改善消化健康的方法与流程

改善消化健康的方法
1.背景
2.hnf4α是核受体，作为人类的许多遗传程序的转录调节子，包括那些基础糖和脂质代谢。它在许多组织中表达，包括肝、胰腺和肾，以及肠。已知hnf4α在上皮生物学、细胞，包括上皮形态发生的中枢调节结构，和肠上皮的稳态和屏障功能中具有不同的作用(cattin等人，(2009)mol.cell.biol.29(23):6294-6308；spath&weiss(1998)j.cell biol.140:935-946)。此外，hnf4α基因在小肠和结肠中高度表达，并且hnf4α蛋白在粘膜上皮细胞的核中是丰富的(jiang等人，(2003)nucl.recept.1:5)。此外，已经提出hnf4α在炎性肠病(ibd)中具有保护性作用，并且hnf4α激动剂可以用于治疗ibd(chahar等人，(2014)mol.cell.biol.34:3291-3304)。
3.研究表明，hnf4α对紧密连接蛋白和粘附连接蛋白的表达和正确定位(chiba等人，(2003)exp.cell res.286:288-297；parviz等人，(2003)nat.genet.34:292-296)以及肠内微绒毛的形成(chiba等人，(2006)j.cell biol.175(6):971-980)至关重要。此外，hnf4α还被描述为保护肠上皮免受炎症的中枢调节剂(babeu&boudreau(2014)world j.gastroenterol.20(1):22-30)。此外，已经显示hnf4α表达在患有克罗恩病(cd)和溃疡性结肠炎(uc)的患者的肠组织中显著降低(darsigny等人，(2009)plos one 4:e7609；ahn等人，(2008)inflamm.bowel dis.14:908-920)。
4.对于肠特异性hnf4α缺失小鼠的研究已经表明，与对照小鼠相比，缺失小鼠更易感于葡聚糖硫酸钠(dss)诱导的结肠炎，并且表现出肠通透性的增加(ahn等人，(2008)inflamm.bowel dis.14:908-920)。在另一项研究中，缺乏hnf4αp1和p2同种型肠表达的小鼠形成了与人ibd类似的进行性慢性肠道炎症，这表明hnf4α活性的长期降低可能促使ibd(darsigny等人，(2009)plos one 4:e7609)。
5.据估计，三百万美国成年人已经接受了ibd诊断，相当于超过人口的1％，并且患病率增加。ibd的直接治疗成本估计接近70亿美元。考虑到许多病症未被诊断并且ibd也可能影响儿童，ibd的实际患病率可能高得多并且超过当前的成本估计。因此，本领域需要以具有高的患者接受度、功效，相对安全性和相对低成本的方式改善这些个体的消化健康。本公开内容解决了本领域中的这种需要。


技术实现要素：

6.本公开内容提供了通过提供包含至少一种载体和有效量的包含式i的化合物或其异构体、盐、同二聚体、异二聚体或缀合物的提取物的可消耗组合物来改善消化健康的方法：
[0007][0008]
在一些实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8和r9各自独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基；虚线键存在或不存在；x是ch2或o；z是chra、nra或o；以及ra选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基，从而改善消化健康。
[0009]
在一些实施方案中，所述化合物具有式ii的结构：
[0010][0011]
在一些实施方案中，r1、r2、r3和r4各自独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基；虚线键存在或不存在；z是chra、nra或o；以及ra选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、
任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基。
[0012]
在一些实施方案中，所述提取物是下述的成员的乙醇提取物：葱属(allium)、辣根属(amoracia)、藜属(chenopodium)、菠菜属(spinacia)、荞麦属(fagpyrum)、番荔枝属(annona)、麻风树属(jatropha)、木槿属(hibiscus)、胡椒属(piper)、画眉草属(eragrostis)、玉蜀黍属(zea)、莲属(nelumbo)、大麻属(cannabis)、枣属(ziziphus)、花椒属(zanthoxylum)、甘薯属(ipomea)、辣椒属(capsicum)、枸杞属(lycium)、茄属(solanum)或蒺藜属(tribulus)。
[0013]
在一些实施方案中，所述组合物被配制为饮食补充剂、食品成分或添加剂、医学食品、营养品或药物组合物。
[0014]
在本文中，所述饮食补充剂、食品成分或添加剂、医学食品、营养品独立地在每次出现时均不包含大麻属提取物，并且大麻属在每次出现时均不应用于饮食补充剂、食品成分或添加剂、医学食品、营养品中。
[0015]
在一些实施方案中，所述式(i)或式(ii)的化合物选自：n-反式-咖啡酰酪胺、n-顺式-咖啡酰酪胺、n-反式-阿魏酰酪胺、n-顺式-阿魏酰酪胺、对香豆酰酪胺、肉桂酰酪胺、芥子酰酪胺和5-羟基阿魏酰酪胺，或前述的药用可接受的盐、溶剂化物及组合。
[0016]
在一些实施方案中，所述式(i)或式(ii)的化合物选自：式(ii)的化合物选自(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-乙氧基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-2-(4-(2-(3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺基)乙基)苯氧基)乙酸、(e)-2-(4-(2-(3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺基)乙基)苯氧基)乙酸乙酯、(e)-n-(4-(环丙基甲氧基)苯乙基)-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(3,3,3-三氟丙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((四氢-2h-吡喃-4-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((4-氟苄基)氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-n-(4-(氰基甲氧基)苯乙基)-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(吡啶-3-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(吡啶-2-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-异丁氧基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(吡啶-4-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((4-甲氧基苄基)氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(氧杂环丁-3-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((四氢-2h-吡喃-2-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((四氢呋喃-2-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(噻吩-2-基氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(3,3-二甲基丁氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-羟基乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-n-(4-((1h-四唑-5-基)甲氧基)苯乙基)-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((1-甲
基吡咯烷-2-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-2-羟基-5-(3-((4-羟基苯乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)苯基碳酸氢盐、(e)-3-(4-羟基-3-(吡啶-4-基氧基)苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(4-羟基-3-异丁氧基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3-(4-氟苯氧基)-4-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3-(氰基甲氧基)-4-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-2-(2-羟基-4-(3-((4-羟基苯乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)苯氧基)乙酸、(e)-3-(3-羟基-4-(吡啶-4-基甲氧基)苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(4-((4-氟苄基)氧基)-3-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3-羟基-4-异丁氧基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(4-(氰基甲氧基)-3-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-n-(3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰基)-n-(4-羟基苯乙基)甘氨酸、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)-n-(吡啶-4-基甲基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)-n-异丁基丙烯酰胺、(e)-n-(氰基甲基)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙酰胺、3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(甲基磺酰胺基)苯乙基)丙酰胺，或前述的药用盐、溶剂化物及组合。
[0017]
在一些实施方案中，式(i)或式(ii)的组合物是单位剂型并且被配置成每次施用施用0.1至100mg/kg个体体重。
[0018]
在一些实施方案中，施用式(i)或式(ii)的化合物增加hnf4α表达。
[0019]
在一些实施方案中，施用式(i)或式(ii)的化合物逆转由高脂饮食引起的潘氏细胞的损失。
[0020]
在一些方面，治疗或预防个体的疾病或病症的方法包括：向有需要的个体施用治疗有效量的式i的化合物或药用可接受的盐，
[0021][0022]
其中，r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8和r9各自独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基；虚线键存在或不存在；x是ch2或o；z是chra、nra或o；以及ra选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的
c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基；其中所述疾病或病症与肠相关。
[0023]
在一些实施方案中，施用式(i)的化合物诱导hnf4α的大幅增加。
[0024]
在一些实施方案中，施用式(i)的化合物增加肠绒毛。
[0025]
在一些实施方案中，施用式(i)的化合物增加潘氏细胞形成。
[0026]
在一些实施方案中，与肝或肠相关的疾病或病症是炎症。
[0027]
在一些实施方案中，与肠相关的疾病或病症是与过敏反应相关的病况。
附图说明
[0028]
结合附图，根据以下描述，本文所述的组合物和方法的特征和优点将变得显而易见。这些附图描述了本技术中描述的组合物和方法的某些方面，因此不应被认为是限制性的。在附图中，除非上下文另外规定，否则类似的附图标记或符号通常标识类似的组件。附图可以不按比例绘制。
[0029]
图1例示出在测定胰岛素启动子活性中n-反式-咖啡酰酪胺、n-反式-阿魏酰酪胺和对香豆酰酪胺的剂量反应分析。将二甲亚砜(dmso)和阿尔维林(20μm)分别用作阴性和阳性对照。
[0030]
图2例示出如通过定量pcr测定的n-反式-咖啡酰酪胺、n-反式-阿魏酰酪胺和对香豆酰酪胺对hnf4αmrna水平的影响。dmso和阿尔维林(20μm)分别用于阴性和阳性对照。
[0031]
