维生素 Bl巧h充剂、盐酸化唉醇、核黄素、叶酸、维生素 D3补充剂）、 维生素巧h充剂、矿物质(例如，硫酸亚铁、氧化锋、硫酸铜、一氧化儘、舰酸巧、亚砸酸钢）、牛 横酸、k肉碱、葡糖胺、混合生育酪、e-胡萝h素、迷迭香提取物。
[0088] 在多个实施方案中，宠物食品组合物包含湿的或干的食品组合物，其可为湿食品、 半湿食品、干食品、补充剂或训练用食物(treat)形式。宠物食品组合物可为粗磨食物形式。 宠物食品组合物可适用于犬科动物或猫科动物。具有抗微生物活性的成分可渗入其中或者 在任何食品组合物的表面上渗入，例如，通过喷雾或在其上沉淀，或者可通过点屯、、补充剂、 训练用食物加入到饮食中或者饮食的液体部分(例如水或另一种流体)中。
[0089] 从始至终使用的范围用作描述在该范围内的各个和每个值的简写。可选择在该范 围内的任何值作为该范围的端点。此外，本文引用的所有参考文献通过引用全文结合到本 文中。在本公开内容与引用的参考文献的定义冲突的情况下，W本公开内容为准。
[0090] 除非另外说明，否则本文W及在说明书的其他地方表述的所有百分比和量应理解 为是指重量百分比。给出的量基于材料的活性重量。 实施例
[0091] 筛选各成分(表1)对抗沙口氏菌（S. aarhus、明斯特沙口氏菌El和沃信顿沙口氏 菌)的抗微生物活性。
[0092] 表1.具有潜在抗微生物活性的成分
实施例1圆盘扩散测试 该测试通常用于细菌中的抗生素敏感性，并且适用于测量具有潜在的抗微生物(AMI) 活性的成分对沙口氏菌的生长抑制。将约5 mm直径的滤纸圆盘浸泡在1%、2%和3% AMI (牛 至例外，其浸泡在〇.1%、〇.2%和0.4%溶液）中，并且放置在具有含四苯基四挫(TTC)的标准方 法琼脂的培养皿中，其已涂抹沙口氏菌(S. aarhus、明斯特沙口氏菌El和沃信顿沙口氏菌） 的标准化的悬浮液。通过测量相对于饱和滤纸沙口氏菌培养物如何紧密生长来确认AMI的 功效。
[0093] 使用圆盘扩散测试筛选各成分的抗微生物活性。对于运些成分中的每一种，制备 1%、2%和3%的溶液，牛至例外，牛至W0.1%、0.2%和0.4%制备。如W上讨论的，浸泡圆盘，将它 们放置在涂抹沙口氏菌的含TTC的标准方法琼脂平板上，并过夜溫育。通过测量围绕圆盘的 透明带(mm)来测定运些成分的功效(表2)。
[0094] 表2.通过圆盘扩散测试筛选具有对抗沙口氏菌的潜在抗微生物活性的成分的结 果
*3次重复 观察到如下的对抗沙口氏菌的抗微生物活性（W逐渐降低的顺序）：憐酸〉酪类，pH 4.25-4.85〉油树脂牛至〉92%乳酸钢和6%二乙酸钢〉酪类，pH 4.8-6.0。
[0095] 实施例2粗磨食物扩散测试 粗磨食物扩散测试具有与圆盘扩散方法类似的原理。使用涂布不同水平的AMI (1%、2% 和3%，牛至例外为0.1%、0.2%和0.4%)的全粗磨食物(成品）代替圆盘。将粗磨食物放置在具 有含TTC的标准方法琼脂的培养皿上，其已涂抹沙口氏菌(S. aarhus、明斯特沙口氏菌El和 沃信顿沙口氏菌）的标准化的悬浮液。通过测量相对于饱和粗磨食物沙口氏菌培养物如何 紧密生长来确认AMI的功效。
[0096] 粗磨食物形式的市售犬科动物和猫科动物成年宠物食品组合物涂布潜在的AMI。 将粗磨食物放置在含有TTC的标准方法琼脂的顶部上，其已涂抹沙口氏菌(S. aarhus、明斯 特沙口氏菌El和沃信顿沙口氏菌）。于30°C下溫育过夜后，分析平板中围绕粗磨食物透明带 的存在情况。
[0097] 通过显示围绕粗磨食物的澄清区域，丙酸、憐酸、乳酸、酪类和丙酸巧抑制沙口氏 菌(表3)。
[0098] 表3.具有对抗沙口氏菌的潜在抗微生物活性的不同成分的粗磨食物扩散测试结 果
实施例3 MIC (最小抑制浓度） 抗微生物成分的最小抑制浓度(MIC)定义为仍抑制沙口氏菌的生长的产品的最大稀释 液。在细菌生长培养基中制备AMI的一系列稀释液(0-3%，牛至例外为0-0.3%)，并且倒入试 管中。随后将测试生物(S. aarhus、明斯特沙口氏菌El和沃信顿沙口氏菌)加入到AMI成分 的稀释液中，至最终浓度为IO6或1〇3 cfu/g，于30°C下溫育过夜，通过浊度或平板计数对生 长评分。
[0099] 对于IO3和1〇6 C化/g沙口氏菌进行最小抑制浓度。报告的结果中负号意味着抑制， 而正号表示生长。牛至需要0.15%的MIC来抑制沙口氏菌，而对于苯酪-pH 4.25-4.85、苯酪-pH 2-2.5、苯酪2-2.5、憐酸、乳酸、丙酸、丙酸巧/丙酸锋和硫酸氨钢，需要至少0.9%，而对于 月桂精氨酸需要0.15%(表4和5)。
