专利名称：一种加替沙星滴眼剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种抗菌药物滴眼剂，特别是一种加替沙星滴眼剂，其中含有有效量的加替沙星，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸丙酯、1，2-丙二醇和维生素E。
背景技术：
眼科疾病在人群中发病率较高，据统计在所有的眼科门诊就诊患者中，约80-90％属于外眼感染，氯霉素，利福平滴眼剂等老产品由于抗感染作用较弱，目前仅限于对轻度结膜眼和沙眼的治疗。自从1962年发现萘啶酸(Nalidixic acid)，特别是1978年诺氟沙星(Norfloxacin)问世以来，喹诺酮类抗菌药如环丙沙星(Ciprofloxacin)、氧氟沙星(Ofloxacin)、司帕沙星(Sparfloxacin)等在治疗呼吸系统、泌尿系统等感染性疾病方面发挥着重要作用，在治疗眼部感染方面作用也同样突出。最早的为诺氟沙星，而后为环丙沙星，氧氟沙星。在治疗结膜炎，角膜炎，角膜溃疡，睫状体炎，泪腺炎等常见多发眼病方面，发挥了显著的治疗效果。尤其对于较为严重的细菌感染性结膜炎，角膜炎，优势尤其明显。杨克钊等用环丙沙星滴眼剂治疗各种常见的眼科疾病，有效率达90-100％；张秀芝等对洛美沙星滴眼剂的药效学研究表明各种常见病菌对其敏感率为100％。MIC90均在4.0mg/L以下；祝丽敏等以氧氟沙星滴眼剂治疗60例眼科疾病临床实验研究表明有效率达95％。喹诺酮滴眼剂之所以在临床上受到广泛的应用在于它们具有抗菌普广、活性强、毒性低等特点，疗效可与第三、第四代头孢菌素类抗菌素相媲美，但头孢菌素类滴眼剂的不良反映较喹诺酮类的发生率高得多，常见的为皮疹，肾毒性，肝脏损害。因此喹诺酮类滴眼剂以其低毒性，成为抗眼部病菌感染药物中最活跃的研究领域之一。但近年来随着它们在临床中的广泛应用及使用剂量的不断增加，细菌耐药性问题表现越来越严重。因此，寻找抗菌活性强、抗菌谱广，对喹诺酮耐药菌株有较强活性的新型喹诺酮类抗菌药具有重要意义。
加替沙星(Gatifloxacin)是一种新合成的第四代喹诺酮类抗菌药，由日本杏林(Kyorin)公司研究开发，目前美国布迈-施贵宝(Bristol-Myers Squibb)公司已获得该药在加拿大、巴西、墨西哥、阿根廷等国家的销售权，1999年6月向美国FDA提出本品口服和静脉注射制剂的上市申请，同年11月获得批准在美国上市，商品名为Tequin。而加替沙星用于治疗眼部细菌感染方面的研究工作也已经展开，且已经开始临床工作。加替沙星与环丙沙星，氧氟沙星等喹诺酮抗菌药的结构不同，C7位为2-甲基哌嗪基，C8位是甲氧基，因此抗菌谱增加，对革兰氏阳性菌、阴性菌和衣原体、支原体等的抗菌活性增强，且很少产生耐药性。加替沙星的作用机制为抑制细菌DNA促旋酶和拓扑异构酶IV的活性，其IC50分别为0.1和13.8mg/L活性强于司帕沙星、氧氟沙星和左氟沙星(levfloxacin)，弱于环丙沙星和克林沙星(clinflo-xacin)，但对人类Hela细胞拓扑异构酶II的IC50为265mg/L，因此加替沙星对细菌拓扑异构酶具有高度选择性，可以降低毒副作用。
体外抗革兰氏阳、阴性菌活性研究表明，加替沙星对葡萄球菌、链球菌、肠道杆菌的抗菌活性MIC90分别为0.13～0.5mg/L、0.25～1mg/L、2～4mg/L，较环丙沙星强2～4倍，稍弱于克林沙星、曲伐沙星(trovafloxacin)和莫西沙星(moxifloxacin)。对梭状芽孢杆菌和拟杆菌的活性是环丙沙星的4～16倍。加替沙星对环丙沙星耐药的肺炎球菌和其它的链球菌等革兰氏阳性球菌也显示了良好的抗菌活性，强于曲伐沙星和司帕沙星。对结核杆菌株的抗菌活性MIC90＜2mg/L，强于喹诺酮类抗菌药中活性较强的司帕沙星。在欧洲进行的一项研究表明，加替沙星对不动杆菌，气单孢菌(MIC90≤0.25mg/L)和对氨苄西林敏感、耐药的H型流感和N型淋球菌(MIC900.016mg/L)较为敏感。加替沙星对中间普雷沃氏菌、牙龈梭杆菌属、产气荚膜梭菌和动弯杆菌属显示高活性(MIC900.39mg/L)，对包括肺炎链球菌(MIC900.5mg/L)、铜绿假单孢菌(MIC904mg/L)和脆弱拟杆菌(MIC900.25mg/L)等多种临床分离菌具有高抗菌活性。对55株淋病奈瑟氏菌临床分离株的体外研究结果显示，加替沙星对喹诺酮敏感株及氟喹诺酮高、中度耐药菌株的抗菌活性强于托氟沙星和氟罗沙星。本品与头孢菌素类、大环内酯类抗菌药几乎没有交叉耐药作用。