图3例示出存在于来自各种来源的乙醇提取物中的n-反式-咖啡酰酪胺、n-反式-阿魏酰酪胺和对香豆酰酪胺的量(提取物的％，w/w)，所述来源包括蒺藜(tribulus terrestris)种子(1)、大麻(cannabis)(大麻(hemp))种子壳(2)、番荔枝属(annona spp.)(释迦凤梨(atemoya))种子(3)、刺果番荔枝(annona muricata)(刺果番荔枝(guanabana))种子(4)、秘鲁番荔枝(a.cherimola)(秘鲁番荔枝(cherimoya))叶(5)、玉蜀黍(zea mays)茎(6)、蒺藜(羊头蒺藜(goat head))种子(7)、秘鲁番荔枝硬木(树皮和芯材)(8)、番茄(solanum lycopersicum)磨碎的果渣(9)、马铃薯(s.tuberosum)(黄薯)果皮(10)、胡椒(piper nigrum)(黑胡椒子)果实(11)、马铃薯(紫薯)果皮(12)、马铃薯(红薯)果皮(13)、番茄果渣(14)、番茄挤压果渣(15)、刺果番荔枝(刺果番荔枝)叶(16)、大蒜(allium sativum)(大蒜)球茎(17)、马铃薯(紫薯)果皮(18)、山刺番荔枝(a.montana)(山刺番荔枝(mountain soursop))叶(19)、玉蜀黍叶(20)、马铃薯(紫薯)芽(21)、秘鲁番荔枝(秘鲁番荔枝)种子(22)、大葱(allium fistulosum)(绿洋葱)全植物(23)、马铃薯(白薯)果皮(24)、秘鲁番荔枝属(秘鲁番荔枝)鲜枝(25)、大麻(大麻)叶(26)、马铃薯(白薯)果皮(27)、番茄种子(28)、番茄(牛排番茄(beefsteak))整果(29)、刺果番荔枝(刺果番荔枝)未成熟果实的果皮(30)、刺果番荔枝(刺果番荔枝)成熟的新鲜果实(31)、番荔枝(a.squamosa)(番荔枝(sweetsop))整果(32)、辣椒(capsicum annuum)(赛拉诺胡椒(serrano pepper))果实(33)、马铃薯(褐薯)果皮(34)、宁夏枸杞(lycium barbarum)(枸杞/雪果)果实(35)、马铃薯(紫薯)核(36)、藜麦(chenopodium quinoa)(藜麦(quinoa))种子(37)、甘薯(辣根)(甘薯)全马铃薯(38)、
甘薯(甘薯)果皮(39)、辣根(armoracia rusticana)(辣根(horseradish))根(40)、马铃薯(科罗拉多马铃薯(colorado potato))果皮(41)、荞麦(fagopyrum esculentum)(荞麦(buckwheat))壳(42)、小米椒(葡萄牙红辣椒(piri piri pepper))果实(43)、马铃薯(紫薯)核(44)、辣椒(泰国辣椒(thai chili))茎和叶(45)、刺果番荔枝(刺果番荔枝)未成熟果肉(46)、马铃薯(黄薯)核(47)和苔麸(eragrostis tef)(苔麸(teff))种子(48)。
[0032]
图4例示出用nct处理的dio小鼠的肠中的hnf4α增加。
[0033]
图5例示出用nct处理的dio小鼠的肠中的潘氏细胞增加。
具体实施方式
[0034]
现已表明，从天然来源分离的含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺和含有所述酪胺的提取物增加或增强hnf4α表达/活性。考虑到已经表明肠上皮层内的hnf4α表达降低与ibd发病机理以及与肠炎症有关的其它慢性病况有关，这些天然化合物和提取物可用于恢复ibd及其它慢性胃肠病况的消化健康。有利地，本公开内容的化合物和提取物具有许多潜在益处，包括患者接受度、相对安全性、低成本和用作常规西药方法的补充方法。
[0035]
本公开内容的含羟基肉桂酸酰胺的酪胺是在用于调节已知信号传导途径的试剂的传统筛选试验中已鉴定的先导化合物的类似物。含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺表现出如最初在t6pne工程化胰腺细胞中测定的剂量反应hnf4α活性，并且增加hnf4αmrna水平。尽管不希望受理论束缚，但据信本公开内容的含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺由于对hnf4α结合位点的亲和力高于天然配体棕榈酸(其下调hnf4α活性)而增加hnf4α活性。因此，通过增加hnf4α活性，本公开内容的化合物可用于改善消化健康功能，从而解决诸如ibd、uc和cd的胃肠病症的潜在发病机理。使用本公开内容的组合物，改善并促进了健康和幸福感。
[0036]
组合物
[0037]
在一些方面，本文提供的公开内容提供了具有一个或多个连接至芳香族芳烃的酸性羟基基团的植物衍生的芳香族代谢物，以及它们在调节代谢中的用途。在一个实施方案中，植物衍生的芳香族代谢物是化合物1的结构类似物：
[0038][0039]
特别地，本公开内容包括式(i)的化合物，或者其异构体、盐、同二聚体、异二聚体或缀合物：
[0040][0041]
在一些实施方案中，r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、r8和r9各自独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基。
[0042]
在一些实施方案中，r1、r2、r3和r8各自独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基，并且r4、r5、r6、r7和r9各自独立地是氢、氘、羟基或卤素。
[0043]
在一些实施方案中，r1、r2和r8各自独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基，并且r3、r4、r5、r6、r7和r9各自独立地是氢、氘、羟基或卤素。
[0044]
在一些实施方案中，虚线键存在或不存在。
[0045]
在一些实施方案中，x是ch2或o。
[0046]
在一些实施方案中，z是chra、nra或o。
[0047]
在一些实施方案中，ra选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任
选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基。
[0048]
在一些实施方案中，式(i)的化合物提供为其药用可接受的盐或溶剂化物。
[0049]
在一些实施方案中，式(i)的化合物选自(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-乙氧基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-2-(4-(2-(3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺基)乙基)苯氧基)乙酸、(e)-2-(4-(2-(3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺基)乙基)苯氧基)乙酸乙酯、(e)-n-(4-(环丙基甲氧基)苯乙基)-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(3,3,3-三氟丙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((四氢-2h-吡喃-4-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((4-氟苄基)氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-n-(4-(氰基甲氧基)苯乙基)-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(吡啶-3-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(吡啶-2-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-异丁氧基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(吡啶-4-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((4-甲氧基苄基)氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(氧杂环丁-3-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((四氢-2h-吡喃-2-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((四氢呋喃-2-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(噻吩-2-基氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(3,3-二甲基丁氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-羟基乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-n-(4-((1h-四唑-5-基)甲氧基)苯乙基)-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-2-羟基-5-(3-((4-羟基苯乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)苯基碳酸氢盐、(e)-3-(4-羟基-3-(吡啶-4-基氧基)苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(4-羟基-3-异丁氧基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3-(4-氟苯氧基)-4-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3-(氰基甲氧基)-4-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-2-(2-羟基-4-(3-((4-羟基苯乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)苯氧基)乙酸、(e)-3-(3-羟基-4-(吡啶-4-基甲氧基)苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(4-((4-氟苄基)氧基)-3-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3-羟基-4-异丁氧基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(4-(氰基甲氧基)-3-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-n-(3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰基)-n-(4-羟基苯乙基)甘氨酸、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)-n-(吡啶-4-基甲基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)-n-异丁基丙烯酰胺、(e)-n-(氰基甲基)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙酰胺、3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(甲基磺酰胺基)苯乙基)丙酰胺，或前述的药用盐、溶剂化物及组合。
[0050]
在一些实施方案中，本公开内容包括式(ii)的化合物：
[0051][0052]
在一些实施方案中，r1、r2、r3和r4各自独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基。
[0053]
在一些实施方案中，虚线键存在或不存在。
[0054]
在一些实施方案中，z是chra、nra或o。
[0055]
在一些实施方案中，ra选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基。
[0056]
在一些实施方案中，式(ii)的化合物选自(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-乙氧基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-2-(4-(2-(3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺基)乙基)苯氧基)乙酸、(e)-2-(4-(2-(3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺基)乙基)苯氧基)乙酸乙酯、(e)-n-(4-(环丙基甲氧基)苯乙基)-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(3,3,3-三氟丙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((四氢-2h-吡喃-4-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((4-氟苄基)氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-n-(4-(氰基甲氧基)苯乙基)-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(吡啶-3-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(吡啶-2-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-异丁氧基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(吡啶-4-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((4-甲氧基苄基)氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(氧杂环丁-3-基甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((四氢-2h-吡喃-2-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((四氢呋喃-2-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、
