专利名称：杀外寄生物的Spinosyn水悬浮剂的制作方法
目前存在许多种类型的杀外寄生物制剂。这些类型的制剂包括乳油，可湿性粉剂，有机溶剂的溶液以及悬浮剂。这些制剂中的许多都要求使用有机溶剂。例如，当制备水包油型乳油时必须使用有机溶剂。然而，通常认为有机溶剂对环境有害或影响生态，且它们可增加制剂的总毒性。可湿性粉剂可以桶混制剂方式分散而不需有机溶剂，但是通常它们在生物活性以及加工特性等方面劣于其它制剂。因此，需要更安全的制剂如水基制剂。
Spinosyn(还已知作为A83453因子)是已知的农业上应用的杀虫剂。因为它们对动物和人的毒性低，spinosyn被认为是对环境有好的“绿色”农药。理想的是spinosyn制剂仍然保持该“绿色”的性能。
Spinosyn还已知具有一些杀外寄生物活性，即它们对杀蚊子幼虫，黑丽蝇幼虫和厩螫蝇成虫具有体外活性，上述昆虫都是双翅目昆虫，另外它们对豚鼠和羊身上的丽蝇幼虫和厩螫蝇成虫具有短暂的内吸活性。根据这些研究，spinosyn是以其含水聚乙烯吡咯烷酮水溶液或聚乙二醇溶液的形式给药(参见US专利No.5,571,901，第26-32栏)。
最近已发现spinosyn可应用于控制羊和伴侣动物身上的外寄生物。因此，应用低毒性和稳定性提高的spinosyn制剂，在控制外寄生物方面具有潜在的应用价值，因此可用于预防通常由上述害虫引起的病害。
最优选spinosyn的水基制剂。不利的是，spinosyn在水中溶解度低，因此在水溶液中是不稳定的。
本发明提供了适合于spinosyn的稳定的水悬浮剂。这些水悬浮剂在几个方面优于先前的不含水或含有有机溶剂的spinosyn制剂。这些优点包括更高的化学，生物和热稳定性以及便于应用。
活性成分与分散剂的比例是本发明制剂独特的方面。通常水悬浮剂中活性成分与分散剂的比例是在约5∶1至约25∶1。然而，本发明制剂具有更高含量的分散剂，使spinosyn与分散剂比例为约3∶1-约1∶5。与本发明制剂中更高浓度分散剂相比，先前的spinosyn制剂中分散剂的浓度相对较低，因此趋于缺乏均一性以及稀释时无法预测预期浓度。上述结果是令人惊奇的，因为可以认为当spinosyn在所述低浓度条件下应是完全稳定的。
增加水悬浮剂中的分散剂浓度可获得另一预想不到的结果。当稀释增加分散剂浓度的制剂时形成的含有5ppm-25ppm spinosyn的含水浸渍溶液，稀释后的溶液在整个浸渍溶液中具有均一的spinosyn浓度，这是一个非常有利的结果。
特别是，本发明提供了稳定的杀外寄生物水悬浮剂，其中包含已研磨至平均粒径为约1-约15微米的杀外寄生物有效量的spinosyn，或其生理上可接受的衍生物或盐，以及有效量的可促进研磨颗粒湿润的表面活性剂，可足以形成spinosyn分散剂重量比为3∶1-约1∶5量的分散剂以及水。
特别优选的稳定的杀外寄生物的本发明水悬浮剂是下述制剂，a)其中spinosyn的量为制剂的约0.1-约50重量％，b)其中分散剂是离子型分散剂，c)其中表面活性剂的量为制剂的约0.1-约10重量％，d)其中还含有约0.3-约5重量％的矿物增稠剂，e)其中还含有约0.05-约3重量％的树胶，以及f)其中还含有局部性兽医应用时可接受的有效量的杀微生物剂以防止悬浮剂中的微生物生长。
其它优选的含spinosyn制剂包含约25克/升的艾克敌，稠合的萘磺酸作为分散剂，丙二醇作为抗冻剂和湿润剂，表面活性剂，矿物悬浮助剂，黄原胶悬浮助剂，杀微生物剂，防泡剂，以及去离子水(介质)。
按各种配比将各组分混合以获得所需特性的制剂。
本发明制剂是水悬浮剂。“含水”表示制剂是水基系统，即制剂中不包括有机溶剂。
从化学稳定性方面考虑本发明组合物为水基的事实是重要的。通过HPLC分析表明含有25g/L的艾克敌的本发明水悬浮剂表现为在室温以及高温条件下可以至少保持6个月化学稳定。该制剂是物理稳定的并易于分散于水中使用。当局部浸渍，喷雾，以及其它应用时，可分散于水中的spinosyn是非常有利的。制剂可不经稀释(本身)使用，可泼淋或点滴使用，或将它们稀释成均一的水溶液以适于局部浸渍使用。
预想不到的优点是当作为泼淋或点滴应用时，这些制剂可提供所有动物的杀外寄生物有效性。当将制剂用于局部浸渍时，例如，它们可易于进行较大动物如绵羊，山羊，和骆驼等的全身处理，根据浸渍池中处理的动物数量的增加，确定稀释浸渍制剂“减少”的最小量。
