专利名称：黄曲霉毒素b的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种解毒酶，特别是黄曲霉毒素B1的解毒酶提取工艺。
现有技术中去除或转化黄曲霉毒素B1的方法有(1)化学法要使用次氯酸钠、臭氧、过氧化氢、氢氧化钠、甲醛、铵盐以及氯气等，主要缺点是在破坏黄曲霉毒素B1的同时也破坏了食品中的许多营养成份，如维生素、蛋白质、生物碱，并且常常会影响食品或调味品的色、香、味(尤其是使用氯气或铵盐时)，有些方法还不能用于水相处理；(2)物理-化学法这类方法是以r-射线、紫外线照射与化学方法结合使用，其缺点与化学法类似；(3)物理吸附法这类方法是使用硅藻土、超滤等技术除去液态食品中的黄曲霉毒素B1或M1，此法的缺点是工艺复杂，难以工业化生产，效果不十分理想，且在使用的同时，不可避免地引起食品营养成份的损失；(4)体内生物转化法，此方法是用某些化学试剂如2-叔丁基对甲酚、Oltipraz等，喂食动物诱导体内肝脏谷胱肽转移酶增多，以增加对肝内的黄曲霉毒素B1的转化，其缺点是必须依赖体内细胞色素P450的存在；对黄曲霉毒素B1的解毒是在黄曲霉毒素被活化成有毒性后才进行解毒；诱导剂本身就有毒性；此法不能用于食品加工过程。
本发明的目的旨在克服现有技术的不足而提供一种专一、高效、无毒并可直接对黄曲霉毒素B1解毒的解毒酶提取工艺。
本发明的目的是这样实现的一种黄曲霉毒素B1解毒酶的提取工艺，其特征在于用假密环菌(Armillariella Fabescens)，在25-30℃培养5-70天，取出菌体，以菌体重∶缓冲液(PH6)＝1∶1(湿重∶体积)，加入PH6的缓冲液，以机械研磨或超声，或高压破碎方法将菌体破坏，使其胞质液流出，而后，离心取上清液，用30-85％的硫酸铵沉淀后，用缓冲液或蒸馏水透析4-24小时脱盐，即得黄曲霉毒素B1的解毒酶。
下面通过实施例对本发明作进一步详述取50g假密环菌菌种接种于综合马铃薯培养基中，在28℃下培养至生长旺盛期约28天，过滤取出菌体，称重约1000g，与1000mlPH6的磷酸缓冲液混合均匀，以机械研磨，或高压，或超声波破碎菌体，使胞质液流出，经离心取出上清液约1000ml，用50％的硫酸铵沉淀，用蒸馏水透析10小时后即得黄曲霉毒素B1的解毒酶。
本发明工艺提取的解毒酶，是一种生物酶，对黄曲霉毒素B1有专一性，高效性，能直接对其解毒，由于本解毒酶来源于食用真菌，故无毒，可安全食用，另由于食用真菌来源丰富，可扩大为工业化生产。
权利要求
1.一种黄曲霉毒素B1解毒酶的提取工艺，其特征在于用假密环菌(Armillariella tabescens)，在25-30℃培养5-70天，取出菌体，以菌体重∶缓冲液(PH6)＝1∶1(湿重∶体积)，加入PH6的缓冲液，以机械研磨或超声或高压破碎方法将菌体破坏，使其胞质液流出，而后，离心取上清液，用30-85％的硫酸铵沉淀后，用缓冲液或蒸馏水透析4-24小时脱盐，即得黄曲霉毒素B1的解毒酶。
全文摘要
本发明提供一种黄曲霉毒素B
文档编号C12N9/50GK1240828SQ98113268
公开日2000年1月12日 申请日期1998年6月30日 优先权日1998年6月30日
发明者刘大岭, 姚冬生, 梁仁 申请人:广东药学院