专利名称：用于输送紫杉烷及其它不溶性药物的低油乳剂组合物的制作方法
发明
背景技术：
领域本发明涉及可用于紫杉烷药物或其它不溶性药物的非经肠给药的医药组合物。更具体地，本发明涉及具有低油含量、小液滴、稳定及即用特性的紫杉烷药物或其它水不溶性药物的可注射性水包油型乳剂。
背景技术：
紫杉烷药物广范应用于癌症化疗法中。因其倾向有高度毒性，因此紫杉烷药物几乎均经由液态溶液的注射或输注给药，以对其血液运送浓度做较佳的调控。然而，由于紫杉烷药物的极高度不溶性，因此这些药物的静脉内注射或输注对于医药科学家和医生构成严重的问题和挑战，且对患者亦造成严重的副作用。各种乳化、悬浮或胶囊化注射用制剂中的不溶性药物的方法已使用了数十年，但这类方法中并无完全适用于紫杉烷药物的方法，且″现有的最佳″太平洋紫杉醇(Paclitaxel)和多西紫杉醇(docetaxel)药物的制剂存在严重的问题、风险和缺点。这些问题包括例如高比例的过敏及/或免疫反应、注射部位的重度疼痛、注射点处或周围血管的严重或潜在性的永久损害。
在所有副作用中，过敏及/或免疫反应是最严重的且有时有致死的风险，FDA因此要求太平洋紫杉醇和多西紫杉醇的制造商必需在这些产品中附上“黑盒(black box)”警告标示。例如，太平洋紫杉醇(TAXOLTM)的“黑盒”警语如下“在临床试验中，有2％-4％接受TAXOLTM的患者会发生特征为呼吸困难和需接受治疗的低血压、血管性水肿和全身性荨麻疹的过敏性反应和重度过敏症反应。尽管经前置给药亦有患者发生致死反应。所有患者均应先经皮质类固醇、二苯安明(diphenhydramine)和H2拮抗剂预先测试。”多西紫杉醇(TAXOTERETM)的“黑盒”警语写道“在接受建议的地塞米松(dexamethasone)前置给药3天的患者中，有2.2％(2/92)发生特征为低血压及/或支气管痉挛或全身性起疹/红斑的严重过敏症反应。据报告有五名未接受前置给药的患者有需要中断TAXOTERETM输注的过敏症反应。这些反应在中断输注及施行适当疗法的后获得解决。TAXOTERETM绝不可给予曾对TAXOTERETM或其它与聚山梨酯80共同调配的药物有严重过敏症反应病史的患者。”这两种重要药物的严重不良反应并非因药物本身，而是因使用于其制剂中的非活性成分。就TAXOLTM而言，过敏性反应和严重过敏症是肇因于CremophorEL(聚氧乙酯化蓖麻油)，而就TAXOTERETM而言，则是聚山梨酯80。
因此可见在现今的注射不溶紫杉烷药物和注射其它形式的高度不溶性药物的技术中存在严重的限制和缺点。
发明内容
本发明提供用以输送紫杉烷药物或其它水不溶性药物的医药组合物，和用以制造及利用这些组合物的方法。本发明的组合物具有一种或多种下列特性(1)可注射性，(2)呈水包油型乳剂的形式，(3)在适当的贮存条件下稳定，(4)含有医疗有效量的紫杉烷药物或其它水不溶性药物，(5)可通过过滤除菌，(6)含有管理机构(例如FDA)核准的成分，(7)低油含量并因而不会造成高血脂症，(8)不刺激血管，(9)非高敏感性，(10)非溶血性，以及(11)较目前可得的紫杉醇制剂(例如TaxolTM)少毒性(即具有很少副作用或较不严重的副作用)。
一方面，本发明提供一种可注射的水包油型乳剂，其包含或基本上由下列成分所组成(a)医药有效量的紫杉烷药物或其它水不溶性药物，(b)油成分，其浓度至多为约6％重量比，(c)磷脂成分(例如大豆卵磷脂或蛋卵磷脂)，其浓度为约1.2％至5％重量比，以及(d)水。
在某些实施方案中，该乳剂含有紫杉烷，其浓度为至少约0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％或0.1％重量比。
在某些实施方案中，该紫杉烷药物为太平洋紫杉醇或多西紫杉醇。
在某些实施方案中，该油成分包含植物油。
在某些实施方案中，该油成分包含植物油和中链三酸甘油酯。在某些实施方案中，植物油与中链三酸甘油酯的重量比为约9∶1至约1∶1。
在某些实施方案中，该乳剂进一步包含稳定剂，例如甘氨酸(例如浓度为约0.1％至约2.5％重量比)和/或EDTA(例如浓度为约0.001％至约0.01％重量比)。
在某些实施方案中，该乳剂进一步包含渗透性改性剂，例如甘油(例如浓度为约0.5％至约2.5％重量比)。
在某些实施方案中，该乳剂内的油滴平均直径小于约500nm、400nm、300nm、200nm、150nm或100nm。
在某些实施方案中，该乳剂可不需稀释直接注射，或于注射前先在水、葡萄糖溶液、生理盐水稀释剂或其它静脉内稀释剂中加以稀释。
另一方面，本发明提供一种可注射的水包油型乳剂，其包含或基本上由下列成分所组成(a)紫杉烷药物，其浓度为约0.03％重量比或以上，(b)中链三酸甘油酯(例如Miglyol 812)，浓度为约1％至约3％重量比，(c)植物油(例如豆油)，其浓度为约1％至约3％重量比，(d)磷脂(例如大豆卵磷脂或蛋卵磷脂)，其浓度为约1％至约5％重量比，以及(e)水。
在某些实施方案中，该乳剂可进一步包含浓度为约0.5％至约1％的甘氨酸、浓度为约1.5％至2.5％的渗透性改性剂(例如甘油)，和/或浓度为约0.005％的EDTA。
另一方面，本发明提供一种可注射的水包油型乳剂，其包含或基本上由下列成分所组成(a)治疗有效浓度的紫杉烷药物或其它水不溶性药物，(b)油成分，(c)乳化剂和(d)水，其中该乳剂可稳定至少6个月。
在某些实施方案中，该乳化剂为磷脂。
在某些实施方案中，该乳剂可不经稀释直接注射。
在某些实施方案中，乳剂中有别于紫杉烷药物或水不溶性药物的一些或所有独立成分通常被药物管理机关视为可安全用于静脉内注射。
在某些实施方案中，该可注射的乳剂是非高敏感性或血管刺激性。
在某些实施方案中，在约2-8℃下贮存至少6个月后，该乳剂内的油滴平均直径增加不超过25％。
在某些实施方案中，在约2-8℃下贮存6个月后，该乳剂内的紫杉烷药物浓度减少不超过10％。
在某些实施方案中，该乳剂不包含足以在冷冻干燥期间稳定乳剂内油滴的量的抗冻剂成分(例如足以使经再水合的乳剂的平均滴径不超过冷冻干燥前乳剂的平均滴径的约200％的量)。
在某些实施方案中，该乳剂不经冷冻干燥。
在某些实施方案中，该乳剂不含结晶药物颗粒或微脂体药物颗粒。
在某些实施方案中，该乳剂不含一种或任一种选自以下的成分脂肪族或芳香族酸类、胺类、蛋白质类、聚乙二醇连接的脂类、正甲基吡咯烷酮、丙二醇类、聚乙二醇类、非离子性表面活性剂、聚乙二醇改性的磷脂酰乙醇胺类、环糊精类、生育酚类、生育三烯酚类，和生育酚类及生育三烯酚类的衍生物。
另一方面，本发明提供一种可注射的水包油型乳剂，其包含(a)治疗剂量至多为500mg的水不溶性药物，其浓度为约0.03％重量比或以上，(b)中链三酸甘油酯，浓度为约1％至约3％重量比，(c)豆油，浓度为约1％至约3％重量比，和(d)大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，浓度为约1％至约5％重量比。
在某些实施方案中，上述的乳剂可进一步包含(e)甘氨酸，浓度为约0.5％至1％重量比，(f)甘油，浓度为约1.5至2.5％重量比，(g)可选包含EDTA，浓度为约0.005％重量比，以及(h)水。
另一方面，本发明亦提供一种制备含医药有效量的紫杉烷药物或其它水不溶性药物的可注射的水包油型乳剂的方法。该方法包括(a)形成混合物，其包含适量的(i)紫杉烷药物，(ii)油成分(例如植物油或植物油和中链三酸甘油酯的组合)，和(iii)磷脂，以及(b)将步骤(a)的混合物和水溶液形成水包油型乳剂。
在某些实施方案中，该紫杉烷药物为多西紫杉醇或太平洋紫杉醇。
在某些实施方案中，该方法进一步包括(c)将多西紫杉醇乳剂的pH调至约3.4至约7.0，或将太平洋紫杉醇乳剂的pH调至约6至约7。
在某些实施方案中，步骤(a)可通过将紫杉烷药物或其它水不溶性药物溶于溶液(例如乙醇)中，并将该溶解的紫杉烷药物或溶解的水不溶性药物与包含油成分和磷脂的组合物混合来进行。