在上述制剂中的杀虫组分是spinosyn，或其衍生物或盐。Spinosyn是自然衍生的大环内酯类物质，是通过Saccharopolyspora spinosa发酵产生的。发酵产生多因子，包括spinosyn A和spinosyn D(也称为A83543A和A8354D)。Spinosyn A和spinosyn D是作为杀虫剂的活性最高的两种spinosyn。主要包括上述两种spinosyn的农业上应用的产品是在市场上可买到的，田间应用时通用名为“艾克敌”。
Spinosyn A是由Saccharopolyspora spinosa的肉汤发酵分离并鉴定的第一种spinosyn。随后对发酵肉汤的鉴定表明S.spinosa可产生大量spinosyn，已经发现spinosyn A-J(A83543A-J)。命名为K-W的其它spinosyn，已由S.spinosa突变株鉴定出来。各种spinosyn的不同之处在于forosamine上的氨基，四核环系上的选取位置以及2N，3N，4N-(三-O-甲基)鼠李糖基上取代方式不同。
这里使用的术语“spinosyn”是指一种或多种spinosyn因子(spinosynA，B，C，D，E，F，G，H，J，K，L，M，N，O，P，Q，R，S，T，U，V，W或Y)，一种或多种spinosyn因子的N-二甲基衍生物，或它们的混合物。为了方便起见，术语“spinosyn”或“spinosyn成分”此处还用于表示spinosyn因子，spinosyn因子的生理上可接受的衍生物或盐，或它们的混合物。
Boeck等人在US 5,362,634(1994.11.8颁布)，US 5,496,932(1996.3.5颁布)和5,571,901(1996.11.5颁布)中公开了spinosynA-H和J(其中它们被称作A83543因子A，B，C，D，E，F，G，H和J)，及其盐。Mynderse等人在US 5,202,242(1993.4.13颁布)中公开了spinosynL-N(其中它们被称作A83543因子L，M和N)，它们的N-二甲基衍生物及其盐，以及Turner等人在US 5,591,606(1997.1.7颁布)和US5,631,155(1997.5.29颁布)公开了spinosyn Q-T(其中它们被称作A83543因子Q，R，S和T)，它们的N-二甲基衍生物及其盐。SpinosynK，O，P，U，V，W和Y，例如由Carl V DeAmicis，James E Dripps，ChrisJ.Hatton和Laura I Karr公开在American Chemical Society’sSymposium SeriesPhytochemicals for Pest Control，第11章，“发酵制备的新的大环内酯杀虫剂Spinosyn的物理和生物活性”(“Physical and Biological Properties of SpinosynNovelMacrolide Pest-Control Agents from Fermentation”)，第146-154页(1997)。
以其盐形式分离的spinosyn也可用于本发明组合物和本发明方法中。可通过制备盐的常规方法制备上述盐。例如，用适合的酸中和spinosyn A以形成酸加成盐。代表性的适合的酸加成盐包括与有机酸或无机酸反应形成的盐，其中有机酸或无机酸包括例如，硫酸、盐酸、磷酸、乙酸、琥珀酸、柠檬酸、乳酸、马来酸、富马酸、胆酸、pamoic、粘酸、谷氨酸、樟脑酸、戊二酸、乙醇酸、苯二甲酸、酒石酸、甲酸、月桂酸、硬脂酸、水杨酸、甲磺酸、苯磺酸、山梨酸、苦味酸、苯甲酸、肉桂酸等。
在制备本发明制剂时，应将spinosyn成分研磨至平均粒径为约1-约15微米以形成最适合的悬浮剂。优选的平均粒径为约2-约7微米，特别是3-7微米。研磨是采用“湿磨”方法进行其中spinosyn与足够的表面活性剂混合，以利于研磨颗粒的湿润。
本发明制剂包含杀外寄生物量的spinosyn组分。“杀外寄生物量”表示当施用至受昆虫，寄生虫，或外寄生物侵染或容易受到上述侵染的动物体时，可有效控制或杀死目标昆虫，寄生虫，或外寄生物的施用量。作为本领域技术人员可以理解的，杀外寄生物的spinosyn的用量将随许多因素而变化，这些因素包括需控制的昆虫或寄生虫，需处理的寄主动物，制剂中的其它组分以及给药方式。
为了提供杀外寄生物有效量并形成适合的悬浮剂，spinosyn浓度应在制剂的约0.02-约50重量％。优选，spinosyn浓度为制剂的约0.1-约50重量％。甚至更优选，spinosyn组分以制剂的约2-约5重量％的用量存在。例如，实际应用的制剂中每升制剂含有25g spinosyn组分。
