蛋白质在高温下容易变性。为了防止蛋白质变性，需要保证在低温下进行干燥。
[0056][有益效果]
[0057]本发明与现有技术相比，具有以下的有益效果:
[0058]本发明利用闪式提取技术对废弃大田鲜烟叶中蛋白质进行提取，具有提取速度快、提取条件温和、提取效率高、操作简单和易于实现工业化生产等优点，是一种新型的叶蛋白提取方法；与传统的叶蛋白提取方法相比，本法可降低能耗，从而降低生产成本；本发明为大田废弃鲜烟叶的利用及相应产品的开发提供了可借鉴的方法。
【附图说明】
[0059]图1为本发明从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的流程图。
【具体实施方式】
[0060]下面结合本发明的实施例对本发明作进一步的阐述和说明。
[0061]下面实施例1?5均使用图1的流程图提取的可溶性蛋白质。
[0062]实施例1
[0063]取大田废弃鲜烟叶，去除叶脉和叶梗，清洗、切碎，称取10g置容器中，加入烟叶质量10倍量的正己烷浸泡I小时，置于闪式提取器上，设定提取电压为120伏，提取转速为6000rpm/min,提取5次，每次提取45秒；提取完毕后过滤，滤澄低温干燥备用，正己烧滤液留着其它用途(如用于烟叶中脂溶性成分的提取)。
[0064]取低温干燥后的滤渣置容器中，加入0.01mol/L NaCl溶液1000g，用0.lmol/LNaOH溶液调节pH至7.0，浸泡5小时，置于闪式提取器上，设定提取电压为100伏，提取转速为5000rpm/min，提取3次，每次提取30秒；提取完毕后过滤，滤液离心除去沉淀，分取上清液置容器中备用。
[0065]根据上清液体积向其中添加无水硫酸铵至溶液中硫酸铵的饱和度为30%，充分搅拌后静置10小时；离心，取沉淀用透析法脱盐后，置真空干燥箱中低温干燥，得烟叶蛋白质
5.6g ;以牛血清白蛋白质为标样，采用Lorry法测定其中蛋白质的含量为81.6%。
[0066]实施例2
[0067]取大田废弃鲜烟叶，去除叶脉和叶梗，清洗、切碎，称取10g置容器中，加入烟叶质量10倍量的正己烷浸泡I小时，置于闪式提取器上，设定提取电压为120伏，提取转速为6000rpm/min,提取5次，每次提取45秒；提取完毕后过滤，滤澄低温干燥备用，正己烧滤液留着其它用途(如用于烟叶中脂溶性成分的提取)。
[0068]取低温干燥后的滤渣置容器中，加入0.01mol/L NaCl溶液1000g，用0.lmol/LNaOH溶液调节pH至7.5，浸泡10小时，置于闪式提取器上，设定提取电压为120伏，提取转速为6000rpm/min，提取5次，每次提取30秒；提取完毕后过滤，滤液离心除去沉淀，分取上清液置容器中备用。
[0069]根据上清液体积向其中添加无水硫酸铵至溶液中硫酸铵的饱和度为40%，充分搅拌后静置10小时；离心，取沉淀用透析法脱盐后，置真空干燥箱中低温干燥，得烟叶蛋白质
6.5g ;以牛血清白蛋白质为标样，采用Lorry法测定其中蛋白质的含量为82.2%。
[0070]实施例3
[0071]取大田废弃鲜烟叶，去除叶脉和叶梗，清洗、切碎，称取10g置容器中，加入烟叶质量10倍量的正己烷浸泡I小时，置于闪式提取器上，设定提取电压为120伏，提取转速为6000rpm/min,提取5次，每次提取45秒；提取完毕后过滤，滤澄低温干燥备用，正己烧滤液留着其它用途(如用于烟叶中脂溶性成分的提取)。
[0072]取低温干燥后的滤渣置容器中，加入0.0lmol/L NaCl溶液1200g，用0.lmol/LNaOH溶液调节pH至7.5，浸泡10小时，置于闪式提取器上，设定提取电压为130伏，提取转速为6000rpm/min，提取5次，每次提取45秒；提取完毕后过滤，滤液离心除去沉淀，分取上清液置容器中备用。
[0073]根据上清液体积向其中添加无水硫酸铵至溶液中硫酸铵的饱和度为50%，充分搅拌后静置15小时；离心，取沉淀用透析法脱盐后，置真空干燥箱中低温干燥，得烟叶蛋白质
7.2g ;以牛血清白蛋白质为标样，采用Lorry法测定其中蛋白质的含量为83.7%。
[0074]实施例4
[0075]取大田废弃鲜烟叶，去除叶脉和叶梗，清洗、切碎，称取10g置容器中，加入烟叶质量10倍量的正己烷浸泡I小时，置于闪式提取器上，设定提取电压为120伏，提取转速为6000rpm/min,提取5次，每次提取45秒；提取完毕后过滤，滤澄低温干燥备用，正己烧滤液留着其它用途(如用于烟叶中脂溶性成分的提取)。
[0076]取低温干燥后的滤渣置容器中，加入0.0lmol/L NaCl溶液1200g，用0.lmol/LNaOH溶液调节pH至7.5，浸泡15小时，置于闪式提取器上，设定提取电压为140伏，提取转速为7000rpm/min，提取6次，每次提取45秒；提取完毕后过滤，滤液离心除去沉淀，分取上清液置容器中备用。
[0077]根据上清液体积向其中添加无水硫酸铵至溶液中硫酸铵的饱和度为60%，充分搅拌后静置20小时；离心，取沉淀用透析法脱盐后，置真空干燥箱中低温干燥，得烟叶蛋白质
8.2g ;以牛血清白蛋白质为标样，采用Lorry法测定其中蛋白质的含量为84.3%。
[0078]实施例5
[0079]取大田废弃鲜烟叶，去除叶脉和叶梗，清洗、切碎，称取10g置容器中，加入烟叶质量10倍量的正己烷浸泡I小时，置于闪式提取器上，设定提取电压为120伏，提取转速为6000rpm/min,提取5次，每次提取45秒；提取完毕后过滤，滤澄低温干燥备用，正己烧滤液留着其它用途(如用于烟叶中脂溶性成分的提取)。
