一种猪用酵母培养物的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种酵母培养物，具体的说是一种猪用酵母培养物的制备方法。
【背景技术】
[0002]随着我国经济的飞速发展和人民生活水平的不断提高，对肉、蛋、奶、皮、毛、羽等畜产品的需求与日倶增。这导致了我国畜牧业的飞速发展，养殖种类增加，养殖规模加大，对粮食作物的需求量不断增高。2013年全年畜牧业总产值近3万亿元，全国商品饲料总产量1.934亿吨(产值6784亿元)，已经成为国民经济的支柱产业。然而，在畜牧业发展的同时，也存在一些制约其可持续发展的关键问题，其中根本的问题就是饲料资源的短缺。同时我国畜牧业的饲料用粮过高，这就引发了“人畜争粮”这一矛盾的出现，因此，饲料原料的短缺已成为饲料产业和畜牧行业发展的首要制约因素，解决我国畜牧业的可持续发展问题的关键是解决饲料资源短缺的状况，开发利用非常规饲料资源是解决我国饲料资源短缺问题的重要途径。
[0003]酵母是一种单细胞真菌，细胞个体大，且酵母富含维生素、酶、寡糖等营养物质，被列为单细胞蛋白饲料的范围内。在对酵母研究的一系列成果中均证明，酵母能够促进动物对其他饲料原料的吸收，能够提高动物的生长表现，能够减低动物疾病的发病率，能够通过给肠道微生物提供营养而改善动物肠道微生态区系，保证动物的健康，同时酵母培养简单，培养成本低，可以降低养殖业的饲料成本。另一方面，我国农业产业多元化发展，各种饼柏类以及其它工业副产品产量巨大，目前均没能好好的被利用。酵母培养物即利用饼柏类和农业副产品作为固体培养基料，将液体培养好的酵母与之均匀混合，经过固体发酵而获得的饲料原料。酵母培养物一方面利用了微生物的特点，一方面利用了低质廉价的工农业加工副产物，生产出优质的蛋白质饲料。然而，现有的酵母培养物生产方法，多是选择几种固体培养基，通过接种酵母菌种进行固体发酵后，进行烘干获得酵母培养物产品，没有考虑赋予酵母培养物微生态制剂的功能。
【发明内容】
[0004]本发明目的是解决目前家猪饲料原料成本高，微生态制剂效果不显著的问题，提供一种猪用酵母培养物的制备方法。
[0005]—种猪用酵母培养物的制备方法，包括以下步骤:
步骤一、取花生柏16份，麸皮50份，大豆皮34份和糖蜜20份置于混合机中，先混合2分钟，再添加玉米浆20份和水35份，再次混合3分钟，得到混合物，将所得混合物置于蒸发釜内进行湿热灭菌后，得到酵母培养物培养基，备用；
步骤二、取酿酒酵母菌种接种于装有麦芽汁培养基的三角瓶中，置于30°C，220rpm摇动培养14h，即酿酒酵母菌液0D600值为0.8-1.2 ;将所培养的酿酒酵母菌液接种到装有到麦芽汁培养基的一级生产种子罐中，30°C，培养14h，接种量为一级生产种子罐的麦芽汁培养基体积的2% ;接着取一级生产种子罐培养的菌液接种至装有到麦芽汁培养基的二级生产种子罐，30°C，培养14h，接种量为二级生产种子罐的麦芽汁培养基体积的2% ;最后再取二级生产种子罐所培养的菌液，接种到装有到麦芽汁培养基的三级生产种子罐中，30°C，培养14h，接种量为三级生产种子罐的麦芽汁培养基体积的2%，得到三级培养酿酒酵母菌液；步骤三、将三级培养酿酒酵母菌液和酵母培养物培养基按照质量比为90-100:5-10的比例进行混合后，迅速装入发酵车，进入发酵车间发酵，控制发酵车间温度28-30°C，兼性厌氧发酵72h，得到发酵物，备用；