本发明制剂还含有分散剂。分散剂是一种化合物，其可以抵销水悬浮剂中颗粒与颗粒之间的吸引力，而不会显著降低水悬浮剂载体的表面张力(即分散剂的加入并不会降低水的表面张力至40达因/cm以下)。分散剂的理化特性使分散剂定向于活性成分颗粒间，并根据分散剂的颗粒大小和/或所带电荷，降低活性成分颗粒之间的粘结性或吸引力。除了赋予含水混合物的物理稳定性外，分散剂还有助于稀释喷雾混合物的再分散。应仔细选择分散剂以避免出现下列问题如附聚，沉降和絮凝。任何可借助于颗粒大小和/或所带电荷影响颗粒与颗粒之间的吸引力或粘结性的分散剂，都可用作本发明目的的分散剂。
离子和非离子分散剂都可用于本发明制剂中，但优选离子型分散剂。实例包括木素磺酸及其盐，聚合的烷基、芳烷基或萘磺酸盐，梳型聚合分散剂(例如ATLOX 4913TM，Uniqema)，缩合的甲醛/萘磺酸及其盐，二辛基磺化琥珀酸钠和高分子量的阴离子分散剂。特别优选的分散剂是缩合的甲醛/萘磺酸或其盐。适合的缩合的萘磺酸分散剂可购自Kenkel Corp，商品名LOMAR PWA。
对水悬浮剂中使用的水的类型没有严格限制。例如，可以是自来水或去离子水。水的pH值范围为约5-约10，理想的pH范围为6-9。
本发明制剂中使用的表面活性剂应使获得的研磨颗粒悬浮剂保持低粘度，并使加工后研磨固体具有高回收百分率。表面活性剂是一种具有表面活性的化合物并可减小水的表面张力至≤40达因/cm。尽管在上述制剂中可以使用阴离子，阳离子，非离子和两性离子表面活性剂，但优选非离子表面活性剂。表面活性剂的实例特别优选包括直链和支链辛基和壬基酚，直链和支链脂肪醇乙氧基化物，以及烷基芳基醚乙氧基化物。
表面活性剂的用量应足以湿润spinosyn组分的研磨颗粒。通常，表面活性剂的用量为制剂的约0.1-约10重量％。优选表面活性剂用量为制剂的约0.1-约5重量％。
通常非离子表面活性剂可有效地湿润固体，而不会倾向于溶解研磨后的微米大小的颗粒。某些含有环氧乙烷的聚氧丙烯-聚氧乙烯的嵌段共聚物是制剂中特别优选的表面活性剂。随环氧乙烷含量的变化，上述表面活性剂的湿润能力不同。实例是PLURONIC系列(BASF)。特别优选PLURONIC P-103TM，PLURONIC P-104TM，和PLURONIC P-123TM表面活性剂。这些表面活性剂水中的定性湿润试验表明，对工业级艾克敌的湿润性能为小于30秒。
本发明制剂中可加入许多其它可选择组分。它们的实例包括悬浮助剂或增稠剂， UV吸收化合物，杀微生物剂，粘度调节化合物，防沫剂或消泡剂，染料，直染剂，香料，防冻剂，除臭剂，湿润剂，以及生理上或皮肤可接受的载体、稀释剂、赋形剂或助剂悬浮助剂或增稠剂有助于水悬浮剂的结构形成和流变学构成。这些试剂赋予悬浮剂物理稳定性。增稠剂增加制剂的粘度，由此有助于活性成分的悬浮。可以使用许多类型的增稠剂。这些增稠剂包括树胶和天然多糖、矿物增稠剂、以及合成聚合增稠剂。
树胶和天然多糖类增稠剂包括多种树胶，淀粉，纤维素和其它多糖。树胶和天然多糖的实例是黄原胶，瓜耳树胶，刺槐豆胶，角叉菜聚糖，果胶，黄耆胶和罗望子胶。
矿物增稠剂的实例是无机粘土，火成二氧化硅和沉淀二氧化硅，混合金属氢氧化物和混合金属硅酸盐。上述无机增稠剂中多种市售二氧化硅增稠剂包括亲水二氧化硅和疏水二氧化硅。疏水无定形的火成二氧化硅也可用作增稠添加剂。疏水二氧化硅的实例是DegussaCorporation，Akron，Ohio生产的AEROSIL R-972和AEROSIL R-974。
制剂中优选使用的矿物增稠剂是来源于天然绿土精制的复合胶态硅酸铝镁。R.T.Vanderbilt Co.生产了称作VEEGUM的适合的矿物悬浮助剂以及称作RHODOPOL 23的黄原胶悬浮助剂。
合成聚合增稠剂是阴离子，非离子，阳离子或疏水改性聚合物。实例包括下列化合物，如聚丙烯酸钠，烷基和烷氧基纤维素(包括羧甲基纤维素钠，甲基纤维素，乙氧基化纤维素，羟丙基甲基纤维素，羟乙基纤维素和改性羟乙基纤维素)，微晶纤维素，淀粉和改性淀粉，聚乙烯吡咯烷酮，分子量为2000-4,000,000的聚乙二醇，及其混合物。优选，聚合物选自聚丙烯酸钠、羟乙基纤维素、十六烷基羟乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮和polyquaternium-10。