在治疗厌氧菌方面，Ednic LE等比较了加替沙星、环丙沙星、司帕沙星、氨苄西林、克林霉素、甲硝唑对脆弱拟杆菌分离株、普雷沃氏菌、卟啉但孢菌等351株厌氧菌的活性，抗菌药物的MIC50和MIC90分别为加替沙星0.5和4mg/L；环丙沙星2和32mg/L；司帕沙星2和8mg/L；氨苄西林1和64mg/L；克林霉素0.125和8mg/L；甲硝唑1和＞16mg/L。在所有参与实验喹诺酮类药物中，加替沙星的MIC最低。加替沙星仅对其中的3株(多形拟杆菌、可变梭杆菌和乳杆菌各一株)的MIC＞8mg/L。本品对梭状芽孢杆菌、类杆菌等的MIC90为0.25～2mg/L，是环丙沙星(MIC901～32mg/L)的4～16倍，它是抗类杆菌活性最强的化合物之一。对衣原体肺炎本品的MIC90为0.063～0.125mg/L，与司帕沙星和妥舒沙星相似，是左氟沙星和环丙沙星的4和16倍。对沙眼衣原体临床分离株的抗菌活性与妥舒沙星相当，而强于左氟沙星和环丙沙星。总之，加替沙星对大多数厌氧菌、衣原体、支原体的抗菌活性优于环丙沙星、妥舒沙星、氧氟沙星。
加替沙星表现出良好的光稳定性，很少或基本没有与其它药物相关的光毒性，在对小老鼠进行的光毒性实验中表明，最达无毒剂量达500mg/kg以上，其光毒性低于其它的喹诺酮类药物。无论是单次或多次给药，患者对本品均有较好的耐受性，临床应用中尚未发现患者出现结晶尿，血液系统，中枢系统和尿液液未有明显改变，副作用发生率低，与治疗相关的副作用主要为恶心(8％)，呕吐(4％)，头痛(4％)，眩晕(3％)等。
加替沙星作为滴眼剂国外已有公司在研发，加拿大的Allergan公司正在进行临床研究。Jensen等对0.3％的环丙沙星滴眼剂在治疗由铜绿假单孢菌引起的角膜溃烂进行了对比实验让40只经过处理眼角溃烂且经过麻醉的新西兰白兔每天使用0.3％的加替沙星或0.3％的环丙沙星滴眼剂一直进行了22天，每天观察感染的状况，药理实验显示，0.3％的加替沙星和环丙沙星滴眼剂在治疗由铜绿假单孢菌感染引起的结膜溃烂相比同样有效，但加替沙星不仅用药次数减少，眼角溃烂愈合的更加彻底，而且即使每天使用48次，也不会在角膜形成沉淀，Allergan公司对加替沙星的眼部用药进行了毒理学研究每天给家犬使用32次0.5％高剂量的加替沙星滴眼剂连续进行了3个月，不会引起眼部和全身感染。Oishi.M等对加替沙星抗眼部感染的45位患者临床实验结果显示眼组织渗透性良好，总有有效率93.3％实验表明加替沙星作为第四代喹诺酮类药物和前三代相比能更有效的杀死深入到眼睛前房的病菌。
药效学实验表明加替沙星滴眼剂对家兔绿脓杆菌和金色葡萄球菌引起的角膜炎均有治疗作用，角膜炎症明显减轻，细菌培养呈阴性，其疗效和氧氟沙星滴眼液相当。毒性实验表明所有的小鼠未见明显的异常反映，也无动物死亡。加替沙星单次给药(2滴)和多次给药(每次2滴，每天3次，连续7天)对家兔的眼部刺激反应，每只动物的对侧眼用生理盐水作为对照。结果在用药后7天内，单次和多次给药，均未发现明显的眼部刺激症状，与生理盐水相当；多次给药的病理组织学检查未见异常。
加替沙星的含水溶液通常不稳定，特别是对光照和热的环境下更加不稳定。加替沙星的含水溶液随时间的推移会降解产生一定的降解物质。由于药物制剂中存在的杂质量在许多情况下会影响制剂的毒理学特性，所以，期望开发稳定的加替沙星溶液制剂，使其产生的杂质量明显降低，稳定性增加，有利于提高产品质量。
发明内容
本发明的目的在于提供一种稳定的加替沙星滴眼剂。
本发明的目的在于提供一种稳定的含有加替沙星，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸丙酯，1，2-丙二醇和维生素E的滴眼剂。
本发明的滴眼剂，其处方组成如下处方(1000支)加替沙星10-30.0g氯化钠 45.0g对羟基苯甲酸甲酯1.15g对羟基苯甲酸丙酯0.55g1，2-丙二醇 1g维生素E 0.5gEDTA-2Na0.5g乳酸适量注射用水加至5000ml制成1000支制备工艺称取加替沙星于适量的蒸馏水中，搅拌加热使溶解；另取氯化钠、EDTA-2Na、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯，1，2-丙二醇和维生素E溶解于适量煮沸的蒸馏水中，搅拌使溶解；将两液合并，加入活性炭(0.1％)，加热60～80℃保温15分钟，过滤脱炭，注射用水稀释至配制量，用1mol/L乳酸溶液调节pH值至6.5±0.5，测中间体，合格后通过0.45μm微孔滤膜过滤，100℃30分钟流通蒸汽灭菌，无菌灌装于塑料眼药水瓶中，每支5ml，即得。
