠檬酸调节pH至4.5。(2)桦褐孔菌发酵菌粉的制备：S1：取桦褐孔菌菌株接种于PDA斜面培养基中，28℃避光培养至菌丝长满斜面，然后取约1cm2斜面菌丝接种于装有100mL液体种子培养基的500mL三角瓶中，置于旋转式摇床，200rpm，28℃下培养1周，即得液体种子；S2：将液体种子按10％接种量转入装有3L发酵培养基的发酵罐(8L)中，通气量150L/h，搅拌转速150r/min，28℃下培养1周，即得桦褐孔菌发酵液；S3：将桦褐孔菌发酵液冷冻干燥，即得桦褐孔菌发酵菌粉。实施例2含有青梅的抗氧化保健食品组合物制备实施例2含有青梅的抗氧化保健食品组合物由以下重量份数的制备原料组成：青梅原汁35份、仙人掌果实萃取物30份、桦褐孔菌发酵菌粉10份、燕麦β-葡聚糖15份和L-赖氨酸10份。制备方法：(1)青梅原汁制备：取青梅，洗净，在沸水中热烫4min，放凉后去核，将果肉连同果皮切成小块，进行匀浆处理，再用胶体磨研磨2次，得青梅原汁；(2)仙人掌果实萃取物制备：取仙人掌果实洗净，按料液比为1:8的比例加入水，进行匀浆处理，加入0.05％wt混合酶，搅拌均匀，于50℃保温进行酶解60min，加入2％wt稳定剂，在85℃条件下回流提取2次，过滤，合并滤液，往滤液中加入乙醇直至含醇量为90％，静置12h后，在10000r/min，4℃条件下离心15min得沉淀，将沉淀冷冻干燥得到仙人掌果实萃取物；其中，混合酶为纤维素酶和甘露聚糖酶以3:1的质量比组成；稳定剂为β-环糊精和海藻糖以1:4的质量比组成；(3)抗氧化保健食品组合物制备：往青梅原汁加入水以1:12的比例进行稀释，加入L-赖氨酸，搅拌均匀，在真空度0.08MPa，温度50℃条件下进行浓缩20min，然后加入仙人掌果实萃取物、桦褐孔菌发酵菌粉和燕麦β-葡聚糖，混匀，在4℃，50MPa的条件下均质20min，然后在4℃，15MPa的条件下均质100min，冷冻干燥，即得抗氧化保健食品组合物。实施例3含有青梅的抗氧化保健食品组合物制备实施例3含有青梅的抗氧化保健食品组合物由以下重量份数的制备原料组成：青梅原汁30份、仙人掌果实萃取物30份、桦褐孔菌发酵菌15份、燕麦β-葡聚糖15份和L-赖氨酸10份。制备方法同实施例2。实施例4含有青梅的抗氧化保健食品组合物制备实施例4含有青梅的抗氧化保健食品组合物由以下重量份数的制备原料组成：青梅原汁40份、仙人掌果实萃取物20份、桦褐孔菌发酵菌粉15份、燕麦β-葡聚糖10份和L-赖氨酸15份。制备方法同实施例2。实施例5含有青梅的抗氧化保健食品组合物制备实施例5含有青梅的抗氧化保健食品组合物由以下重量份数的制备原料组成：青梅原汁35份、仙人掌果实萃取物30份、桦褐孔菌发酵菌粉10份、燕麦β-葡聚糖15份和L-赖氨酸10份。制备方法与实施例2基本相同，其中仙人掌果实萃取物制备过程中的混合酶为纤维素酶和甘露聚糖酶以2:1的质量比组成，稳定剂为β-环糊精和海藻糖以1:6的质量比组成。对比例1含有青梅的抗氧化保健食品组合物制备对比例1含有青梅的抗氧化保健食品组合物由以下重量份数的制备原料组成：青梅原汁35份、仙人掌果实萃取物30份、桦褐孔菌发酵菌粉10份、燕麦β-葡聚糖15份和L-赖氨酸10份。制备方法与实施例2基本相同，区别在于，所述的仙人掌果实萃取物制备过程中的混合酶为纤维素酶和甘露聚糖酶以1:1的质量比组成。对比例2含有青梅的抗氧化保健食品组合物制备对比例2含有青梅的抗氧化保健食品组合物由以下重量份数的制备原料组成：青梅原汁35份、仙人掌果实萃取物30份、桦褐孔菌发酵菌粉10份、燕麦β-葡聚糖15份和L-赖氨酸10份。制备方法与实施例2基本相同，区别在于，所述的仙人掌果实萃取物制备过程中不添加稳定剂，即不添加β-环糊精和海藻糖。对比例3含有青梅的抗氧化保健食品组合物制备对比例3含有青梅的抗氧化保健食品组合物由以下重量份数的制备原料组成：青梅原汁40份、仙人掌果实萃取物30份、燕麦β-葡聚糖15份和L-赖氨酸15份。制备方法与实施例2相同，本对比例与实施例2含有青梅的抗氧化保健食品组合物的制备原料基本相同，区别在于，不添加桦褐孔菌发酵菌粉，并相应增加青梅原汁和L-赖氨酸的比例。试验例一、本发明含有青梅的抗氧化保健食品组合物的抗氧化功效评价1.试验方法取昆明种小鼠72只，雌雄各半，体重20±2g，购回后用基础饲料适应喂养1周，随机取64只小鼠进行D-半乳糖衰老模型制备，制备方法为：每天在小鼠的背部皮下注射D-半乳糖120mg/kg，1次/d，连续注射6周，剩余的8只小鼠设为正常对照组。