本发明涉及软饮料领域，具体涉及一种菠菜运动饮料及其制备方法。
背景技术：
：运动饮料是根据运动时生理消耗的特点而配制的，包括一定的含糖量，适量的维生素和电解质。目前，市面上常见的有“红牛”、“尖叫”“佳得乐”等，这些运动饮料可补充人体运动后丢失的能量、糖、矿物质和维生素，但并不能促进代谢物的分解或排出体外，疲劳缓解效果并不理想，影响人体的体能发挥和耐力。菠菜(spinaciaoleraceal.)又名波斯菜、赤根菜、鹦鹉菜等，属藜科菠菜属，一年生草本植物。植物可达1米，根圆锥状，带红色，较少为白色，叶乾形至卵形，鲜绿色，全缘或有少数牙齿状裂片。菠菜每100克含铁1.6～2.9毫克，蛋白质2.4克(1斤菠菜相当于2个鸡蛋的蛋白质含量)，维生素a3毫克(多于胡萝卜)，b10.06毫克、b20.16毫克、c31.4毫克(为番茄的3倍)。其赤根中含有一般蔬果所缺乏的维生素k，有助于防治皮肤、内脏的出血倾向。因此菠菜被称为“蔬菜之王”。目前国内对菠菜的利用研究主要集中在品质及加工性能分析、饮料生产工艺研究。例如cn1015241720公开了一种菠菜芦笋合成汁饮品及其制备方法。该方法包括将菠菜、芦笋洗净，分别榨取汁液，按比例混合，并加入水、木糖醇等。该专利中将菠菜榨汁，饮用时可吸收到菠菜中的营养成分，但菠菜中富含的蛋白质，却很难吸收利用。有研究表明，有些叶蛋白质经水解后往往会产生具有生理活性的肽。如非专利文献《antihypertensivepropertiesofspinachleafproteindigests》(yanjunyang等，农业与食品化学杂志)公开了一种菠菜活性多肽，其将新鲜菠菜叶用0.003n氢氧化钠水溶液均化；得到的匀浆经两片纱布过滤，离心；上清液过滤，调节ph至4.5以产生蛋白沉淀；将得到的沉淀物依次用丙酮，乙醇和乙醚在玻璃过滤器上洗涤，直到滤液无色；胃蛋白酶-胰酶水解菠菜叶蛋白，得到的菠菜叶蛋白的胃蛋白酶和胰酶水解产物对高血压小鼠具有明显的降血压效果，而菠菜叶蛋白则无该效应。目前将菠菜加工成功能型运动饮料，并研究其是否具有抗疲劳的功能尚未见报道。因此寻求开发一种具有抗疲劳活性的菠菜运动饮料成为该领域技术人员的追求目标。技术实现要素：为了解决上述将菠菜加工成功能型运动饮料的技术问题，本发明提供一种菠菜运动饮料及其制备方法。为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：一种菠菜运动饮料，包括如下重量份的组份：优选地，包括如下重量份的组份：其中，所述菠菜提取物的制备，包括以下步骤：(1)预处理：将菠菜菜叶进行清洗、漂烫处理；(2)均化：冷却，捣碎，加水搅拌，调ph为8.5-9.5；(3)沉淀：过滤收集上清液，调ph为4-5；(4)酶解：离心，收集沉淀，加水溶解，加入碱性-中性蛋白酶酶解，灭酶，过滤得到菠菜提取物。其中，步骤1中，所述漂烫温度70-100℃，时间30s-1.5min。其中，步骤2中，所述加水搅拌的温度45-55℃，时间60-90min，料液比(g/ml)为1∶30-40。其中，步骤3中，沉淀时间为20-40min。其中，步骤4中，加水溶解后，沉淀浓度(g/ml)为2-5％。其中，步骤4中，所述中性蛋白酶酶解ph6.8-7.2，时间50-70min，温度50-60℃，加酶量(酶-底物比g/g)为1-2％；所述碱性蛋白酶酶解ph8.0-9.0，时间80-100min，温度50-60℃，加酶量(酶-底物比g/g)为1-2％；其中，灭酶为高温灭酶或微波灭酶。其中，所述糖为葡萄糖、砂糖、蔗糖、果糖中的一种或几种；所述盐离子为钠、钾、钙、镁中的一种或几种；所述维生素为维生素b1、维生素b2、维生素b6、维生素b12、维生素c中的一种或几种。