本发明涉及饮料领域，特别是一种微生态活菌饮料制造方法。
背景技术：
微生态活菌制品的制作是近十五年来刚兴起的生物工程技术，这类产品是采用人体自身的生理细菌来调节人体内菌群平衡，无任何毒付作用，服用可达到有病治病、无病保健之目的。
目前公开的微生态活菌制品有两大类形态：一类是液体形态的细菌发酵培养液，发酵液直接供人服用：另一类是对发酵液进行分离，将所得菌泥干燥制得干粉的固体形态的活菌制品，再将其制成粉剂、胶囊、微囊或片剂供人服用。这两种现有技术都存在其缺欠：液体形态的制品，由于细菌一直在培养液内不断进行生理代谢，使液体内细菌极易死亡，制品存放的时间愈长则液内菌的存活数就愈少，因此它的疗效就会明显降低；固体形态的制品，被服用进入人体肠道后需要一段时间的复苏、生长，然后才能代谢、繁殖，这就使得制品的疗效降低、缓慢，而且这种固体活菌制品的加工过程是先发酵、后分离，分离后的发酵上清液不再作为制品的组成部分，这样细菌在发酵期间内产生在发酵液内的对人体有益代谢产物就未能得到充分利用。
然而在生产过程中，没有对病菌检测过后，在进行灭菌，会造成特殊细菌的纯在的可能，并且没用针对性的进行灭菌，会造成资源的浪费，不利于精细化生产。
技术实现要素：
针对现有技术中所存在的不足，本发明提供了一种微生态活菌饮料制造方法，解决了生态活菌饮料制造方法没用针对性的进行灭菌，会造成资源的浪费。
为实现上述目的，本发明采用了如下的技术方案：
一种微生态活菌饮料制造方法，包括以下步骤：
(1)选取菌株，配置种子液、接种到液体培养基中发酵，
(2)将上述发酵液离心分离成菌泥与上清液两部分，
(3)对分离的菌泥进行干燥、对菌泥干燥粉再进行固态稀释，真空包装即得固体组分，
(4)对分离出的上清液即得液体组分，进行进行治病病菌的检测，得到治病病菌结果，
(5)然后根据治病病菌结果进行进行灭菌处理，灌装；步骤(4)治病病菌的检测包括以下步骤：
a.微生态活菌制剂的再水化：准确称取微生态活菌制剂0.05g，于ep管中，加入0.95ml灭菌pbs缓冲液，37℃摇床100rpm缓慢摇晃30min；
b.基因组提取：使用基因组提取试剂盒进行提取；
c.引物合成：根据本发明所设计的各种常见致病菌的引物，进行引物合成；
d.用多重pcr致病菌检测：将处理后的微生态制剂为模板，同时加入乙型副伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的特异性引物为引物进行多重pcr扩增，七重pcr的反应条件、反应体系如上述表4，表5所示；
e.核酸电泳检测：上述pcr产物加于2％琼脂糖凝胶电泳，观察是否存在致病菌条带
菌泥干燥方式可采用喷雾干燥、烘干干燥或冷冻干燥方法。
对菌泥干燥粉稀释后，要保持细菌存活数为106～1010cfu/g
相比于现有技术，本发明具有如下有益效果：生态活菌饮料，对检测结果中存在的细菌，如大肠杆菌o157、单增李斯特菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌、志贺氏菌；进行针对性灭菌，完成精细化生产，为后面的工业3.0做好升级准备。
具体实施方式
下面对本发明做进一步的说明。
一种微生态活菌饮料制造方法，包括以下步骤：
(1)选取菌株，配置种子液、接种到液体培养基中发酵，
(2)将上述发酵液离心分离成菌泥与上清液两部分，
(3)对分离的菌泥进行干燥、对菌泥干燥粉再进行固态稀释，真空包装即得固体组分，
(4)对分离出的上清液即得液体组分，进行进行治病病菌的检测，得到治病病菌结果，
(5)然后根据治病病菌结果进行进行灭菌处理，灌装；
步骤(4)治病病菌的检测包括以下步骤：
a.微生态活菌制剂的再水化：准确称取微生态活菌制剂0.05g，于ep管中，加入0.95ml灭菌pbs缓冲液，37℃摇床100rpm缓慢摇晃30min；
b.基因组提取：使用基因组提取试剂盒进行提取；
c.引物合成：根据本发明所设计的各种常见致病菌的引物，进行引物合成；
d.用多重pcr致病菌检测：将处理后的微生态制剂为模板，同时加入乙型副伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的特异性引物为引物进行多重pcr扩增，七重pcr的反应条件、反应体系如上述表4，表5所示；
e.核酸电泳检测：上述pcr产物加于2％琼脂糖凝胶电泳，观察是否存在致病菌条带
菌泥干燥方式可采用喷雾干燥、烘干干燥或冷冻干燥方法。
对菌泥干燥粉稀释后，要保持细菌存活数为106～1010cfu/g。
发酵培养液配方如下：
葡萄糖2％
蛋白胨2％
酵母浸膏0.6％
可溶性淀粉0.1％
氯化钠0.5％
吐温-800.1％
水余下部分ph值7.0。
1)一款固体微生态制剂的再水化：准确称取固体微生态制剂(包括固体颗粒、菌粉等形式)0.05g，于ep管中，加入0.95ml灭菌pbs缓冲液，37℃摇床100rpm缓慢摇晃30min。
2)基因组提取：将步骤(1)制备得到的发酵溶液取出1ml，12000转/min离心1分钟，弃上清。先用500μl70％乙醇将菌体重悬，冰浴20min，加入溶菌酶重悬，37℃孵育60min，加入蛋白酶，55℃孵育15min，加入rnasea静置2min，加入bindingbuffer400μl混匀，加入到离心柱中，弃掉流出液，先后用washbuffer和cleanbuffer洗涤两次，用elutionbuffer洗脱dna。提取的基因组用1％琼脂糖凝胶测电泳检。
3)引物合成：所设计的各种常见致病菌的引物对如表3所述，根据表3提供的引物对的碱基信息由引物合成公司合成。
4)用多重pcr致病菌检测：将处理后的微生态制剂为模板，同时加入乙型副伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌的特异性引物为引物进行多重pcr扩增。七重pcr的反应条件、反应体系如上述表4，表5所示。
5)核酸电泳检测：上述pcr产物加于2％琼脂糖凝胶电泳，观察是否存在致病菌条带。最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。