发酵麦芽提取物作为抗炎剂的应用的制作方法

专利名称：发酵麦芽提取物作为抗炎剂的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种商品名为Avemar的发酵麦芽提取物的新治疗用途，更具体涉及Avemar用于制备药物组合物的用途，该药物组合物可用作抗炎剂，用于预防或治疗或缓解炎症，特别是关节炎。
发酵麦芽提取物(即在下文提到的Avemar)的生产方法以及免疫刺激和抗转移作用描述在WO 99/08694中。该物质可通过在水介质中使用酿酒酵母发酵麦芽并且干燥滤过的发酵液体来获得。所获得的物质其特征表现为每克干燥物质中含有0.4毫克的2，6-二甲氧基-对苯醌。
令人惊奇的是，在我们的研究中发现Avemar能够用于治疗或预防炎症疾病，特别是发生在包括人类在内的哺乳动物身上的类风湿性关节炎。
关节炎是大量关节炎疾病的总称，比如类风湿性关节炎、细菌性关节炎、反应性关节炎等等。类风湿性关节炎又包括一大组非细菌性情形，最显著的症状为关节炎症和关节变形。在大多数情况中，典型的类风湿性关节炎会影响到全身多处的关节(即多关节炎)，但它也可仅影响某一处单独的关节(即单关节炎)。在使大多数关节软骨和骨头变形以及破坏关节功能的众多因素中，关节软骨受到攻击只是其中之一。这种疾病影响关节鞘、关节韧带和骨组织。在大多数的情况中，这种疾病表现为复杂的变化过程，包括伴随一生的反复加重和改善阶段；并且，这种关节的变形和全身组织系统的损害将持续恶化。仅有约10％的患者能够自然康复。
目前主要的治疗方法为缓解疼痛和减轻症状，还没有一种能够彻底治愈该病的方法。在众所周知的治疗方法中，抗炎剂的使用是最普遍的，比如甾类化合物(强的松龙，地塞米松)、非甾类抗炎药(NSAIDs)以及影响该疾病的抗风湿药(DMARDs)。NSAIDs类包括水杨酸盐、布洛芬、非诺罗芬、萘普生、炎痛喜康、托美丁、吲哚美辛和其它诸如环氧合酶抑制剂。这些化学治疗药表现出低效高毒的特性。
DMARA类或SAAR类(长效抗风湿药)包括D-青霉胺、氯金酸钠、氯喹、asatioprine、甲氨蝶啶和环磷酰胺。考虑到它们的高毒性，这些药物一般作为对NSAIDs药效反应不佳的患者的第二选择。这些药物通常与NSAIDs配合使用。
最近，非甾类抗炎剂同样已经被用于治疗类风湿性关节炎，包括γ-干扰素和白细胞介素-6拮抗剂、环孢菌素、PAF-拮抗剂、二十碳五烯酸(EPA)、生长激素释放抑制因子类似物、肽衍生物和免疫调节剂。
匈牙利专利NO.203044描述了一种能够改善关节炎症状的药物制备物，其活性成分为草药提取物。
尽管目前可用的药物有很多，但仍然很难或无法通过医药治疗改进多数患者的状况。此外，也没有一种能够有效预防类风湿性关节炎的方法。
因此，对新型的抗风湿药特别是那些毒性小、副作用低并且能显著消除、缓解与预防类风湿性关节炎各种症状的药物的需求日益增长。新的药物应能抑制或减轻炎症、肿胀和异常血管再生、骨或关节侵蚀，同时可被良好耐受。
因此，在可能引发佐剂性关节炎(AA)的大鼠中检查了Avemar的效果，这是最常用的人类类风湿性关节炎(RA)实验模型。已经发现佐剂性关节炎的形成符合人类类风湿性关节炎的一些特性，因此能够恰当地用于筛选化合物。通常，这种慢性炎症的模型被药理学家用于检测药物的抗炎效果和免疫抑制作用。
影响大鼠AA形成的时间和程度决定于几个因素，比如引发剂及其剂量、注射部位、实验大鼠的品系等等。足跖注射后24小时内出现了急性炎症反应(初级反应)，然后在4到5天内足爪体积逐渐增大。根据所用大鼠的品系，在第6天和第11天之间炎症程度逐渐稳定(坪效应)，接着反应的强度进一步增加。注射后的第10天至第12天，未进行足跖注射的一侧足爪也产生了炎症反应(次级反应或免疫-介导反应)。在接受处置和未处置的足跖上，炎症反应、也就是足爪体积增大都在第18天与第21天之间达到最大。
附图的简要说明

图1显示22-天p.o.治疗对AA的效果(足跖注射)。
