专利名称：速释玉泉微丸的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗糖尿病的中药制剂，即中药微丸制剂，具体而言，本发明涉及一种治疗糖尿病的速释玉泉微丸及其制备方法。
背景技术：
糖尿病为内分泌科常见病、多发病，亦称成人发病型糖尿病，多在35～40岁之后发病，占糖尿病患者90％以上，近年来有逐渐上升趋势。临床以高血糖为主要标志，久病可引起全身多个系统的损害。具有难治愈、复发率高、终身服药、并发症多、病死率高等特点。
常用降糖西药因其作用局限而起不到综合性治疗作用，同时亦存在毒副作用。若长期服用降糖西药，导致较大毒副作用的蓄积而引起患者产生耐药性及依赖性，久而久之，又提高了糖尿病肾病、视网膜病变、神经病变、糖尿病足等并发症的发生率。而经现代药理研究证明具有明确的降血糖、胰岛素增敏的中药(尤其是复方制剂)除不易产生耐药性外，还有较轻的毒性、副作用的优点。
玉泉丸由清·叶天士《种福堂公选良方》玉泉散改剂而成，是一经典名方，具有养阴清热，生津止渴之功效。临床用于轻、中型2型糖尿病患者疗效确切，能有效缓解糖尿病之多饮，多食，多尿，体乏，形体消瘦等症状。但其存在生物利用度低，药物吸收不完全，用药量大且外观粗、大、黑等缺点。本发明人对玉泉丸的制备进行了潜心研究，在传统名方玉泉丸的基础上进行剂型工艺改进，通过正交试验设计，筛选出优化的制备工艺，由此完成了本发明。
发明内容
本发明的目的是提供了一种治疗糖尿病的速释玉泉微丸及其制备方法。
本发明的目的是通过下列技术方案实现的本发明的速释玉泉微丸通过如下的方法制备，其中处方葛根 5-25重量份五味子 5-25重量份甘草 1-10重量份天花粉 5-25重量份地黄 5-25重量份麦冬5-25重量份制法
将葛根、五味子、甘草、天花粉4味药粉碎成粗粉，地黄切成小块，麦冬块根备用；葛根，五味子中加入相当于生药量4～8倍重量的60～95％、优选70～90％乙醇(V/V)加热回流提取1～3次，每次1～3小时，滤过，合并滤液；葛根与五味子滤渣挥去乙醇后，并入天花粉、麦冬、甘草、地黄4味药中，加入相当于处方6味生药量重量的6～10倍水煎煮1～3次，每次1～2小时，滤过，合并煎液；减压浓缩至含固量为15～17％，优选16％(W/W)；将所得提取液喷雾干燥，进口温度设定为170～180℃，出口温度设定为80～90℃，得到干浸膏；按照干浸膏粉末∶微晶纤维素重量比为68～40∶32～60(W/W)的比例投入流化床造粒包衣机中，用5～10％聚乙烯吡咯烷酮或3～6％羟丙甲纤维素水溶液(W/V)作为粘合剂由顶喷或者侧喷制粒。
本发明优选的技术方案是处方葛根 15重量份五味子 15重量份甘草 5重量份 天花粉 15重量份地黄 15重量份麦冬15重量份制法将葛根、五味子、甘草、天花粉4味药粉碎成粗粉，地黄切成小块，麦冬块根备用；葛根，五味子中加入相当于生药量8倍重量的80％乙醇(V/V)加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液；葛根与五味子滤渣挥去乙醇后，并入天花粉、麦冬、甘草、地黄4味药中，加入相当于处方6味生药量重量的8倍水煎煮2次，每次2小时，滤过，合并煎液；减压浓缩至含固量为15～17％，优选16％(W/W)；将所得提取液喷雾干燥，进口温度设定为170～180℃，出口温度设定为80～90℃，得到干浸膏；按照干浸膏粉末∶微晶纤维素重量比为40∶60(W/W)的比例投入流化床造粒包衣机中，由顶喷5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)制粒，收集30～60目颗粒。
本发明制备得到的速释玉泉微丸疗效高、使用剂量小、药物吸收完全、生物利用度高、服用方便、便于贮存保管。
本发明所制备的速释玉泉微丸制剂可用于消渴病之阴虚热盛证的治疗，相当于西医之2型糖尿病，症见多饮，多食，多尿，体乏，形体消瘦等。
下面通过实施例进一步说明本发明。应该理解的是，本发明的实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。另外，在本发明中，(v/v)表示体积比浓度或者体积比；(w/w)表示重量比浓度或者重量比；(w/v)表示重量/体积比浓度或者重量/体积比，其对应的单位是(克/毫升)。
实施例1玉泉微丸干浸膏提取工艺研究1.1葛根、五味子、甘草、天花粉、地黄、麦冬提取的工艺条件研究由于处方中葛根的有效成分葛根素，五味子中的甲素、乙素在乙醇中溶解度较大，麦冬、天花粉、地黄中的多糖、甘草中的甘草酸均是水溶性的。为了最大限度地利用各味药的有效成份，我们考虑前二者用高浓度的醇来提取，其余的水煎，设计了八个工艺。具体如下工艺一六味药全部水煎，第一次10倍量，1小时；第二次8倍量，1小时。