在某些实施方案中，步骤(b)可通过经机械均质作用将水性溶液加至步骤(a)的混合物中来进行。
在某些实施方案中，本发明的方法进一步包含以高剪切力将步骤(b)的乳剂均质化，以产生平均滴径小于约200nm的乳剂。
在某些实施方案中，本发明的方法进一步包含通过过滤将所产生的乳剂灭菌。
另一方面，本发明亦提供一种治疗癌症的方法，其通过对需要治疗的个体给予医药有效量的本文所述的含紫杉烷药物的可注射的水包油型乳剂。
在某些实施方案中，所述给药可为静脉内、肌内、动脉内、鞘内、眼内、皮下、关节内和腹腔内给药。
附图的简要说明
图1显示接受低油太平洋紫杉醇乳剂以后的兔耳血管组织病理。
图2显示接受TaxolTM和低油乳剂制剂中的太平洋紫杉醇以后的雄小鼠存活率。
图3显示接受TaxolTM和低油乳剂制剂中的太平洋紫杉醇以后的雌小鼠存活率。
图4显示接受TaxolTM和低油乳剂制剂中的太平洋紫杉醇以后的雄小鼠体重。
图5显示接受TaxolTM和低油乳剂制剂中的太平洋紫杉醇以后的雌小鼠体重。
发明的详细说明本发明一方面提供用以输送紫杉烷药物和其它水不溶性药物的医药组合物。这些组合物为水包油型乳剂，其包含紫杉烷药物或其它水不溶性药物、油成分、乳化剂(例如磷脂成分)和水。任意地，这些组合物可进一步包含稳定剂或渗透性改性剂。本发明的组合物具有一种或多种下列特性(1)可注射，(2)在适当的贮存条件下稳定，(3)含医药有效量的紫杉烷药物或其它水不溶性药物，(4)通过过滤除菌，(5)含有被管理机构(例如FDA)核准的成分，(6)低油含量并因而不会造成高血脂症，(7)不刺激血管，(8)非高敏感性，(9)非溶血性，以及(10)较目前可得的紫杉醇制剂(例如TaxolTM)少毒性(即具有很少副作用或较不严重的副作用)。本发明的组合物至少在油浓度上与现有技术中所公开的用于非经肠输送药物的乳剂不同。更具体地，现有技术中的几乎所有乳剂均含高油浓度，通常为10％、15％或有时为20％。本文中称这些乳剂为″高油乳剂″。高油乳剂可能具有下列的主要问题及缺点。
(1)因液滴凝聚而使乳剂不稳定。高油含量会产生具有高液滴密度(即每体积单位的滴数)的乳剂。高液滴密度会增加液滴撞入彼此的机会并因而增加液滴凝聚的机会。
(2)大液滴径。高油乳剂倾向具有大滴径(直径超过200nm)。大部分市售的非经肠乳剂产品(营养脂乳剂)含有平均直径为约300nm至约400nm的液滴，且无法通过0.2-微米过滤器过滤。然而，一些热敏感性药物，例如紫杉烷药物，必需通过0.2-微米膜过滤来除菌。
(3)自高油乳剂所吸收的过量油脂可能导致高脂血症。
与现有技术中惯用于作为药物输送体系的高油乳剂相比，本发明的乳剂的低油含量提供数种额外的优点。首先，其可制备出具有小滴径(例如不超过200nm)的乳剂，其因而使得可通过经0.2μm膜过滤对乳剂除菌，且使得可更自由循环于接受该乳剂的动物或人体中。其次，低油含量可提高乳剂的稳定性。相信低油含量可减少油滴彼此接合及凝集的机会，但也不被任何具体的理论所束缚。再次，低油含量有助于乳剂的制备，因为所产生的乳剂与高油含量的乳剂相比黏度更低。
“水包油型乳剂”是指胶体(colloidal)分散系统，其中液态油以小液滴形式(分散相，亦称为“油相”)分散于水性介质(连续相，亦称为“水相”)中。
在某些实施方案中，60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、92％、94％、95％、96％、97％、98％或99％以上的紫杉烷药物或其它水不溶性药物是存在于油相中。
″紫衫碱类″是指一类抗癌化合物，其中有数种广泛应用于癌症化疗中。最早的实例为TAXOLTM，一种可注射制剂的商品名，其含有一种称为太平洋紫杉醇的抗癌化合物。另一紫杉烷药物为多西紫杉醇，其商品名为TAXOTERETM。
太平洋紫杉醇通常经由半合成法自欧洲紫杉(Taxus baccata)制得。太平洋紫杉醇的化学名为5β，20-环氧-1，2α，4，7β，10β，13α-六羟基紫杉-11-烯-9-酮4，10-二醋酸酯2-苯甲酸酯13-酯与(2R，3S)-N-苯甲酰基-3-苯基异丝胺酸。太平洋紫杉醇具有下列结构式 太平洋紫杉醇为高度亲脂性，并且不溶于水。
多西紫杉醇是通过以萃取自紫杉植物类可再生性针叶生物体的前体为起始经半合成所制得。多西紫杉醇的化学名称为(2R，3S)-N-羧基-3-苯基异丝胺酸，N-叔丁酯，13-酯与5(β)-20-环氧-1，2(α)，4，7(β)，10(β)，13(α)-六羟基紫杉-11-烯-9-酮4-醋酸酯2-苯甲酸酯，三水合物。多西紫杉醇具有如下的结构式
多西紫杉醇亦为高度亲脂性并特别不溶于水。
由于合成化学家和其它研究者已研发出多种紫杉碱化合物的类似物和衍生物，且因为通常不明确特定的类似物或衍生物是否符合“紫杉碱”化合物的正规定义，因此本文所使用的术语“紫杉烷药物”是包括紫杉碱类和分子结果类似紫杉碱类的紫杉碱类的异构体、类似物和衍生物。然而，本文所使用的术语“紫杉烷药物”所涵盖的紫杉碱药物或紫杉碱药物的异构体、类似物或衍生物必须为医药上可接受的且在可注射制剂中具有医药应用性。已商业化使用或在科学文献中被报导为具有抗癌活性的水-不溶性紫杉烷的实例包括但不限于太平洋紫杉醇；多西紫杉醇；紫杉醇(taxane)；蛇鞭菊种素(spicatin)；云南杉醇(yunnanxol)；紫杉醇-2，13-二酮，5.β.，9.β.，10.β.-三羟基-环-9，10-乙缩醛与丙酮或醋酸酯；紫杉醇-2，13-二酮，5.β.，9.β.，10.β.-三羟基-环-9，10-乙缩醛与丙酮或醋酸酯；紫杉醇-2.β.，15.β.，-9.β.，10.β.-四醇-环-9，10-乙缩醛与丙酮或醋酸酯；N-脱苯甲酰基太平洋紫杉醇A；三尖杉宁碱(cephalomannine)；三尖杉宁碱-7-木糖苷；7-环-10-脱乙酰基-三尖杉宁碱；10-脱乙酰基-三尖杉宁碱；赤果浆霉素(baccatin)；赤果浆霉素二醋酸酯；赤果浆霉素I-VI；7-环-赤果浆霉素III；赤果浆霉素A；7-(4-叠氮-苯甲酰基)-赤果浆霉素III；O-乙酰基赤果浆霉素IV；7-(三乙基硅基)-赤果浆霉素III；7，10-二-O-[(2，2，2-三氯乙氧)-羰基]-赤果浆霉素III；13-(2′，3′-二羟基-3′-苯基丙酰基)-赤果浆霉素III；赤果浆霉素III 13-O-醋酸酯；太平洋紫杉醇B；环太平洋紫杉醇；10-脱乙酰基-7-环太平洋紫杉醇；10-脱乙酰太平洋紫杉醇；10-脱乙酰太平洋紫杉醇B或C；7-木糖-10-脱乙酰太平洋紫杉醇；和10-脱乙酰太平洋紫杉醇-7-木糖苷。
术语“不溶”是指紫杉烷或其它药物在水性溶液(例如水、生理盐水、可注射的葡萄糖液等等)中缺乏溶解度。USP/NF大体上根据在特定温度下溶解1克药物所需的溶剂体积(例如25℃下，1g阿司匹林溶于300ml H2O，5ml乙醇)来表达溶解度。其它参考文献可能使用更主观的术语来描述溶解度，例如那些列于下表的取自Remington′sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，PA，最新版者。
因此，本发明的“水不溶性药物”包括下面四种溶解度类别的药物，即以水作为溶剂时“微溶”、“难溶”、“极难溶”和“几乎不溶或不溶”。
术语“不溶”可与疏水、亲脂、亲油及类似术语替换使用。太平洋紫杉醇和多西紫杉醇均为不溶性药物。
