[0053] 如图1所示，提取率随着蛋白酶的加入量的增加，先缓慢提高，当酶量加入量到达 84U/g后，提取率随着蛋白酶加入量的增加而迅速提高，蛋白酶加入量为126U/g时提取率 最大，随后随着蛋白酶加入量的增加，提取率降低。
[0054] 1. 2. 2、α -淀粉酶加入量对提取率的影响结果分析
[0055] 如图2所示，随着α -淀粉酶加入量的增加，提取率先提高，α -淀粉酶加入量为 l〇U/g时提取率最大，达到86. 6%，然后随着α -淀粉酶加入量的增加，提取率开始降低。
[0056] 2、确定最佳提取工艺条件的正交实验
[0057] 正交实验选择豆渣粉的粒度（Α)、蛋白酶加入量（Β)和α -淀粉酶加入量（C)三 个因素，以提取率作为指标，进行三因素三水平的正交实验，正交实验因素水平表如表2所 不。
[0058] 每个试验号称取3. OOOOg豆渣粉样品，各组试验除了豆渣粉的粒度（Α)、蛋白酶加 入量（B)和α -淀粉酶加入量（C)的其余工艺参数均与实施例1相同，实验结果如表3所 不。
[0059] 表2正交实验因素水平表
[0061 ] 表3正交实验结果及分析
[0062]
[0063] 从表3得出，最佳提取工艺条件为第一组组合APA，即粉碎度选择过50目筛， 蛋白酶加入量为42U/g，α-淀粉酶加入量为5U/g。该提取工艺条件对应的提取率达到 83. 6%。再从极差R值分析知道，三个因素对提取率的影响主次顺序是：α -淀粉酶量〉粉 碎程度〉蛋白酶量。
[0064] 3、提取得到的不可溶性膳食纤维的灰分含量
[0065] 3. 1、灰分含量的测定方法
[0066] 称取3份3. 00g过50目筛的豆渣粉样品，按本实施例所述工艺步骤进行实验，实 验中蛋白酶酶加入量为84U/g，α -淀粉酶酶加入量为l〇U/g。将获得的3份不可溶性膳食 纤维粗提取物各称取1. 〇〇〇〇g作为样品，按照《GB 50094-2010食品安全国家标准食品中灰 分的测定》进行灰分的测定。
[0067] 3. 2、结果分析
[0068] 灰分含量的测定结果如表4所示。
[0069] 表4不可溶性膳食纤维中灰分含量的测定
[0070]
[0071] 从表4得出，由本发明工艺提取得到的不可溶性膳食纤维中灰分含量较低，总体 上杂质含量约2. 8%左右，说明不可溶性膳食纤维中杂质含量较少，不可溶性膳食纤维的纯 度是传统技术提取的2倍以上。
[0072] 实施例2
[0073] -种酶法提取豆渣中不可溶性膳食纤维的工艺，包括如下步骤：
[0074] (1)将豆渣烘干粉碎得到豆渣粉；
[0075] (2)向每克豆渣粉中加入蒸馏水5ml以及PH 6. 5的磷酸缓冲液5ml，得到豆渣浆；
[0076] (3)向豆渣浆中加入中性蛋白酶进行第一次酶解，中性蛋白酶的加入量为步骤 (1)所述豆渣粉：中性蛋白酶=lg:〇. 7mg，得到第一酶解豆渣浆；
[0077] (4)对第一酶解豆渣浆进行第一次灭酶处理，得到第一灭酶豆渣浆；
[0078] (5)向第一灭酶豆渣浆中加入耐热α -淀粉酶进行第二次酶解，耐热α -淀粉酶的 加入量为步骤（1)所述豆渣粉：耐热α -淀粉酶=lg: 10 μ 1，得到第二酶解豆渣浆；
[0079] (6)对第二酶解豆渣浆进行第二次灭酶处理，得到第二灭酶豆渣浆；
[0080] (7)对第二灭酶豆渣浆进行离心分离，过滤后取滤渣，将滤渣洗涤并烘干后，得到 所述豆渣中不可溶性膳食纤维。
[0081] 步骤（1)所述豆渣粉为过80目筛所得粉末。
[0082] 中性蛋白酶的酶活为25U/mg
[0083] 耐热α -淀粉酶的酶活为200U/mL。
[0084] 实施例3
[0085] -种酶法提取豆渣中不可溶性膳食纤维的工艺，包括如下步骤：
[0086] (1)将豆渣烘干粉碎得到豆渣粉；
[0087] (2)向每克豆渣粉中加入蒸馏水7ml以及PH 7. 0的磷酸缓冲液7ml，得到豆渣浆；
[0088] (3)向豆渣浆中加入中性蛋白酶进行第一次酶解，中性蛋白酶的加入量为步骤 (1)所述豆渣粉：中性蛋白酶=lg:lmg，得到第一酶解豆渣浆；
[0089] (4)对第一酶解豆渣浆进行第一次灭酶处理，得到第一灭酶豆渣浆；
[0090] (5)向第一灭酶豆渣浆中加入耐热α -淀粉酶进行第二次酶解，耐热α -淀粉酶的 加入量为步骤（1)所述豆渣粉：耐热α -淀粉酶=lg:20 μ 1，得到第二酶解豆渣浆；
[0091] (6)对第二酶解豆渣浆进行第二次灭酶处理，得到第二灭酶豆渣浆；
[0092] (7)对第二灭酶豆渣浆进行离心分离，过滤后取滤渣，将滤渣洗涤并烘干后，得到 所述豆渣中不可溶性膳食纤维。