进一步地，还可以包括本领域公知的可用于运动饮料的各种食品添加剂。比如，稳定剂、防腐剂、甜味剂、酸味剂、抗氧化剂等。其中，所述稳定剂为羧甲基纤维素钠、微晶纤维素、淀粉、明胶或琼脂中的一种或几种。其中，所述防腐剂为苯甲酸、苯甲酸盐、山梨酸或山梨酸盐中的一种或几种。其中，所述甜味剂为山梨糖醇、木糖醇、麦芽糖醇、麦芽低聚糖、低聚异麦芽糖、甜蜜素、阿斯巴甜、三氯蔗糖、低聚果糖、安赛蜜、低聚乳糖、甘露糖醇中的一种或几种。其中，所述酸味剂为柠檬酸、酒石酸、苹果酸、乳酸、醋酸中的一种或几种。其中，所述抗氧化剂为抗血酸酸钠、茶多酚、ve、异抗坏血酸钠中的一种或几种。本发明还提供一种菠菜运动饮料的制备方法，包括将各原料混合，搅拌均匀，灭菌灌装即得。其中，灭菌为常规灭菌方法，例如巴氏灭菌、微波灭菌或瞬时高温灭菌。上述酶解后过滤，采用本领域人员公知的技术，包括滤纸过滤或超滤。上述菠菜提取物可进一步精制：在菠菜提取物中按0.5-1％(w/v)加入活性炭，在温度80-90℃搅拌脱色，过滤，重复以上操作，得淡绿色澄清滤液，冷冻干燥或喷雾干燥成粉末。本发明配方中，提供盐离子的化合物包括但不局限于氯化钠、氯化镁、氯化钾、氯化钙、硫酸镁、硫酸钾、硫酸钠、乳酸钙、碳酸钠、碳酸钾、柠檬酸钠、酒石酸钾。用于调ph值的试剂包括但不局限于柠檬酸钠、柠檬酸钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、焦磷酸钠、碳酸氢钠。本发明配方中，菠菜，又叫菠棱菜、赤根菜、波斯菜、鹦鹉菜。菠菜含有蛋白质、脂肪、碳水化合物、钙、磷、铁、维生素a、维生素b1、维生素b2、烟酸、维生素c等营养成分。花生(peanut)，原名落花生(学名：arachishypogaealinn.)，是我国产量丰富、食用广泛的一种坚果，又名“长生果”、“泥豆”等。属蔷薇目，豆科一年生草本植物，茎直立或匍匐，长30-80厘米，翼瓣与龙骨瓣分离，荚果长2-5厘米，宽1-1.3厘米，膨胀，荚厚，花果期6-8月。花生果实含有蛋白质、脂肪、糖类、维生素a、维生素b6、维生素e、维生素k，以及矿物质钙、磷、铁等营养成分，含有8种人体所需的氨基酸及不饱和脂肪酸，含卵磷脂、胆碱、胡萝卜素、粗纤维等物质。脂肪含量为44％-45％，蛋白质含量为24-36％，含糖量为20％左右。含有丰富的维生素b2、pp、a、d、e，钙和铁等。并含有硫胺素、核黄素、尼克酸等多种维生素。有促进人的脑细胞发育，增强记忆的作用。豌豆，(学名pisumsativumlinn)，一年生攀援草本，高0.5-2米。全株绿色，光滑无毛，被粉霜。叶具小叶4-6片，托叶比小叶大，叶状，心形，下缘具细牙齿。小叶卵圆形；花于叶腋单生或数朵排列为总状花序；花萼钟状，深5裂，裂片披针形；花冠颜色多样，随品种而异，但多为白色和紫色，雄蕊(9+1)两体。子房无毛，花柱扁，内面有髯毛。荚果肿胀，长椭圆形，顶端斜急尖，背部近于伸直，内侧有坚硬纸质的内皮；种子2-10颗，圆形，青绿色，有皱纹或无，干后变为黄色。豌豆营养丰富，含有蛋白质、脂肪，以及碳水化合物，粗纤维、胡萝卜素、维生素b1、维生素b2、钙、磷、钠、铁等。本发明技术方案，具有如下优点：1.本发明的菠菜运动饮料中添加的菠菜提取物，含有活性肽，水溶性极佳，可补充蛋白质，有效缓解疲劳，促进机体恢复。2.本发明的菠菜运动饮料中，各组分之间具有协同增效作用，有效发挥抗疲劳作用。3.本发明的菠菜运动饮料，色泽鲜艳，独具菠菜香味，口感佳，适用于各种运动人群。具体实施方式超氧化物歧化酶测定试剂盒、丙二醛测定试剂盒、血尿素测定试剂盒、血乳酸测定试剂盒、肝糖原测定试剂盒，均购自南京迈博生物科技有限公司。游泳箱、恒温水浴锅购自北京医疗设备厂、可见光分光光度计754购自上海精密仪器有限公司、低温高速离心机tdl40b购自星科科技公司；sc-2型磁力搅拌器购自上海沪西仪器厂；电子天秤购自上海精科等。