其它化合物也可用作制剂中的增稠剂或悬浮助剂。例如，糖，盐和其它小分子物质如尿素，可用于增加含水制剂中的水的密度，因此有助于活性成分颗粒的悬浮。这些化合物可以足够量加入制剂中，增加水溶液的密度，以抵销使悬浮颗粒沉降的物理沉降力。
增稠剂或悬浮助剂的用量，以及悬浮助剂与spinosyn组分的比例可根据制剂中spinosyn组分的所需浓度而确定。通常，增稠剂的用量为制剂的约0.05-约8重量％。例如，优选在含有200g/L艾克敌和0.2％(w/w)黄原胶的制剂中含有1％(w/w)的复合胶态硅酸铝镁(1∶5的比例)，而带有更低含量活性成分或固体成分的最终制剂中，如50g/L或25g/L艾克敌，以及0.2％(w/w)黄原胶的制剂中，含有2％(w/w)的复合胶态硅酸铝镁(1∶10的比例)。
一般地说，带有较高含量的固体或活性成分的悬浮剂与带有较低含量的固体或活性成分的悬浮剂相比，可更有效地湿磨并悬浮于水中。较低浓度活性成分的悬浮剂具有高水含量，需要加入成比例的更高用量的悬浮助剂以悬浮固体。最终水悬浮剂的粘度应尽可能小，以使其易于从容器中倾倒并与水混合应用。
通常将杀微生物剂加入制剂中以防止不需要的微生物生长，特别是当制剂组分有利于上述微生物的生长的情况下。例如，当使用黄原酸胶作为增稠剂以悬浮固体并提高粘度时，杀微生物剂的加入可防止微生物破坏胶体并降低产品粘度。
各种杀微生物剂都可用于上述目的。某些化学品如1-(3-氯烯丙基)-3，5，7-三氮杂-1-氮鎓金刚烷氯化物和1，2-苯并异噻唑啉-3-酮是特别优选的杀微生物剂的实例。前一化合物购自Dow ChemicalCompany，商品名DOWICIL 75TM防腐剂，且后者的二(丙二醇)水溶液购自Zeneca Biocides，商品名PROXEL GXLTM。后者的杀微生物剂在存在胺和含胺化合物如艾克敌时是稳定的，并具有广谱的杀微生物活性。
当杀微生物组分是液体以及水合前将增稠剂悬浮于试剂如丙二醇时，可有利于在悬浮剂中混合杀微生物剂。
通常，本发明的含水可流动剂可含有约0.01-约0.5重量％的杀微生物剂，并优选0.04-约0.3重量％。例如，本发明制剂含有黄原胶作为增稠剂和0.2％w/w(2000ppm)浓度的1，2-苯并异噻唑啉-3-酮的二(丙二醇)水溶液。上述浓度的杀微生物剂可有效地保护胶体。
防沫剂或消泡剂是作为本发明制剂的可选择组分的。特别优选使用聚(二甲基硅氧烷)防沫剂。它们可以在最初加入艾克敌的研磨物料中用以控制泡沫。这些试剂的实例是购自Dow Corning的ANTIFOAM ATM和ANTIFOAM CTM。前者是100％活性防沫剂。后者是30％聚(二甲基硅氧烷)水乳剂，并发现其在加工时更有效。优选以约0.2％w/w用量加入制剂。本发明制剂使用的其它市售的防沫剂的实例包括ANTIFOAMFG-10，ANTIFOAM DB-100，以及ANTIFOAM AF-100(所有均购自DowCorning)。其它防沫剂也可用于本发明制剂中。
直染剂是另一种可加入本发明制剂中的成分。术语“直染剂”表示可增加活性成分(使用spinosyn组分的情况)与角质层的表层或毛发的结合或持久性的一种化合物。优选的直染剂还有助于防止活性成分通过水或物理接触如摩擦而除去。优选的直染剂的实例包括丙烯酸酯，聚乙酸乙烯酯，以及聚乙烯醇。
本发明还涉及稳定的杀外寄生物水悬浮剂的制备方法，所述方法包括(1)将含有spinosyn，或其生理上可接受的衍生物或盐，与表面活性剂，分散剂，防沫剂和水的组合物进行湿磨形成“研磨组合物”，其中spinosyn的平均粒径为约1-约15微米。
(2)将含有约2-约10重量％的矿物增稠剂的水悬浮液，与含有约1-约4重量％胶体的C2-C4亚烷基二醇的分散组合物混合形成“水合悬浮组合物”，其中含有约0.5-约8重量％的矿物增稠剂，以及(3)将第一体积的研磨组合物用第二体积的水合悬浮组合物充分稀释，以提供所需的spinosyn浓度。
换句话说，本发明制剂的制备是通过(1)制备浓缩的spinosyn组分的水悬浮液，(2)将浓缩物稀释至适合的spinosyn浓度以用于泼淋、点滴或浸渍的浓度，然后(3)加入足量的分散剂使spinosyn与分散剂的比例为约3∶1-约1∶5。
非离子表面活性剂(如PLURONIC P-123TM)是优选加入spinosyn水悬浮剂中的表面活性剂。适合的“水合悬浮物料”是将复合胶态硅酸铝镁悬浮助剂(如VEEGUM)的水合悬浮液与水合于丙二醇中的黄原酸胶(如RHODOPOL 23TM)混合而制备得到的。水合悬浮物料和需要补加的水与研磨物料混合以防止离浆，或清水溶液与悬浮研磨固体的分离。为制备制剂，与研磨物料混合的水合悬浮物料的适合比例是根据粒径减小后研磨物料的回收百分率确定的。