(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(噻吩-2-基氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(3,3-二甲基丁氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(2-羟基乙氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-n-(4-((1h-四唑-5-基)甲氧基)苯乙基)-3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)苯乙基)丙烯酰胺、(e)-2-羟基-5-(3-((4-羟基苯乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)苯基碳酸氢盐、(e)-3-(4-羟基-3-(吡啶-4-基氧基)苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(4-羟基-3-异丁氧基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3-(4-氟苯氧基)-4-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3-(氰基甲氧基)-4-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-2-(2-羟基-4-(3-((4-羟基苯乙基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)苯氧基)乙酸、(e)-3-(3-羟基-4-(吡啶-4-基甲氧基)苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(4-((4-氟苄基)氧基)-3-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(3-羟基-4-异丁氧基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-3-(4-(氰基甲氧基)-3-羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、(e)-n-(3-(3,4-二羟基苯基)丙烯酰基)-n-(4-羟基苯乙基)甘氨酸、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)-n-(吡啶-4-基甲基)丙烯酰胺、(e)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)-n-异丁基丙烯酰胺、(e)-n-(氰基甲基)-3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙烯酰胺、3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-羟基苯乙基)丙酰胺、3-(3,4-二羟基苯基)-n-(4-(甲基磺酰胺基)苯乙基)丙酰胺，或前述的药用盐、溶剂化物及组合。
[0057]
在一些实施方案中，式(ii)的化合物提供为其药用可接受的盐或溶剂化物。
[0058]
在一些实施方案中，本公开内容包括式(iii)的化合物：
[0059][0060]
在一些实施方案中，r3和r4各自独立地选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
2-12
杂环基、任选取代的-(o)c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基。
[0061]
在一些实施方案中，各自独立地选择的虚线键存在或不存在。
[0062]
在一些实施方案中，z是chra、nra或o。
[0063]
在一些实施方案中，ra选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代
的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
杂芳基。
[0064]
在一些实施方案中，qa、qb、qc、qd各自独立地选自键、chra、nra、c＝o和-o-。
[0065]
在一些实施方案中，ra选自氢、氘、羟基、卤素、氰基、硝基、任选取代的氨基、任选取代的c-酰胺基、任选取代的n-酰胺基、任选取代的酯、任选取代的-(o)c
1-6
烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烯基、任选取代的-(o)c
1-6
炔基、任选取代的-(o)c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
环烷基、任选取代的-(o)c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
4-12
杂环基、任选取代的-(o)c
4-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
5-12
芳基、任选取代的-(o)c
1-12
杂芳基和任选取代的-(o)c
1-6
烷基c
1-12
杂芳基。
[0066]
在一些实施方案中，qc、qd不存在。在一些实施方案中，qd不存在。
[0067]
在一些实施方案中，n是1、2、3或4。
[0068]
在一些实施方案中，式(ii)的化合物提供为其药用可接受的盐或溶剂化物。
[0069]“异构体”尤其是指光学异构体(例如基本上纯的对映异构体、基本上纯的非对映异构体及其混合物)以及构象异构体(即，仅其至少一个化学键的角度不同的异构体)、位置异构体(特别是互变异构体)和几何异构体(例如，顺式-反式异构体)。
[0070]
在某些实施方案中，式(i)或式(ii)的化合物选自：
[0071][0072]
本公开内容的化合物的盐是指具有母体化合物的所需药理活性的化合物，并且包括：(1)与无机酸形成或与有机酸形成的酸加成盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；所述有机酸例如乙酸、丙酸、己酸、环戊丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、樟脑磺酸、4-甲苯磺酸、4-甲基双环[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等；或者(2)当母体化合物中存在的酸性质子被取代时形成的盐。
[0073]
如本领域已知的，同二聚体是由两个相同的含有羟基肉桂酸酰胺亚单元的酪胺组成的分子。通过比较，异二聚体是由两种不同的含有羟基肉桂酸酰胺亚单元的酪胺组成的分子。本公开内容的同二聚体的实例包括但不限于交联的n-反式-阿魏酰酪胺二聚体、交联的n-反式-咖啡酰酪胺二聚体和交联的对香豆酰酪胺二聚体。参见，例如，king&calhoun(2005)phytochemistry 66(20):2468-73，其教导了从马铃薯常见疮痂病变(scab lesions)中分离交联的n-反式-阿魏酰酪胺二聚体。
[0074]
含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺单体和其它化合物如木酚素酰胺的缀合物。缀合物的
实例包括但不限于大麻素a、大麻素b、大麻素c、大麻素d、大麻素e、大麻素f和克罗酰胺。
[0075]
每当基团被描述为“任选取代的”时，所述基团可以是未取代的或被所示取代基中的一个或多个取代。同样，当基团被描述为“未取代或取代的”时，如果是取代的，则取代基可以选自所示取代基中的一个或多个。如果没有指示取代基，则其意指所示“任选取代的”或“取代的”基团可以单独地且独立地被一个或多个取代基取代，所述取代基单独地且独立地选自烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基、杂脂环基、芳烷基、杂芳烷基、(杂脂环基)烷基、羟基、受保护的羟基、烷氧基、芳氧基、酰基、巯基、烷基硫基、芳基硫基、氰基、卤素、硫基羰基、o-氨甲酰基、n-氨甲酰基、o-硫基氨甲酰基、n-硫基氨甲酰基、c-酰胺基、n-酰胺基、s-磺酰胺基、n-磺酰胺基、c-羧基、保护的c-羧基、o-羧基、异氰酸基、硫氰酸基、异硫氰酸基、硝基、甲硅烷基、亚磺酰基、亚硫酰基、磺酰基、卤代烷基、卤代烷氧基、三卤代甲磺酰基、三卤代甲磺酰胺基、氨基、单取代的氨基基团和二取代的氨基基团，以及其受保护的衍生物。
[0076]
对于本文的基团，以下括号中的下标进一步如下限定基团：“(cn)”限定了基团中的碳原子的确切数量(n)。例如，“c
1-c
6-烷基”表示具有1个至6个碳原子(例如，1、2、3、4、5或6，或者衍生自其中的任何范围(例如，3-6个碳原子))的那些烷基基团。
[0077]
除了异构体、盐、同二聚体、异二聚体和缀合物之外，含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺还可以被糖基化。可以通过将含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺转糖基化以向含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺中添加葡萄糖单元，例如一个、两个、三个、四个、五个或多于五个葡萄糖单元来制备糖基化的含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺。转糖基化可以用任何合适的酶与作为供体的支链淀粉、麦芽糖、乳糖、部分水解的淀粉和麦芽糖糊精进行，所述酶包括但不限于支链淀粉酶和异麦芽糖酶(lobov等人，(1991)agric.biol.chem.55:2959-2965)、～-半乳糖苷酶(kitahata等人，(1989)agric.biol.chem.53:2923-2928)、糊精蔗糖酶(yamamoto等人，(1994)biosci.biotech.biochem.58:1657-1661)或环糊精葡萄糖转移酶。
[0078]
如本文使用，“烷基”是指包括完全饱和的(无双键或叁键)烃基团的直链或支链烃链。烷基基团可以具有1个至20个碳原子(每当在本文中出现时，诸如“1至20”的数值范围是指给定范围内的每一个整数；例如，“1个至20个碳原子”意指烷基基团可以由1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等,直至并且包括20个碳原子组成，然而本定义还涵盖存在未指定数值范围的术语“烷基”)。烷基基团也可以是具有1个至10个碳原子的中等大小的烷基。烷基基团也可以是具有1个至6个碳原子的低级烷基。可以将化合物的烷基基团表示为“c1-c4烷基”或类似的表示。仅通过实例，“c1-c4烷基”表示在烷基链中有一个至四个碳原子，即，烷基链选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。典型的烷基基团包括但绝不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基和己基。烷基基团可以是取代或未取代的。
[0079]
本文所用，术语“卤素原子”或“卤素”意指元素周期表第7族的任一个放射稳定的原子，例如氯(cl)、氟(f)、溴(br)和碘(i)基团。
[0080]
在本文所述的基团中的任一个中，可用的氢可以被烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳烷基、烷基芳基、杂芳烷基、杂芳基烯基、杂芳基炔基、烷基杂芳基、羟基、羟基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、烷氧基烷氧基、烷氧基羰基、酰基、卤素、硝基、芳氧基羰基、氰基、羧基、芳烷氧基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、烷基硫基、芳基硫基、杂芳基
硫基、芳烷基硫基、杂芳烷基硫基、环烷基或杂环基取代。
[0081]
本技术中所示的结构的原子上的任何未定义的化合价隐含地表示与该原子键合的氢原子。
[0082]
如本文使用，“烯基”是指在直链或支链烃链中含有一个或多个双键的如本文定义的烷基基团。烯基基团可以是未取代或取代的。
[0083]
如本文使用，“炔基”是指在直链或支链烃链中含有一个或多个叁键的如本文定义的烷基基团。炔基基团可以是未取代或取代的。
[0084]
如本文使用，“环烷基”是指完全饱和的(无双键或叁键)单环或多环烃环体系。当由两个或更多个环组成时，环可以以稠合方式连接在一起。环烷基基团可以在环中含有3个至10个原子或者在环中含有3个至8个原子。环烷基基团可以是未取代或取代的。典型的环烷基基团包括但绝不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。
[0085]
如本文使用，“芳基”是指碳环(全碳)单环或多环芳香族环系(包括例如稠合、桥接或螺环体系，其中两个碳环共用化学键，例如一个或多个芳基环与一个或多个芳基或非芳基环)，其在至少一个环中具有完全离域的π电子体系。芳基基团中的碳原子数可以变化。例如，芳基基团可以是c
6-c
14