图2显示22-天p.o.治疗对AA的效果(未进行足跖注射)。
图3显示22-天p.o.治疗第14天对AA的效果(足跖注射)。
图4显示22-天p.o.治疗第18天对AA的效果(足跖注射)。
图5显示22-天p.o.治疗第22天对AA的效果(足跖注射)。
图6显示22-天p.o.治疗第14天对AA的效果(未进行足跖注射)。
图7显示22-天p.o.治疗第18天对AA的效果(未进行足跖注射)。
图8显示22-天p.o.治疗第22天对AA的效果(未进行足跖注射)。
图9显示22-天p.o.治疗对大鼠体重的影响对时间的函数。
图10显示22-天p.o.治疗第22天对大鼠体重的影响。
图11显示35-天p.o.治疗对AA的效果(足跖注射)。
图12显示35-天p.o.治疗对AA的效果(未进行足跖注射)。
图13显示35-天p.o.治疗第28天对AA的效果(足跖注射)。
图14显示35-天p.o.治疗第32天对AA的效果(足跖注射)。
图15显示35-天p.o.治疗第35天对AA的效果(足跖注射)。
图16显示35-天p.o.治疗第28天对AA的效果(未进行足跖注射)。
图17显示35-天p.o.治疗第32天对AA的效果(未进行足跖注射)。
图18显示35-天p.o.治疗第35天对AA的效果(未进行足跖注射)。
图19显示35-天p.o.治疗对大鼠体重的影响对时间的函数。
图20显示35-天p.o.治疗第35天对大鼠体重的影响。
图21显示表现AA的未治疗大鼠滑膜和邻近组织中的严重慢性炎性浸润。
图22显示表现AA的未治疗大鼠滑膜中含有巨细胞的严重浸润。
图23显示表现AA的未治疗大鼠关节周围组织中炎性浸润内的微脓肿。
图24显示见于表现AA的未治疗大鼠滑膜中的炎性浸润中的CD4阳性淋巴细胞。
图25显示先前表现AA并且用Avemar治疗的大鼠滑膜与滑膜周围组织中没有炎性浸润。
Avemar对大鼠佐剂性关节炎的效果在我们的实验中，在动物右后爪跖部皮肤下注射悬浮与匀化在液体石蜡中的0.1ml 0.5％灭活乳酪分枝杆菌(Difco)，引发雌性Wistar大鼠的佐剂性关节炎。22-天治疗期的实验动物组的初始体重平均值为138+5g，35-天治疗期的实验组为118±5g。Avemar治疗期间，动物的体重以及22天实验组第0，1，4，7，12，14，18和22天注射的右腿和未注射的左腿的体积(包括初级反应和次级反应的变化)，和35天实验组第0，3，7，11，15，18，21，25，28，32和35天的体积是通过体积描记器来测量的。在开始使用Avemar治疗后，炎症反应分别在第1天(22-天组检测)和第14天(35-天检测组)产生。在两个实验组中都采用了以下的实验组和方法1.对照组2×1.0ml/150g(蒸馏水)；2.Avemar组2×2.5g/kg/天；3.Avemar组2×1.0g/kg/天；4.Avemar组2×0.25g/kg/天；5.Avemar组2×0.05g/kg/天；6.吲哚美辛组2×0.5mg/kg/天；7.地塞米松组2×0.05mg/kg/天。每个实验组由10-16只大鼠组成。
Avemar(Biromedicina Pcl.生产，布达佩斯，匈牙利)和地塞米松悬浮液总在给予前准备好和/或直接稀释。吲哚美辛(Chinoin Pharmaceutical and ChemicalWorks生产，布达佩斯，匈牙利)的0.5％羧甲基纤维素钠溶液被作为阳性对照而给予。不同剂量的Avemar、吲哚美辛和地塞米松(Organon生产)按照每150g体重1.0ml经胃管给予，一天两次，也就是每日用量的前一半在早上8点-10点间给予，另一半在下午4点-6点间给予。对照组给予1ml/150g的蒸馏水。
结果的统计评估采用了单向方差分析法(ANOVA)。