推荐下述的制剂惰性组分添加顺序以制备水合悬浮液，这有利于控制产品粘度和防止研磨后的艾克敌的离浆(1)向去离子水中加入所有复合胶态硅酸铝镁同时高速搅拌并使之充分水合，(2)边搅拌边将黄原胶加入丙二醇中，以在乙二醇中充分地分散胶体，以及(3)边搅拌边将产物(2)加入产物(1)中，使黄原胶在水中立即水合。不要在悬浮液中混入过量的空气。
另一方面，本发明提供了一种制品，包括包装材料以及包含在所述包装材料中的控制外寄生虫对小反刍动物或伴侣动物侵染的制剂，其中所述制剂含有a)单位剂量的杀外寄生物有效量的已研磨至平均粒径为约1-约15微米的spinosyn，或其生理上可接受的衍生物或盐，和有效量的足以湿润研磨颗粒的表面活性剂，b)足量的分散剂以使spinosyn与分散剂重量比为约3∶1-约1∶5，以及c)水，以及其中所述包装材料包括标签或带有说明书的包装插页用于指导动物的给药剂量。
本发明还包括控制外寄生物对小型反刍动物或伴侣动物侵染的方法，包括给动物施以一种制剂，该制剂包括杀外寄生物有效量的已研磨至平均粒径为约1-约15微米的spinosyn，或其生理上可接受的衍生物或盐，以及有效量的足以湿润研磨颗粒的表面活性剂，足量的分散剂以使spinosyn与分散剂重量比为约3∶1-约1∶5，以及水。
术语“控制”是指消灭或改善现有侵染状况或预防对敏感动物的侵染。“动物”是指小型反刍动物或伴侣动物。小型反刍动物包括绵羊，山羊和骆驼。伴侣动物的实例是狗，猫，马以及人拥有并和人紧密接触的其它宠物。
本发明方法中使用的优选制剂是水悬浮剂，包括约1-约50重量％的spinosyn，足量的分散剂以使spinosyn与分散剂比为约3∶1-约1∶5，以及约0.1-约5重量％的表面活性剂。
在本发明方法中，水悬浮剂优选以泼淋或点滴处理方式局部应用。在泼淋或点滴处理时，直接将制剂施用至动物的毛发和/或头、颈、肩或背部的皮肤上，处理区域小于动物毛发和皮肤表面积的10％。
可包括在用作泼淋或点滴的水悬浮剂中的可选择成分包括约1-约5重量％的悬浮助剂，该悬浮助剂选自矿物增稠剂和树胶，约0.5-约2重量％的离子分散剂，至多10％(w/w)的聚合的直染剂以增加制剂在毛发和/或皮肤上的固着性，以及有效量的杀微生物剂，以防止水悬浮剂中的微生物生长。
本发明方法和本发明水悬浮剂的优点是，spinosyn仅需每周或两周使用一次。该特点可通过延长施药间隙，使动物看管人花尽可能少的人力控制动物身上的外寄生物。另一优点是可迅速而简便地使用该制剂。而且，与其它杀外寄生物制剂所需装置情况相比，应用这些制剂的施用装置的费用非常低。
除了泼淋和点滴施用外，本发明spinosyn水悬浮剂还可以水稀释浸渍溶液以及喷雾方式应用。另外，水悬浮剂还可用于活性成分的内吸给药，如通过饲喂或注射制剂方式使用。
下述实施例用于解释本发明制剂。在实施例中，使用的艾克敌(“艾克敌，工业级”)是购自Dow Agrosciences的产品。在制备制剂时，将艾克敌研磨至粒径为3-7微米。
实施例1分散剂对艾克敌浓度的作用为了评价加入分散剂是否使稀释浓度的可预测性增加，与缺少上述分散剂的水悬浮液进行了对比，进行了下述实验室研究，其中对有和没有分散剂的水悬浮剂进行评估。制备两组含有25g/L艾克敌的水悬浮剂，一组含有分散剂而另一组不含分散剂。使用的分散剂是约45％固体的磺化萘缩合物的铵盐。使用的浓度为4-5％重量/重量从而获得以固体计约2％活性分散剂。
将悬浮液用足量的各种pH值的自来水或去离子水稀释以将艾克敌稀释至100ppm的理论浓度。在稀释时立即评估以及稀释后24小时评估样品实际的艾克敌浓度。
表1在样品最初被稀释至100ppm理论浓度以及稀释后24小时，比较了在三个pH水平下的两种类型的水中的艾克敌浓度。
表1 分散剂对艾克敌浓度的作用艾克敌(ppm)水 初浓度 稀释后24小时浓度无分散剂含分散剂 无分散剂 含分散剂去离子水(pH＝4.0) 74.1 92.7 59.7 70.4(pH＝7.0) 65.1 92.2 27.8 73.0(pH＝10.0) 60.5 86.3 29.1 71.2自来水(pH＝4.0) 68.2 90.2 32.0 66.1(pH＝7.0) 72.1 85.2 23.5 65.9(pH＝10.0) 76.7 94.1 37.4 64.6如表1所示，在pH值为4，7，和10的软水(去离子水)和硬水(自来水)条件下，水悬浮剂中含有分散剂可很大程度上提高艾克敌浓度。分散剂还有助于悬浮剂中固体静止沉降后制剂的再悬浮能力(再混合能力)。