芳基基团、c
6-c
10
芳基基团或c6芳基基团。芳基基团的实例包括但不限于苯、萘和甘菊环。芳基基团可以是取代或未取代的。
[0086]
如本文使用，“杂环基”是指包含至少一个杂原子(例如，o、n、s)的单环或多环环系。此类体系可以是不饱和的，可以包括一些不饱和度，或者可以含有一些芳香族部分，或者全是芳香族的。杂环基基团可以含有3个至30个原子。杂环基基团可以是未取代或取代的。
[0087]
在具体实施方案中，r1存在并且表示对位处的羟基基团，并且r2是间位处的羟基或低级烷氧基基团。在某些实施方案中，具有式(i)的结构的含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺呈反式构型。
[0088]
如本文使用，“杂芳基”是指含有一个或多个除了碳之外的杂原子(包括但不限于氮、氧和硫)和至少一个芳香族环的单环或多环芳香族环系(具有含完全离域的π电子体系的至少一个环的环系)。杂芳基基团的环中的原子数可以变化。例如，杂芳基基团可以在环中含有4个至14个原子、在环中含有5个至10个原子或者在环中含有5个至6个原子。此外，术语“杂芳基”包括稠环体系，其中两个环，例如至少一个芳基环和至少一个杂芳基环或者至少两个杂芳基环共用至少一个化学键。杂芳基环的实例包括但不限于呋喃、呋咱、噻吩、苯并噻吩、酞嗪、吡咯、噁唑、苯并噁唑、1,2,3-噁二唑、1,2,4-噁二唑、噻唑、1,2,3-噻二唑、1,2,4-噻二唑、苯并噻唑、咪唑、苯并咪唑、吲哚、吲唑、吡唑、苯并吡唑、异噁唑、苯并异噁唑、异噻唑、三唑、苯并三唑、噻二唑、四唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、嘌呤、蝶啶、喹啉、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、噌啉和三嗪。杂芳基基团可以是取代或未取代的。
[0089]
如本文使用的术语“氨基”是指-nh2基团。
[0090]
如本文使用，术语“羟基”是指-oh基团。
[0091]“氰基”基团是指
“‑
cn”基团。
[0092]“羰基”基团是指c＝o基团。
[0093]“c-酰胺基”基团是指
“‑
c(＝o)n(rarb)”基团，其中ra和rb可以独立地是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基、杂脂环基、芳烷基或(杂脂环基)烷基，如
以上定义。c-酰胺基可以是取代或未取代的。
[0094]“n-酰胺基”基团是指“rc(＝o)n(ra)
‑”
基团，其中r和ra可以独立地是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基、杂脂环基、芳烷基或(杂脂环基)烷基，如以上定义。n-酰胺基可以是取代或未取代的。
[0095]“脲”基团是指
“‑
n(rarb)-c(＝o)-n(rarb)
‑”
基团，其中ra和rb可以独立地是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基、杂脂环基、芳烷基或(杂脂环基)烷基，如以上定义。脲基团可以是取代或未取代的。
[0096]
如本文使用的术语“药用可接受的盐”是广义术语，并且应赋予本领域普通技术人员常用且惯用的含义(并且不限于特殊或定制的含义)，并且是指但不限于不会对其所施用的生物体造成显著刺激并且不会消除化合物的生物活性和性质的化合物的盐。在一些实施方案中，盐是化合物的酸加成盐。药用盐可以通过使化合物与无机酸反应来获得，所述无机酸例如氢卤酸(例如，盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸和磷酸。药用盐也可以通过使化合物与有机酸反应来获得，所述有机酸例如脂肪族或芳香族羧酸或磺酸，例如甲酸、乙酸(acoh)、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、丙二酸、马来酸、富马酸、三氟乙酸(tfa)、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、琥珀酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、烟酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸、丁酸、苯乙酸、苯丁酸、丙戊酸、1,2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸或萘磺酸。药用盐也可以通过使化合物与碱反应形成盐来获得，所述盐例如铵盐、碱金属盐(例如锂、钠或钾盐)、碱土金属盐(例如钙、镁或铝盐)，有机碱的盐，所述有机碱例如二环己胺、n-甲基-d-葡糖胺、三(羟甲基)甲胺、c
1-c7烷基胺、环己胺、二环己胺、三乙醇胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇，以及与氨基酸如精氨酸和赖氨酸形成的盐；或无机碱的盐，所述无机碱例如氢氧化铝、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸钠、氢氧化钠等。
[0097]
应理解，在本文所述的具有一个或多个手性中心的任何化合物中，如果没有明确指出绝对立体化学，则每个中心可以独立地具有r-构型或s-构型或其混合物。因此，本文提供的化合物可以是对映体纯的、对映体富集的，或者可以是立体异构混合物，并且包括所有非对映异构体和对映异构体形式。此外，应理解，在产生可以定义为e或z的几何异构体的本文所述的具有一个或多个双键的任何化合物中，每个双键可独立地为e或z及其混合物。如果需要，通过诸如立体选择性合成和/或通过手性色谱柱分离立体异构体的方法获得立体异构体。
[0098]
同样，应理解，在所述的任何化合物中，也包括所有互变异构形式。
[0099]
应理解，本文所述的化合物可以被同位素标记或通过其它方式标记，包括但不限于使用发色团或荧光部分、生物发光标记或化学发光标记。用诸如氘的同位素取代可以由于较高的代谢稳定性而提供某些治疗优势，例如，增加的体内半衰期或降低剂量要求。化合物结构中表示的每种化学元素可以包括所述元素的任何同位素。例如，在化合物结构中，氢原子可以明确地公开或理解为存在于该化合物中。氢原子可以存在于化合物的任何位置处，氢原子可以是氢的任何同位素，包括但不限于氢-1(氕)、氢-2(氘)和氢-3(氚)。因此，除非上下文另外明确规定，否则本文提及的化合物涵盖所有可能的同位素形式。
[0100]
应理解，本文所述的化合物可以被同位素标记或通过其它方式标记，包括但不限于使用发色团或荧光部分、生物发光标记或化学发光标记。用诸如氘的同位素取代可以由于较高的代谢稳定性而提供某些治疗优势，例如，增加的体内半衰期或降低剂量需求。化合
物结构中表示的每种化学元素可以包括所述元素的任何同位素。例如，在化合物结构中，氢原子可以明确地公开或理解为存在于该化合物中。氢原子可以存在于化合物的任何位置处，氢原子可以是氢的任何同位素，包括但不限于氢-1(氕)、氢-2(氘)和氢-3(氚)。因此，除非上下文另外明确规定，否则本文提及的化合物涵盖所有可能的同位素形式。
[0101]
应理解，本文所述的方法和制剂包括使用一些实施方案的化合物的结晶形式、非晶相和/或药用可接受的盐、溶剂化物、水合物和构象异构体，以及这些化合物的具有相同类型活性的代谢物和活性代谢物。构象异构体是作为构象异构体的结构。构象异构现象是具有相同结构式但原子围绕旋转键的不同构象(构象异构体)的分子的现象。在具体实施方案中，本文所述的化合物以与药用可接受的溶剂如水、乙醇等的溶剂化形式存在。在其它实施方案中，本文所述的化合物以非溶剂化形式存在。溶剂化物含有化学计量或非化学计量的量的溶剂，并且可以在用药用可接受的溶剂如水、乙醇等结晶的过程中形成。当溶剂是水时形成水合物，或者当溶剂是醇时形成醇化物。此外，本文提供的化合物可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在。通常，出于本文提供的化合物和方法的目的，溶剂化形式被认为等同于非溶剂化形式。可以以其它形式提供一些实施方案的化合物，包括无定形形式、研磨形式和纳米颗粒形式。
[0102]
同样，应理解本文所述的化合物，例如一些实施方案的化合物，包括本文所述的任何形式的化合物(例如，药用可接受的盐、前药、结晶形式、无定形形式、溶剂化形式、对映异构形式、互变异构形式等)。
[0103]
活性化合物的来源
[0104]
本公开内容的化合物可以从已知具有式(i)的化合物的任何合适的植物种类和/或植物原料获得。优选地，将化合物提供为包含所述化合物或基本上纯的化合物的提取物。
[0105]“提取物”是指含有式(i)化合物的组合物，其与从其中获得提取物的天然来源材料中存在的其它不需要的物质分离。在一些实施方案中，天然来源材料是植物。植物提取物可以从任何植物组织获得，包括整个植物；植物部分，例如芽营养器官/结构(例如叶、茎和块茎)、根、花和花器官/结构(例如，苞片、萼片、花瓣、雄蕊、心皮、花药和胚珠)、种子(包括胚、胚乳和种皮)或果实(成熟的子房)；植物组织(例如，脉管组织、基本组织等)；细胞(例如，保卫细胞、卵细胞等)，或者其分泌物以及其子代和培养物或细胞系。优选地，提取物含有对于人类食用通常被认为安全(gras)的化合物。因此，在某些实施方案中，提取物来自可食用来源。在这方面，提取物是可食用的提取物。
[0106]
提取物可以通过冷冻、研磨、浸渍、粉碎、发酵、渗滤、煎煮、溶剂提取(例如，分层)或沉淀、用活性炭处理、蒸发、过滤和/或对目标源材料进行色谱分级来制备。在这方面，本公开内容的“提取物”可以是粗品、分级的、亚分级的、拆分的、分离的、富集的或纯化的，而不限于此。术语“粗品”意指未完全与其存在的原始组合物的组分分离的化合物或分子。在涉及级分或亚级分的实施方案中，可以对粗提取物中的分子进行部分分离以提供含有其它物质的更少粗提取物。在一些实施方案中，化合物被分离。术语“分离的”意指化合物或分子相对于其天然存在的复杂细胞环境(例如，在粗提取物中)基本上富集或纯化。当分离的分子被富集或纯化时，纯度的绝对水平不是关键的，并且本领域技术人员可以根据材料的用途容易地确定合适的纯度水平。在一些情况下，分离的分子形成组合物的一部分(例如含有许多其它物质的或多或少的粗提取物)，所述组合物可以例如含有其它组分。在其它情况
下，可以将分离的分子纯化至基本均质，例如通过分光光度法，通过nmr或通过色谱法(例如lc-ms)测定。
[0107]
用于制备提取物的合适的溶剂包括例如正戊烷、己烷、丁烷、氯仿、二氯甲烷、二乙醚、乙腈、水、丁醇、异丙醇、乙醇、甲醇、冰醋酸、丙酮、丁酮、戊酮、诺氟烷(hfa134a)、乙酸乙酯、二甲亚砜、七氟丙烷(hfa227)和亚临界或超临界流体，例如液态二氧化碳和水，或者其任意比例的组合。当使用如上所列的溶剂时，所得提取物通常含有非特异性脂溶性材料。这可以通过多种方法除去，包括“冬化(winterization)”(其涉及冷却至指定温度，通常-20℃，随后过滤或离心以除去蜡状压载物(ballast))，用亚临界或超临界二氧化碳或非极性溶剂(例如，己烷)提取和通过蒸馏。
[0108]
富集本公开内容的化合物的提取物理想地通过色谱分级获得。色谱分级通常包括柱色谱法，并且可以基于分子大小、电荷、溶解度和/或极性。取决于色谱方法的类型，可以用由例如右旋糖酐、琼脂糖、聚丙烯酰胺、二氧化硅、c18、c8、聚乙烯吡咯烷酮、聚苯乙烯、硅藻土和苯基-己基组成的基质材料进行柱色谱法，并且可以包括溶剂，例如二甲亚砜、吡啶、水、二甲基甲酰胺、甲醇、盐水、二氯乙烷、氯仿、丙醇、乙醇、异丁醇、甲酰胺、二氯甲烷、丁醇、乙腈、异丙醇、四氢呋喃、二氧杂环己烷、氯仿/二氯甲烷、甲醇、己烷和乙酸乙酯。
[0109]
通常，色谱步骤的产物收集在多个级分中，然后可以使用任何合适的分析技术(例如，薄层色谱法、质谱法和紫外吸收法)测试所需化合物的存在。然后可以选择富集所需化合物的级分用于进一步纯化。
[0110]
作为替代方案，或与色谱法结合，可以进行结晶以获得高纯度酰胺。含有酰胺的羟基肉桂酸酪胺溶解度是通过改变温度和/或溶液的组成调节的羟基肉桂酸酪胺，例如通过除去乙醇，和/或调节ph以促进沉淀，随后过滤或离心沉淀的晶体或油状物。其它合适的方法包括但不限于液-液提取、离心分配色谱法或吸附到树脂上或用树脂除去杂质。
[0111]
化合物的“基本上纯的”制剂定义为通过hplc图谱的面积归一化测定的色谱纯度(所需化合物的)大于95％、更优选大于96％、更优选大于97％、更优选大于98％、更优选大于99％、并且最优选大于99.5％的制剂。
[0112]
术语“包含化合物的提取物”包括所需化合物的色谱纯度为至少2％、优选大于5％、更优选大于10％的制剂。此类提取物通常含有比“基本上纯的”制剂更大比例的杂质、非靶标物质和其它分子。
[0113]
在具体实施方案中，“包含化合物的提取物”是“植物性”产物或物质。在本文中，“植物性”是指“包括植物材料、藻类、宏观真菌及其组合的产品”。通过用于制备提取物(例如，通过粉碎、煎煮、压榨(expression)、水提取和/或乙醇提取)并提供定量的一种或多种目标化合物的工艺步骤来限定植物制品(botanicals)。
[0114]
理想地，从植物中提取和/或纯化本公开内容的化合物。示例性植物来源包括但不限于表1中列出的类、科、目、属、种的植物。
[0115]
表1
[0116]
[0117][0118]
通过举例的方式，通过粉碎蒺藜的干燥果实或研磨蒺藜，将粉碎的材料在室温下经受80％乙醇，过滤并浓缩80％乙醇提取物，将浓缩的提取物重新悬浮在水中，用己烷使水溶液分层，向水层中添加氯仿，使氯仿层进行硅胶液相色谱，获得含有n-反式-咖啡酰酪胺的提取物，参见例如ko等人，(2015)internatl.j.mol.med.36(4):1042-8。
[0119]
包含含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺的提取物可以使用常规技术标准化，例如高效液相色谱(hplc)或高效薄层色谱(hptlc)。术语“标准化提取物”是指通过鉴定提取物中存在的特征成分或生物活性标记物而标准化的提取物。可以例如通过分析诸如质谱(ms)、红外(ir)、紫外(uv)和核磁共振(nmr)光谱数据的频谱数据来进行表征。