步骤四、取地衣芽孢杆菌菌种，进行活化后，逐级扩大到生产种子罐中，接种量为培养基体积的2% ;培养14h-16h，使地衣芽孢杆菌菌液中地衣芽孢杆菌的活菌数量为19CFU/mL，备用；取凝结芽孢杆菌菌种，进行活化后，逐级扩大到生产种子罐中，接种量为培养基体积的2% ;培养14h-16h，使凝结芽孢杆菌菌液中地衣芽孢杆菌的活菌数量为10sCFU/mL，备用；
步骤五、将上述步骤三中所制备的发酵物置于混合机中，按照地衣芽孢杆菌菌液、凝结芽孢杆菌菌液和发酵物的质量比为1: 1:10的比例，将地衣芽孢杆菌菌液和凝结芽孢杆菌菌液添加到发酵物中，混合5min，得到混合物，将所得混合物采用低温烘干至混合物含水量为10%，即制备出猪用酵母培养物。
[0006]步骤五所述采用低温烘干，烘干机进口温度70°C，出口温度为60 °C。
[0007]步骤一中所述蒸发釜内湿热灭菌的方法为，将步骤一所述混合物摊开至厚度20cm，温度120°C，压力2个大气压，湿热灭菌20min。
[0008]步骤二中所述三角瓶中麦芽汁培养基的体积为三角瓶体积的40%。
[0009]本发明所制备的猪用酵母培养物进行检测后各成份的质量百分比含量为:粗蛋白彡20.0% ;水分彡12.5% ;粗灰分彡8.0% ；小肽彡2.0% ;总有机酸(以乳酸计)彡2.0% ；甘露聚糖多0.05%。
[0010]所制备的猪用酵母培养物中益生菌活菌数量:地衣芽孢杆菌活菌多25 X 18Cfu/g ;乳酸菌(凝结芽孢杆菌)活菌彡0.5 X 10scfu/g。
[0011]有益效果是:
本发明猪用酵母培养物的制备方法，所制备猪用酵母培养物的解决了当前酵母培养物功能单一的问题，除了具备酵母培养物的基础营养物质以外，通过混合活菌制剂，给产品赋予了微生态制剂的功能，而酵母培养物中的酵母内容物和细胞壁能很好的给益生菌活菌提供营养。产品在动物上使用能够起到增强效果的作用。本发明猪用酵母培养物的制备方法，以农副产品为主要发酵原料，成本低廉；发酵过程中无废水、废液的排放，对环境无污染。
【具体实施方式】
[0012]—种猪用酵母培养物的制备方法，包括以下步骤:
步骤一、取花生柏16份，麸皮50份，大豆皮34份和糖蜜20份置于混合机中，先混合2分钟，再添加玉米浆20份和水35份，再次混合3分钟，得到混合物，将所得混合物置于蒸发釜内进行湿热灭菌后，得到酵母培养物培养基，备用；
步骤二、取酿酒酵母菌种接种于装有麦芽汁培养基的三角瓶中，置于30°C，220rpm摇动培养14h，即酿酒酵母菌液0D600值为0.8-1.2 ;将所培养的酿酒酵母菌液接种到装有到麦芽汁培养基的一级生产种子罐中，30°C，培养14h，接种量为一级生产种子罐的麦芽汁培养基体积的2% ;接着取一级生产种子罐培养的菌液接种至装有到麦芽汁培养基的二级生产种子罐，30°C，培养14h，接种量为二级生产种子罐的麦芽汁培养基体积的2% ;最后再取二级生产种子罐所培养的菌液，接种到装有到麦芽汁培养基的三级生产种子罐中，30°C，培养14h，接种量为三级生产种子罐的麦芽汁培养基体积的2%，得到三级培养酿酒酵母菌液；步骤三、将三级培养酿酒酵母菌液和酵母培养物培养基按照质量比为90-100:5-10的比例进行混合后，迅速装入发酵车，进入发酵车间发酵，控制发酵车间温度28-30°C，兼性厌氧发酵72h，得到发酵物，备用；