如上述说明，本发明还提供用于输送紫杉烷药物以外的水不溶性药物的医药组合物。这类药物包括但不限于医药活性剂、诊断试剂、营养剂等等。水不溶性药物的实例包括止痛剂/退热剂(例如阿司匹林、乙酰胺酚、伊布普洛芬(ibuprofen)、那普洛辛钠(naproxen sodium)、盐酸丁丙诺啡(buprenorphine hydrochloride)、盐酸普帕西芬(propoxyphenehydrochloride)、萘磺酸普帕西芬(propoxyphene napsylate)、盐酸唛啶(meperidine hydrochloride)、盐酸二氢吗啡酮(hydromorphonehydrochloride)、硫酸吗啡、盐酸羟考酮(oxycodone hydrochloride)、磷酸可待因、重酒石酸二氢可待因、盐酸喷他佐辛(pentazocinehydrochloride)、重酒石酸二氢可待因酮(hydrocodone bitartrate)、酒石酸左啡诺(levorphanol tartrate)、二氟苯水杨酸(diflunisal)、水杨酸三乙醇胺(trolamine salicylate)、盐酸纳布芬(nalbuphine hydrochloride)、甲芬那酸(mefenamic acid)、酒石酸布托啡诺(butorphanol tartrate)、水杨酸胆碱、布他比妥(butalbital)、枸橼酸苯甲苯氧胺(phenyltoloxaminecitrate)、枸橼酸二苯安明、左美丙嗪(methotrimeprazine)、盐酸桂麻磺碱(cinnamedrine hydrochloride)、甲丙氨酯(meprobamate)，及其类似物)；麻醉剂(例如环丙烷、恩氟烷(enflurane)、氟烷(halothane)、异氟烷(isoflurane)、甲氧氟烷(methoxyflurane)、一氧化氮、丙泊酚(propofol)，及其类似物)；抗气喘剂(例如氮卓斯汀(Azelastine)、酮替芬(Ketotifen)、曲呫诺(Traxanox)，及其类似物)；抗生素(例如新霉素、链霉素、氯霉素、头孢霉素、安比西林、盘尼西林、四环霉素，及其类似物)；抗抑郁药(例如奈福泮(nefopam)、奥苷哌汀(oxypertine)、盐酸多塞平(doxepin hydrochloride)、阿莫沙平(amoxapine)、盐酸曲唑酮(trazodone hydrochloride)、盐酸阿米替林(amitriptyline hydrochloride)、盐酸马普替林(maprotiline hydrochloride)、硫酸苯乙基肼(phenelzinesulfate)、盐酸去甲丙咪嗪(desipramine hydrochloride)、盐酸去甲替林(nortriptyline hydrochloride)、硫酸反苯环丙胺(tranylcypromine sulfate)、盐酸氟西汀(fluoxetine hydrochloride)、盐酸多塞平(doxepinhydrochloride)、盐酸丙咪嗪(imipramine hydrochloride)、双羟萘酸丙咪嗪(imipramine pamoate)、去甲替林(nortriptyline)、盐酸阿米替林、异唑胼(isocarboxazid)、盐酸去甲丙咪嗪、马来酸三甲丙咪嗪(trimipraminemaleate)、盐酸普罗替林(protriptyline hydrochloride)，及其类似物)；抗糖尿病剂(例如双胍类、荷尔蒙、磺酰尿素衍生物，及其类似物)；抗真菌剂(例如灰黄霉素(griseofulvin)、克洛可纳唑(keloconazole)、两性霉素B(amphotericin B)、制霉菌素(Nystatin)、克念珠菌素(candicidin)，及其类似物)；降血压药(例如普萘洛尔(propanolol)、盐酸普罗帕酮(propafenone)、氧烯洛尔(oxyprenolol)、硝苯地平(Nifedipine)、利血平(reserpine)、樟脑磺酸三甲噻芬(trimethaphan camsylate)、盐酸酚苄明(phenoxybenzamine hydrochloride)、盐酸帕吉林(pargylinehydrochloride)、地舍平(deserpidine)、二氮嗪(diazoxide)、单硫酸胍乙啶(guanethidine monosulfate)、米诺地尔(minoxidil)、利血胺(rescinnamine)、亚硝酰铁氰化钠(sodium nitroprusside)、萝芙木(rauwolfia serpentina)、阿舍西隆(alseroxylon)、甲磺酸酚妥拉明(phentolamine mesylate)、利血平(reserpine)，及其类似物)；抗炎剂(例如(非固醇类)引朵美辛(indomethacin)、拿百疼(naproxen)、伊布普洛芬、雷米那酮(ramifenazone)、吡罗昔康(piroxicam)，(固醇类)可体松，地塞米松、氟扎可特(fluazacort)、氢化可体松(hydrocortisone)、泼尼松龙(prednisolone)、培尼皮质醇(prednisone)，及其类似物)；抗恶性肿瘤药(例如阿霉素(adriamycin)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、放线菌素(actinomycin)、平阳霉素(bleomycin)、道诺路比星(duanorubicin)、多柔路比星(doxorubicin)、表路比星(epirubicin)、丝裂霉素(mitomycin)、甲氨蝶呤(methotrexate)、氟尿嘧啶、卡铂(carboplatin)、氯乙亚硝脲(carmustine)(BCNU)、甲基-CCNU、顺铂(cisplatin)、依托泊苷(etoposide)、干扰素类，坎普特赛辛(camptothecin)及其衍生物、非纳特林(phenesterine)、紫杉醇类及其衍生物(例如太平洋紫杉醇及其衍生物、泰索帝(taxotere)及其衍生物，及其类似物)，硫酸长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、塔莫西芬(tamoxifen)、哌泊舒凡(piposulfan)，及其类似物)；抗焦虑剂(例如劳拉西泮(lorazepam)、盐酸丁螺环酮(buspironehydrochloride)、帕西泮(prazeparn)、盐酸氯二氮平(chlordiazepoxidehydrochloride)、奥沙西泮(oxazepam)、二钾氯氮(clorazepatedipotassium)、二西泮(diazepam)、恩波酸羟嗪(hydroxyzine pamoate)、盐酸羟嗪(hydroxyzine hydrochloride)、阿普唑仑(alprazolam)、达啶醇(droperidol)、哈拉西泮(halazepam)、氯美扎酮(chlormezanone)、丹曲洛林(dantrolene)，及其类似物)；免疫抑制剂(例如环孢灵(cyclosporine)、硫唑嘌呤(azathioprine)、咪唑立宾(mizoribine)、FK506(他克莫司(tacrolimus))，及其类似物)；抗偏头痛药(例如酒石酸麦角胺(ergotamine tartrate)、盐酸普奈洛尔(propanolol hydrochloride)、黏液酸异美汀(isometheptene mucate)、氯醛比林(dichloralphenazone)，及其类似物)；