[0120]
生物活性
[0121]
化合物和/或提取物的生物活性可以使用一种或多种以下更详细描述的熟知的生物测定和动物模型来测定。这些测定中的每一个将提供本公开内容的化合物的活性的测量以提供对与消化健康和慢性肠疾病或病症(包括但不限于ibd、肠易激综合征(ibs)、uc、乳糜泻和cd)相关的细胞终点的有益效果。
[0122]
上皮屏障完整性模型。为了评估屏障功能，将3d球状体与来自患有ibs的个体或健康对照的血浆样品进行基底外侧(basolaterally)孵育。将仅培养基和2mm乙二醇四乙酸(egta)分别用作阴性和阳性对照。在存在或不存在本公开内容的化合物或提取物的情况下，将球状体与2ml含有37.5％(v/v)血浆、52.5％(v/v)培养基和10％(v/v)荧光素异硫氰酸酯标记的4kda葡聚糖(fd4)一起孵育。通过共聚焦显微镜评估基底至腔的fd4渗透，参见ludidi等人，(2015)plos one 10(5):e0123498。
[0123]
肠源性极化单层(edm)-单核细胞共培养模型。为了评估微生物、肠上皮细胞和免疫系统之间的3向相互作用，可以使用edm-单核细胞edm-单核细胞共培养模型。参见wo 2018/161077 a1。在该测定中，edm适于在2室载玻片中与顶侧(apical side)上的ibd相关
微生物和基底外侧上的非上皮细胞(免疫和非免疫细胞，例如单核细胞、t细胞、肌成纤维细胞等)共培养，以重建包含微生物、肠上皮细胞和免疫系统的三向系统。可以评估微生物对上皮细胞的影响，以及后者在基底外侧释放可溶性因子(细胞因子，例如mcp-1或butyrophilins，其吸引yδt细胞)的能力，以及测量这些因子如何触发非上皮细胞的募集和活化。使用这种方法，本公开内容的提取物或化合物对肠道微生物、上皮细胞和非上皮细胞之间的复杂相互作用的影响可以通过rna测序单独评估基因表达，并且通过qpcr和elisa评估细胞因子表达。
[0124]
ibs的动物模型。束缚应激(wrs)模型是人ibs的已建立的模型(williams等人，(1988)gastroenterology 94:611-621)。wrs模型通常应用一次(急性测试)并且包括强制固定动物至少持续2小时。该测试的功效通过即时痛觉过敏的发展来证实，所述即时痛觉过敏可通过结肠-直肠扩张(crd)数、小肠转运的抑制、大肠活动的刺激和排泄物的增加来量化。此外，已经证明，在该测定中大鼠呈现低度粘膜炎症，以及肥大细胞和嗜酸性粒细胞显著增加(traini等人，(2016)neurogastroenterol.motil.28:1172-1185；traini等人，(2017)j.cell.mol.med.21:735-745)，这与ibs的结肠活检中所描述的重叠。此外，这些动物表现出神经胶质细胞、抑制性和兴奋性神经递质和受体的重要变化，这被解释为ibs患者中存在的运动障碍和超敏反应的原因。此类模型可用于证实本公开内容的化合物的体内反应并探索关键概念，例如剂量反应。
[0125]
慢性结肠炎的动物模型。通过暴露于溶解在饮用水中的1％-5％(wt/vol)右旋糖酐硫酸钠(分子量36,000-50,000kda)诱导慢性结肠炎(okayasu等人，(1990)gastroenterology 98:694-702)。将dss随意给予5-7天，随后几天给予正常饮用水。在dss施用期间，小鼠发展急性结肠炎，伴有溃疡、体重减轻和血性腹泻。因此，从第三个dss循环后的第二天开始，向小鼠提供本公开内容的化合物或提取物以证明体内反应。对整个结肠评估宏观和组织学评分，同时可以对从邻近和远离严重坏死损伤的炎症区域收集的结肠段进行生化测定。
[0126]
计数器筛选。为了避免脱靶效应，通常使用计数器筛选在化合物库中进行选择。在本公开内容中，化合物作为hfn4α活性调节剂的活性是所需的靶标，即使可能发生其它脱靶效应。已经上市的基于hfn4α以外的靶效应的人用药物随后已经显示具有作为hnf4α活化剂的活性(alverine and benfluorex；lee等人，(2013)acs chem.biol.8(8):1730-6)。阿尔维林(alverine)已经作为胃肠病症的平滑肌松弛剂上市，而苯氟雷司(benflurex)作为食欲抑制剂上市。已知苯氟雷司通过将酯部分裂解代谢成芬氟拉明(fenfluramine，5-羟色胺(serotonin)5-羟色胺(5-hydroxytryptamine)2(5-ht2)受体的有效激动剂)，这种作用被认为与其作为食欲抑制剂的活性有关(porter等人，(1999)br.j.pharmacol.128(1):13-20)。然而，苯氟雷司对5-ht2受体的调节与不希望的心肺副作用有关。因此，基于合成化合物的这些经历，将使用例如荧光成像板读数器(flipr)测定来测试本公开内容的化合物和提取物对5-羟色胺受体活化的脱靶效应，荧光成像板读数器(flipr)测定允许快速检测cho-k1细胞中表达人5-ht
2a
、5-ht
2b
或5-ht
2c
受体的细胞中的细胞内钙水平的升高。参见，例如，porter等人，(1999)br.j.pharma col.12 8(1):13-20。可以基于最初的研究选择其它的计数器筛选，其中毒性作用可以与其它脱靶作用相关联。
[0127]
制剂
[0128]
包含本公开内容的化合物的基本上纯的化合物或提取物可以与载体组合并以任何合适的形式提供以供个体食用或向个体施用。在这方面，将化合物或提取物作为外源性成分或添加剂添加到消耗品中。合适的消耗品形式包括但不限于饮食补充剂、食品成分或添加剂、医学食品、营养品或药物组合物。在一些实施方案中，化合物或提取物以液体或粉末的形式提供。
[0129]
在本文中，所述饮食补充剂、食品成分或添加剂、医学食品、营养品独立地在每次出现时均不包含大麻属提取物，并且大麻属在每次出现时均不应用于饮食补充剂、食品成分或添加剂、医学食品、营养品中。
[0130]
食品成分或添加剂是旨在直接或间接导致其成为任何食品的组分或以其它方式影响任何食品的特性的可食用物质(包括旨在用于生产、制造、填装、加工、制备、处理、包装、运输或保存食品的任何物质)。食品产品，特别是功能性食品，是在加工过程中强化或富集以包括附加补充营养物和/或有益成分的食品。根据本公开内容的食品产品可以例如呈黄油、人造黄油、甜味或香味涂抹酱、调味品、饼干、健康棒、面包、蛋糕、谷物、糖果、糖果糕点、汤、奶、酸奶或发酵奶产品、干酪、基于果汁和基于蔬菜的饮料、发酵饮料、奶昔、调味水、茶、油或任何其它合适的食品。在一些实施方案中，食品产品是全食品产品，其中化合物的浓度已经通过特定的收获后和食物生产加工方法富集至提供有效量的化合物的水平。
[0131]
饮食补充剂是含有本公开内容的化合物或提取物并且旨在补充饮食的口服产品。营养品是来源于食品来源的产品，其提供食品中存在的基本营养价值之外的附加健康益处。药物组合物被定义为旨在在疾病的诊断、治愈、减轻、治疗或预防中提供药理学活性或其它直接作用，或者影响人或其它动物的身体的结构或任何功能的任何组分的药物产品。饮食补充剂、营养品和药物组合物可以以许多胶囊形式，形式如片剂、包衣片剂、丸剂、胶囊剂、微丸、颗粒剂、软凝胶剂、软明胶胶囊剂、液体剂、散剂、乳剂、混悬剂、酏剂、糖浆剂和任何其它适合使用的形式存在。在本文中，所述饮食补充剂和营养品独立地在每次出现时均不包含大麻属提取物，并且大麻属在每次出现时均不应用于饮食补充剂和营养品中。本文公开的药物组合物可以以本身已知的方式制造，例如通过常规的混合、溶解、制粒、制糖衣丸、研磨、乳化、包封、包埋或压片方法。另外，包含有效实现其预期目的的量的活性成分。本文公开的药物组合中使用的许多化合物可以作为与药物相容的抗衡离子的盐的形式提供。
[0132]
本领域中存在的施用化合物、盐和/或组合物的多种技术包括但不限于口服、直肠、肺、局部、气溶胶、注射、输注和肠胃外递送，包括肌内、皮下、静脉、髓内注射、鞘内、直接心室内、腹膜内、鼻内和眼内注射。在一些实施方案中，可以口服施用本文所述的化合物，包括式(i)、(ii)、(iii)的化合物或其药用可接受的盐。
[0133]
人们也可以以局部而非全身方式施用化合物、盐和/或组合物，例如，通过将化合物直接注射或植入受影响区域，通常以贮库或缓释制剂形式。此外，人们可以在靶向药物递送系统中，例如在涂覆有组织特异性抗体的脂质体中施用化合物。脂质体将靶向器官并且被器官选择性吸收。例如，可能需要鼻内或肺部递送以靶向呼吸疾病或病况。
[0134]
如果需要，组合物可以存在于包装或分配器装置中，其可以含有一种或多种含有活性成分的单位剂型。包装可以例如包括金属箔或塑料箔，例如泡罩包装。包装或分配器装置可以附有给药说明书。包装或分配器还可以附有与容器有关的注意事项，其是由管理医药品的制造、使用或销售的政府机构所指定的形式，该注意事项反映该机构批准该药物形
式用于人类或兽医学施用。此类注意事项可以是例如美国食品药品管理局(u.s.food and drug administration)批准用于处方药的标签，或批准的产品插页。还可以制备在相容性药物赋形剂中配制的可以包含本文所述的化合物和/或盐的组合物，并且置于适当的容器中，并标记用于指定病况的治疗。
[0135]
化合物、盐和/或药物组合物可以以试剂盒的形式提供给施用医师或其它保健专业人员。试剂盒是容纳含有在合适的药物组合物中的化合物的容器以及用于向个体施用药物组合物的说明书的套件。试剂盒还可以任选地含有一种或多种附加治疗剂。试剂盒还可以含有用于连续或顺序施用的单独剂量的化合物或药物组合物。试剂盒可以任选地包含一种或多种诊断工具和使用说明书。试剂盒可以含有例如合适的递送装置(例如，注射器等)，以及施用化合物和任何其它治疗剂的说明书。试剂盒可以任选地包括用于储存、重构(如果适用)和施用所包含的任何或所有治疗剂的说明书。试剂盒可以包括多个容器，其反映了待给予至个体的施用数量。
[0136]
在一些实施方案中，式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物以约1-200mg/kg体重的剂量施用。在一些实施方案中，式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物以约1-10、1-20、1-30、1-40、1-50、1-60、1-70、1-80、1-90、1-100、1-200、1-300、1-400、1-500、1-600、1-700、1-800、1-900、1-1000、1-11、1-12、1-13、1-13、1-14、1-15、1-16、1-17、1-18、1-19、10-20、10-30、10-40、10-50、10-60、10-70、10-80、10-90、10-100、10-200、10-300、10-400、10-500、10-600、10-700、10-800、10-900、10-1000、20-30、20-40、20-50、20-60、20-70、20-80、20-90、20-100、20-200、20-300、20-400、20-500、20-600、20-700、20-800、20-900、20-1000、30-40、30-50、30-60、30-70、30-80、30-90、30-100、30-200、30-300、30-400、30-500、30-600、30-700、30-800、30-900、30-1000、40-50、40-60、40-70、40-80、40-90、40-100、40-200、40-300、40-400、40-500、40-600、40-700、40-800、40-900、40-1000、50-60、50-70、50-80、50-90、50-100、50-200、50-300、50-400、50-500、50-600、50-700、50-800、50-900、60-70、60-80、60-90、60-100、60-200、60-300、60-400、60-500、60-600、60-700、60-800、60-900、60-1000、70-80、70-90、70-100、70-200、70-300、70-400、70-500、70-600、70-700、70-800、70-900、70-1000、80-90、80-100、80-200、80-300、80-400、80-500、80-600、80-700、80-800、80-900、80-100、90-100、90-200、90-300、90-400、90-500、90-600、90-700、90-800、90-900、90-1000、100-150、100-200、100-300、100-400、100-500、100-600、100-700、100-800、100-900或100-1000mg/kg体重的剂量施用。在一些实施方案中，式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物以约0.01、0.02、0.03、0.05、0.07、0.1、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、14.5、15、15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、20、20.5、21、21.5、22、22.5、23、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26.5、27、27.5、28、28.5、29、29.5、30、30.5、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、55、60、65、70、80、90或95mg/kg体重的剂量施用。在一些实施方案中，式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物以小于约0.01、0.02、0.03、0.05、0.07、0.1、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、14.5、15、15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、20、20.5、21、21.5、22、22.5、23、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26.5、27、27.5、28、28.5、29、29.5、30、30.5、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40mg/m2体表面积的剂量施用。在一些实施方案中，式