步骤四、取地衣芽孢杆菌菌种，进行活化后，逐级扩大到生产种子罐中，接种量为培养基体积的2% ;培养14h-16h，使地衣芽孢杆菌菌液中地衣芽孢杆菌的活菌数量为19CFU/mL,备用；取凝结芽孢杆菌菌种，进行活化后，逐级扩大到生产种子罐中，接种量为培养基体积的2% ;培养14h-16h，使凝结芽孢杆菌菌液中地衣芽孢杆菌的活菌数量为10sCFU/mL，备用；
步骤五、将上述步骤三中所制备的发酵物置于混合机中，按照地衣芽孢杆菌菌液、凝结芽孢杆菌菌液和发酵物的质量比为1: 1:10的比例，将地衣芽孢杆菌菌液和凝结芽孢杆菌菌液添加发酵物中，混合5min，得到混合物，将所得混合物采用低温烘干至混合物含水量为10%，即制备出猪用酵母培养物。
[0013]步骤五所述采用低温烘干，烘干机进口温度70°C，出口温度为60 °C。
[0014]步骤一中所述蒸发釜内湿热灭菌的方法为，将步骤一所述混合物摊开至厚度20cm，温度120°C，压力2个大气压，湿热灭菌20min。
[0015]步骤二中所述三角瓶中麦芽汁培养基的体积为三角瓶体积的40%。
[0016]按照如下方法对本发明所制备的猪用酵母培养物进行检测:
猪用酵母培养物水分的测定方法参照国标GB6435— 86 ;粗蛋白测定方法参照国标GB/T6432—94 ;粗脂肪测定方法参照国标GB/T6433—94 ;饲料中粗纤维测定方法参照国标GB/T6434—94 ;粗灰分的测定方法参照国标GB/T6438—92 ;饲料中钙的测定方法参照国标GB/T6436—92 ;饲料中总磷量的测定方法——光度法参照国标GB/T、6437— 92 ;氨基酸的测定参照国标GB/T 18246 ;益生菌总数的测定:参照参照国标GB/T 13093-2006，选择益生菌专用培养基活菌计数。
[0017]最终测得本发明所制备的猪用酵母培养物进行检测后各成份的质量百分比含量为:粗蛋白彡20.0% ;水分彡12.5% ;粗灰分彡8.0% ；小肽彡2.0% ;总有机酸(以乳酸计)^ 2.0% ；甘露聚糖彡0.05%。
[0018]所制备的猪用酵母培养物中益生菌活菌数量:地衣芽孢杆菌活菌多25 X 18Cfu/g ;乳酸菌(凝结芽孢杆菌)活菌彡0.5 X 10scfu/g。
[0019]实施例1
一种猪用酵母培养物的制备方法，包括以下步骤:
步骤一、取花生柏16份，麸皮50份，大豆皮34份和糖蜜20份置于混合机中，先混合2分钟，再添加玉米浆20份和水35份，再次混合3分钟，得到混合物，将所得混合物置于蒸发釜内进行湿热灭菌后，得到酵母培养物培养基，备用；
步骤二、取酿酒酵母菌种接种于装有麦芽汁培养基的三角瓶中，置于30°C，220rpm摇动培养14h，即酿酒酵母菌液0D600值为0.8-1.2 ;将所培养的酿酒酵母菌液接种到装有到麦芽汁培养基的一级生产种子罐中，30°C，培养14h，接种量为一级生产种子罐的麦芽汁培养基体积的2% ;接着取一级生产种子罐培养的菌液接种至装有到麦芽汁培养基的二级生产种子罐，30°C，培养14h，接种量为二级生产种子罐的麦芽汁培养基体积的2% ;最后再取二级生产种子罐所培养的菌液，接种到装有到麦芽汁培养基的三级生产种子罐中，30°C，培养14h，接种量为三级生产种子罐的麦芽汁培养基体积的2%，得到三级培养酿酒酵母菌液；步骤三、将三级培养酿酒酵母菌液和酵母培养物培养基按照质量比为90:5的比例进行混合后，迅速装入发酵车，进入发酵车