将造模后的小鼠随机分为模型组、实施例2-5组、对比例1-3组，每组8只。其中，实施例2-5组和对比例1-3组分别灌胃给本发明实施例2-5和对比例1-3制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物，灌胃剂量为0.8g/kg，1次/d；正常对照组和模型组每天灌胃给等体积的生理盐水，1次/d；各组小鼠连续灌胃2周后打过滤麻药进行处死，取血清和肝脏组织，测定小鼠血清和肝脏组织中的丙二醛(MDA)和还原性谷胱甘肽(GSH)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活力。2.试验结果表1本发明含有青梅的抗氧化保健食品组合物对衰老小鼠的MDA和GSH影响注：与正常组比较，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01；与对比例1组比较，△P＜0.05；与对比例2组比较，■P＜0.05，与对比例3组比较，◇P＜0.05。结果显示，与正常组比较，模型组小鼠血清和肝组织中的MDA含量显著增加(P＜0.01)，GSH含量显著减少(P＜0.01)；而本发明实施例2-5制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物可显著降低小鼠血清和肝组织中的MDA含量(P＜0.01)，增加GSH含量(P＜0.01)，效果优于对比例1-3制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物，具有显著性差异(P＜0.05)，并以实施例2制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物效果最佳。以上结果表明本发明提供的含有青梅的抗氧化保健食品组合物具有较佳的抗氧化性。表2本发明含有青梅的抗氧化保健食品组合物对衰老小鼠的SOD和GSH-PX影响注：与正常组比较，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01；与对比例1组比较，△P＜0.05；与对比例2组比较，■P＜0.05，与对比例3组比较，◇P＜0.05。结果显示，与正常组比较，模型组小鼠血清和肝组织中的SOD和GSH-PX酶活显著降低(P＜0.01)，而本发明实施例2-5制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物可显著增加小鼠血清和肝组织中的SOD和GSH-PX酶活(P＜0.01)，效果优于对比例1-3制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物，具有显著性差异(P＜0.05)，并以实施例2制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物效果最佳，以上结果表明本发明提供的含有青梅的抗氧化保健食品组合物具有较佳的抗氧化性。试验例二、本发明含有青梅的抗氧化保健食品组合物对黄褐斑的治疗效果评价1.试验资料筛选360例黄褐斑志愿患者，纳入标准：①面部淡褐色至深褐色、界限清楚的斑片，基本对称分布，无炎症表现及鳞屑；②无明显自觉症状，女性多发，夏重冬轻，有一定的季节性；③无明显内分泌疾病，并排除其他疾病引起的色素沉着。排除标准：①其他疾引起的色素沉着；②正在接受其它方法治疗者；③已知对试验药物中的任何成分过敏者。2.试验方法将360例黄褐斑志愿患者随机分为空白对照组、实施例2组、对比例1-3组和阳性对照组，每组各60人。其中实施例2组志愿患者服用本发明实施例2制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物，40mg/次，2次/日；对比例1-3组志愿患者服用本发明对比例1-3制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物，40mg/次，2次/日；阳性对照组服用六味地黄丸(九芝堂股份有限公司)，5丸/次，3次/日；空白对照组不作任何处理，各组连续服用4周后评价志愿患者脸部黄褐斑的皮损变化情况，并测定志愿患者服药前、后血清中超氧化物气化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。