26mg、17mg-28mg、17mg-30mg、17mg-32mg、17mg-34mg、17mg-36mg、17mg-38mg、17mg-40mg、17mg-42mg、17mg-44mg、17mg-46mg、17mg-48mg、17mg-50mg、17mg-52mg、17mg-54mg、17mg-56mg、17mg-58mg、17mg-60mg、20mg-22mg、20mg-24mg、20mg-26mg、20mg-28mg、20mg-30mg、20mg-32mg、20mg-34mg、20mg-36mg、20mg-38mg、20mg-40mg、20mg-42mg、20mg-44mg、20mg-46mg、20mg-48mg、20mg-50mg、20mg-52mg、20mg-54mg、20mg-56mg、20mg-58mg、20mg-60mg、22mg-24mg、22mg-26mg、22mg-28mg、22mg-30mg、22mg-32mg、22mg-34mg、22mg-36mg、22mg-38mg、22mg-40mg、22mg-42mg、22mg-44mg、22mg-46mg、22mg-48mg、22mg-50mg、22mg-52mg、22mg-54mg、22mg-56mg、22mg-58mg、22mg-60mg、25mg-26mg、25mg-28mg、25mg-30mg、25mg-32mg、25mg-34mg、25mg-36mg、25mg-38mg、25mg-40mg、25mg-42mg、25mg-44mg、25mg-46mg、25mg-48mg、25mg-50mg、25mg-52mg、25mg-54mg、25mg-56mg、25mg-58mg、25mg-60mg、27mg-28mg、27mg-30mg、27mg-32mg、27mg-34mg、27mg-36mg、27mg-38mg、27mg-40mg、27mg-42mg、27mg-44mg、27mg-46mg、27mg-48mg、27mg-50mg、27mg-52mg、27mg-54mg、27mg-56mg、27mg-58mg、27mg-60mg、30mg-32mg、30mg-34mg、30mg-36mg、30mg-38mg、30mg-40mg、30mg-42mg、30mg-44mg、30mg-46mg、30mg-48mg、30mg-50mg、30mg-52mg、30mg-54mg、30mg-56mg、30mg-58mg、30mg-60mg、33mg-34mg、33mg-36mg、33mg-38mg、33mg-40mg、33mg-42mg、33mg-44mg、33mg-46mg、33mg-48mg、33mg-50mg、33mg-52mg、33mg-54mg、33mg-56mg、33mg-58mg、33mg-60mg、36mg-38mg、36mg-40mg、36mg-42mg、36mg-44mg、36mg-46mg、36mg-48mg、36mg-50mg、36mg-52mg、36mg-54mg、36mg-56mg、36mg-58mg、36mg-60mg、40mg-42mg、40mg-44mg、40mg-46mg、40mg-48mg、40mg-50mg、40mg-52mg、40mg-54mg、40mg-56mg、40mg-58mg、40mg-60mg、43mg-46mg、43mg-48mg、43mg-50mg、43mg-52mg、43mg-54mg、43mg-56mg、43mg-58mg、42mg-60mg、45mg-48mg、45mg-50mg、45mg-52mg、45mg-54mg、45mg-56mg、45mg-58mg、45mg-60mg、48mg-50mg、48mg-52mg、48mg-54mg、48mg-56mg、48mg-58mg、48mg-60mg、50mg-52mg、50mg-54mg、50mg-56mg、50mg-58mg、50mg-60mg、52mg-54mg、52mg-56mg、52mg-58mg或52mg-60mg。在一些实施方案中，式(i)、式(ii)或式(iii)化合物的剂量大于、等于或约0.1mg、0.3mg、0.5mg、0.75mg、1mg、1.25mg、1.5mg、1.75mg、2mg、2.5mg、3mg、3.5mg、4mg、5mg、约10mg、约12.5mg、约13.5mg、约15mg、约17.5mg、约20mg、约22.5mg、约25mg、约27mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约125mg、约150mg、约200mg、约300mg.约400mg、约500mg、约600mg、约700mg、约800mg、约900mg或约1000mg。在一些实施方案中，式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物的剂量是约小于约0.5mg、0.75mg、1mg、1.25mg、1.5mg、1.75mg、2mg、2.5mg、3mg、3.5mg、4mg、5mg、约10mg、约12.5mg、约13.5mg、约15mg、约17.5mg、约20mg、约22.5mg、约25mg、约27mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约125mg、约150mg或约200mg。
[0138]
如本文使用的术语“载体”意指涉及将题述化合物从一个器官或身体部分携带或运输至另一个器官或身体部分的材料、组合物或媒介物，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂(例如，润滑剂、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌或硬脂酸)或溶剂封装材料。每种载体应与制剂的其它成分相容并且对个体无害。可用作载体的材料的一些实例包括：(1)糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、乙酸纤维素和羟丙基甲基纤维素；(4)黄蓍胶粉末；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石；(8)赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；(9)油，例如花生
油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二醇，例如丙二醇；(11)多元醇，例如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；(12)酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)ph缓冲溶液；(21)聚酯、聚碳酸酯和/或聚酸酐；和(22)常规制剂中使用的其它无毒相容物质。
[0139]
为了制备固体组合物如片剂或胶囊，将化合物或提取物与载体(例如，常规的压片成分如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨糖醇、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、磷酸氢钙或树胶)和其它稀释剂(例如，水)混合以形成固体组合物。然后将该固体组合物细分为含有有效量的本公开内容的化合物的单位剂型。可以将包含化合物或提取物的片剂或丸剂包衣或以其它方式复合来提供具有延长作用的优点的剂型。
[0140]
在本公开内容的具体实施方案中，可消耗组合物包含化合物或提取物、载体和防腐剂以减少或延缓微生物生长。防腐剂的添加量高达膜的约5重量％，优选约0.01重量％至1重量％。优选的防腐剂包括苯甲酸钠、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、亚硝酸钠、二氧化硫、山梨酸钠和山梨酸钾。其它合适的防腐剂包括但不限于乙二胺四乙酸盐(也称为乙二胺四乙酸或edta的盐，例如edta二钠)。
[0141]
将本公开内容的化合物或提取物掺入其中的用于口服或肠胃外施用的液体形式包括水溶液、适当调味的糖浆、水性或油性悬浮液和具有食用油以及酏剂和类似媒介物的调味的乳液。用于水性悬浮液的合适的分散剂或悬浮剂包括合成的天然树胶，例如黄蓍胶、阿拉伯胶、海藻酸盐、葡聚糖、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或明胶。用于口服施用的液体制剂可以采取例如溶液、糖浆或悬浮液的形式，或者它们可以作为干燥产品存在，用于在使用前用水或其它合适的媒介物重构。此类液体制剂可以通过常规方法用可接受的添加剂制备，所述添加剂例如悬浮剂(例如，山梨醇糖浆、甲基纤维素或氢化食用脂肪)；乳化剂(例如，卵磷脂或阿拉伯胶)；非水性媒介物(例如，杏仁油、油酯或乙醇)；防腐剂(例如，对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)；以及人造或天然色素和/或甜味剂。
[0142]
制备本公开内容的制剂或组合物的方法包括将本公开内容的化合物或提取物与载体和任选的一种或多种辅料和/或活性成分结合的步骤。通常，通过将本公开内容的化合物或提取物与液体载体或细分的固体载体或两者均匀地且紧密地结合，然后，如果需要，使产物成型来制备制剂。如此，公开的制剂可以由本文所述的化合物或提取物以及合适的载体组成，或者基本上由本文所述的化合物或提取物以及合适的载体组成。
[0143]
当本公开内容的化合物或提取物作为药物、营养品或饮食补充剂施用于人和动物时，它们可以本身或作为含有例如0.1至99％(更优选10至30％)的活性成分与可接受的载体组合的组合物施用。大麻属提取物不应用于所述营养品和饮食补充剂中。
[0144]
可消耗产品可以由个体每天消耗以提供少于100mg的本文公开的化合物。在某些实施方案中，消耗品提供10至60mg/天的包含羟基肉桂酸酰胺的酪胺。有效量可以通过本领域已知的方法确定，并且取决于生物利用度、毒性等。
[0145]
虽然预期单独的含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺可以用于本公开内容的消耗品中，但还预期两种或更多种的化合物或提取物可以以任何相对量组合以产生包含期望比例的两种或更多种的含有羟基肉桂酸酰胺的酪胺的成分的定制组合，以增强产物功效、改善感官
性质或对产物的最终用途重要的品质的一些其它量度。
[0146]
分子靶标
[0147]
hnf4α(肝细胞核因子4α)是全身性核转录因子，调节多种参与维持平衡代谢(体内平衡)的基因的表达。它在许多组织中表达，包括肝、胰腺和肾，以及肠。已知hnf4α在上皮生物学，包括上皮细胞的结构，上皮形态发生的中枢调节，以及肠上皮的稳态和屏障功能中具有不同的作用(cattin等人，(2009)mal.cell.biol.29(23):6294-6308；spath&weiss(1998)j.cell biol.140:935-946)。此外，hnf4α基因在小肠和结肠中高度表达，并且hnf4α蛋白在粘膜上皮细胞的核中是丰富的(jiang等人，(2003)nucl.recept.1:5)。此外，已经提出hnf4α在ibd中具有保护性作用，并且hnf4α激动剂可以用于治疗ibd(chahar等人，(2014)mol.cell.biol.34:3291-3304)。
[0148]
研究表明，hnf4α对紧密连接蛋白和粘附连接蛋白的表达和正确定位(chiba等人，(2003)exp.cell res.286:288-297；parviz等人，(2003)nat.genet.34:292-296)以及肠内微绒毛的形成(chiba等人，(2006)j.cell biol.175(6):971-980)至关重要。此外，hnf4α还被描述为保护肠上皮免于炎症的中枢调节剂(babeu&boudreau(2014)world j.gastroenterol.20(1):22-30)。此外，已经显示hnf4α表达在患有克罗恩病(cd)或溃疡性结肠炎(uc)的患者的肠组织中显著降低(darsigny等人，(2009)plos one 4:e7609；ahn等人，(2008)inflamm.bowel dis.14:908-920)。
[0149]
对于肠特异性hnf4α缺失小鼠的研究已经表明，与对照小鼠相比，缺失小鼠更容易增加对右旋糖酐硫酸钠(dss)模型的结肠炎的易感性，并且表现出肠通透性的增加(ahn等人，(2008)inflamm.bowel dis.14:908-920)。在另一项研究中，缺乏hnf4αp1和p2同种型肠表达的小鼠发展了与人ibd类似的进行性慢性肠道炎症，这表明hnf4α活性的长期降低可能促使ibd(darsigny等人，(2009)plos one 4:e7609)。
[0150]
替代或另外地，hnf4α在调节肠通透性中的作用的潜在病理生理学机制是hnf4α可以与肠微生物群相互作用以预防慢性炎症的发展。特别地，已经提出hnf4α是肠道内的微生物抑制的转录因子，并且由这种调节控制的基因可以包括能够为ibd疗法提供新靶标的因子(davison等人，(2017)genome res.27:1195-206)。此外，已经证明hnf4α表达受饮食和细菌的影响。特别地，结肠内细菌代谢的产物可以产生充当hnf4α的配体的脂肪酸，从而改变其表达(qin等人，(2018)genome biol.19:7)。此外，也与肠通透性有关的胆汁酸(或其衍生物)(stenman等人，(2012)world j.gastroenterol.18(9):923-9)可以充当hnf4α配体。
[0151]