实施例2艾克敌(1g/L)水悬浮剂作为杀外寄生物药剂的效果研究浸渍制剂对绵羊身上的嗜牛虱Hartley种(Bovicola ovisHartley Strain)的防治作用。在该试验中，制备含有1g/L艾克敌的水悬浮剂(AS)并用水以1∶5000比例稀释形成浸渍溶液，其中spinosyn浓度为0.2ppm。试验持续56天，统计最初，处理后7，14，28，42，和56天的虱子的数量。
表2总结了该试验的结果。
表2 艾克敌AS浸渍制剂对绵羊身上的虱子的防治
如表2所示，含有0.2ppm艾克敌的浸渍液在最初以及56天后对羊身上的虱子具有很好的防治作用。可100％有效地防治虱子的浸渍水溶液中，优选的艾克敌剂量认为是1.0ppm，允许5倍的置信因数。
实施例3艾克敌制剂的稳定性试验试验1将含艾克敌的几种浸渍制剂在40℃持续储藏，以进行化学储藏稳定性试验。浸渍液1和2是艾克敌的乳油制剂。在浸渍液1中，艾克敌由60F下比重为0.9的芳香烃(Aromatic 150)溶剂制备，浸渍液2是由油酸甲酯作溶剂制备的。浸渍液3是艾克敌的水悬浮剂。将组合物暴露于高温条件下0，7，14，28和87天后，测定制剂中存在的艾克敌浓度。通过分析HPLC进行测定。初始(0天)测定值以100％表示，用以比较后期存在的活性成分浓度。该试验结果列于表3中。
表3 40℃下三种浸渍制剂中艾克敌的稳定性艾克敌浓度，初始百分数
如表3所示，乳油制剂不稳定，但水悬浮剂是化学稳定的。
试验2制备含25g/L艾克敌的两种制剂，一种是水悬浮剂(AS)，另一种是水溶液。将它们储藏在环境温度(即室温)和50℃以比较两种制剂的稳定性。使用HPLC定量分析按时测定各个点的艾克敌浓度。该试验结果列于表4。
表4在25g/L水悬浮剂和溶液制剂中艾克敌的稳定性艾克敌浓度，初始百分数
如该试验所示，艾克敌的25g/L水悬浮剂在室温至约50℃下98天都是化学稳定的，然而，艾克敌水溶液在室温或高温下没有表现出长期化学稳定性。
实施例4浸渍水溶液中艾克敌的消减采用两个试验确定浸渍绵羊后从浸渍水溶液中艾克敌的移出(消减)程度。在该试验中，由含25g/L艾克敌的水悬浮剂制备50ppm和5ppm的艾克敌浸渍槽浓缩液。两个试验涉及在70加仑(265升)处理水中浸渍10只Dorset-cross shorn绵羊。将每只羊浸渍30秒，同时头浸泡两次。在浸渍前和每只羊浸渍后用HPLC分析测定浸渍水溶液样品。每只羊浸渍后还测定水的pH值。5ppm艾克敌浸渍槽浓度可控制羊身上的虱子。5和50ppm浓度下艾克敌是真溶液。
在50ppm试验中，用于浸渍每只羊的浸渍槽中损失约1.5加仑(5.7升)浸渍水溶液。在槽中每只羊浸渍后，浸渍水溶液的pH值增加。在浸渍10只羊后，浸渍水溶液中艾克敌浓度降低约4％。
在5ppm试验中，用于浸渍每只羊的浸渍槽中损失约2.1加仑(8升)浸渍水溶液。而且，在槽中每只羊浸渍后，浸渍水溶液的pH值增加。在浸渍10只羊后，浸渍水溶液中艾克敌浓度降低约14％。
因此，该试验表明在最终浓度为50ppm和5ppm的稀释水悬浮剂中浸渍羊时pH和活性成分浓度发生类似变化。
上述浸渍羊试验表明在浸渍一定数量的动物后，从稀释的浸渍水溶液中获得最小程度的艾克敌消减率。
实施例5由物料湿磨方法制备的艾克敌(25g/L)水悬浮剂含有下述组分的25g/L艾克敌浓缩液由下述方法制备组分 含量，％w/w艾克敌，工业级@92.0％2.7分散剂溶液(LOMAR PWA)(44％) 4.5矿物增稠剂(VEEGUM) 1.0杀微生物剂(PROXEL GXL) 0.2丙二醇 10.0黄原胶(RHODOPOL 23) 0.2表面活性剂(PLURONIC P123)1.0防沫剂，30％溶液(ANTIFOAM C) 0.2去离子水 80.2在单独的搅拌的不锈钢容器中制备三种储备溶液。制备表面活性剂的10％储备溶液(溶液A)。使用的表面活性剂在20℃下是糊状，并升温至50℃以液化。要求适度混合以溶解/分散于水中。
在水中使用高剪切混合器(即Cowles分散器)以保证溶解/分散来制备第二种5-10％水合物(最常用的是5％)的矿物增稠剂储备溶液(溶液B)。需要的循环时间是约4小时。