结果图1-10显示了22-天治疗组的结果，图11-20显示了35-天治疗组的结果。这些图还给出了组平均值与标准偏差(±SEM)(22-天实验组中n＝14-15，35-天实验组中n＝10-12)。与对照组比较的显著性水平以条形图上的*表示(*＝p＜0.05；**＝p＜0.01；***＝p＜0.001)。
实验结果证实了Avemar的抗炎功效，Avemar依据不同的剂量能显著抑制大鼠初级与次级炎性反应的形成。与吲哚美辛和地塞米松类似的是，在经治疗的大鼠中Avemar以剂量-依赖性方式使佐剂性关节炎最小化(尽管它的功效还没达到阳性对照组的吲哚美辛和地塞米松的水平，它依然能够明显抑制佐剂性关节炎)。在14-天的预治疗中，它没有影响鼠腿的体积，即表示它并不引起广泛的炎性反应。根据预治疗的持续时间，它抑制了关节炎的形成。在22-天或35-天治疗期间，预治疗使用Avemar不能或仅能轻微增加关节炎大鼠的体重。
组织学研究将受到影响的右后足跖关节连同骨骺及周围纤维与肌肉组织固定在4％中性福尔马林缓冲液中。并使用EDTA脱钙，将样本用石蜡包埋。切成8微米薄的纵切片，用hemotoxiline(H)和酸性曙红(E)染色。在所选择的阳性对照组和治疗组中，进行免疫过氧化酶反应，用于显示CD4和CD8阳性T淋巴细胞。使用的抗体为Santa Cruze(Santa Cruze，CA，USA)的产品，并以1∶100稀释。
患有AA的未治疗对照组大鼠关节的组织学检查表现出滑膜及周围(滑膜周的)组织严重的炎性变化(图21，H和E染色，放大300倍)。细胞浸润由淋巴细胞、浆细胞、组织细胞、多核巨细胞和成纤维细胞组成(图22，H和E染色，放大300倍)。在炎性浸润内还观察到由嗜中性粒细胞形成的微脓肿(图23，H和E染色，放大300倍)。AA大鼠的炎性浸润物中大多数淋巴细胞呈CD4阳性(图24，CD4免疫过氧化物酶)。
经2×1.0或2×2.5g/kg/天Avemar治疗的大鼠的关节没有表现出或仅表现出最少量的炎性浸润。浸润物中关节滑液和滑膜周围细胞的CD4阳性淋巴细胞几乎全部消失，且经过Avemar的治疗关节纤维化也降到最低程度(图25，H和E染色，放大300倍)。类似的结果也出现在使用吲哚美辛和地塞米松的阳性对照组中。表1显示了不同实验组中炎性浸润程度的半定量评估。在接受预治疗24小时和14天的组中，没有出现明显的差异。
表1未治疗和用Avemar、吲哚美辛或地塞米松治疗的AA大鼠炎性浸润的半定量组织学测定
因此，组织学研究明确地表明了Avemar的抗炎作用。
在这些结果的基础上能够推断出，适当剂量的Avemar能抑制类风湿性关节炎的形成。
在GLP(Good Laboratory Practice)条件下进行的急性和亚急性毒理测试显示，不同于甾类和非甾类抗炎化合物，Avemar没有任何毒副作用，包括侵蚀性胃炎和急性胃溃疡(Report.Acute oral toxicity study of Avemarin mice.Code9901.Univ.Vet.Sci.，Dept.Pharmacol.Toxicol.，Budapest，1999；Acute oral toxicitystudy of Avemarin Rats.Code9902.Univ.Vet.Sci.，Dept.Pharmacol.Toxicol.，Budapest，1999；Subacute oral toxicity study of Avemar.Code0001.Univ.Vet.Sci.，Dept.Pharmacol.Toxicol.，Budapest，2000)。更进一步，该制备物在大鼠骨髓的微核测试中没有发现基因毒性。
这些实验的结果表明Avemar可以作为治疗人类类风湿性关节炎的合适的治疗工具。同样可以考虑它在治疗其它免疫病理学疾病中的应用。
Avemar对人类类风湿性关节炎的作用证实患有类风湿性关节炎的治疗耐受性患者在the National Institute forRheumatology and Physiotherapy的风湿病IV部(Budapest，Hungary)，用Avemar治疗。这种自我控制的开放式临床测试主要评定Avemar的疗效、耐受性和副作用。下面是15位患者经过1年治疗的实验结果。