临床证据进一步表明hnf4α激动剂可以有益于消化病症和疾病的治疗。具体而言，hnf4α激动剂阿尔维林已被批准用于在欧洲治疗ibs。
[0152]
慢性胃肠病症
[0153]
术语“慢性胃肠病症”、“胃肠上皮细胞屏障功能病症”、“与肠上皮屏障的破坏相关的慢性疾病”等是指其中个体具有胃肠(gi)道的慢性或复发免疫应答和炎症的病况。最常见的疾病或病症是肠易激综合征(ibs)、炎性肠病(ibd)、克罗恩病(cd)、溃疡性结肠炎(uc)和乳糜泻。其它慢性胃肠病症包括但不限于坏死性小肠结肠炎、未定型结肠炎、慢性结肠炎、hiv肠病、幽门螺杆菌胃炎、nsaid肠病/肠炎、结肠袋炎、不连续或斑片状疾病、回肠炎症、结肠外炎症、响应于破裂的隐窝的肉芽肿性炎症、口疮性溃疡、经壁炎症、微观结肠炎、憩室炎、改道性结肠炎、短肠综合征、gi粘膜炎、化疗诱导的粘膜炎、放射诱导的粘膜炎和间
质性膀胱炎。
[0154]
溃疡性结肠炎(uc)。uc是在大肠内层中引起炎症和疼痛(称为溃疡)的疾病。炎症通常发生在直肠和结肠的下部，但它可能影响整个结肠。uc可以在任何年龄的人中发生，并且被认为是身体免疫系统通过引起肠壁中持续的炎症而对病毒或细菌作出反应的结果。患有溃疡性结肠炎的人具有免疫系统异常，但尚未显示这些异常是疾病的原因或结果。
[0155]
溃疡性结肠炎最常见的症状是腹痛和血性腹泻。患者还可能经历乏力、体重减轻、食欲丧失、直肠出血以及体液和营养物丧失。约一半的患者具有轻微的症状。余者经历频繁发烧、血性腹泻、恶心和严重的腹部痉挛。
[0156]
克罗恩病(cd)。克罗恩病的特征在于肠炎症以及肠狭窄和瘘的出现；神经病经常伴随这些症状。在一些情况下，据信克罗恩病由肠粘膜屏障故障引起，这可能由遗传易感性和环境因素(例如吸烟)引起，其将免疫系统暴露于来自肠腔的抗原，包括细菌和食品抗原。另一个假说是由诸如副结核分枝杆菌(mycobacterium paratuberculosis)、单核细胞增多性李斯特菌(listeria monocytogenes)、异常大肠杆菌(escherichia coli)或副粘病毒的病原体的持续肠道感染刺激免疫反应；或替代地，由对普遍存在的抗原(例如正常的肠道微生物群以及它们产生的代谢物和毒素)的免疫反应失调引起症状。
[0157]
已经发现iga和igg抗酿酒酵母抗体(asca)在血清中的存在是高度诊断儿童克罗恩病。此外，在克罗恩病的活跃病例中，升高浓度的tnf-α和il-6被分泌到血液循环中，并且tnf-α、il-1、il-6和il-8由粘膜细胞局部过量地产生。在这方面，已经提出粪便样本中的细胞因子分布可能是克罗恩病的有用诊断工具。
[0158]
肠易激综合征(ibs)。ibs是主要影响肠或大肠的病症。ibs引起痉挛、腹胀、胀气、腹泻和便秘。患有ibs，肠中的神经和肌肉非常敏感，并且可以在用餐或运动期间或之后不久被激活，从而痉挛和腹泻。倾向于引起症状的食品包括乳制品、巧克力、酒精、咖啡因、碳酸饮料和脂肪食品。在一些情况下，仅食用大餐就会触发症状。
[0159]
坏死性小肠结肠炎。坏死性小肠结肠炎是主要发生于早产儿或患病新生儿中的获得性疾病，其中肠组织死亡。在坏死性小肠结肠炎中，肠壁的内层死亡并且组织脱落。这种病症的原因是未知的，但据信流入肠道的血流量减少阻止了肠道产生正常的保护性粘液。肠道中的细菌也可能是原因。有风险的是幼小的早产儿、喂食浓缩配方食品的婴儿、已经出现疾病(提示传染性原因)的托儿所中的婴儿以及接受过血液交换输血的婴儿。
[0160]
症状包括腹胀、呕吐、嗜睡、喂养不耐受、便血、温度不稳定性和腹泻。诊断通常包括腹部x射线检查，以及检查隐匿性便血、升高的白细胞计数、血小板减少症和乳酸酸中毒。
[0161]
乳糜泻。乳糜泻是通过从食物中吸收营养物而损害小肠的消化系统疾病。患有乳糜泻的人的消化系统受到影响，不能耐受谷蛋白(小麦、黑麦和大麦中存在的蛋白质)。当患有乳糜泻的人食用含有谷蛋白的食品或使用含有谷蛋白的产品时，他们的免疫系统通过损伤小肠来作出反应。
[0162]
乳糜泻是遗传性疾病，其可以在手术、妊娠、分娩、病毒感染或严重的情绪压力后被触发或首次变得活跃。患有乳糜泻的个体可能存在腹泻和腹痛、易激惹、抑郁、胀气、反复腹胀、臭味或脂性粪便、体重减轻/增加、乏力、不明原因的贫血、骨或关节痛、骨质疏松、骨量减少、行为改变、腿刺痛和麻木(由于神经损伤)、肌肉痉挛、癫痫发作、错过经期(经常由于过度体重减轻)、不育症、反复流产、生长迟缓、婴儿发育迟缓、口腔内的浅疮(称为口疮性
溃疡)、牙齿变色或牙釉质损失以及瘙痒性皮肤皮疹(疱疹样皮炎)。乳糜泻可以使用测试血液测量免疫球蛋白a(iga)、抗组织转谷氨酰胺酶(ttga)和iga抗肌内膜抗体(aea)的水平来进行诊断。
[0163]
hiv肠病。hiv肠病是一种综合征，其特征在于在hiv阳性个体中，在彻底评估后没有确定的感染原因的慢性、明确的腹泻(持续时间大于一个月)。据信这是由于hiv对肠粘膜的直接或间接作用。
[0164]
幽门螺杆菌胃炎。幽门螺杆菌(heliobacter pylori)可引起胃部感染，这可能导致出现消化不良(胃灼热、腹胀和恶心)、胃炎(胃部炎症)以及胃和十二指肠的溃疡。幽门螺杆菌感染可以通过内窥镜活组织检查，随后对移除的组织进行细菌检查，呼吸测试或血液测试(测量针对血液中存在的这些细菌的抗体)来诊断。症状包括不适、腹胀、恶心和可能的呕吐，以及溃疡。
[0165]
nsaid肠病/肠炎。nsaid的抗炎、止痛和解热性质已得到充分证实，并且可用于多种病症。nsaid临床应用的主要局限性在于它们的胃十二指肠上皮毒性。nsaid毒性对胃十二指肠不是位点特异性的，并且可以在更远端的肠中诱导毒性。
[0166]
消化健康
[0167]
本公开内容提供了改善、恢复或维持消化健康的方法。根据此类方法，向有需要的个体提供有效量的本公开内容的化合物或提取物，从而改善或维持个体的消化功能，从而解决一种或多种慢性胃肠病症的潜在发病机理并促进个体的健康、幸福和生活质量。如本文使用的术语“个体”是指动物，优选哺乳动物。在一些实施方案中，个体是兽医、伴侣、农场、实验室或动物园动物。在其它实施方案中，个体是人。
[0168]
在一些方面，包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物或其药用可接受的盐、异构体、同二聚体、异二聚体或缀合物的组合物改善个体的消化健康。在一些实施方案中，包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物的组合物治疗或缓解个体的与消化健康相关的疾病或病况。在一些实施方案中，治疗或缓解个体的消化健康不是治疗或改善炎症。在一些实施方案中，包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物的组合物通过增加hnf4α表达来治疗或缓解个体的与消化健康相关的疾病或病况。在一些实施方案中，包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物的组合物通过逆转由高脂饮食引起的潘氏细胞的损失治疗或缓解个体的与消化健康相关的病症或病况。在一些实施方案中，包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物的组合物通过增加肠绒毛治疗或缓解个体的与消化健康相关的病症或病况。在一些实施方案中，包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物的组合物通过增加潘氏细胞形成来治疗或缓解个体的与消化健康相关的疾病或病况。在一些实施方案中，包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物的组合物通过减少与过敏反应相关的病况来治疗或缓解个体的与消化健康相关的疾病或病况。
[0169]
在实施方案中，包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物或其药用可接受的盐的组合物治疗或改善与个体的消化健康相关的至少一个因素。在其它方面，本文公开的包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物或其药用可接受的盐的组合物将个体的消化健康改善例如，至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％。在又一些方面，包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物或其药用可接受的盐的组合物通过将与消化健康相关的疾病或病况降低例如，约10％至约100％、约20％至约
100％、约30％至约100％、约40％至约100％、约50％至约100％、约60％至约100％、约70％至约100％、约80％至约100％、约10％至约90％、约20％至约90％、约30％至约90％、约40％至约90％、约50％至约90％、约60％至约90％、约70％至约90％、约10％至约80％、约20％至约80％、约30％至约80％、约40％至约80％、约50％至约80％或约60％至约80％、约10％至约70％、约20％至约70％、约30％至约70％、约40％至约70％或约50％至约70％来改善消化健康。在一些实施方案中，与消化健康相关的疾病或病症与潘氏细胞的水平、hnf4α水平、过敏反应或肠绒毛水平相关。
[0170]
在实施方案中，包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物或其药用可接受的盐的组合物具有能够降低肝或肠的炎症水平的抗炎活性。在其它方面，本文公开的包含式(i)、式(ii)或式(iii)的化合物或其药用可接受的盐的组合物具有能够将炎症水平降低例如，至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的抗炎活性。在又一些方面，包含式(i)、式(ii)或式(iii)或其药用可接受的盐的组合物具有能够将肝或肠的炎症水平降低例如，约10％至约100％、约20％至约100％、约30％至约100％、约40％至约100％、约50％至约100％、约60％至约100％、约70％至约100％、约80％至约100％、约10％至约90％、约20％至约90％、约30％至约90％、约40％至约90％、约50％至约90％、约60％至约90％、约70％至约90％、约10％至约80％、约20％至约80％、约30％至约80％、约40％至约80％、约50％至约80％、或约60％至约80％、约10％至约70％、约20％至约70％、约30％至约70％、约40％至约70％、或约50％至约70％的抗炎活性。在一些实施方案中，炎症是慢性炎症。在一些实施方案中，组合物减少了与炎症相关的症状。在一些实施方案中，组合物治疗、减少或消除了与个体的炎症相关的症状。在一些实施方案中，组合物治疗、减少或消除了个体的炎症。
[0171]
在一些实施方案中，炎症症状可以包括但不限于水肿、充血、红斑、挫伤、压痛、僵硬、肿胀、发烧、寒战、鼻塞、头闷、呼吸问题、体液潴留、血栓、食欲丧失、心率增加、肉芽肿形成、纤维蛋白、脓、非粘性浆液、或溃疡和疼痛。
[0172]
在一些实施方案中，炎症症状可以与构成多种疾病和病症的一大组不相关病症相关。在一些实施方案中，免疫系统经常涉及炎症病症，表现为过敏反应和一些肌病，其中许多免疫系统紊乱导致异常炎症。
[0173]
需要本公开内容的组合物的个体包括具有可观察到的慢性胃肠病症的症状的个体(例如，具有腹痛、便血、便脓、发热、体重减轻、频繁腹泻、疲劳、食欲降低、抽搐和直肠出血的个体)，以及没有可观察到的慢性胃肠病症的症状但已被确定为容易发展胃肠病症的个体(即，有风险发展胃肠病症的个体)。
[0174]
如本文使用的术语“有效量”意指足以显著改善病症的化合物、提取物或者含有化合物或提取物的制剂的量。如本文所用，术语“改善”或“改善的”应被广义地理解为包括疾病状态的已识别特征的改善，所述特征被本领域技术人员认为与对照相比，或与与所述特征相关的已知平均量相比，通常与所述疾病相关或指示所述疾病。例如，与施用本公开内容的化合物或提取物相关的“改善的”消化健康可以通过将用化合物或提取物治疗的人的消化健康(例如，腹部症状、粪便、发烧、体重、食欲和/或上皮屏障完整性)与未治疗的人的消化健康进行比较来证明。或者，可以将用本公开内容的化合物或提取物治疗的人的消化健
康与人的平均消化健康进行比较，如本领域技术人员已知的科学或医学出版物中所述。在本公开内容中，“改善的”不必要求数据是统计学显著的(即，p《0.05)；相反，表明一个值(例如，平均治疗值)不同于另一个值(例如，平均对照值)的任何可量化的差异均可以上升到“改善的”水平。
[0175]
在确定用于人的有效量时，需要注意的是平衡所需效果(益处)与与使用化合物相关的风险。这种风险/益处评估的问题是观察到的不良影响的类型以及它们将发生的可能性。还需要考虑有效量可以随所治疗的特定病症(例如ibd、ibs、uc或cd)、最终使用者的年龄和身体状况、病况的严重性、治疗的持续时间、使用的特定载体等因素而变化。
[0176]
通常，本公开内容的化合物或提取物的合适的日剂量将是有效产生所需益处的最低剂量的化合物或提取物的量，在这种情况下效果是改善消化健康并因此改善总体健康和幸福。此类有效剂量通常取决于本文所述的因素。对于口服施用，剂量可以是约0.0001mg至约10克/千克体重/天、约5mg至约5克/千克体重/天、约10至约2克/千克体重/天或任何其它合适的剂量。如果需要，化合物或提取物的有效日剂量可以作为两个、三个、四个、五个、六个或更多个子剂量在一天中以适当的间隔分开施用，任选地以单位剂型施用。在一些实施方案中，给药是每天施用一次。
[0177]
本公开内容的化合物或提取物可以单独使用或与特定的饮食或护理标准组合使用。举例说明，本公开内容的化合物或提取物可以与无谷蛋白的饮食组合，或者与氨基水杨酸盐、皮质类固醇、硫嘌呤、甲氨蝶呤、jak抑制剂、1-磷酸鞘氨醇(sip)受体抑制剂、抗整合蛋白生物制品、抗il12/23r或抗il23生物制品和/或抗肿瘤坏死因子试剂或生物制品组合使用。
[0178]