昆明种雄性小鼠购自江西中医学院实验动物研究所。花生粉、豌豆粉均可市售获得。中性蛋白酶(20万u/g)、碱性蛋白酶(20万u/g)购自广西南宁庞博生物工程有限公司。实施例1菠菜提取物的制备称取新鲜的菠菜菜叶50g，清洗干净。在500ml烧杯中，加入400ml纯净水，加热至80℃。将菠菜菜叶放入进行漂烫处理1min后，取出迅速冷却。冷却后放入捣碎机中捣碎，之后在恒温磁力搅拌器上，边加水边搅拌80min，加水量为1500ml，调温至50℃，调ph为9.0。经2-4层纱布过滤去除沉淀，所得上清液调ph为4.5，室温下搅拌30min。离心10min(1500r/min)，收集沉淀，所得沉淀为菠菜分离蛋白。取菠菜分离蛋白1g置于100ml烧杯中，加入50ml纯水，调ph值为8.5，温度为55℃，加入碱性蛋白15mg，作用90min；调ph值为7.0，温度为55℃，加入中性蛋白酶15mg，作用60min，90℃水浴10min灭酶，过滤得菠菜提取物。实施例2菠菜提取物的制备称取新鲜的菠菜菜叶50g，清洗干净。在500ml烧杯中，加入400ml纯净水，加热至100℃。将菠菜菜叶放入进行漂烫处理30s后，取出迅速冷却。冷却后放入捣碎机中捣碎，之后在恒温磁力搅拌器上，边加水边搅拌60min，加水量为2000ml，调温至55℃，调ph为8.5。经2-4层纱布过滤去除沉淀，所得上清液调ph为5，室温下搅拌20min。离心10min(1500r/min)，收集沉淀，所得沉淀为菠菜分离蛋白。取菠菜分离蛋白1g置于50ml烧杯中，加入20ml纯水，调ph值为8.0，温度为50℃，加入碱性蛋白20mg，作用100min；调ph值为7.2，温度为50℃，加入中性蛋白酶20mg，作用70min，90℃水浴10min灭酶，过滤得菠菜提取物。实施例3菠菜提取物的制备称取新鲜的菠菜菜叶50g，清洗干净。在500ml烧杯中，加入400ml纯净水，加热至70℃。将菠菜菜叶放入进行漂烫处理1.5min后，取出迅速冷却。冷却后放入捣碎机中捣碎，放在恒温磁力搅拌器上，边加水边搅拌90min，加水量为1750ml，调温至45℃，调ph为9.5。经2-4层纱布过滤去除沉淀，所得上清液调ph为4，室温下搅拌40min。离心10min(1500r/min)，收集沉淀，所得沉淀为菠菜分离蛋白。将菠菜分离蛋白1g置于550ml烧杯中，加入25ml纯水，调ph值为9.0，温度为60℃，加入碱性蛋白15mg，作用80min；调ph值为6.8，温度为60℃，加入中性蛋白酶15mg，作用50min，90℃水浴10min灭酶，过滤得菠菜提取物。将上述菠菜提取物置于4℃冰箱静置24h，取上清，加入2％粉末活性炭煮沸15min，过滤，得色淡清亮的菠菜多肽溶液，冷冻干燥成多肽粉末。实施例4菠菜运动饮料的制备按重量份称取实施例1制备的菠菜提取物20g；花生粉10g；豌豆粉10g；蔗糖65g；水900g；氯化钠1g；氯化钾0.2g；氯化钙0.2g；维生素c0.1g；维生素b20.02g；维生素b120.02g。把原料放入调配罐中，搅拌均匀，然后进行巴氏杀菌，灌装即为成品。实施例5菠菜运动饮料的制备按重量份称取实施例1制备的菠菜提取物15g；花生粉12g；豌豆粉8g；果糖70g；水950g；氯化钠0.8g；氯化钾0.4g；乳酸钙0.2g；碳酸镁0.1g；维生素c0.08g；维生素b20.01g；维生素b120.02g；维生素b60.01。把原料放入调配罐中，搅拌均匀，然后进行巴氏杀菌，灌装即为成品。实施例6菠菜运动饮料的制备按重量份称取实施例1制备的菠菜提取物25g；花生粉8g；豌豆粉12g；葡萄糖60g；水850g；柠檬酸钠0.6g；氯化钾0.6g；维生素c0.1g；维生素b20.02g；维生素b120.03g。