本发明的配方是经过筛选得到的，本发明采用了不同的配方进行比较筛选，找出了最优选的配方即本发明的配方。
最佳pH范围的确定滴眼液的pH值范围受多种因素制约，如原料的性质(发挥疗效pH范围，原料溶液的稳定性)、滴眼液的作用(缩瞳、抑菌、降压等)和人眼适宜范围等。为了筛选本品滴眼液的最佳pH值，我们配制了pH值为3.0～7.0的溶液经过高温(100℃)2、4、8、12hr及光照(3000lx)考察5、10天，对溶液的色泽、澄明度、pH值及含量进行考核，结果表明本品溶液较稳定，高温及光照溶液色泽有所加深，含量、pH值均无明显改变，因此确定最佳pH值为6.5～7.5之间。
本处方加入对羟基羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯作为抑菌剂，加入维生素E，具有营养稳定和抗氧化作用，同时加入1，2-丙二醇起稳定和增稠作用，使本发明的滴眼剂更稳定，在眼中停留时间增长。
以下稳定性实验可以证明本发明的优越性。
为考察不同滴眼液的稳定性及本品处方的可行性，我们按照处方制各样品，经高温(40、60℃)及光照(3000lx)放置考核5、10天，对溶液的外观、色泽、pH值及含量等指标进行考核，结果表明，按处方制备的样品溶液，经光照(3000lx)及高温(40、60℃)的色泽不变，pH值及含量均没有明显变化，光照、40℃、60℃溶液外观均为黄绿色澄明液体，溶液是稳定的。
比较稳定性实验表1实施例1和不含1，2-丙二醇和维生素E的产品在60℃条件下实验结果
表2实施例1和不含稳定剂的处方在光照试验(4000Lx)条件下实验结果
本发明还提供本发明的滴眼剂的质量控制方法，该方法包括，对本发明的滴眼剂的性状、鉴别、检查、颜色、有关物质、渗透压比及含量测定等内容进行控制和测定。
具体质量控制方法如下(以下所述本品为实施例1方法得到的产品)性状本品为微黄绿色澄明液体。
鉴别(1)取供试品适量，加流动相定量稀释制成每1ml中含加替沙星0.3mg的供试品溶液；另称取加替沙星对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml含加替沙星0.3mg的对照品溶液。照有关物质项下的色谱条件测定，供试品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致。
(2)取含量测定项下的溶液，照分光光度法(中国药典2000年版二部附录IV A)测定，在292nm的波长处有最大吸收，在262nm的波长处有最小吸收。
(3)本品显钠盐与氯化物的鉴别反应(中国药典2000年版二部附录III)。
检查pH值应为5.5～7.5(中国药典2000年版二部附录VI H)。
颜色 取本品，依法检查(中国药典2000年版二部附录IX A第一法)，如显色，与黄绿色标准比色液5号比较，应不得更深。
有关物质 取本品，加流动相分别制成每1ml中含加替沙星0.3mg的供试品溶液和每1ml中含加替沙星3μg的对照溶液。照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VD)测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L枸橼酸溶液(用三乙胺调节pH值至4.0)-乙腈(80∶20)为流动相；检测波长为292nm。理论板数按加替沙星峰计算应不低于2000。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高为满量程的10％～25％，注意调节流动相配比，使主峰与杂质峰分离度符合要求，再取上述两种溶液各20μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍；供试液中如显杂质峰，量取各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积(1.0％)。