A.患者的选择有15名门诊患者参与研究，基于他们的ACR分类标准，证实患有RA，并且分为Steinbrocker解剖学阶段II期至III期。他们在用Avemar治疗前经过三个月的其它治疗，RA病情停滞或恶化。这些患者均同意参加此项试验研究。
B.排除标准—年龄在18岁以下和80岁以上的；—患有肝脏、心脏、肾脏和造血器官严重疾病的；—活动期胃溃疡患者；—精神病，精神发育迟缓者；—不配合者；—怀孕或哺乳期妇女。
如果3个月后没有达到预期疗效，说明制备物无效，将停止给药。
C.研究过程常规药物治疗(基础治疗、甾类和NSAID)之外，这15例RA患者每天被给予2×9g的Avemar水溶性颗粒剂(早晨9g，晚上9g)。患者开始治疗和之后每个月进行检查，6和12个月时分别进行统计分析。
D.测试指标本研究的临床指标如下—Ritchie指数；—HAQ(健康评估调查)；—晨僵的持续小时数；—沉积作用；-CRP；—血细胞比容值。
研究中还记录了给予甾类治疗剂量的变化。在此研究中参与试验的15位女性RA患者的平均年龄是54.5岁(44-68岁)，并且有平均持续8年(3-25年)的病史；除去其中一位，其余患者都是血清阳性。在研究起始阶段，有10位患者接受了基准治疗1位患者治疗使用的是柳氮磺胺吡啶(Salazopyrin)，5个用的是甲氨蝶呤(Methotrexate，Lachema)，3个用的是环孢菌素(Sandimmun，Neoral)，1个用的是氯喹(Delagil)。5位患者没有接受基础治疗在早期应用的基础治疗的药物没有被证实有效和/或产生副作用。在研究的起始阶段，有11位患者被给予了甾类治疗剂，最大口服剂量是7.5-10mg的强的松龙，或等同剂量的甲基强的松龙或地塞米松。患者的病征如表2所述。
表2Avemar治疗开始前的患者数据
甾类 基准治疗剂ESR红细胞沉积率地塞米松D氯喹Ch HAQ健康评估调查甲基强的松龙M甲氨蝶呤MTX曲安西龙T环孢菌素C强的松龙P柳氮磺胺吡啶S
结果利用Wilcoxon检验进行统计计算。
结果见表3-9。
表36和12个月内Ritchie指数和初始值的变化比较
表46和12个月内HAQ值和初始值的变化比较
表56和12个月内晨僵和初始值的变化比较
表66和12个月内沉积作用和初始值的变化比较
表7CRP水平变化
利用单一样本的T检验进行比较。
表8血细胞比容值的变化
利用单一样本的T检验进行比较。
表96和12个月内甾类剂量的变化
4名患者没有接受甾类剂治疗。
11位患者中有5位服用的甾类剂量和初期剂量相同；2位患者成功地将初始剂量减掉一半，2位患者的剂量从7.5mg变成5mg。12个月的检测期间内4位患者改变了基础治疗药物的剂量其中1位的MTX从12.5mg增至15mg，其他3位患者服用环孢菌素的剂量分别从175mg减到125mg，225mg减到100mg，200mg减到100mg。剂量未改变的有5名患者。
血红蛋白和肝肾功能实验指标的检测没有显著变化。
这些数据结论显示出在前6个月，经Avemar治疗的治疗耐受性RA患者都收到了令人惊喜的结果。关于患者的临床指标，无一例外的都有了显著改善；而且，它也能降低患者服用甾类药物的剂量。到整个疗程结束时，相比于初始状态，临床指标的显著改善仍在持续。
基于上述的结论，本发明的目的是发酵麦芽提取物在制备治疗或预防或缓解炎症的药物中的应用。
优选地，Avemar能够用于制备药物组合物，该组合物可用于治疗或预防或缓解关节炎，更优选类风湿性关节炎。
本发明进一步的目的是提供一种制备药物组合物的方法，该组合物含有发酵麦芽提取物作为活性成分，该方法包含将所述活性成分与药剂学上常用的添加剂制成可用于治疗或预防或缓解炎性疾病的药物组合物。