把原料放入调配罐中，搅拌均匀，然后进行巴氏杀菌，灌装即为成品。实施例7菠菜运动饮料的制备按重量份称取实施例1制备的菠菜提取物10g；花生粉15g；豌豆粉5g；白砂糖50g；水1000g；碳酸氢钠1g；氯化钾1g；维生素c0.1g；维生素b20.05g；维生素b120.03g；维生素b60.02g。把原料放入调配罐中，搅拌均匀，然后进行巴氏杀菌，灌装即为成品。实施例8菠菜运动饮料的制备按重量份称取实施例1制备的菠菜提取物30g；花生粉5g；豌豆粉15g；低聚果糖80g；水800g；氯化钠0.6g；酒石酸钾0.2g；氯化钙0.1g；氯化镁0.1g；维生素c0.1g。把原料放入调配罐中，搅拌均匀，然后进行巴氏杀菌，灌装即为成品。对比例1菠菜运动饮料的制备与实施例4类似，不同之处在于不含花生粉。对比例2菠菜运动饮料的制备与实施例4类似，不同之处在于不含菠菜提取物。对比例3菠菜运动饮料的制备与实施例4类似，不同之处在于菠菜提取物未经漂烫处理。对比例4菠菜运动饮料的制备与实施例4类似，不同之处在于菠菜提取物为新鲜榨取的菠菜汁。试验例1菠菜提取物的检测蛋白质测定：蛋白质总氮和上清液中可溶性氮由凯氏定氮法测定，具体方法参照gb5009.5-2016进行。游离氨基氮含量的测定按照甲醛点位滴定法。氮溶指数：按nsi＝上清液中可溶性氮/菠菜蛋白质中总氮×100％；水解度dh：按dh＝(n2-n1)/(n0-n1)×100％，式中，n0：总氮含量g/l；n1：酶解前游离氨基酸氮含量g/l；n2：酶解后游离氨基氮含量g/l。纯度：按照福林酚检测制得的菠菜多肽的多肽纯度。分子量分布：采用高效凝胶过滤色谱法(hpgfc)测定小分子多肽峰值分子量范围。结果见表1。表1菠菜提取物的检测菠菜提取物的氮溶指数高达95％以上，水解度在75％以上，碱性-中性蛋白酶对菠菜叶蛋白的改性效果较佳；分子量分布在300-800da；纯度在55％以上。试验例2菠菜运动饮料的感官评分评定小组由10名成员组成，男女各5人，小组成员身体健康、无吸烟、酗酒等不良嗜好，对味道有较强的分辨力和较高的灵敏度。所有样品均采用三位随机数编码，室温下进行品评。评价标准见表2。评价结果见表3。表2产品的感官评价标准表3感官评价结果实施例4实施例5实施例6实施例7实施例8对比例1对比例2对比例3对比例4989796979592857065由此可见，菠菜经漂烫酶解后，其感官评价分值明显增加。试验例3菠菜运动饮料的活性检测(1)实验动物健康昆明种雄性小鼠120只，体重(20±2)g。按体重随机将生长正常、会游泳的实验小鼠分为6组：实验i组灌胃实施例4的菠菜运动饮料，实验ii组灌胃对比例1的菠菜运动饮料，实验iii组灌胃对比例2的菠菜运动饮料，实验iv组灌胃对比例3的菠菜运动饮料，对照组1灌胃生理盐水，对照组2灌胃对比例4的菠菜运动饮料，每组20只，实验室饲养1周后灌胃给药，剂量按体表面积比率折算等效剂量为0.1ml·10g-1，每日1次，连续21d。实验期间，小鼠自由摄食及饮水。(2)小鼠生长速率的测定实验之前和之后各称量一次实验小鼠的体重，计算平均净增质量。结果见表4。表4不同处理对小鼠生长速度的影响组别实验前质量/g实验结束时质量/g平均净增质量/gi组20.65±1.0535.60±1.1214.95±0.79ii组21.03±1.3535.57±0.9414.54±1.60iii组19.86±1.1534.58±1.1314.72±0.88iv组20.42±1.2935.42±1.1915.00±1.04ck1组20.00±1.1135.13±1.0515.13±1.96ck2组20.33±1.4235.68±2.0315.35±0.90由表5可见，6组小鼠灌胃21d试验结果表明，i组、ii组、iii组、iv组和ck组的小鼠平均净增质量无显著性差异。