工艺二全部30％醇提(V/V)，第一次10倍量，1小时；第二次8倍量，1小时。
工艺三全部60％醇提(V/V)，第一次8倍量，1小时；第二次6倍量，1小时。
工艺四全部95％醇提(V/V)，第一次8倍量，1小时；第二次6倍量，1小时。
工艺五葛根、五味子80％醇提(V/V)，两次，1小时/次，第一次8倍量，第二次6倍量，药渣弃去；地黄、麦冬、甘草、天花粉水煎，两次，1小时/次。
工艺六葛根、五味子80％醇提(V/V)，两次，1小时/次，第一次8倍量，第二次6倍量；药渣并入其余四味药水煎，第一次10倍量，1小时；第二次8倍量，1小时。
工艺七葛根、五味子、麦冬80％醇提(V/V)，两次，1小时/次，第一次8倍量，第二次6倍量；药渣合并入地黄、甘草、天花粉水煎，2次，1小时/次，第一次10倍量，第二次8倍量。
工艺八麦冬、天花粉水煎醇沉，水煎第一次10倍量，1小时，第二次8倍量，1小时，合并提取液并浓缩至1∶1(W/V)，加95％乙醇(V/V)使溶液浓度达到80％(V/V)，然后静置过夜，多糖析出，过滤后溶液弃去；甘草、地黄水煎，第一次10倍量，小时，第二次8倍量，1小时；葛根、五味子80％醇提(V/V)，第一次8倍量，1小时，第二次6倍量，1小时，药液合并后浓缩成浸膏并与得到的多糖混匀。
每个工艺的提取液减压回收，真空干燥。所得浸膏量见表1表1.不同提取工艺干浸膏得率
对其活性成分进行评分，所得结果见表2表2.不同工艺中各活性指标成分综合评分
评分标准*规定葛根素、五味子甲素、乙素、甘草酸、总多糖满分分别为50分、7分、7分、6分和30分。葛根素最高含量为730.5mg，记为50分，其它值记为A/730.5×50；甲素、乙素最高含量分别为42.07mg和77.97mg，他们分别记为7分，其它值则记为B/42.17×7和B/77.97×7；甘草酸最高含量为202mg，记为6分，则其它值分别记为C/202×6；总多糖最高含量为13.29mg，记为30分，则其它值分别记为D/13.29×30。总记分为A/730.5×50+B/42.17×7+B/77.97×7+C/202×6+D/13.29×30。
为求最佳工艺，配合工艺研究。对八种不同工艺制备的玉泉微丸提取物进行了药效学试验，观察了其对肾上腺素及四氧嘧啶小鼠高血糖模型血糖的影响，结果如下①对肾上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影响根据《中国生化药物杂志》，2002，23(3)，第112-114页“五味子中α-葡萄糖苷酶制剂对小鼠的降血糖作用”中描述的方法，取正常小鼠120只，分为12组，正常对照组与模型对照组灌胃生理盐水，其余10组分别给不同工艺提取的药物(6g/kg)，0.1ml/10g，连续8天。末次给药后禁食3小时，除正常组外，其余各组腹腔注射肾上腺素100ug/kg。于30分钟后分别取血采用葡萄糖GOD-PAP法测定血糖值，结果见表3表3.对肾上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影响(x±S)
“*”表示与模型对照组比较P＜0.05，“**”表示与模型对照组比较P＜0.01(以下各表同)②对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量的影响根据《中国生化药物杂志》，2002，23(3)，第112-114页“五味子中α-葡萄糖苷酶制剂对小鼠的降血糖作用”中描述的方法，四氧嘧啶糖尿病小鼠由正常小鼠腹腔注射四氧嘧啶(200mg/kg)，72小时后测空腹血糖，选取血糖值在11.0mmol/L以上者。分组时各组动物平均血糖值之差不大于0.5mmol/L。取四氧嘧啶糖尿病小鼠110只，随机分成11组，分别为模型组及10种不同工艺的给药组，不同工艺给药组分别以6g/kg剂量给药，0.1ml/10g，模型组给等容积的生理盐水，连续7天，末次给药后禁食3小时，取血采用葡萄糖GOD-PAP法测定血糖值。结果见表4表4.对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量的影响(x±S)
综合两试验结果，认为第1、4和6号工艺对糖尿病小鼠的降血糖效果较佳，均可选择。结合活性指标成分综合评分结果，工艺6综合评分最高，为最佳选择，即葛根、五味子80％醇提(V/V)，两次，1小时/次，第一次8倍量，第二次6倍量；药渣并入其余四味药水煎，第一次10倍量，1小时；第二次8倍量，1小时。
1.2玉泉微丸的醇提工艺优选采用正交实验法来确定葛根、五味子醇提最佳工艺条件，选择乙醇浓度、加醇量、提取时间和提取次数4个因素作为考察因素，每个因素选择3个水平进行考察，如下表表5.因素水平表