[0080]取低温干燥后的滤渣置容器中，加入0.01mol/L NaCl溶液1200g，用0.lmol/LNaOH溶液调节pH至8.0，浸泡20小时，置于闪式提取器上，设定提取电压为150伏，提取转速为7000rpm/min，提取7次，每次提取45秒；提取完毕后过滤，滤液离心除去沉淀，分取上清液置容器中备用。
[0081]根据上清液体积向其中添加无水硫酸铵至溶液中硫酸铵的饱和度为60%，充分搅拌后静置20小时；离心，取沉淀用透析法脱盐后，置真空干燥箱中低温干燥，得烟叶蛋白质8.3g ;以牛血清白蛋白质为标样，采用Lorry法测定其中蛋白质的含量为85.6%。
[0082]从上述实施例可见，使用本发明的闪式提取方法从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质，得到的蛋白质纯度大于80%。
[0083]尽管这里参照本发明的解释性实施例对本发明进行了描述，上述实施例仅为本发明较佳的实施方式，本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，应该理解，本领域技术人员可以设计出很多其他的修改和实施方式，这些修改和实施方式将落在本申请公开的原则范围和精神之内。
【主权项】
1.一种从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的方法，其特征在于它包括以下步骤: A，废弃鲜烟叶的前处理 取大田废弃鲜烟叶，去除其叶脉和叶梗，清洗、切碎后备用； B，脱色脱脂 将步骤A前处理的废弃鲜烟叶置于容器中，加入正己烷浸泡Ih后，置于闪式提取器上，设定提取电压、转速、提取次数和每次提取时间；提取完毕后过滤，滤渣低温干燥备用；滤液回收利用；所述废弃鲜烟叶与正己烷的质量比为1:10 ; C，可溶性蛋白质的提取 将步骤B得到的滤渣，加入浓度为0.0lmol/L的NaCl溶液，然后用浓度为0.lmol/LNaOH溶液调节pH值至7.0?8.0，浸泡一段时间后，置于闪式提取器上，设定提取电压、转速、提取次数和每次提取时间，提取后过滤，滤液离心去除沉淀后，分取上清液备用Γ滤渣回收利用； D，可溶性蛋白质的沉淀及干燥 将中性盐加入到步骤C中的上清液中至盐溶液呈饱和状态，静置一定时间使蛋白质充分沉淀后，离心，沉淀采用透析法脱盐后，置于真空干燥箱中低温干燥，即得到所述的可溶性蛋白质。
2.根据权利要求1所述的从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的方法，其特征在于在步骤B中，所述提取电压为120V，转速为6000rpm/min，提取次数为5次，每次提取时间为45s0
3.根据权利要求1所述的从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的方法，其特征在于在步骤C中，所述滤渣与0.01mol/L的NaCl溶液的质量比为1:10?20。
4.根据权利要求1所述的从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的方法，其特征在于在步骤C中，所述浸泡时间为5?20h。
5.根据权利要求1所述的从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的方法，其特征在于在步骤C中，所述提取电压为100?150V、转速为5000?10000rpm/min、提取次数为3?8次、每次提取时间为30?60s。
6.根据权利要求1所述的从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的方法，其特征在于在步骤C中，所述滤渣回收利用是指用于制备动物饲料或肥料。
7.根据权利要求1所述的从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的方法，其特征在于在步骤D中，所述中性盐选自无水硫酸铵、无水氯化钠、无水硫酸镁、无水硫酸钠或无水磷酸钠；所述饱和状态是指饱和度为25?60%。
8.根据权利要求1所述的从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的方法，其特征在于在步骤D中，所述的静止时间为10?20h。
9.根据权利要求1所述的从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的方法，其特征在于在步骤B和步骤D中，所述低温干燥是指在温度不超过50°C的条件下进行的干燥。
【专利摘要】本发明公开了一种从大田废弃鲜烟叶中提取可溶性蛋白质的方法。本发明通过对大田废弃鲜烟叶进行前处理、脱色脱脂、闪式提取、离心、沉淀、干燥的方法，提取可溶性蛋白质。本发明的提取方法具有速度快、提取条件温和、提取效率高、操作简单和易于实现工业化生产等优点，为大田废弃鲜烟叶的利用及相应产品的开发提供了可以借鉴的方法。
【IPC分类】A23J3-14, A23J1-00
【公开号】CN104738302
【申请号】CN201510148550
【发明人】沈怡, 戴亚, 冯广林, 肖克毅, 薛芳, 谭兰兰, 寇明钰, 施丰成, 李东亮, 汪长国
【申请人】川渝中烟工业有限责任公司
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2015年3月31日