其中，黄褐斑皮损改变评分方法和标准见下表：记分0123面积大小0＜3cm23-6cm2＞6cm2色素程度无淡褐色褐色深褐色其中，痊愈：肉眼视色斑面积消退大于90％，颜色基本消失；评分法计算治疗后下降指数≥0.8；显效：肉眼视色斑面积消退大于60％，颜色明显变淡；评分法计算治疗后下降指数≥0.5；好转：肉眼视色斑面积消退大于30％，颜色变淡；评分法计算治疗后下降指数≥0.3；无效：肉眼视色斑面积消退小于30％，颜色变化不明显；评分法计算治疗后下降指数≤0.3。皮肤总积分＝皮损面积积分+皮损色素程度积分下降指数＝(治疗前总积分-治疗后总积分)/治疗前总积分有效率＝(痊愈例数+显效例数+好转例数)/总例数x100％3.试验结果表3本发明含有青梅的抗氧化保健食品组合物对黄褐斑治疗后总评分及下降指数组别治疗前总积分治疗4周后总积分下降指数阳性对照组3.62±0.842.43±0.56*0.33±0.09*实施例23.58±0.802.37±0.52*0.34±0.08*对比例13.57±0.823.27±0.63#△0.08±0.05#△对比例23.63±0.763.20±0.60#△0.12±0.04#△对比例33.59±0.803.42±0.68#△0.05±0.04#△注：与治疗前比较，*P＜0.05；与阳性对照组比较，#P＜0.05；与实施例2组比较，△P＜0.05。表4本发明含有青梅的抗氧化保健食品组合物对黄褐斑的治疗效果组别痊愈显效好转无效总有效率(％)阳性对照组172212985.0实施例2202311690对比例11214161870对比例21418141476.7对比例3812182263.3表5本发明含有青梅的抗氧化保健食品组合物对黄褐斑的治疗效果注：与治疗前比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与阳性对照组比较，#P＜0.05；与实施例2组比较，△P＜0.05。六味地黄丸为中成药，主要成分为熟地黄、山萸肉、山药、泽泻、牡丹皮、茯苓，具有滋阴补肾作用，对黄褐斑具有较好的疗效，本发明以六味地黄丸作为阳性对照药，评价本发明实施例2制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物对黄褐斑的治疗效果。由表3可知，黄褐斑志愿患者服用本发明实施例2制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物4周后，其脸部皮肤总积分显著减少(P＜0.05)，效果与阳性对照药六味地黄丸相当，而对比例1-3制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物减少皮肤总积分效果较差，其效果与实施例2均具有显著性差异(P＜0.05)。由表4可知，本发明实施例2制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物对黄褐斑的治疗效果较佳，总有效率达90％，优于阳性对照药六味地黄丸的总有效率84％，而对比例1-3制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物对黄褐斑的效果较差，尤其以对比例3的效果最差。由表5可知，本发明实施例2制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物可显著增加黄褐斑志愿患者血清中SOD水平(P＜0.01)，显著降低MDA水平(P＜0.01)，效果较阳性对照药六味地黄丸显著，而对比例1-3制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物增加黄褐斑志愿患者血清中SOD水平和降低MDA水平的效果较差，其效果与实施例2均具有显著性差异(P＜0.05)。以上结果表明，本发明实施例2制得的含有青梅的抗氧化保健食品组合物可通过增加黄褐斑志愿患者血清中的SOD水平和降低MDA水平，清除体内过量自由基，充分发挥抗氧化的作用，对黄褐斑具有较显著的疗效。以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页1 2 3