按照处方比例称取葛根、五味子各15g，共30g，称9份，按照正交实验方案表进行实验，分析结果如表6表6.正交设计试验分析结果序号 乙醇浓度 提取时间 提取量 提取次数 葛根素含量 甲素含量 乙素含量 综合评分A(％) (小时) (倍)(次) (mg) (mg) (mg)1 70 1 4 1 251.3112.324 32.5875 60.442 70 2 6 2 366.9222.57 51.24 93.323 70 3 8 3 336.3424.628 47.6185 88.99
4 80 1 6 3 393.8819.746 45.222892.895 80 2 8 1 315.1917.501 49.063 80.516 80 3 4 2 317.6817.893249.927881.537 90 1 8 2 335.0720.936453.523688.008 90 2 4 3 356.5420.930053.653691.319 90 3 6 1 282.8110.114534.930564.32K1242.75 241.33 233.28 205.27K2254.93 265.14 250.53 262.85K3243.63 234.84 257.5 273.19K1258927.5625 58240.1689 54419.5584 42135.7729K2264989.3649 70299.2196 62765.2809 69090.1225K2259355.5769 55149.8256 66306.2500 74632.7761R 4.06 10.1 8.07 22.64评分标准*评分标准规定葛根素和五味子甲素、乙素满分各为60分、20分、20分，葛根素最高含量为393.88mg，记为60分，其它值记分为N/393.88×60；甲素、乙素最高含量分别为24.628mg和53.6536mg，它们分别记为20分，其它分别记分为N/24.628×20和N/53.6538×20，总记分为M/393.88×60+N/24.628×20+N/53.6538×20。方差分析结果见表7表7.方差分析结果
F0.1(2，8)＝3.1F0.05(2，8)＝4.46F0.01(2，8)＝8.65通过对上述结果进行方差分析，结果可见，D因素(提取次数)和B因素(提取时间)对结果有显著性影响，A、C两因素对结果无显著性影响。最优组合应为A2B2C3D3。将提取两次与提取三次所得的数据作比较，提取两次的数据占提取三次的数据的90％以上，故可以认为提取两次成分已基本提取完全，故选择D2。由于提取倍数无显著性差别，根据常规故选择8倍量提取，为C2。
根据方差分析结果，结合生产实际，本着成本低的原则，确定了醇提工艺最佳条件用80％乙醇(V/V)提取两次，第一次8倍量，2个小时；第二次8倍量，2小时。取葛根30g、五味子30g，按照确定的最佳工艺条件进行验证实验。则得其中有效成分含量如下表8所示。
表8.醇提工艺验征试验
验证实验表明优选出的工艺合理可行。
1.3玉泉微丸的水提工艺优选采用正交实验法来确定最佳水提工艺条件，选择加水量、煎煮时间、煎煮次数3个因素作为考察因素，每个因素选择3个水平进行考察，如表9所示表9.因素水平表
按处方比例称取麦冬、天花粉、地黄各270g，甘草90g，共九份。每份另加葛根、五味子醇提后药渣按正交设计条件进行水提，结果见表10表10.正交设计实验分析结果序号 乙醇浓度 提取时间 提取量 提取次数 葛根素含量 甲素含量 乙素含量 综合评分A(％) (小时) (倍)(次) (mg) (mg) (mg)1 70 1 4 1 251.31 12.324 32.587560.442 70 2 6 2 366.92 22.5751.24 93.323 70 3 8 3 336.34 24.628 47.618588.994 80 1 6 3 393.88 19.746 45.222892.895 80 2 8 1 315.19 17.501 49.063 80.516 80 3 4 2 317.68 17.8932 49.927881.537 90 1 8 2 335.07 20.9364 53.523688.008 90 2 4 3 356.54 20.9300 53.653691.31
9 90 3 6 1 282.8110.114534.930564.32K1242.75 241.33 233.28 205.27K2254.93 265.14 250.53 262.85K3243.63 234.84 257.5 273.19K1258927.5625 58240.1689 54419.5584 42135.7729K2264989.3649 70299.2196 62765.2809 69090.1225K2259355.5769 55149.8256 66306.2500 74632.7761R 4.0610.18.0722.64评分标准*与表2的评分标准同。