渗透压比 应为0.9～1.1(中国药典2000年版二部附录IX G)。
其他 应符合滴眼剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版二部附录IJ)。
含量测定精密量取本品适量，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml中约含加替沙星6μg的溶液，照分光光度法(中国药典2000年版二部附录IV A)试验，在292nm波长处测定吸收度；另精密称取经105℃干燥至恒重的加替沙星对照品适量，以0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml约含加替沙星6μg的溶液，同法测定，计算，即得。
具体实施例方式
以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。
实施例1处方(1000支)加替沙星15.0g氯化钠 45.0g对羟基苯甲酸甲酯1.15g对羟基苯甲酸丙酯0.55g1，2-丙二醇 1g维生素E 0.5gEDTA-2Na0.5g乳酸适量注射用水加至5000ml制成1000支制备工艺称取加替沙星于适量的蒸馏水中，搅拌加热使溶解；另取氯化钠、EDTA-2Na、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯，1，2-丙二醇和维生素E溶解于适量煮沸的蒸馏水中，搅拌使溶解；将两液合并，加入活性炭(0.1％)，加热60～80℃保温15分钟，过滤脱炭，注射用水稀释至配制量，用1mol/L乳酸溶液调节pH值至6.5±0.5，测中间体，合格后通过0.45μm微孔滤膜过滤，100℃30分钟流通蒸汽灭菌，无菌灌装于塑料眼药水瓶中，每支5ml，即得。
实施例2处方(1000支)加替沙星10.0g氯化钠 45.0g对羟基苯甲酸甲酯1.15g对羟基苯甲酸丙酯0.55g
1，2-丙二醇 1g维生素E 0.5gEDTA-2Na0.5g乳酸适量注射用水加至5000ml制成1000支制备工艺称取加替沙星于适量的蒸馏水中，搅拌加热使溶解；另取氯化钠、EDTA-2Na、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯，1，2-丙二醇和维生素E溶解于适量煮沸的蒸馏水中，搅拌使溶解；将两液合并，加入活性炭(0.1％)，加热60～80℃保温15分钟，过滤脱炭，注射用水稀释至配制量，用1mol/L乳酸溶液调节pH值至6.5±0.5，测中间体，合格后通过0.45μm微孔滤膜过滤，100℃30分钟流通蒸汽灭菌，无菌灌装于塑料眼药水瓶中，每支5ml，即得。
实施例3处方(1000支)加替沙星 30.0g氯化钠 45.0g对羟基苯甲酸甲酯 1.15g对羟基苯甲酸丙酯 0.55g1，2-丙二醇 1g维生素E 0.5gEDTA-2Na 0.5g乳酸 适量注射用水加至 5000ml制成 1000支制备工艺称取加替沙星于适量的蒸馏水中，搅拌加热使溶解；另取氯化钠、EDTA-2Na、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯，1，2-丙二醇和维生素E溶解于适量煮沸的蒸馏水中，搅拌使溶解；将两液合并，加入活性炭(0.1％)，加热60～80℃保温15分钟，过滤脱炭，注射用水稀释至配制量，用1mol/L乳酸溶液调节pH值至6.5±0.5，测中间体，合格后通过0.45μm微孔滤膜过滤，100℃30分钟流通蒸汽灭菌，无菌灌装于塑料眼药水瓶中，每支5ml，即得。
权利要求
1.一种加替沙星滴眼剂，其特征在于，其中含有有效量的加替沙星，氯化钠，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸丙酯，1，2-丙二醇，维生素E，EDTA-2Na。
2.权利要求1的滴眼剂，其特征在于，是溶液制剂，注射用水为溶剂，乳酸为PH调节剂，PH值为6.5-7.5。
3.权利要求2的滴眼剂，其特征在于，配方组成如下加替沙星10-30.0g氯化钠 45.0g对羟基苯甲酸甲酯1.15g对羟基苯甲酸丙酯0.55g1，2-丙二醇 1g维生素E 0.5gEDTA-2Na0.5g乳酸适量注射用水 加至 5000ml制成1000支。