更进一步，Avemar已被证实优选适宜联合其它非甾类抗炎剂(NSAID)，比如双氯酚酸钠、布洛芬、吡罗昔康、托美丁等使用。协同给药的结果是非甾类药物的剂量可以减少很多，从而可以成功地降低这些药物的毒性。举例来说，协同双氯酚酸钠给药使得所用的两种药物的剂量都减少50％，但达到的疗效相同。
基于上述结论，本发明更进一步的目的是发酵麦芽提取物(Avemar)和另一种活性成分(尤其是抗炎剂)在制备治疗或预防或缓解关节炎的药物中的应用。按照本发明，优选地使用非甾类抗炎剂作为另一种抗炎剂。
再进一步，本发明还涉及一种组合的药物组合物，其含有有效量的发酵麦芽提取物(Avemar)与另一种活性成分(尤其是抗炎剂)的组合，以及药剂学上可接受的载体。
本发明优选的抗炎药物组合物含有有效量的发酵麦芽提取物(Avemar)和双氯酚酸钠，以治疗和预防类风湿性关节炎。
本发明中的活性成分可被配制成几种口服和经非肠道给药的剂型。一般来说，活性成分在药物中的重量比大约为5％-95％。
生产药物组合物所用的药剂学上可接受的赋形剂可以是固相或者液相。例如，固体药物组合物的例子包括粉剂、片剂、丸剂、胶囊剂、扁囊剂，菱形制利、栓剂和可分散性颗粒剂。固体组合物还可包括数种添加剂，比如稀释剂、矫味剂、溶解剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包封物质。
关于粉剂，赋形剂是微细粉状的固体物质，与微细分散的活性成分构成混合物。
关于片剂，将具备所需粘合特征的载体按适当比例与活性成分混和，压制成所需形状和大小。
优选地，粉剂和片剂中活性成分的含量为5％-70％。举例来说，适合的赋形剂包括碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖、乳糖、果胶、糊精、环糊精、麦芽糖糊精、淀粉、明胶、西黄耆胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可油等等。生产牵涉将活性成分与作为赋形剂的包封物质一起配制，由此得到胶囊剂，其中含有或没有其他载体的活性成分被该赋形剂所包围，后者于是与活性成分结合。扁囊剂和菱形药剂的生产和上述类似。片剂、粉剂、胶囊剂、丸剂、扁囊剂和菱形剂都可口服给予。
为了生产栓剂，低熔点蜡、例如脂肪酸甘油酯的混合物或者可可油先进行融化，然后将活性成分均匀地分散在其中。再将融化的均匀混合物倒进适当大小的栓剂模型，冷却成形。
液体药物组合物包括溶液、悬浮液、乳液、糖浆剂和酏剂，例如水溶液或者丙二醇水溶液。关于经非肠道注射，液体药物组合物可配制成聚乙二醇水溶液。
适合口服给药的溶液可通过将活性成分溶入水中，并加入适当的着色剂、矫味剂、稳定剂和促凝剂而制成。
适合口服给药的悬浮液可通过将微细研磨的活性成分与一些粘性物质均匀地分散在水中而制成。所说的粘性物质，例如天然或者合成的橡胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠以及其它已知的悬浮剂。
固体药物组合物也可包括在用于口服给药前不久转化为液体制备物的那些。这类液体药物制剂的实例包括溶液、悬浮液和乳液。除活性成分以外，这些药剂制备物可以含有着色剂、矫味剂、稳定剂、缓冲剂、人工与天然甜味剂、分散剂、促凝剂、溶解剂及类似物质。
经非肠道给药的无菌组合物可以优选地是水溶液或非水溶液、悬浮液或乳液。以下物质可被作为溶剂水，丙二醇，某些种类的聚乙二醇，植物油如橄榄油，可注射的有机酯如油酸乙酯。这些组合物也可包括其它辅料，特别是润滑剂、等渗剂、净化剂、分散剂和稳定剂。有几种方式可以灭菌，包括无菌过滤，在组合物中包括灭菌剂，辐射或高温处理。无菌固体组合物也可以这样制备，在使用前不久溶解在灭菌水或其它可注射用的介质中。
优选地，药物组合物按单位剂量包装。将制备物分成单位剂量，每一单位包含一定量的活性成分。单位剂量形式可以是带包装的制备物，其中该包装含有不连续量的制备物，例如包装在小瓶或安瓿中的片剂、胶囊剂和粉剂。单位剂量形式也可包括胶囊剂、片剂、扁囊剂、菱形制剂或其一定数量包括在包装中。