方差分析见下表11表11.方差分析结果
F0.1(2，8)＝3.1F0.05(2，8)＝4.46F0.01(2，8)＝8.65结合药效学试验，观察了不同正交设计工艺对肾上腺素及四氧嘧啶小鼠高血糖模型血糖的影响，结果如下①对肾上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影响根据《中国生化药物杂志》，2002，23(3)，第112-114页“五味子中α-葡萄糖苷酶制剂对小鼠的降血糖作用”中描述的方法，参照“实施例1.1中①中的方法”测定血糖值，结果见表12表12.对肾上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影响(x±S)
#实施例1项下的1.1中“工艺6”，下同。
②对四氧嘧啶糖尿病小鼠糖含量的影响根据《中国生化药物杂志》，2002，23(3)，第112-114页“五味子中α-葡萄糖苷酶制剂对小鼠的降血糖作用”中描述的方法，参照“实施例1.2中②的方法”测定血糖值，结果见表13表13.对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量的影响(x±S)
从以上两试验结果可见，第1、5、6、7、9号工艺及原6号工艺组给药组药物对肾上腺素所致小鼠高血糖的降血糖作用明显(P＜0.05或0.01)，且第6、7号工艺及原6号工艺药物对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量降血糖效果显著(P＜0.05或0.01)，综合两试验结果，认为第6、7号工艺对糖尿病小鼠的降血糖效果较佳，均可选择。
由表10、表11综合分析来看，A因素无显著性，且A2与A3数值基本接近无明显差异，从节能角度考虑，A因素取A2即可；B因素也无显著性，且从数据上来看，B2与B3也无明显差异，基本相同，为保证提取尽可能完全，取B3；C因素有显著性，但第二次提取率占第三次提取的93％以上，从节约成本和工业大生产的方面考虑，选择C2，故最佳工艺条件为A2B3C2。即8倍量水提取，提取两次，每次两小时。从药效上看，工艺6和7均可以选择，但从理论上分析，工艺6仅提取1次，是无法提取完全的；工艺7提取3次，提取倍数也较高，能源耗费比较大，且周期长。结合化学指标成分分析和药效学，可以认为A2B3C2是最佳选择。因为它不但反映了活性指标成分含量测定的结果同时也兼顾了工艺6和工艺7，即尊重了药效学的结果。
综上所述，正交实验经活性成分综合评分、方差分析及药效学实验，确定水提最佳工艺为8倍量水，每次2小时，共两次。
验证试验按上述所选择的最佳工艺，即葛根、五味子各30g，即两个处方量，用80％乙醇(V/V)提取，8倍量，每次2小时，共两次；药渣挥干乙醇后，并入甘草10g，天花粉、地黄、麦冬各30g，一并水提，8倍量，每次2小时，共两次。进行验证实验，测得其活性成分含量如表14表14.验证实验(n＝3)
注单位均为毫克，为两个处方量共160g生药所对应浸膏所含的总量。
由所测得的数据可以看出，含量基本上均高于正交试验的数据，可以认为是最佳工艺条件。
实验例2.玉泉微丸的制备方法取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉各17公斤，地黄17公斤切块，粉碎成粗粉的甘草5.7公斤，麦冬块根17公斤，按最终确定工艺将葛根、五味子投入提取罐，加80％乙醇(V/V)8倍量(272L)，加热回流提取两个小时，放出提取液后，重新加入同等量80％乙醇(V/V)，加热回流提取两个小时。药渣挥干乙醇后，将其它药材一并投入，分别加水8倍量725.6L，提取两个小时，共两次。
合并乙醇提取液与水提取液，减压，浓缩至含固量约为16％(W/W)。将所得提取液喷雾干燥，进口温度设定为180℃，出口温度设定为90℃。最终得到药粉29.95公斤，含水量为4.2％，得膏率为33.02％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纤维素为55～40∶45～60(W/W)的比例，以5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液或3％HPMC水溶液(W/V)为粘合剂，进风温度67～71℃，片床温度40℃，雾化压力3bar，流化床顶喷或者侧喷造粒，滚圆；使用18％OPADRY II(85G64874)(上海卡乐康包衣技术有限公司生产)(W/V)防潮包衣液包衣，流化床温度45～50℃，雾化压力0.8～1kg/cm2。本方法制备的微丸为20～80目，优选30～60目，光滑，圆整的球形小丸。