第三种储备溶液(溶液C)中，通过制备干燥粉末的丙二醇浆液，其中丙二醇中含有全部量的杀微生物剂，并将浆液在适度剪切条件下分散于水中，以使黄原胶水合。通常，黄原胶水合物为1-2重量％水平，并优选1.5％。在该阶段可使用所有的丙二醇，或如需要将一些丙二醇加入预研磨容器中。
将储备溶液A，分散剂，去离子水，和防沫剂加入预研磨容器。此时同样可加入任意量的在制备溶液C中没有使用的丙二醇。将各组分混合直至均匀。可以该步或推迟至回收后研磨物料时，加入全部量的溶液B。
下一步，在适度搅拌条件下缓慢加入艾克敌。加入完成后，必须增加剪切力以防止飘浮并确保湿润。为确保适度湿润并减少艾克敌结块，建议使用不锈钢转子/定子均化器，并将流出液再循环回预研磨容器。
将预研磨容器中的成分置换至湿磨装置(不锈钢球磨，优选卧式)以进一步减小粒径。将研磨物料和磨的漂洗物收集在搅拌的，配衡好的，不锈钢容器(后研磨容器)。记录回收的后研磨物料数量，并与理论回收值比较以确定回收百分率。
根据回收百分率，计算必须提供给最终产品的溶液C的精确量(水合黄原胶)。如果预研磨阶段没有加入溶液B，根据溶液C进行同样的演算，以确定目前溶液B的加入量。将计算量的溶液C(以及如必须的溶液B)边适度搅拌(螺旋桨叶约500rpm)边加入后研磨物料，并使之搅拌1小时。测试终产物样品的粘度、粒径和比重。实施例6艾克敌(0.2g/L)水悬浮剂如下制备含0.2g艾克敌/L的水悬浮剂
为制备0.2g/L水悬浮剂，采用下述步骤。将工业级艾克敌(0.03g)与表面活性剂(3.0g)，分散剂(0.15g)，去离子水(7.52g)和防沫剂(0.15g)混合并在球磨机中湿磨以形成研磨物料。
分别地，根据下述方法制备水合悬浮物料边混合边向丙二醇(15g)和杀微生物剂(0.3g)中加入黄原胶(0.3g)。边混合边向去离子水(120.55g)中加入矿物增稠剂(3g)。使黄原胶在丙二醇中充分分散，然后边混合边将黄原胶/丙二醇加入水合矿物增稠剂。
为制成最终的水悬浮剂产品，将研磨物料加入大量水合溶液，以形成最终艾克敌浓度为0.2g/L的水悬浮剂。
实施例7含直染剂的艾克敌(100g/L)水悬浮泼淋制剂制备含100g/L艾克敌和聚乙酸乙烯酯的水悬浮剂。聚乙酸乙烯酯作为粘着剂/粘合剂组分，以使在用于泼淋时增加制剂与毛发的粘合力。悬浮剂组分为
为制备该制剂，将艾克敌在含有表面活性剂，分散剂溶液以及0.05g防沫剂的10g去离子水中湿磨以制备研磨物料。再用5g水冲洗研磨物料。研磨物料的回收率为90.46％。
通过将矿物增稠剂混入含有杀微生物剂的8.83克水中，以形成水合悬浮液。将聚乙酸乙烯酯加入丙二醇中。将矿物增稠剂水合物和聚乙酸乙烯酯/丙二醇混合物混合形成水合悬浮剂。
将水合悬浮剂加入研磨物料并混合直至均匀。实施例8艾克敌(100g/L)的水悬浮泼淋制剂如下制备含100g/L艾克敌的泼淋制剂
通过将艾克敌在含有表面活性剂、分散剂溶液以及防沫剂的10g去离子水中湿磨形成研磨物料。将研磨物料再用5g水冲洗。研磨物料的回收率为88.56％。
将其在加热至96℃的去离子水中混合直至成为溶液，并使溶液冷却至室温而制成10％(w/w)聚乙烯醇(AIRVOL 125TM，Air Products)溶液。
通过将丙二醇，矿物增稠剂，杀微生物剂，聚乙烯醇和去离子水(8.83克)混合形成水合悬浮物料。
向研磨物料中加入88.56％的水合悬浮液，并混合直至均匀而制成最终的产品。
实施例9含有聚合增稠剂和聚合分散剂的艾克敌(25g/L)水悬浮剂如下制备艾克敌水悬浮剂
将艾克敌在含有杀微生物剂，0.1g防沫剂，2g表面活性剂，2g聚合分散剂和2.5g聚合增稠剂的64.9g去离子水中湿磨形成研磨物料。研磨物料的回收率为91％。代表性的聚合表面活性剂是ATLOX4894，以及可应用的聚合分散剂是ATLOX 4913(均由Uniqema生产)。
通过与0.9g防沫剂，18g表面活性剂，28g聚合分散剂，37.5g聚合增稠剂，丙二醇和755.6g去离子水一起搅拌分别制成调稀物料。向研磨物料中加入819g调稀物料并混合直至均匀，制成最终产品。
实施例10艾克敌(480g/L)的水悬浮剂如下制备含480g/L艾克敌的水悬浮剂
将艾克敌与表面活性剂，分散剂，去离子水(90.74g)和2g的防沫剂混合，并在球磨机中湿磨形成研磨物料。适合的木素磺酸盐分散剂是Reax 88B，Westvaco Corporation，Inc。研磨物料的回收率为66.20％。