镇静剂/安眠药(例如巴比妥酸盐类(例如戊巴比妥(pentobarbital)、戊巴比妥钠、司可巴比妥钠(secobarbital sodium)，及其类似物)，苯并二氮平类(benzodiazapines)(例如盐酸氟西泮(flurazepam hydrochloride)、三唑仑(triazolam)、托马希泮(tomazeparm)、盐酸咪达唑仑(midazolam hydrochloride)，及其类似物)，及其类似物)；抗心绞痛药(例如β-交感神经阻断剂类，钙离子阻断剂类(例如硝苯地平(nifedipine)、盐酸地尔硫卓(diltiazem hydrochloride)，及其类似物)，硝酸盐类(例如硝化甘油、硝酸异山梨酯(isosorbide dinitrate)、四硝酸异戊四醇(pentaerythritol tetranitrate)、赤藓醇四硝酸酯(erythrityltetranitrate)，及其类似物)，及其类似物)；抗精神病药(例如氟哌啶醇(haloperidol)、丁二酸洛沙平(loxapinesuccinate)、盐酸洛沙平(loxapine hydrochloride)、硫利达嗪(thioridazine)、盐酸硫利达嗪(thioridazine hydrochloride)、替沃噻吨(thiothixene)、盐酸氟奋乃静(fluphenazine hydrochloride)、癸酸氟奋乃静(fluphenazine decanoate)、庚氟奋乃静(fluphenazine enanthate)、盐酸三氟拉嗪(trifluoperazine hydrochloride)、盐酸氯丙嗪(chlorpromazinehydrochloride)、奋乃静(perphenazine)、柠檬酸锂、普鲁氯哌嗪(prochlorperazine)，及其类似物)；抗躁狂药(例如碳酸锂，及其类似物)；抗心律失常药(例如托西溴苄铵(bretylium tosylate)、盐酸艾司洛尔(esmolol hydrochloride)、盐酸维拉帕米(verapamil hydrochloride)、胺碘酮(amiodarone)、盐酸恩卡尼(encainide hydrochloride)、地高辛(digoxin)、洋地黄毒苷(digitoxin)、盐酸美西律(mexiletinehydrochloride)、磷酸双异丙吡胺(disopyramide phosphate)、盐酸普鲁卡因胺(procainamide hydrochloride)、硫酸奎尼丁(quinidine sulfate)、葡萄糖酸奎尼丁(quinidine gluconate)、聚半乳糖醛酸奎尼丁(quinidinepolygalacturonate)、醋酸氟卡尼(flecainide acetate)、盐酸妥卡尼(tocainide hydrochloride)、盐酸利都卡因(lidocaine hydrochloride)，及其类似物)；抗关节炎药(例如苯丁唑酮(Phenylbutazone)，舒林酸(sulindac)、青霉胺(penicillamine)、双水杨酯(salsalate)、吡罗昔康(piroxicam)、硫唑嘌呤(azathioprine)、引朵美辛(indomethacin)、关克芬那梅钠(meclofenamate sodium)、硫代苹果酸金钠(gold sodium thiomalate)、酮洛芬(ketoprofen)、金诺芬(auranofin)、金硫葡萄糖(aurothioglucose)、托美丁钠(tolmetin sodium)，及其类似物)；抗痛风剂(例如秋水仙碱(colchicine)、别嘌呤醇(allopurinol)，及其类似物)；抗凝血剂(例如肝素、肝素钠、华法林钠(warfarin sodium)，及其类似物)；血栓溶解剂(例如尿激酶、链球菌激酶、欧特普酶(altoplase)，及其类似物)；抗纤维溶解剂(例如胺基己酸，及其类似物)；血液循环剂(例如己酮可可碱(pentoxifylline)，及其类似物)；抗血小板剂(例如阿司匹林、依姆匹灵(empirin)、阿斯克丁(ascriptin)，及其类似物)；抗癫痫药(例如丙戊酸(valproic acid)、二丙戊酸钠、苯妥英(phenytoin)、苯妥英钠、氯硝西泮(clonazepam)、扑米酮(primidone)、苯巴比妥(phenobarbitol)、苯巴比妥钠、卡玛西平(carbamazepine)、异戊巴比妥钠(amobarbital sodium)、甲琥胺(methsuximide)、美沙比妥(metharbital)、甲苯比妥(mephobarbital)、美芬妥英(mephenytoin)、苯琥胺(phensuximide)、对甲双酮(paramethadione)、乙苯妥英(ethotoin)、乙酰脲(phenacemide)、赛可巴比妥钠(secobarbitol sodium)、二钾氯氮(clorazepate dipotassium)、三甲双酮(trimethadione)，及其类似物)；抗巴金森剂(例如乙琥胺(ethosuximide)，及其类似物)；抗组胺剂/止痒剂(例如盐酸羟嗪、盐酸二苯安明、苹果酸氯菲安明(chlorpheniramine maleate)、苹果酸溴菲安明(brompheniraminemaleate)、盐酸赛庚啶(cyproheptadine hydrochloride)、特芬那啶(terfenadine)、丁烯二酸克雷满汀(clemastine fumarate)、盐酸曲普利啶(triprolidine hydrochloride)、苹果酸卡比诺沙明(carbinoxaminemaleate)、盐酸二苯拉林(diphenylpyraline hydrochloride)、酒石酸芬宁胺(phenindamine tartrate)、苹果酸阿扎他定(azatadine maleate)、盐酸曲吡那敏(tripelennamine hydrochloride)、苹果酸右氯敏(dexchlorpheniramine maleate)、盐酸甲地嗪(methdilazinehydrochloride)、酒石酸曲帕嗪(trimprazine tartrate)，及其类似物)；可用于钙调节的试剂(例如降钙素(calcitonin)、副甲状腺荷尔蒙，及其类似物)；抗细菌剂(例如硫酸阿米卡星(amikacin sulfate)、胺曲南(aztreonam)、氯霉素、棕榈酸氯霉素、氯霉素琥珀酸钠、盐酸环丙沙星(ciprofloxacin hydrochloride)、盐酸克林霉素(clindamycinhydrochloride)、棕榈酸克林霉素、磷酸克林霉素、甲硝唑(metronidazole)、盐酸甲硝唑、硫酸庆大霉素(gentamicin sulfate)、盐酸林可霉素(lincomycin hydrochloride)、硫酸妥布霉素(tobramycinsulfate)、盐酸万古霉素(vancomycin hydrochloride)、硫酸多黏菌素B(polymyxin B sulfate)、可利菌素甲磺酸钠(colistimethate sodium)、硫酸黏杆菌素(colistin sulfate)，及其类似物)；抗病毒剂(例如γ干扰素、齐多夫定(zidovudine)、盐酸金刚烷胺(amantadine hydrochloride)、利巴韦林(ribavirin)、阿昔洛韦(acyclovir)，及其类似物)；抗微生物剂(例如头孢霉素类(例如头孢唑林钠(cefazolinsodium)、头孢拉定(cephradine)、头孢克洛(cefaclor)、头孢匹林钠(cephapirin sodium)、头孢唑肟钠(ceftizoxime sodium)、头孢哌酮钠(cefoperazone sodium)、头孢替坦二钠(cefotetan disodium)、头孢托沙明阿唑替(cefutoxime azotil)、头孢噻肟钠(cefotaxime sodium)、头孢羟氨苄单水化合物(cefadroxil monohydrate)、头孢他定(ceftazidime)、头孢雷辛(cephalexin)、头孢菌素钠(cephalothin sodium)、盐酸头孢雷辛单水化合物、头孢孟多酯(cefamandole nafate)、头孢西丁钠(cefoxitinsodium)、头孢尼西钠(cefonicid sodium)、头孢雷特(ceforanide)、头孢曲松钠(ceftriaxone