施用本公开内容的化合物或提取物改善消化功能，从而解决一种或多种胃肠病症的潜在发病机理并促进个体的健康、幸福和生活质量。理想地，与未接受治疗的个体相比，有效量的化合物或提取物提供了hnf4α活性或活性和/或肠上皮屏障和/或消化功能的可测量的改善。更具体地，本公开内容的化合物或提取物的使用优选地预防、减缓肠病症(例如，ibd、ibs、uc和/或cd)的进展，延迟或治疗肠病症。
[0179]
提供以下非限制性实施例以进一步说明本公开内容。
[0180]
实施例1：评估代谢活动的指标：材料和方法
[0181]
胰岛素和hnf4α的表达。使用色谱分离和分离试剂盒(qiagen)纯化rna，并且使用qscript
tm
cdna supermix(quanta biosciences)将其转化为cdna。使用optic on real-time system(mj research)和qpcr supermix(biopioneer)用对应于2μg rna的cdna进行q-pcr。参见所有的mrna值被归一化为18s rrna值，并且被表示为相对于媒介物处理的对照的倍数变化。
[0182]
一级抗体。使用hnf4α抗体(#sc-6556,santa cruz biotechnology；santa cruz,ca and#3113,cell signaling technology；danvers,ma)。对于荧光成像，将样品与alexa488绿色荧光染料或若丹明标记的抗小鼠、兔或山羊一起孵育，并且用dapi(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)对细胞核进行复染。单独使用抗体进行免疫染色。用常规倒置显微镜(olympus,planfl 40x/0.60)或用装有氪/氩激光器的共聚焦显微镜分析荧光对照以确保使用切片的次级特异性标记。
[0183]
生物利用度测定。经由iv、腹膜内或口服途径(每种途径三只小鼠)向雄性c57bl/6
小鼠施用n-反式-咖啡酰酪胺或n-反式-阿魏酰酪胺(表2)。
[0184]
表2
[0185][0186]
在施用后0.25、0.5、1、2、4、6和24小时从每只小鼠抽取血液样品。将8μl血液等分试样用于分析。在添加200μl内标物(包含在acn中的100ng/ml拉贝洛尔、100ng/ml地塞米松、100ng/ml甲苯磺丁脲、100ng/ml维拉帕米、100ng/ml格列本脲和100ng/ml塞来昔布)之后，将混合物涡旋混合并在4℃下以12000rpm离心15分钟以沉淀沉淀蛋白质。注射4μl的上清液用于lc-ms/ms分析。使用标称剂量的uc
0-inf
(％auc
extra
《20％)或auc
0-last
(％auc
extra
》20％)计算生物利用度(％)。
[0187]
ph稳定性评估。在dmso中制备10mg/ml的浓度的单独的储备溶液。制备四种不同的缓冲溶液以获得ph为2、7.4、8.5和10的溶液。对于每个ph测定，将5μl储备溶液添加到2ml管中的245μl缓冲溶液中，涡旋并在37℃水浴中孵育。在每个时间点，取50μl等分试样，中和并使用dad检测器在280nm处经由hplc分析进行分析。分别分析初始和最终时间点(分别为0.5和72小时)在280nm处的峰面积的倍数变化。
[0188]
实施例2：评估化合物作为hnf4激动剂的活性
[0189]
考虑到hnf4α在维持人健康代谢中的作用，筛选测试化合物作为hnf4α激动剂的活性(直接或间接作用)。使用已知的胰岛素启动子-报告基因测定，kiselyuk和同事(2010.j.biomol.screen 15(6):663-70)筛选了化合物库的促进胰岛素活化的活性。它们鉴定化合物1为胰岛素活化剂(kiselyuk等人，(2012)chem.biol.19(7):806-18)，随后该化合物在鸟氨酸氨甲酰基转移酶(otc)启动子测定中显示出具有hnf4α激动活性。已知otc启动子在瞬时转染测定中对hnf4α有反应(inoue等人，(2002)j.biol.chem.277:25257-65)。
[0190]
为了鉴定具有与该合成剂(化合物1)类似的生物活性的植物化合物，采用生物信息学方法从所有已知植物化合物的集合中预测具有所需hnf4α激动活性的目标子集。使用许多算法结合训练数据(即，阳性数据)，围绕阳性数据的重要特征建立模型，这预测了期望的生物活性。更具体地，阳性数据集中包括一组18种已知能够影响hnf4α活性的合成化合物(例如，化合物1)。这些结构用于在植物化合物数据库中搜索具有类似结构特征的化学结构。基于来自图论和信息论领域的概念，使用许多度量来单独或组合地测量相似性。
[0191]
选择与18个靶标结构的相似度最高的前10个百分点的植物化合物，并且在hnf4α测定中筛选根据其化学结构被预测为hnf4α活性的潜在激动剂的化合物。筛选结果确定了一类含羟基肉桂酸酰胺的植物酪胺(即，n-反式-咖啡酰酪胺、n-顺式-咖啡酰酪胺、n-反式-阿魏酰酪胺和对香豆酰酪胺)，其能够充当hnf4α调节剂。值得注意，n-反式-咖啡酰酪胺被确定在激活hnf4α方面比阿尔维林更有效约一个数量级(图1)。由于两个苯基环的羟基衍生
化，n-反式-咖啡酰酪胺亲脂性较低，因此预期更大的生物利用度。总而言之，增加的效力和预期的提高的生物利用度表明n-反式-咖啡酰酪胺和其它含羟基肉桂酸酰胺的酪胺预期是用于本文公开的方法的更理想的化合物。
[0192]
进行实验以证明这些化合物直接调节hnf4α活性。特别地，证明了在n-反式-咖啡酰酪胺和n-反式-阿魏酰酪胺的存在下，hnf4α基因表达上调(例如，通过定量pcr分析确定)(图2)。此外，发现对香豆酰酪胺也上调hnf4α基因表达；然而，顺式-阿魏酰酪胺、n-香豆酰多巴胺、n-反式-阿魏酰章鱼胺和对香豆酰章鱼胺是无活性的。
[0193]
实施例3：化合物相关毒性的评价
[0194]
考虑到平衡本公开内容的化合物的益处和风险的需要，通常在实验室动物(例如小鼠、大鼠、狗)中进行体内毒性研究。此类研究通常按照实验室管理规范(glp)规定进行，以确保出于监管目的的可靠性和再现性。如果化合物在人类中施用数周至数月至数年的时间，则通常进行慢性毒性研究(研究持续时间为六个月至一年)。对于在食品中使用的化合物，推荐口服毒性研究。
[0195]
慢性毒性测试的目的在于确定测试化合物的毒理学特性。在测试的初始阶段，将在大鼠中进行研究。随机选择总共160只sprague dawley大鼠(80只雄性和80只雌性)，约5至7周龄，体重为每只80至100g，按体重分配至治疗组；使得每个组的平均体重不会显著不同。测试化合物或提取物将以0.5、1和2g/kg体重/天的剂量水平对大鼠连续90天口服施用。每天观察动物的任何临床毒性表现(例如，行为变化；皮毛外观；饮食和饮水；等)。在实验结束时，将按照标准毒理学方法对动物进行血液学、生化和组织病理学评价。
[0196]
还进行了初始安全性/毒性测定，其汇总结果示于表3中。
[0197]
表3
[0198][0199]
nd，未测定的。
[0200]
实施例4：从植物来源分离含羟基肉桂酸酰胺的酪胺
[0201]
从各种植物物种及其植物组织中制备乙醇提取物。通过用95％乙醇水溶液提取干燥的植物粉末材料来鉴定提取物中的各个化合物。将乙醇提取物浓缩并吸附到硅藻土上并干加载到c18固相萃取柱上。通过用两个柱体积的水洗涤将提取物脱盐，所述水被收集并弃去。用两个柱体积的甲醇洗脱化合物，并将提取物浓缩至干。在分析之前，将提取物重悬于1:1的乙腈:水中。已知浓度的合成标准物用于在分析之前产生校准曲线。在分析中使用的来源的列表在以下表4中给出。对于每种化合物，以降序显示植物，其中在列表顶部是产生最高量化合物的植物，在列表底部是最低产生物。
[0202]
表4
[0203]
[0204][0205]
测定存在于某些乙醇提取物中的n-反式-咖啡酰酪胺、n-反式-阿魏酰酪胺和对香豆酰酪胺的量(提取物的％，w/w)。通过用乙醇提取物的重量归一化结果进行化合物的定量(图3)。
[0206]
实施例5：n-反式-咖啡酰酪胺改善紧密连接
[0207]
tnf-α是增加肠紧密连接通透性的炎性细胞因子。为了分析n-反式-咖啡酰酪胺对紧密连接蛋白的影响，将200ng或300ng tnf-α添加至单层的上皮caco-2细胞中以诱导紧密连接损伤。tnf-α暴露之后，添加n-反式-咖啡酰酪胺，通过闭锁小带(zo)-1的抗体染色确定紧密连接形成。核染色(dapi)用于证明细胞活力。分选caco-2细胞以获得高tnf-α表达，其中紧密连接的完整性受损。外源性tnf-α浓度从200ng增加到300ng,zo-1染色降低。然而，在
200ng至300ng的量下，添加n-反式-咖啡酰酪胺逆转了tnf-α对zo-1的作用。
[0208]
为了证实体内咖啡酰酪胺，c57bl/6小鼠每天两次腹膜内注射(ip)咖啡酰酪胺，持续14天，采集由n-trans(n-反式)经n-trans给药的肠样品并染色以观察hnfα表达、zo-1和dapi染色。在所有小鼠的上皮层的干细胞中观察到hnf4α表达。在用n-反式-咖啡酰酪胺处理2周后，可以看到hnf4α表达沿着上皮绒毛延伸，这表明该化合物在n-反式-咖啡酰酪胺处理的小鼠的肠内层中诱导hnf4α表达。
[0209]
实施例6：n-反式-咖啡酰酪胺对肠的影响
[0210]
对用dmso或n-反式-咖啡酰酪胺处理的小鼠的肠进行组织学检查。大体形态外观没有改变。dio小鼠在hnf4α表达方面没有显著变化。在两种情况下，hnf4α在隐窝中高度表达，而在绒毛中可检测的hnf4α则少得多(参见图4)。n-反式-咖啡酰酪胺在整个过程中诱导hnf4α表达的大幅增加，其中在绒毛中增加较大并且在隐窝中增加较小，其中表达已经相当强(参见图5，在下图中定量)。对由n-反式-咖啡酰酪胺诱导的基因分析表明n-反式-咖啡酰酪胺可能促进潘氏细胞形成和/或功能。潘氏细胞是专门的分泌细胞，其在防御肠道微生物中起关键作用。为此，它们分泌多种抗微生物肽。值得注意，潘氏细胞在ibd发病机制中起重要作用。据报道，高脂饮食减少了潘氏细胞的数量，我们的研究重现了这一发现(参见图4)，但其发生的机理尚不清楚。明显地，n-反式-咖啡酰酪胺诱导dio小鼠中潘氏细胞数量的完全恢复(参见图4)。
[0211]
本公开内容一般使用肯定语言来描述多个实施方案。本公开内容还包括其中完全或部分地排除主题(例如物质或材料、方法步骤和条件、方案或程序)的实施方案。在不背离所要求保护的主题的范围的情况下，可以对上述方法和结构进行各种其它省略、添加和修改。所有这些修改和变化旨在落入由所附权利要求限定的主题的范围内。
[0212]
关于本文中基本上任意复数和/或单数术语的使用，本领域技术人员可以按上下文和/或应用的情况而定从复数翻译成单数和/或从单数翻译成复数。为了清楚起见，本文可以清楚地阐述各种单数/复数排列。
[0213]
本领域技术人员应理解，通常在本文中使用的术语，并且尤其是在所附权利要求(例如，所附权利要求的主体)中使用的术语通常旨在作为“开放式”术语(例如，术语“包括(including)”应被解释为“包括但不限于”，术语“具有”应被解释为“至少具有”，术语“包括(includes)”应被解释为“包括但不限于”等)。本领域的技术人员还应理解，如果旨在特定数量的介绍的要求的叙述项，则在权利要求中将明确地叙述此类意图，并且在没有此类叙述的情况下，不存在此类意图。例如，作为理解的辅助，以下所附权利要求可以含有介绍性短语“至少一个”和“一个或多个”的使用来介绍要求的叙述项。然而，此类短语的使用不应被解释为暗示通过不定冠词“一个(a)”或“一个(an)”介绍的要求的叙述项将含有此类介绍的要求的叙述项的任意具体权利要求限制为仅含有一个/种此类叙述项的实施方案，即使当同一权利要求包括介绍性短语“一个或多个”或“至少一个”和诸如“一个(a)”或“一个(an)”的不定冠词时(例如，“一个(a)”和/或“一个(an)”应被解释为意指“至少一个”或“一个或多个”)；对于用于介绍要求的叙述项的定冠词的使用也是如此。此外，即使明确地叙述了特定数量的介绍的要求的叙述项，本领域技术人员应认识到，此类叙述应被解释为意指至少所叙述的数量(例如，没有其它修饰的“两个叙述项”的裸叙述意指至少两个叙述项，或两个或更多个叙述项)。此外，在其中使用类似于“a、b和c中的至少一个，等”的惯例的那些
情况中，通常此类结构是指本领域技术人员将理解的所述惯例的涵义(例如，“具有a、b和c中的至少一个的系统”将包括但不限于仅具有a、仅具有b、仅具有c、具有a和b一起、具有a和c一起、具有b和c一起、和/或具有a、b和c一起的系统，等)。在其中使用类似于“a、b或c中的至少一个，等”的惯例的那些情况中，通常此类结构是指本领域技术人员将理解的所述惯例的涵义(例如，“具有a、b或c中的至少一个的系统”将包括但不限于仅具有a、仅具有b、仅具有c、具有a和b一起、具有a和c一起、具有b和c一起、和/或具有a、b和c一起的系统，等)。本领域的技术人员还将理解，无论在说明书、权利要求书或附图中，实际上连接两个或更多个可替代的术语的任意析取词语和/或短语都应该被理解为考虑包括所述术语中的一个，所述术语中的任一个，或两个术语的可能性。例如，短语“a或b”应被理解为包括“a”或“b”或“a和b”的可能性。
[0214]
此外，在按照马库什组描述本公开内容中的特征或方面的情况下，本领域技术人员应认识到，由此也按照马库什组的任意单个成员或成员的子组描述本公开内容。
[0215]
如本领域技术人员将理解，出于任意和所有目的，例如就提供书面说明书而言，本文公开的所有范围还涵盖任意和所有可能的子范围及其子范围的组合。任意列出的范围可以被简单地认为充分地描述并且使得相同的范围能够被分解成至少相等的两等份、三等份、四等份、五等份、十等份等。作为非限制性实例，本文讨论的每个范围可以容易地分解成下三分之一、中三分之一和上三分之一等。如本领域技术人员还将理解，所有语言例如“高达”、“至少”、“大于”、“小于”等包括所列举的数字，并且是指如以上所述随后可被分解成子范围的范围。最后，如本领域技术人员将理解，范围包括每个单独的成员。因此，例如，具有1-3个制品的组是指具有1个、2个或3个制品的组。类似地，具有1-5个制品的组是指具有1个、2个、3个、4个或5个制品的组，等。
[0216]
虽然本文已经公开了各种方面和实施方案，但其它方面和实施方案对于本领域技术人员来说是显而易见的。本文公开的各个方面和实施方案是为了说明的目的，而不是旨在限制由以下权利要求表明的真正的范围和主旨。