4.权利要求3的滴眼剂，其特征在于，配方组成如下加替沙星10g氯化钠 45.0g对羟基苯甲酸甲酯1.15g对羟基苯甲酸丙酯0.55g1，2-丙二醇 1g维生素E 0.5gEDTA-2Na0.5g乳酸适量注射用水 加至 5000ml制成 1000支。
5.权利要求3的滴眼剂，其特征在于，配方组成如下加替沙星15.0g氯化钠 45.0g对羟基苯甲酸甲酯1.15g对羟基苯甲酸丙酯0.55g1，2-丙二醇 1g维生素E 0.5gEDTA-2Na0.5g乳酸适量注射用水 加至 5000ml制成1000支。
6.权利要求3的滴眼剂，其特征在于，配方组成如下加替沙星30.0g氯化钠 45.0g对羟基苯甲酸甲酯1.15g对羟基苯甲酸丙酯0.55g1，2-丙二醇 1g维生素E 0.5gEDTA-2Na0.5g乳酸适量注射用水 加至 5000ml制成1000支。
7.权利要求1-6任何一项滴眼剂的制备方法，其特征在于，经由以下步骤称取加替沙星于适量的蒸馏水中，搅拌加热使溶解；另取氯化钠、EDTA-2Na、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯，1，2-丙二醇和维生素E溶解于适量煮沸的蒸馏水中，搅拌使溶解；将两液合并，加入活性炭，加热60～80℃保温15分钟，过滤脱炭，注射用水稀释至配制量，用1mol/L乳酸溶液调节pH值至6.5±0.5，测中间体，合格后通过0.45μm微孔滤膜过滤，100℃30分钟流通蒸汽灭菌，无菌灌装于塑料眼药水瓶中，每支5ml，即得。
8.权利要求1-6任何一项滴眼剂的质量控制方法，包括以下步骤，对滴眼剂的性状、鉴别、检查、颜色、有关物质、渗透压比及含量测定进行测定。
9.权利要求8的滴眼剂的质量控制方法，包括以下步骤，性状本品为微黄绿色澄明液体；鉴别(1)取供试品适量，加流动相定量稀释制成每1ml中含加替沙星0.3mg的供试品溶液；另称取加替沙星对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml含加替沙星0.3mg的对照品溶液；照有关物质项下的色谱条件测定，供试品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致；(2)取含量测定项下的溶液，照分光光度法测定，在292nm的波长处有最大吸收，在262nm的波长处有最小吸收；(3)本品显钠盐与氯化物的鉴别反应；检查pH值应为5.5～7.5；颜色取本品，依法检查，如显色，与黄绿色标准比色液5号比较，应不得更深；有关物质取本品，加流动相分别制成每1ml中含加替沙星0.3mg的供试品溶液和每1ml中含加替沙星3μg的对照溶液；照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L枸橼酸溶液-用三乙胺调节pH值至4.0-乙腈(80∶20)为流动相；检测波长为292nm；理论板数按加替沙星峰计算应不低于2000；取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高为满量程的10％～25％，注意调节流动相配比，使主峰与杂质峰分离度符合要求，再取上述两种溶液各20μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍；供试液中如显杂质峰，量取各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积；渗透压比应为0.9～1.1；其他应符合滴眼剂项下有关的各项规定；含量测定精密量取本品适量，加0.1mol/L盐酸溶液制成每1ml中约含加替沙星6μg的溶液，照分光光度法；试验，在292nm波长处测定吸收度；另精密称取经105℃干燥至恒重的加替沙星对照品适量，以0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml约含加替沙星6μg的溶液，同法测定，计算，即得。
全文摘要
本发明涉及一种抗菌药物滴眼剂，特别是一种加替沙星滴眼剂，其中含有有效量的加替沙星，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸丙酯、1，2－丙二醇和维生素E。
文档编号A61K31/496GK1712006SQ200510080059
公开日2005年12月28日 申请日期2005年6月28日 优先权日2005年6月28日
发明者董泽贤 申请人:董泽贤