因此菠菜运动饮料不影响小鼠机体的生长发育。(3)菠菜运动饮料安全性检测在21d喂养期间，观察6组小鼠中每只的摄食、饮水、大小便情况，观察生长发育、行为是否正常，以及是否有中毒表现，实验结束后，检查各受试小鼠的肝、心、肺、肾、空肠、脾脏、胸腺和睾丸是否受到损伤或病变。结果显示，在21d喂养期间，3组小鼠的摄食、饮水、大小便正常，生长发育良好，未观察到明显行为改变和中毒表现，试验结束时将小鼠解剖对其肝、心、肺、肾、空肠、脾脏、胸腺和睾丸进行健康检查，未发现明显病变，各组动物脏器均未见由受试物引起的损害性改变，因此菠菜运动饮料是安全无毒的。(4)小鼠游泳能力试验小鼠连续灌胃21d，末次灌胃30min后，进行负重游泳实验。在小鼠尾部1/3处负重质量为5％体重的铅皮，投入水深30cm、水温25-30℃的游泳箱中游泳，观察和记录小鼠自入水后到沉入水中10s不能浮出水面(处于力竭状态)的时间。结果见表5。表5菠菜运动饮料对小鼠负重游泳时间的影响组别力竭游泳所需时间/mini组50.2±3.4ii组43.4±1.8iii组39.7±2.2iv组49.2±3.1ck1组36.5±2.4ck2组39.4±1.5负重游泳实验室是评价抗疲劳作用的动物模型，游泳时间的长短与运动耐力有关，可以反应动物运动疲劳的程度。本试验中，小鼠给予不同的喂养以后，与ck2相比，i组、iv组处理可显著延长小鼠负重游泳时间，与ii组、iii组均存在显著性差异，因此，可知菠菜运动饮料具有一定的抗疲劳的作用，菠菜提取物和花生粉具有良好的协同作用，两者共同使用，产生了增效效果。(5)小鼠生化指标的测定将游泳力竭后小鼠从水中捞出，立即眼眶采血0.5ml，分离血清，检测血清中血乳酸(lac)、超氧化物歧化酶(sod)、丙二醛(mda)和血清尿素氮(bun)的含量。然后将采血后实验小鼠立即处死。分离肝脏，经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，精确称取肝脏200mg，用蒽酮比色法测定各组小鼠肝糖原的含量。结果如表6所示。表6小鼠生化指标的测定由上表可知，对小鼠连续灌胃21d后，i组、iv组的血乳酸含量、丙二醛含量低，肝糖原、超氧化物歧化酶含量较高，与ck组存在显著性差异。在运动时，肌肉通过糖酵解反应产生了大量的乳酸，由乳酸解离所生成的氢离子使肌肉中的氢离子浓度上升，ph值下降，进而引起一系列的生化变化，导致疲劳，减少乳酸的产生或加速乳酸的清除可引起抗疲劳的作用，丙二醛是衡量基体自由基代谢的敏感指标，其含量能客观地反应基体产生自由基的水平。本实验结果表明菠菜运动饮料可抑制脂质过氧化，减少乳酸堆积，较快消除运动疲劳的作用。糖原是运动中最重要的能源物质，体内糖原的水平与耐久力密切相关，糖原贮备的提高有利于基体耐力速度的提高和运动时间的延长。超氧化物歧化酶在组织内能清除机体内过多的氧自由基，可提高人体免疫力，增强抗氧化能力，抗氧化剂已成为一类重要的运动营养补剂。实验中灌胃菠菜运动饮料后，小鼠超氧化物歧化酶含量和糖原含量显著增加，从而证明菠菜运动饮料具有增强小鼠的抗氧化能力，消除运动疲劳的功能。其机制可能是通过增加力竭运动过程中肝糖原的储备，显著降低代谢产物mda、bun的水平，提高sod活性，加速自由基的清除，增强小鼠的抗氧化能力，减轻基体的氧化损伤，来提高小鼠的运动能力，起到抗疲劳作用。显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，均属本发明的保护范围之内。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。当前第1页12