sodium)、头孢他定，头孢羟氨苄(cefadroxil)、头孢拉定(cephradine)、头孢呋辛钠(cefuroxime sodium)，及其类似物)，盘尼西林类(例如安比西林、阿莫西林(amoxicillin)、苄星盘尼西林G(penicillin G benzathine)、环青霉素(cyclacillin)、安比西林钠、钾盘尼西林G、钾盘尼西林V、哌拉西林钠(piperacillin sodium)、苯唑西林钠(oxacillin sodium)、盐酸贝安比西林、氯唑西林钠(cloxacillin sodium)、替卡西林二钠(ticarcillin disodium)、阿洛西林钠(azlocillin sodium)、卡茚西林钠(carbenicillin indanyl sodium)、钾盘尼西林G、盘尼西林G普鲁卡因、甲氧西林钠(methicillin sodium)、萘夫西林钠(nafcillin sodium)，及其类似物)，红霉素类(例如红霉素琥珀酸乙酯(erythromycinethylsuccinate)、红霉素、依托红霉素(erythromycin estolate)、乳糖酸红霉素(erythromycin lactobionate)、西雷红霉素(erythromycin siearate)、红霉素琥珀酸乙酯，及其类似物)，四环霉素类(例如盐酸四环霉素、盐酸多西环素(doxycycline hyclate)、酸米诺环素(minocyclinehydrochloride)，及其类似物)，及其类似物)；气管扩张药(例如拟交感神经药(例如盐酸肾上腺素(epinephrinehydrochloride)、硫酸间普那林(metaproterenol sulfate)、硫酸特布他林(terbutaline sulfate)、新异丙肾上腺素(isoetharine)、甲磺酸新异丙肾上腺素、盐酸新异丙肾上腺素、硫酸沙丁胺醇(albuterol sulfate)、沙丁胺醇、比托特罗(bitolterol)、甲磺酸盐酸异丙肾上腺素(mesylateisoproterenol hydrochloride)、硫酸特布他林、肾上腺素酒石酸氢盐(epinephrine bitartrate)、硫酸间普那林、肾上腺素、肾上腺素酒石酸氢盐，及其类似物)，抗胆素药物(例如异丙托溴铵(ipratropium bromide)，及其类似物)，黄嘌呤类(例如胺茶碱(aminophylline)、甘油茶碱(dyphylline)、硫酸间普那林、胺茶碱，及其类似物)，肥大细胞稳定剂(例如色甘酸钠(cromolyn sodium)，及其类似物)，吸入用皮质类固醇(例如氟尼缩松二丙酸倍氯米松(flurisolidebeclomethasonedipropionate)、二丙酸倍氯米松单水合物，及其类似物)、沙丁胺醇(salbutamol)、二丙酸倍氯米松(BDP)、异丙托溴铵、布地奈德(budesonide)、酮替芬(ketotifen)、沙美特罗(salmeterol)、羟萘甲酸盐(xinafoate)、硫酸特布他林(terbutaline sulfate)、曲安西龙(triamcinolone)、茶碱(theophylline)、奈多罗米钠(nedocromil sodium)、硫酸间普那林、沙丁胺醇(albuterol)、氟尼缩松(flunisolide)，及其类似物)；荷尔蒙(例如雄激素类(例如达那唑(danazol)、环戊丙酸睾酮(testosterone cypionate)、氟甲睾酮(fluoxymesterone)、乙基睾酮(ethyltostosterone)、睾酮恩尼特(testosterone enanihate)、甲基睾酮、氟甲睾酮、环戊丙酸睾酮，及其类似物)，雌激素类(例如雌二醇、雌酮硫酸酯哌嗪(estropipate)、结合型雌激素类，及其类似物)，黄体激素类(例如醋酸甲氧黄体素(methoxyprogesterone acetate)、醋酸炔诺酮(norethindrone acetate)，及其类似物)，皮质类固醇(例如曲安西龙(triamcinolone)、β美塞松(βmethasone)、β美塞松磷酸钠、地塞米松、地塞米松磷酸钠、醋酸地塞米松、培尼皮质醇、甲基乙酸培尼皮质醇悬浮液、曲安奈德(triamcinolone acetonide)、甲基泼尼松龙(methylprednisolone)、泼尼松龙磷酸钠、甲基泼尼松龙琥珀酸钠、氢化可体松琥珀酸钠、甲基泼尼松龙琥珀酸钠、曲安西龙六卡托奈(triamcinolone hexacatonide)、氢化可体松、环戊丙酸氢化可体松、泼尼松龙、醋酸氟化可体松(fluorocortisone acetate)、醋酸帕拉米松(paramethasone acetate)、特布酸泼尼松龙(prednisolone tebulate)、醋酸泼尼松龙、泼尼松龙磷酸钠、氢化可体松琥珀酸钠，及其类似物)、甲状腺荷尔蒙(例如左甲状腺素钠(levothyroxine sodium)，及其类似物)，及其类似物；降血糖剂(例如人类胰岛素、纯化的牛胰岛素、纯化的猪胰岛素、优降糖(glyburide)、氯磺丙脲(chlorpropamide)、格列吡嗪(glipizide)、甲苯磺丁脲(tolbutamide)、妥拉磺脲(tolazamide)，及其类似物)；降血脂剂(例如氯苯丁酯(clofibrate)、右旋甲状腺素钠(dextrothyroxine sodium)、普罗布考(probucol)、洛伐他汀(lovastatin)、烟碱酸，及其类似物)；可用以刺激红血细胞生成的试剂(例如红血细胞生长激素(erythropoietin)，及其类似物)；抗溃疡/抗胃酸逆流剂(例如法莫替丁(famotidine)、西咪替丁(cimetidine)、盐酸雷尼替丁(ranitidine hydrochloride)，及其类似物)；止恶心剂/止吐剂(例如盐酸美克洛嗪(meclizine hydrochloride)、那密浓(nabilone)、甲哌氯丙嗪(prochlorperazine)、氯茶二苯安明(dimenhydrinate)、盐酸异丙嗪(promethazine hydrochloride)、硫乙哌丙嗪(thiethylperazine)、东莨菪碱(scopolamine)，及其类似物)；油溶性维生素(例如维生素A、D、E、K，及其类似物)；以及其它药物，例如米托坦(mitotane)、维沙啶(visadine)、卤化亚硝基尿素类、艾霉素类(anthrocyclines)、椭圆玫瑰树碱(ellipticine)，及其类似物。
医药活性剂的其它实例包括那些基本上不溶于水，及列于MerckIndex(第十二版，1996)的“Therapeutic Category and Biological ActivityIndex”中的化合物，其所有相关的内容均并列为本文的参考。
可用于本发明实施中的诊断剂的实例包括超声波造影剂、放射造影剂(例如碘-辛烷类，碳卤化合物，雷诺格拉芬(renografin)，及其类似物)，磁造影剂(例如碳氟化合物，脂溶性顺磁化合物，及其类似物)，以及其它不经一些物理及/或化学性修饰调节其基本上不溶于水的特性则不易输送的诊断剂。
可用于本发明实施中的营养剂的实例包括氨基酸类、糖类、蛋白质类、碳水化合物类、脂溶性维生素(例如维生素A，D，E，K，及其类似物)或脂质，或其中任意两种或更多种的组合。
“治疗有效浓度”(可与“医药有效浓度”替换使用)是指在适于任何药物治疗的合理利益/风险比条件下可有效治疗疾病或病症(例如癌症)的药物(例如太平洋紫杉醇)的浓度。紫杉烷药物的治疗有效浓度的示范性的例子包括但不限于约0.1mg/mL至约0.5mg/mL(或约0.01％至约0.05％)。
若无其它注明，本文所使用的“重量比浓度”是指组合物(例如低油乳剂)中成分(例如紫杉烷药物)的重量与该组合物的总重量的比例(单位为百分比)。