实验例3.制备玉泉微丸取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉各17公斤，地黄17公斤切块，粉碎成粗粉的甘草5.7公斤，麦冬块根17公斤，按最终确定工艺将葛根、五味子投入提取罐，加80％乙醇(V/V)8倍量(272L)，加热回流提取两个小时，放出提取液后，重新加入同等量80％乙醇(V/V)，加热回流提取两个小时。药渣挥干乙醇后，将其它药材一并投入，分别加水8倍量725.6L，提取两个小时，共两次。
合并乙醇提取液与水提取液，减压，浓缩至含固量约为16％(W/W)。将所得提取液喷雾干燥，进口温度设定为180℃，出口温度设定为90℃。最终得到药粉30.63公斤，含水量为4.5％，得膏率为33.77％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纤维素40∶60(W/W)的比例，以5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)为粘合剂，进风温度67～71℃，片床温度40℃，雾化压力3bar，流化床顶喷造粒，滚圆；使用18％OPADRYII(85G64874)(上海卡乐康包衣技术有限公司生产)(W/V)防潮包衣液包衣，流化床温度45～50℃，雾化压力0.8～1kg/cm2。本方法制备的微丸为30～60目，光滑，圆整的球形小丸。
实验例4.制备玉泉微丸取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉各0.45公斤，地黄0.45公斤切块，粉碎成粗粉的甘草0.15公斤，麦冬块根0.45公斤，按最终确定工艺将葛根、五味子投入提取罐，加80％乙醇(V/V)8倍量，加热回流提取两个小时，放出提取液后，重新加入同等量80％乙醇(V/V)，加热回流提取两个小时。药渣挥干乙醇后，将其它药材一并投入，分别加水8倍量，提取两个小时，共两次。
合并乙醇提取液与水提取液，减压，浓缩至含固量约为16％(W/W)。将所得提取液喷雾干燥，进口温度设定为180℃，出口温度设定为90℃。最终得到药粉0.816公斤，含水量为4.1％，得膏率为34.00％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纤维素为68∶32(W/W)的比例，以10％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)为粘合剂，进风温度67～71℃，片床温度40℃，雾化压力3bar，流化床侧喷造粒，滚圆；使用18％OPADRY II(85G64874)(上海卡乐康包衣技术有限公司生产)(W/V)防潮包衣液包衣，流化床温度35～40℃，雾化压力0.8～1kg/cm2。本方法制备的微丸为30～60目，光滑，圆整的球形小丸。
实验例5制备玉泉微丸取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉各10公斤，地黄8公斤切块，粉碎成粗粉的甘草3公斤，麦冬块根8公斤，按最终确定工艺将葛根、五味子投入提取罐，加90％乙醇(V/V)6倍量，加热回流提取3个小时，放出提取液后，重新加入同等量90％乙醇(V/V)，加热回流提取2个小时。药渣挥干乙醇后，将其它药材一并投入，分别加水10倍量，提取1个小时，共3次。
合并乙醇提取液与水提取液，减压，浓缩至含固量约为17％(W/W)。将所得提取液喷雾干燥，进口温度设定为175℃，出口温度设定为85℃。最终得到干浸膏药粉15.72公斤，含水量为4.3％，得膏率为32.08％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纤维素为50∶50(w/w)的比例，以6％羟丙甲基纤维素水溶液(W/V)为粘合剂，进风温度70℃，片床温度42℃，雾化压力3bar，流化床造粒，滚圆；使用18％OPADRY II(85G64874)(上海卡乐康包衣技术有限公司生产)(W/V)防潮包衣液包衣，流化床温度42～48℃，雾化压力1kg/cm2。本方法制备的微丸为30～60目，光滑，圆整的球形小丸。
实验例6.制备玉泉微丸取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉地黄各1公斤，地黄1公斤切块，粉碎成粗粉的甘草0.2公斤，麦冬块根1公斤，按最终确定工艺将葛根、五味子投入提取罐，加90％乙醇(V/V)6倍量，加热回流提取3个小时，放出提取液后，重新加入同等量90％乙醇(V/V)，加热回流提取2个小时。药渣挥干乙醇后，将其它药材一并投入，分别加水10倍量，提取1个小时，共3次。