[0100] 表4.具有对抗1〇6 C化/g沙口氏菌的潜在抗微生物活性的成分的MIC结果
表5.具有对抗1〇3 C化/g沙口氏菌的潜在抗微生物活性的成分的MIC结果
实施例4攻击研究和可口性测试 在攻击研究（challenge study)中测试涂布AMI (0-3%)的成品。用沙口氏菌（S . aarhus、明斯特沙口氏菌El和沃信顿沙口氏菌)接种100 g粗磨食物的每一种粗磨食物至 最终浓度为1〇6,并且在30°C下溫育。W预定的时间间隔进行沙口氏菌计数。对于含有AMI的 犬科动物和猫科动物成年宠物食品组合物相对于不含AMI的对照，进行可口性研究（2碗，2 天)。
[0101] 选择乳酸、酪类-pH 4.25-4.85、酪类-pH 2-2.5、丙酸、月桂精氨酸、憐酸和牛至用 于微生物攻击和可口性研究。用不同水平的运些抗微生物剂制备犬科动物和猫科动物成年 宠物食品组合物，W进行可口性测试(表6-9)。
[0102] 对具有不同水平的AMI的犬科动物成年宠物食品组合物进行微生物攻击研究。将 100 g份的粗磨食物接种至最终浓度为1〇6 C化/g沙口氏菌，并且在30°C下溫育。W预定的 时间间隔进行沙口氏菌计数。比起对照，在预调节器中的1%乳酸和2-3%局部加入(与DT10L? 混合)的乳酸降低沙口氏菌两个对数循环(log cycles)(图1和图2)。
[0103] 含有局部加入的或在预调节器中加入的抗微生物剂的犬科动物成年宠物食品组 合物的可口性相对于对照至少同等(表6和7)。含有在预调节器中加入的抗微生物剂的猫科 动物成年宠物食品组合物相对于对照至少同等(表8和9)。
[0104] 表6.含有局部加入的抗微生物剂的犬科动物宠物食品组合物相对于不含抗微生 物剂的对照的可口性结果
表7.含有局部加入的抗微生物剂的犬科动物宠物食品组合物相对于不含抗微生物剂 的对照的可口性结果
表8.含有局部加入的抗微生物剂的猫科动物宠物食品组合物相对于不含抗微生物剂 的对照的可口性结果
表9.含有局部加入的抗微生物剂的猫科动物宠物食品组合物相对于不含抗微生物剂 的对照的可口性结果
实施例5生产涂布丙酸的粗磨食物 样品制备和溫育 生产含有丙酸的犬科动物成年宠物食品组合物。取样品来模拟过程的不同步骤。1)将 粗磨食物滴落到传送带上，流动穿过冷却器，随后包装。运是要模拟从挤出机脱落并且穿过 气动提升机流动至干燥器的产品。水分目标为约20%。2)将干燥器溫度降低，并且提高带 速。运是要模拟在部分干燥的设备处在干燥器中的产品一可能从第一带脱落并且滴落至第 二带。水分目标为约15%。3)对于未经涂布的基料(base)和成品二者，在干燥器之后收集干 的粗磨食物。水分目标为约8%。
[0105] 将具有中间水分(15%和20%)的粗磨食物冷却，W防止在袋中冷凝并且阻碍霉菌生 长D
[0106] 用沙口氏菌1〇6 cfu/g接种挤出机、干燥机、未经涂布的基料和成品样品（各10 kg)。通过喷漆器(paint sprayer)雾化沙口氏菌在缓冲溶液中的浓缩溶液，并且当产品在 旋转混合机中翻滚时均匀施用，W递送目标cfu/g。
[0107] 在接种后，未经涂布的基础样品用局部料（topicals)(可口料和脂肪）涂布(表 10)。
[0108] 表10.对于接种沙口氏菌的未经涂布的基料，犬科动物成年宠物食品组合物
将样品分开，并且在30、50或70°C溫箱中溫育。选择运些溫度W代表还未冷却至环境溫 度(30°C)的成品，部分通过(part way t虹OUgh)干燥器且开始吸收来自干燥器(70°C)的热 量的产品，W及通过气动提升机转移并已闪蒸出其一部分水分(对其进行快速蒸发冷却）的 产品（50°C)。
[0109] 在0、15、30和60分钟后，在70 °C下将样品铺板。
[0110] 在0、30、60和240分钟后，在50°C下将样品铺板。
[0111] 在0、1、2、3、8和15天后，在30°C下将样品铺板。
[0112] 选择铺板时间和持续时间来试图代表产品在干燥器中通常将暴露的条件。在正常 的生产期间，任何中间条件的持续时间不会超过20分钟，但是在溫箱中延长的时间将允许 分离过程变量，给予实验室技术人员时间抽取(pull)样品和对其进行操作，并且提供一些 离散的时间间隔来测量处理的效果。
[0113] 涂布并且接种沙口氏菌的产品（代表在包衣机(enrober)后被污染的成品）显示由 在预调节器中包含3%丙酸导