本文所使用的术语“油”一般指烃类衍生物、碳水化合物衍生物或在体温如约37℃下为液态的类似有机化合物，并且药理上可接受用于注射制剂中。其包括甘油酯类或非甘油酯类。
术语“油成分”或“油相”指一种油，或多种油的组合。
在某些实施方案中，本发明的油成分包括单甘油酯、双甘油酯、三酸甘油酯，或其混合物。在某些实施方案中，油成分包括一种或多种脂肪酸与甘油外的醇类形成的酯。
在某些实施方案中，所述油指“植物油”。植物油指衍生自植物种子或坚果的油。示例性的植物油包括但不限于杏仁油、琉璃苣油、黑醋栗种子油、蓖麻油、玉米油、红花油、豆油、芝麻油、棉籽油、花生油、橄榄油、油菜籽油、可可油、棕榈油、芥花籽油等等。植物油通常为″长链三酸甘油酯类″，其由三脂肪酸(根据油的来源不同，通常长度约14至约22个碳，具有不同数目和位置的不饱和键)与甘油上的三个羟基形成酯键而生成。
在某些实施方案中，通常使用高纯度(亦称为“超精制”)植物油以确保水包油型乳剂的安全性和稳定性。在某些实施方案中，可在本发明中使用氢化植物油，其通过植物油的可控氢化制得。
在某些实施方案中，所述油指“中链三酸甘油酯类”。中链三酸甘油酯类(MCT′s)为另一类三酸甘油酯油，其可为天然或合成品。MCT′s是自长度通常为约8至约12个碳的脂肪酸制得。与植物油一样，MCT′s已被广泛应用在设计用于注射的乳剂中，作为需要非经肠营养的患者的热量来源。这类油可通过商业渠道获得，如购自德国SASOLGmbH的Miglyol 210和Miglyol 812，购自新泽西Croda Inc.ofParsippany的CRODAMOL GTCC-PN，或购自新泽西PVO International，Inc.，of Boonton的Neobees M-5油。其它低熔点中链油类亦可用于本发明中。
“动物脂肪”是指来自动物的油。其亦包括三酸甘油酯类，但其三个脂肪酸链的长度与其中的不饱和键与植物油不同。自室温下为固态的油源(例如牛油、猪油，等)所得的动物脂肪可视需要加工成液态。其它形式的在室温下本为液态的动物脂包括各种鱼油，等等。
在某些实施方案中，将植物油和MCT油的组合应用于本发明中。这些组合通常有合并使用于可注射乳剂中的长期安全记录，且其使本发明的胶态分散体或干燥固体有优良的稳定性。所使用的特定种类的植物油(即豆油、玉米油或红花油等)并不重要，只要安全、具有良好耐受性、医药上可接受、化学上稳定且可提供所需大小范围的分散油滴。
本发明乳剂中的总油含量可在约1％至约6％重量比的范围内。在某些实施方案中，油成分的总浓度范围为约2％至约4％。在某些实施方案中，油成分的总浓度为约或最多为约1％、2％、3％、4％、5％或6％重量比。在某些实施方案中，所述乳剂包含施用于个体不会造成高脂血症的油量。
在某些实施方案中，乳剂中的植物油与MCT油的比例范围为约9∶1至约1∶5重量比。在某些实施方案中，植物油与MCT油的比例范围为约2∶1至约1∶2重量比。在某些实施方案中，植物油与MCT油的重量比为约9∶1、8∶1、7∶1、6∶1、5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4或1∶5。
本发明中的非甘油酯类主要是指胆固醇。
在某些实施方案中，本发明制剂的油成分包括豆油和MCT。
在某些实施方案中，本发明乳剂中的紫杉烷药物(或其它不溶性药物)与油成分(例如三酸甘油酯)的重量比为约1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60、1∶70、1∶80、1∶90、1∶100或1∶120。
″乳化剂″指可避免可注射乳剂分离成独立的油和水相的化合物。可使用于本发明的乳化剂通常为(1)与本发明的水包油型乳剂的其它成分可兼容，(2)不会干扰乳剂中的紫杉烷药物或其它水不溶性药物的稳定性或功效，(3)在制剂中稳定且不会变劣，及(4)无毒性。
适当的乳化剂包括但不限于丙二醇单-和二-脂肪酸酯、脂肪酸聚氧乙烯山梨糖醇酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚合物和嵌段共聚合物、脂肪醇硫酸酯的盐类、脂肪酸山梨糖醇酯、聚乙二醇甘油酯的酯类、油和蜡基的乳化剂、单硬脂酸甘油酯、脂肪酸甘油山梨糖醇酯和磷脂类。
“磷脂成分”指纯磷脂或二种或更多种磷脂的组合或混合物。
“磷脂”指具有两个脂肪酸和一个磷酸离子的甘油三酯。可使用于本发明的示例性磷脂包括但不限于磷脂酰胆碱、卵磷脂(磷酸酯化二酰基甘油的胆碱酯的混合物)、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、具有约4至约22个碳原子且更通常为约10至约18个碳原子且不同饱和度的磷脂酸。药物输送组合物的磷脂可为单一磷脂或数种磷脂的混合物。磷脂应可适合所选用的给药途径。
可用于本发明的磷脂可为天然来源。天然存在的磷脂包括大豆卵磷脂、蛋卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋卵磷脂、神经鞘氨醇、神经节苷脂和植物鞘氨醇，及其组合。
天然的卵磷脂是为硬脂酸、棕榈酸和油酸的双甘油酯连接于磷酸的胆碱酯的混合物，通称为磷脂酰胆碱，且可得自各种来源，例如蛋和黄豆。大豆卵磷脂和蛋卵磷脂(包括这些化合物的氢化产物)具有长久的安全性历史，拥有综合的乳化和溶解特性，且比大部分合成表面活性剂更容易较快崩解成无害物质。市面上可购得的大豆磷脂为Central Soya营销并贩卖的Centrophase和Centrolex产品、德国Phospholipid GmbH的Phospholipon、德国Lipoid GmbH的Lipoid和Degussa的EPIKURON。
氢化卵磷脂是将卵磷脂控制性氢化的产物。其亦可使用于本发明中。
根据美国药典(USP)，卵磷脂为非专属名称，其描述丙酮不溶性磷脂的复杂混合物，主要是由磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸和磷脂酰肌醇结合各种含量的其它物质如三酸甘油酯类、脂肪酸和碳水化合物组成。
在医药上，卵磷脂主要作为分散、乳化及稳定剂，且被包括于肌内和静脉内注射剂、非经肠营养制剂和局部产品中。卵磷脂在FDAInactive Ingredients Guide中亦被列为可用于吸入剂、IM和IV注射剂、口服胶囊、悬浮剂和片剂、直肠、局部和阴道用制剂。
磷脂亦可为合成磷脂，且常见的合成磷脂如下所示双酸甘油酯类1，2-二月桂酰-sn-甘油(DLG)1，2-二荳蔻酰-sn-甘油(DMG)1，2-二棕榈酰-sn-甘油(DPG)1，2-二硬脂酰-sn-甘油(DSG)磷脂酸类
1，2-二荳蔻酰-sn-甘油-3-磷脂酸，钠盐(DMPA，Na)1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷脂酸，钠盐(DPPA，Na)1，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷脂酸，钠盐(DSPA，Na)磷酸胆碱类1，2-二月桂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DLPC)1，2-二荳蔻酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DMPC)1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DPPC)1，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DSPC)磷酸乙醇胺类1，2-二月桂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DLPE)1，2-二荳蔻酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