合并乙醇提取液与水提取液，减压，浓缩至含固量约为17％(W/W)。将所得提取液喷雾干燥，进口温度设定为175℃，出口温度设定为85℃。最终得到干浸膏药粉1.64公斤，含水量为4.0％，得膏率为31.63％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纤维素为50∶50(w/w)的比例，以7.5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)为粘合剂，进风温度70℃，片床温度39℃，雾化压力3bar，流化床侧喷造粒，滚圆；使用18％OPADRY II(85G64874)(上海卡乐康包衣技术有限公司生产)(W/V)防潮包衣液包衣，流化床温度42～45℃，雾化压力21kg/cm2。本方法制备的微丸为30～60目，光滑，圆整的球形小丸。
实验例7.制备玉泉微丸取粉碎成粗粉的葛根、五味子、天花粉各2公斤，地黄2公斤切块，粉碎成粗粉的甘草0.8公斤，麦冬块根2公斤，按最终确定工艺将葛根、五味子投入提取罐，加90％乙醇(V/V)6倍量，加热回流提取3个小时，放出提取液后，重新加入同等量90％乙醇(V/V)，加热回流提取2个小时。药渣挥干乙醇后，将其它药材一并投入，分别加水10倍量，提取1个小时，共3次。
合并乙醇提取液与水提取液，减压，浓缩至含固量约为15％(W/W)。将所得提取液喷雾干燥，进口温度设定为175℃，出口温度设定为85℃。最终得到干浸膏药粉3.51公斤，含水量为3.9％，得膏率为32.46％(W/W)。按照干浸膏粉末∶微晶纤维素为60∶40(w/w)的比例，以9％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)为粘合剂，进风温度70℃，片床温度42℃，雾化压力3bar，流化床侧喷造粒，滚圆；使用18％OPADRY II(85G64874)(上海卡乐康包衣技术有限公司生产)(W/V)防潮包衣液包衣，流化床温度39～44℃，雾化压力1kg/cm2。本方法制备的微丸为30～60目，光滑，圆整的球形小丸。
实施例8.实施例3制备得到的玉泉微丸主要药效学实验药品与试剂如下玉泉微丸，按照实施例3方法制备，上海医药工业研究院提供，批号040309，临用前加适量蒸馏水配成合适浓度，即1g/ml。
四氧嘧啶(Alloxan)，美国Fluka公司生产，批号445307/131603091玉泉丸，0.15g/丸，成都金鼎药业有限公司生产，批号020725。
降糖灵片，25mg/片，山东省莒南制药厂生产，批号020607。
盐酸肾上腺素注射液，1mg/ml，武汉诺佳药业集团股份有限公司，批号011001多烯康胶丸，山东禹王制药有限公司产品，批号011021，实验时制成乳剂。
甲苯磺丁脲，江苏长江药业有限公司产品，批号020217。
葡萄糖检测试剂盒，四川省迈克科技有限公司生产，批号1103041具体实验如下8.1肾上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影响根据《中国生化药物杂志》，2002，23(3)，第112-114页“五味子中α-葡萄糖苷酶制剂对小鼠的降血糖作用”中描述的方法，取正常小鼠70只，随机分成7组，每组10只，正常对照组与模型对照组灌胃同体积生理盐水，其余各组如表15所示剂量给药，每天一次，连续11天。末次给药后禁食3小时，除正常组对照组外，其余各组腹腔注射肾上腺素100ug/kg。于注射后30分钟后分别断头取血，采用葡萄糖GOD-PAP法测定血糖含量。结果见表15表15.对肾上腺素所致高血糖小鼠血糖含量的影响(x±S)
“*”表示与模型对照组比较P＜0.05，“**”表示与模型对照组比较P＜0.01，“▲”表示与正常对照组比较P＜0.05，“▲▲”表示与正常对照组比较P＜0.01，以下各表同。
结果表明，模型对照组小鼠血糖值显著高于正常对照组，说明造模成功；玉泉微丸小、中、大剂量给药组药物降血糖作用明显，与模型对照组相比差异有显著性(P＜0.05或0.01)，中剂量组降血糖作用与玉泉丸原剂型组相比降血糖作用略优于玉泉丸原剂型组，但无显著性差异。
8.2对四氧嘧啶糖尿病大鼠血糖含量的影响取正常大鼠，按200mg/kg剂量腹腔注射四氧嘧啶，72小时后剪尾采血测空腹血糖，选取血糖值在11.1mmol/L以上者为模型动物。取四氧嘧啶糖尿病鼠60只，随机分成6组，分组时各组动物平均血糖值之差不大于0.5mmol/L。按表16示剂量灌胃给药，1ml/100g体重，模型组给等容积的生理盐水，每天一次，连续14天，未次给药后禁食12小时，心脏取血，采用葡萄糖GOD-PAP法测定血糖值。结果见表16表16.对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖含量的影响(x±S)
结果显示，各给药组降血糖效果显著，与模型组相比差异显著(P＜0.01)，玉泉微丸给药组与原剂型相比无显著性差异。