根据活性成分的用途和效力，活性成分的用量可以在1与1000mg之间变化或调整，优选在10与100mg之间的单位剂量制备物。假如需要的话，药物组合物还可以含有其它可相容的治疗剂。
为预防、抑制或阻断关节炎而按照本发明应用的组合物的有效剂量和服药比率取决于多个因素。适合的剂量必须由专家给出。通常，医师可根据治疗对象的年龄、体重和其它个体因素指定适合的剂量。每日剂量的水平在约0.1-1000mg/kg体重之间，优选约1-500mg/kg/天，更优选约50-250mg/kg/天。出于安全性考虑，假如需要的话，每日总剂量可以分开来，每次给予一部分。
当药物组合物包括除了Avemar之外的另一种活性成分时，其它组成成分可以选自下组皮质甾类、抗炎剂、抗风湿剂、免疫抑制剂、抗代谢药和免疫调节剂。属于上述类别的化合物名单见下述手册“Comprehensive MedicalChemistry”，Pergamon Press，Oxford，970-986(1990)。这组药物例如包括柳氮磺胺吡啶和氨基水杨酸盐(抗炎剂)；环孢菌素；FK-506和雷帕霉素(免疫抑制剂)；环磷酰胺和甲氨蝶呤(抗代谢药)；地塞米松、甲基强的松龙、曲安西龙、强的松龙(甾类)；和干扰素(免疫调节剂)。当Avemar和一种或更多科药剂合用时，它们可以被包装在一起，或联合给药。一种或更多药剂与Avemar联合给药基本上是同时或先后进行的。专家能够根据所释放的药剂、所需结果、患者和被治疗的病症决定最适合的给药方式。
对于上文给出的本发明中的具体实施例，本领域技术人员将会明白这种叙述仅具有示例性，因而不同的选择、等效替换手段、适应性变化或修改都在本发明的范围之内，而且在申请人的预期之内。因此，本发明不仅仅被限定在上文举例中的特定实施例，而是由下述权利要求所限定的。
权利要求
1.一种发酵麦芽提取物(Avemar)在制备治疗或预防或缓解炎症的药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于该炎症为关节炎。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于该关节炎为类风湿性关节炎。
4.一种发酵麦芽提取物(Avemar)和另一种特别是抗炎剂的活性组分在一制备治疗或预防或缓解关节炎的药物中的应用。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于该抗炎剂为非甾类抗炎剂。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于该非甾类抗炎剂为双氯酚酸钠。
7.一种药物组合物，其特征在于该药物组合物包含有效量的发酵麦芽提取物(Avemar)和另一种活性组分的组合以及药剂学上可接受的载体。
8.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于具有抗炎活性，包含有效量的发酵麦芽提取物和非甾类抗炎剂的组合。
9.一种治疗或预防或缓解包括人类在内的哺乳动物炎症的方法，其包括对需要这类治疗或预防或缓解的所述哺乳动物给予有效量的发酵麦芽提取物(Avemar)。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于包括进一步给予抗炎剂。
全文摘要
本发明涉及一种商品名为Avemar的发酵麦芽提取物的新治疗用途，更具体涉及Avemar用于制备药物的用途，该药物可用作抗炎剂，用于预防或治疗或缓解炎症，特别是关节炎。
文档编号A61P19/02GK1674924SQ03818900
公开日2005年9月28日 申请日期2003年8月8日 优先权日2002年8月9日
发明者梅特·希德弗吉, 阿科斯·雷瑟塔 申请人:梅特·希德弗吉, 阿科斯·雷瑟塔