DMPE)1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DPPE)1，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DSPE)磷酸甘油酯类1，2-二月桂酰-sn-甘油-3-磷酸甘油，钠盐(DLPG)1，2-二荳蔻酰-sn-甘油-3-磷酸甘油，钠盐(DMPG)1，2-二荳蔻酰-sn-甘油-3-磷酸-sn-1-甘油，铵盐(DMP-sn-1-G，NH4)1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸甘油，钠盐(DPPG，Na)1，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸甘油，钠盐(DSPG，Na)1，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸-sn-1-甘油，钠盐(DSP-sn-1G，Na)磷酸丝氨酸类1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸-L-丝氨酸，钠盐(DPPS，Na)混合链磷脂类1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(POPC)1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸甘油，钠盐(POPG，Na)1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸甘油，铵盐(POPG，NH4)溶血磷脂类1-棕榈酰-2-溶血-sn-甘油-3-磷酸胆碱(P-lyso-PC)1-硬脂酰-2-溶血-sn-甘油-3-磷酸胆碱(S-lyso-PC)乙二醇化磷脂类
N-(羰基-甲氧基聚乙二醇2000)-MPEG-2000-DPPE1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，钠盐N-(羰基-甲氧基聚乙二醇5000)-MPEG-5000-DSPE1，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，钠盐N-(羰基-甲氧基聚乙二醇5000)-MPEG-5000-DPPE1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，钠盐N-(羰基-甲氧基聚乙二醇750)-MPEG-750-DSPE1，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，钠盐N-(羰基-甲氧基聚乙二醇2000)-MPEG-2000-DSPE1，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，钠盐本发明的乳剂中的磷脂类含量重量比可在约0.5％至约6％的范围内。在某些实施方案中，磷脂类含量重量比可在约1％至约5％或约2％至约4％的范围内。在某些实施方案中，磷脂含量为约0.5％、1％、2％、3％、4％、5％或6％重量比。
在某些实施方案中，本发明的乳剂中的油成分与磷脂的比例为约5∶1至约1∶1(w/w)。在某些实施方案中，其重量比为约5∶1、4∶1、3∶1、2∶1或1∶1。
本发明的组合物可任意含有添加剂，例如酸化、碱化、缓冲、螯合、复合及稳定剂、抗氧化剂和抗微生物性防腐剂、悬浮及/或黏度改性剂，和其它生物兼容性物质或治疗剂。这些试剂存在于乳剂的水相中。在某些实施方案中，这些添加剂有助于稳定乳剂或乳剂中的药物，并使本发明的制剂成为生物兼容性。
水相的渗透压(osmolality)通常为约300mOsm，且可包括氯化钾或氯化钠、海藻糖、蔗糖、山梨醇、甘油、甘露醇、聚乙二醇、丙二醇、白蛋白、氨基酸，和其混合物。在某些实施方案中，与也可增加黏度的试剂如山梨醇或蔗糖一起，可使渗透性(tonicity)达到至少为250mOsm。可用于调节本发明乳剂的渗透压的化合物称为“渗透性改性剂”或“渗透压改性剂”。
本文所使用的“抗氧化剂”主要指可安全使用于可注射产物中的金属离子螯合剂及/或还原剂。金属离子螯合剂可通过结合于金属离子并藉此减少金属离子在药物、油或磷脂成分的氧化反应上的催化作用而可作为抗氧化剂。可用于本发明的金属螯合剂包括但不限于EDTA、甘氨酸和柠檬酸，或其盐类。
在某些实施方案中，本发明乳剂的依地酸二钠的浓度为约0.0001％至约1％w/v。在某些实施方案中，其浓度为约0.001％至约0.1％w/v，或为约0.001％至约0.005％w/v。
在某些实施方案中，本发明乳剂中的平均滴径为约50至约250nm。在某些实施方案中，油滴的平均直径可为约50至约200nm，或约75nm至约150nm的范围内。在某些实施方案中，平均滴径约为70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190或200nm。在某些实施方案中，该乳剂可经由0.2μm过滤器灭菌。
在某些实施方案中，水包油型乳剂中不同于紫杉烷药物或其它水不溶性药物的部分或全部成分(例如油成分、乳化剂、稳定剂和渗透性改性剂)是安全、有良好耐受性的，且经FDA认可能用于静脉内注射。
水包油型乳剂的成分若不会造成患者的不希望的系统性或局部反应(例如过敏性休克)则可视为“安全的”。
水包油型乳剂的成分若不会导致注射部位的实质性不良作用，例如静脉炎、血管发炎或血管刺激，则可视为“有良好耐受性”。
水包油型乳剂的成分若于本发明申请日前即已使用于经FDA核准的静脉注射产品中，且其使用的浓度可比照那些经FDA核准的产品，则可视为“被FDA接受”。
在某些实施方案中，水包油型乳剂中不同于紫杉烷药物或其它水不溶性药物的部分或全部成分(例如油成分、乳化剂、稳定剂和渗透性改性剂)一般为药物管理机构视为可安全使用于静脉注射的成分。
水包油型乳剂的成分若于本发明申请日前即已使用于经FDA或欧洲的药物管理机构核准的静脉注射产品中，且其使用的浓度可比照那些经美国FDA或欧洲的药物管理机构核准的产品，则可视为“一般为药物管理机构视为可安全使用于静脉注射”。
在某些实施方案中，本发明的水包油型乳剂为无血管刺激性。“无血管刺激性”指化合物或组合物的特性，当其经静脉内给药时，不会造成注射部位的实质刺激，该刺激的迹象为例如增厚的皮肤、坏死的皮肤、局部红肿、局部隆起、有血栓生成的血管扩张，或有皮下发炎的血管栓塞。
在某些实施方案中，本发明组合物是化学和物理稳定的。如果组合物内的紫杉烷药物(或其它不溶性药物)在适当的条件下贮存至少1个月仍无实质上的化学分解，那么组合物为“化学稳定”。在某些实施方案中，组合物内所有的紫杉烷药物(或其它不溶性药物)的浓度在适当的贮存条件下(例如在2-8℃或室温下)至少1、2、3、4、5、6、9、12、15、18或24个月后减少不超过约1％、3％、5％、8％或10％。
如果乳剂组合物可于适当的条件下贮存至少1个月而未使其平均滴径增加超过100％或无相分离、变乳霜状或颗粒凝集的迹象，那么乳剂组合物为“物理性稳定”。在某些实施方案中，本发明组合物的平均粒径在适当的贮存条件下(例如2-8℃，或室温)至少1、2、3、4、5、6、9、12、15、18或24个月后增加不超过约10％、20％、25％、30％、40％、50％、75％或100％。
另一方面，本发明涉及即用型静脉注射/输注乳剂。术语“即用型”指该医药组合物可直接使用或在使用前不需经进一步稀释、混合或其它对其组合物的改变。
在某些实施方案中，本发明乳剂可非经肠对个体给药。“非经肠”包括任何不经消化道的给药模式，但排除经膜输送，例如皮肤贴剂。非经肠给药最普遍的是指注射或输注至血管中。