8.3对葡萄糖引起大鼠血糖升高的影响取正常大鼠70只，随机分为7组，每组10只。按表17所示剂量灌胃给药，正常对照组及葡萄糖模型组给予等容积的生理盐水，1ml/100g，每天一次，连续14天。未次给药后禁食10小时，除正常对照组外，其余动物腹腔注射葡萄糖溶液2g/kg，分别于注射后30，60和120分钟后眶静脉取血，采用葡萄糖GOD-PAP法测定血糖值。结果见表17表17.对葡萄糖性高血糖大鼠血糖含量的影响(x±S)
从表17结果可见，玉泉微丸对外源性葡萄糖引起的大鼠高血糖具有明显的降低血糖作用，效果优于原剂型组，但无显著性差异，在第120分钟作用较为明显，玉泉微丸各给药组与模型组相比差异有显著性(P＜0.05)，而原剂型组与模型组相比则无显著性差异。
8.4对正常大鼠血糖值的影响取正常大鼠60只，随机分为6组，每组10只。按表18所示剂量灌胃给药，正常对照组给予等容积的生理盐水，1ml/100g，每天一次，连续10天。未次给药后禁食3小时，心脏取血，采用葡萄糖GOD-PAP法测定血糖值。结果见表18表18.对正常大鼠血糖值的影响(x±S)
表18结果显示，玉泉微丸各剂量组均明显降低正常大鼠血糖的作用(P＜0.01)，且降糖作用与玉泉丸原剂型相比有增强作用但不及阳性对照药。
8.5对小鼠血清甘油三酯及总胆固醇含量的影响取小鼠60只，雌雄各半，按体重随机分为6组空白组、多烯康、玉泉微丸三个剂量组和玉泉丸组。连续给药10天，末次给药后禁食10小时，眼眶取血测血清中甘油三酯(TG)及血清总胆固醇(TC)含量。结果见表19表19.对小鼠血清脂质含量的影响(x±S)
表19结果显示，玉泉微丸各剂量组及玉泉丸组对正常小鼠血清TG及TC均无明显影响，多烯康对其有明显降低作用。
8.6对蛋黄引起的高脂血症小鼠血清脂质的影响取雄性小鼠70只，按体重随机分为7组正常对照组、模型对照组、多烯康组、玉泉微丸三个剂量组和玉泉丸组，连续灌胃给药10天，两个对照组均给予每只鼠0.5ml蒸馏水。末次给药后除正常对照组外，其余每鼠均腹腔注射70％蛋菌乳剂0.5ml。禁食16小时后于眼眶取血测TC及TG。结果见表20表20.对蛋黄引起的高脂血症小鼠血清脂质的影响(x±S)
表20结果显示，玉泉微丸各剂量组及玉泉丸组对对蛋黄引起的高脂血症小鼠TC及TG均有明显降低作用，其作用与多烯康相当。
综合上表可以得出玉泉微丸可明显降低肾上腺素性高血糖小鼠的血糖水平，降低四氧嘧啶性糖尿病大鼠的血糖含量，降低正常大鼠血糖的作用，对正常大鼠的葡萄糖糖耐量有明显的改善与同剂量玉泉丸原剂型相比玉泉微丸有较强降血糖作用趋势；对正常小鼠血清TG及TC均无明显影响；对蛋黄引起的高脂血症小鼠TC及TG均有明显降低作用。
实施例9.实施例3制备得到的玉泉微丸的长期毒性试验分别以对应于36g(生药)/kg(体重)，18g(生药)/kg(体重)，9g(生药)/kg(体重)的实施例3的玉泉微丸的剂量对大鼠进行灌胃给药，对照组给予等体积蒸馏水，连续26周，每日观察一般状况，每星期测量体重1次。给药13周后，每组处死12只(雄6雌6)动物进行病理、血液学检查、血液生化检查。给药26周后，每组再次处死18只(雄9雌9)动物进行病理、血液学检查、血液生化检查。剩余动物停药后继椟观察3周，再次进行血液学、病理学及血液生化检查。结果大鼠活动正常，未出现明显异常或死亡；血液学检查、血液生化学检查、尿常规检查、病理学检查等结果表明玉泉微丸连续给药13周后与给药26周后，给药组血糖值(GLU)均明显降低(P＜0.01)；给药26周后，大剂量组脾指数增加明显(P＜0.05)；停药继续观察3周后，各组动物血液学、血液生化学检查、病理学检查指标与对照组相比均无显著性差异(P＞0.05)。病理学检查结果显示肺间质性炎症均见于对照组和给药组，其可能与环境等饲养条件有关。少数大鼠可见肝灶性炎细胞浸润、肾皮髓质和脾髓质有充血也同时存在于对照组及给药组，且无明显差异。所有病理学检查结果显示，未发现与药物毒性有关的病理变化。
综上所述，大鼠连续灌服玉泉微丸26周，未见与药物有关的不可逆毒性反应。
实施例10.实施例3的玉泉微丸急性毒性试验实施例3的玉泉微丸对小鼠的最大给药量为192g(生药)/kg，按体重计，其剂量相当于人临床一日用量(60kg计)的320倍，说明在此剂量内玉泉微丸较为安全。
实施例11.实施例3的玉泉微丸与原玉泉丸溶出试验结果比较按中国药典(2000年版二部附录XC)溶出度测定法第三法，150ml水为介质，100rpm测定溶出成分的含量，计算出实施例3的玉泉微丸和市售的玉泉丸(四川成都九芝堂金鼎药业有限公司生产)每个时间的溶出度并加以比较。情况见表21、22。
表21.玉泉微丸和玉泉丸葛根素溶出比较
表22.玉泉微丸和玉泉丸中甘草酸溶出比较
上述数据可以看出，玉泉微丸中葛根素和甘草酸均在2～5分钟内即完全释放，而玉泉丸中的葛根素480分钟内尚未完全释放(94.26％)，甘草酸360分钟方释放完全。结果表明体外释放玉泉微丸明显优于玉泉丸。