分别地，如下制备水合悬浮物料。边混合边向丙二醇中加入黄原胶，然后边混合边向28.3g去离子水和杀微生物剂中加入矿物增稠剂。在边混合边向水合矿物增稠剂中加入黄原胶/丙二醇前使黄原胶充分分散于丙二醇中。
向研磨物料中加入28.27克水合悬浮液并混合均匀形成最终产品。
实施例11含有蔗糖的艾克敌(100g/L)水悬浮泼淋制剂该制剂中使用下述组分
为制备研磨物料，将艾克敌，表面活性剂，分散剂，防沫剂和40％蔗糖水溶液混合并湿磨至所需艾克敌中值粒径。从研磨机中回收研磨物料并确定回收百分率。向回收研磨物料中，加入适量丙二醇和杀微生物剂以使艾克敌最终浓度为100g/L。
实施例12含尿素的艾克敌(200g/L)水悬浮泼淋制剂该制剂中使用下述组分
为制备研磨物料，将艾克敌，表面活性剂，分散剂，防沫剂和尿素溶液混合并湿磨至所需艾克敌中值粒径。从研磨机中回收研磨物料并确定回收百分率。向回收研磨物料中，加入适量丙二醇和杀微生物剂以使艾克敌最终浓度为200g/L。
权利要求
1.稳定的杀外寄生物水悬浮剂，其中包括研磨至平均粒径为约1-约15微米的杀外寄生物有效量的spinosyn，或其生理上可接受的衍生物或盐，以及可促进研磨颗粒湿润的有效量的表面活性剂，可足以形成spinosyn分散剂重量比为3∶1-约1∶5量的分散剂以及水。
2.权利要求1的制剂，其中spinosyn平均粒径为约2-约7微米。
3.权利要求1或2的制剂，其中spinosyn的量为制剂的约0.02-约50重量％。
4.权利要求3的制剂，其中spinosyn的量为制剂的约2-约5重量％。
5.权利要求1，2，3或4的制剂，其中spinosyn是spinosyn A。
6.权利要求1，2，3，4或5的制剂，其中分散剂是离子型分散剂。
7.权利要求1，2，3，4，5或6的制剂，其中进一步包括a)约0.1-约10重量％的表面活性剂，b)约0.3-约5重量％的矿物增稠剂，c)约0.05-约3重量％的树胶，以及d)局部兽医应用可接受的、有效防止悬浮剂中微生物生长量的杀微生物剂。
8.权利要求7的制剂，其中表面活性剂以制剂的约0.1-约5重量％存在。
9.权利要求7的制剂，其中spinosyn以约每升制剂25克量存在，分散剂是缩合甲醛/萘磺酸或其盐，树胶是黄原胶，水是去离子水，并且其还含有丙二醇和防沫剂。
10.一种制品，其包括包装材料和包含在所述包装材料中的用于控制小型反刍动物或伴侣动物的外寄生物侵染的制剂，其中所述制剂包括单位剂量的权利要求1-9中任一项的制剂；并且其中所述包装材料包括标签或带有用于指导动物给药剂量的说明书的包装插页。
11.稳定的杀外寄生物水悬浮剂的制备方法，所述方法包括(a)将含有spinosyn，或其生理上可接受的衍生物或盐，与表面活性剂，分散剂，防沫剂和水的组合物进行湿磨形成“研磨组合物”，其中spinosyn的平均粒径为约1-约15微米，(b)将含有约2-约10重量％矿物增稠剂的水悬浮液与含有约1-约4重量％树胶的C2-C4亚烷基二醇的分散组合物混合形成“水合悬浮组合物”，其中含有约0.5-约8重量％的矿物增稠剂，以及(c)将第一体积的研磨组合物用第二体积的水合悬浮组合物充分稀释，以提供所需的spinosyn浓度。
12.控制外寄生物对小型反刍动物或伴侣动物侵染的方法，其包括给动物施以有效量的权利要求1-9中任一项的制剂。
13.权利要求12的方法，其中将制剂以点滴或泼淋方式施用至动物的头，颈，肩或背部。
14.权利要求1，2，3，4，5，6，7，8或9的制剂在制备用于控制小型反刍动物或伴侣动物的外寄生物侵染的药物中的应用。
15.稳定的杀外寄生物水悬浮剂，其中包括研磨至平均粒径为约1-约15微米的杀外寄生物有效量的spinosyn，或其生理上可接受的衍生物或盐，以及可促进研磨颗粒湿润的有效量的表面活性剂，可足以形成spinosyn分散剂重量比为约3∶1-约1∶5量的分散剂以及水；其基本上如前述的任一实施例所述。
全文摘要
本发明提供了稳定的杀外寄生物的Spinosyn水悬浮剂,其中包含已研磨至平均粒径为1－15微米的spinosyn,或其生理上可接受的衍生物或盐,有效量的可促进研磨颗粒湿润的表面活性剂,可形成spinosyn:分散剂重量比为3∶1－1∶5量的分散剂,以及水。还提供了防止小反刍动物或伴侣动物外寄生物侵染的方法,其包括给以有效量的上述水悬浮剂。
文档编号A61K47/34GK1367646SQ00811234
公开日2002年9月4日 申请日期2000年8月2日 优先权日1999年8月12日
发明者W·W·汤普森, J·R·温克勒 申请人:伊莱利利公司