[0093] 步骤（1)所述豆渣粉为过120目筛所得粉末。
[0094] 中性蛋白酶的酶活为75U/mg
[0095] 耐热α -淀粉酶的酶活为400U/mL。
[0096] 实施例4
[0097] -种酶法提取豆渣中不可溶性膳食纤维的工艺，包括如下步骤：
[0098] (1)将豆渣烘干粉碎得到豆渣粉；
[0099] (2)向每克豆渣粉中加入蒸馏水6ml以及PH 6. 7的磷酸缓冲液6ml，得到豆渣浆；
[0100] (3)向豆渣浆中加入中性蛋白酶进行第一次酶解，中性蛋白酶的加入量为步骤 (1)所述豆渣粉：中性蛋白酶=lg:〇.9mg，得到第一酶解豆渣浆；
[0101] (4)对第一酶解豆渣浆进行第一次灭酶处理，得到第一灭酶豆渣浆；
[0102] (5)向第一灭酶豆渣浆中加入耐热α -淀粉酶进行第二次酶解，耐热α -淀粉酶的 加入量为步骤（1)所述豆渣粉：耐热α -淀粉酶=lg: 15 μ 1，得到第二酶解豆渣浆；
[0103] (6)对第二酶解豆渣浆进行第二次灭酶处理，得到第二灭酶豆渣浆；
[0104] (7)对第二灭酶豆渣浆进行离心分离，过滤后取滤渣，将滤渣洗涤并烘干后，得到 所述豆渣中不可溶性膳食纤维。
[0105] 步骤（1)所述豆渣粉为过100目筛所得粉末。
[0106] 中性蛋白酶的酶活为45U/mg
[0107] 耐热α -淀粉酶的酶活为280U/mL。
[0108] 以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点，其他采用类似 的步骤及方式的实施例，不再一一陈述。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施 例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和 范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明 范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
【主权项】
1. 一种酶法提取豆渣中不可溶性膳食纤维的工艺，其特征在于，其包括如下步骤： (1) 将豆渣烘干粉碎得到豆渣粉； (2) 向每克豆渣粉中加入蒸馏水5~7ml以及PH 6. 5~7. O的磷酸缓冲液5~7ml， 得到豆渣浆； (3) 向豆渣浆中加入中性蛋白酶进行第一次酶解，中性蛋白酶的加入量为步骤（1)所 述豆渣粉：中性蛋白酶=lg:〇. 7~lmg，得到第一酶解豆渣衆； (4) 对第一酶解豆渣浆进行第一次灭酶处理，得到第一灭酶豆渣浆； (5) 向第一灭酶豆渣浆中加入耐热a -淀粉酶进行第二次酶解，耐热a -淀粉酶的加入 量为步骤（1)所述豆渣粉：耐热a -淀粉酶=lg: 10~20 y 1，得到第二酶解豆渣浆； (6) 对第二酶解豆渣浆进行第二次灭酶处理，得到第二灭酶豆渣浆； (7) 对第二灭酶豆渣浆进行离心分离，过滤后取滤渣，将滤渣洗涤并烘干后，得到所述 豆渣中的不可溶性膳食纤维。2. 如权利要求书1所述酶法提取豆渣中不可溶性膳食纤维的工艺，其特征在于，步骤 (1)所述豆渣粉为过80~120目筛所得粉末。3. 如权利要求书1所述酶法提取豆渣中不可溶性膳食纤维的工艺，其特征在于，步 骤⑵所述磷酸缓冲液的配制方法如下：取〇. 2moL/mL的磷酸二氢钾250mL，加118mL的 0? 2moL/mL氢氧化钠溶液，再用水稀释至1000mL。4. 如权利要求书1所述酶法提取豆渣中不可溶性膳食纤维的工艺，其特征在于，所述 中性蛋白酶的酶活为25~75U/mg。5. 如权利要求书1所述酶法提取豆渣中不可溶性膳食纤维的工艺，其特征在于，所述 耐热a -淀粉酶的酶活为200~400U/mL。
【专利摘要】本发明公开了一种酶法提取豆渣中不可溶性膳食纤维的工艺，工艺流程包括：豆渣→烘干→粉碎→过筛→加水→加缓冲液→加蛋白酶→灭酶→加α-淀粉酶→灭酶→离心过滤→洗涤滤渣→滤渣烘干至恒重。本发明综合考虑pH值、底物浓度、粉碎程度、酶的使用条件及酶的使用量等对提取率影响的因素，本发明使得豆渣资源得到合理利用，减少了豆子废弃造成的环境污染；并且通过灰分的测定实验结果说明，酶法提取得到的不可溶性膳食纤维纯度高，灰分含量仅为2.8％左右。
【IPC分类】A23L33/21
【公开号】CN105231463
【申请号】CN201510744070
【发明人】吴书建, 张政, 吕权峰, 王璐璐, 卿名义
【申请人】广西大学
【公开日】2016年1月13日
【申请日】2015年11月5日