综上所述，由本发明制备的速释玉泉微丸具有比原剂型玉泉丸疗效好、奏效快、使用剂量小、药物吸收完全、生物利用度高的优点。本配方科学合理，其中生地养阴生津清热，善滋肾水。五味子，固肾敛肺，生津缩尿，不使水液急于下趋。葛根生津解肌退热；天花粉生津止渴，清热润燥；麦冬养阴润肺、益胃生津。生甘草泻火解毒，益气和中，调和诸药。六药相配，以养阴清热为核心，生津则渴自止。可用于消渴病属阴虚燥热证的治疗，相当于西医之2型糖尿病。能够有效治疗糖尿病之多饮，多食，多尿，体乏，形体消瘦等临床症状。
权利要求
1.一种治疗糖尿病的速释玉泉微丸，其特征在于由下列方法制成其中原料为葛根 5-25重量份五味子 5-25重量份甘草 1-10重量份天花粉 5-25重量份地黄 5-25重量份麦冬 5-25重量份制法将葛根、五味子、甘草、天花粉4味药粉碎成粗粉，地黄切成小块，麦冬块根备用；葛根，五味子中加入相当于生药量4～8倍重量的60～95％乙醇(V/V)加热回流提取1～3次，每次1～3小时，滤过，合并滤液；葛根与五味子滤渣挥去乙醇后，并入天花粉、麦冬、甘草、地黄4味药中，加入相当于处方6味生药量重量的6～10倍水煎煮1～3次，每次1～2小时，滤过，合并煎液；减压浓缩至含固量为15～17％(W/W)；将所得提取液喷雾干燥，得到干浸膏；按照干浸膏粉末微晶纤维素重量比为68～40∶32～60(W/W)的比例投入流化床造粒包衣机中，用5～10％聚乙烯吡咯烷酮水溶液或3～6％羟丙甲基纤维素水溶液(W/V)为粘合剂，采用侧喷或顶喷制粒，滚圆，包衣。
2.根据权利要求1的速释玉泉微丸，其中所述制法中，葛根，五味子中加入相当于生药量4～8倍重量的70～90％乙醇(V/V)加热回流提取。
3.根据权利要求2的速释玉泉微丸，其中原料为葛根 15重量份五味子 15重量份甘草 5重量份 天花粉 15重量份地黄 15重量份麦冬 15重量份。
4.根据权利要求1-3之一的速释玉泉微丸，其中所述制法中，将葛根、五味子、甘草、天花粉4味药粉碎成粗粉，地黄切成小块，麦冬块根备用；葛根，五味子中加入相当于生药量8倍重量的80％乙醇(V/V)加热回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液；葛根与五味子滤渣挥去乙醇后，并入天花粉、麦冬、甘草、地黄4味药中，加入相当于处方6味生药量重量的8倍水煎煮2次，每次2小时，滤过，合并煎液；减压浓缩至含固量为16％(W/W)；将所得提取液喷雾干燥，进口温度设定为170～180℃，出口温度设定为80～90℃，得到干浸膏。
5.根据权利要求4的速释玉泉微丸，其中所述制法中，按照干浸膏粉末微晶纤维素重量比为40∶60(W/W)的比例投入流化床造粒包衣机中。
6.根据权利要求4的速释玉泉微丸，其中所述制法中，按照干浸膏粉末微晶纤维素重量比为68∶32(W/W)的比例投入流化床造粒包衣机中。
7.根据权利要求5的速释玉泉微丸，其中所述制法中，由顶喷5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)制粒，使用18％OPADRY II(W/V)防潮包衣液包衣。
8.根据权利要求6的速释玉泉微丸，其中所述制法中，由侧喷10％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)制粒，使用18％OPADRY II(W/V)防潮包衣液包衣。
9.根据权利要求7或8的速释玉泉微丸，其中所述制法中，造粒流化床温度40～50℃，雾化压力0.8～1kg/cm2。
10.根据权利要求9的速释玉泉微丸，其中所述制法制备的微丸为30～60目光滑圆整的球形小丸。
全文摘要
本发明涉及一种治疗糖尿病的速释玉泉微丸及其制备方法。该方法是葛根，五味子用乙醇加热回流提取；提取后的残渣并入天花粉、麦冬、甘草、地黄4味药中，加入水煎煮，滤过；水醇提取液减压浓缩至含固量约为16％(W/W)，将所得提取液喷雾干燥得到干浸膏；按照干浸膏粉末微晶纤维素重量比为68～40∶32～60(W/W)的比例投入流化床造粒包衣机中，由顶喷5％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)或侧喷10％聚乙烯吡咯烷酮水溶液(W/V)制粒，滚圆；收集30～60目微丸，包衣。由本发明制备的速释玉泉微丸具有比原剂型玉泉丸疗效好、奏效快、使用剂量小、药物吸收完全、生物利用度高的优点。
文档编号A61K9/16GK1682935SQ20051005154
公开日2005年10月19日 申请日期2005年3月4日 优先权日2005年3月4日
发明者杨义芳, 乔艳红 申请人:浙江海正药业股份有限公司, 上海医药工业研究院