在某些实施方案中，本发明乳剂的给药模式是通过静脉内、动脉内、鞘内、腹腔内、眼内、关节内、肌内或皮下注射。
在某些实施方案中，本发明的水包油型乳剂并不包括那些自冻干制剂重组的。
在某些实施方案中，本发明的乳剂不含有一种或多种抗冻剂，或不含足以于冻干期间稳定乳剂的油滴的量(例如足以使经再水合的乳剂的平均滴径不超过冻干前的约200％的量)的抗冻剂。在某些实施方案中，本发明的乳剂不含有足以使经再水合的乳剂的平均滴径不超过冻干前的约150％或约125％的量的抗冻剂。
“抗冻剂”亦称为“冻干助剂”或“冻干增量剂(bulking agent)”，指那些经添加以在冻干过程中及随着乳剂中水份去除时，维持乳剂的分散相和亚微粒液滴，以为液滴提供固态基质而形成固包油(oil-in-solid)分散体系。示例性的抗冻剂包括聚醇类、单糖类、二糖类、多糖类、氨基酸类、肽类、蛋白质类和亲水性聚合物，或其混合物。足以使乳剂的油滴稳定的抗冻剂浓度的通常范围为约5％至20％重量比。使用于本发明中的稳定剂(例如甘氨酸)和渗透性改性剂(例如甘油)使用于低油乳剂中的浓度并不足以发挥任何抗冻效果，即避免油滴在冷冻干燥期间凝集；因此，其不能被视为抗冻剂。
在某些实施方案中，本发明的乳剂不包含一种或任一种下列化合物脂肪族或芳香族酸、胺类、蛋白质类、聚乙二醇连结的脂类、丙二醇类、正甲基吡咯烷酮、聚乙二醇类、非离子性表面活性剂、聚乙二醇改性的磷脂酰乙醇胺类、环糊精、生育酚类、生育三烯酚类，和生育酚类与生育三烯酚类的衍生物(参见美国专利5,478,860；4,816,247；5,750,142；5,977,172；6,245,349；6,348,491；和6,458,373号；公开的PCT申请WO 99/04787)。
在某些实施方案中，本发明的乳剂不含结晶药物颗粒或微脂体药物颗粒。
示例性的水包油型乳剂可包括(a)紫杉烷药物，其浓度为约0.03％重量比或以上，(b)中链三酸甘油酯，浓度为约1％至约3％重量比，(c)豆油，浓度为约1％至约3％重量比，(d)大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，浓度为约1％至约5％重量比，(e)甘氨酸，浓度为约0.5至1％重量比，(f)甘油，浓度为约1.5至2.5％重量比，(g)可选含有EDTA，浓度为约0.005％重量比，以及(h)水。
水包油型乳剂的其它实例可包含(a)多西紫杉醇，浓度为约0.05％重量比，(b)中链三酸甘油酯，浓度为约1％至约3％重量比，(c)豆油，浓度为约1％至约3％重量比，(d)大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，浓度为约1％至约5％重量比，(e)甘氨酸，浓度为约0.5至1％重量比，(f)甘油，浓度为约1.5至2.5％重量比，(g)可选含有EDTA，浓度为约0.005％重量比，(h)氯化钠及/或盐酸，以将pH调至约3.5和7.0，以及(i)水。
水包油型乳剂的其它实例可包含(a)太平洋紫杉醇，浓度为约0.05％重量比，(b)中链三酸甘油酯，浓度为约1％至约3％重量比，(c)豆油，浓度为约1％至约3％重量比，(d)大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，浓度为约1％至约5％重量比，(e)甘氨酸，浓度为约0.5至1％重量比，(f)甘油，浓度为约1.5至2.5％重量比，(g)可选含有EDTA，浓度为约0.005％重量比，(h)氯化钠及/或盐酸，以将pH调至约6和7，以及(i)水。
水包油型乳剂的其它实例可包含(a)多西紫杉醇，浓度为约0.05％重量比，(b)豆油，浓度为约1％至约6％重量比，(c)大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，浓度为约1％至约5％重量比，(d)甘氨酸，浓度为约0.5至1％重量比，(e)甘油，浓度为约1.5至2.5％重量比，(f)可选含有EDTA，浓度为约0.005％重量比，(g)氯化钠及/或盐酸，以将pH调至约3.5和7.0，以及(h)水。
水包油型乳剂的其它实例可包含(a)太平洋紫杉醇，浓度为约0.05％重量比，(b)豆油，浓度为约1％至约6％重量比，(c)大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，浓度为约1％至约5％重量比，(d)甘氨酸，浓度为约0.5至1％重量比，(e)甘油，浓度为约1.5至2.5％重量比，(f)可选含有EDTA，浓度为约0.005％重量比，(g)氢氧化钠及/或盐酸，以将pH调至约6和7，以及(h)水。
本发明亦提供制备用来输送本文所述紫杉烷药物和其它水不溶性药物的水包油型乳剂的方法。这类乳剂的制备可通过如下步骤进行(a)形成混合物，其包含适量的(i)紫杉烷药物(或其它水不溶性药物)，(ii)油成分(例如植物油或植物油与中链三酸甘油酯的组合)，和(iii)磷脂，并且(b)将步骤(a)的混合物与水性溶液形成水包油型乳剂。该方法可进一步包含一个或多个下列步骤(A)将乳剂的pH调至所需范围，(B)以高剪切力将乳剂均质化以产生平均滴径小于约200nm的乳剂及(C)使用0.2μm过滤器将乳剂过滤除菌。
在某些实施方案中，步骤(a)是通过(i)以乙醇溶解紫杉烷药物，(ii)将该经溶解的紫杉烷药物与包含下列成分的组合物混合(1)植物油，(2)可选含有的中链三酸甘油酯，和(3)磷脂，以及(iii)去除乙醇至残量(即紫杉烷药物、植物油、中链三酸甘油酯和磷脂总重量的10％以下)。
用以制备本发明乳剂的示例性方法可包括一个或多个下列步道骤(1)将药物、油和乳化剂溶于足量的挥发性溶剂中，例如乙醇、二氯甲烷、氯仿、异丙醇、甲醇、叔丁醇等，以形成澄清溶液，(2)通过真空或通过以氮或空气流吹送溶液，以去除溶剂至毒理上可接受的残留量，以得到油相，(3)将渗透性改性剂、防腐剂、抗冻剂和/或其它非活性成分溶于水中以形成水相，(4)可选过滤、分离该油和/或水相以去除颗粒，(5)将水相加至油相中，并充份混合以形成粗水包油型乳剂，(6)将该粗乳剂的pH调至所需pH范围，(7)使该粗乳剂通过高压均质机2至10次，直至该乳剂的液滴达所需平均直径范围，且乳剂中无直径大于5微米的液滴为止，所述高压均质机例如在约18,000-23,000psi的操作压力下工作的装有乳剂交互作用室的微射流均质机(例如Microfluidics Corp，MA的Model 110F)(8)在无菌操作下使该乳剂通过无菌的0.2微米级膜过滤器以将其除菌，(9)在无菌操作下将该经过滤的乳剂充填至适当的无菌容器中并以适当的无菌塞子将该容器封口，以及(10)对最终的乳剂进行必要的试验。
本发明还提供本文所述的组合物的使用方法。譬如，本发明提供治疗癌症的方法，包括对需要治疗的患者给予本文所述的含有不溶性抗肿瘤药(例如太平洋紫杉醇或多西紫杉醇)的组合物。在某些实施方案中，该给药可能为静脉内、肌内、动脉内、鞘内、眼内、皮下、关节内和腹腔内给药。
下列实例是用以说明本发明，但不限制其实施。
实施例实施例1如下述说明制备太平洋紫杉醇低油乳剂(3.1％油含量，表1.1)。
表1.1
通过将太平洋紫杉醇、豆油、中链三酸甘油酯、蛋卵磷脂和足量的乙醇合并，并混合以形成黄色澄清溶液，从而制得3.1％油乳剂。使用旋转蒸发器将该溶液在真空下干燥，直至残留的乙醇含量为其它成分总重的2％以下，以得到浓稠黄色液体(即油相)。将甘油和甘氨酸取出称重并溶于适量的水中，以形成水相。将该水相加至油相中，并以高剪切力混拌器(例如Tekmar Company的Ultra Turrax)搅拌该混合物以得到粗乳剂。以1N NaOH或1N HCl溶液将该粗乳剂的pH调至6.5±0.2。使调整pH后的粗乳剂在18,000-23,000psi的操作压力下通过装有乳剂交互作用室的微射流均质机5次。使所产生的乳剂经无菌0.2微米过滤器过滤，随后将过滤后的乳剂充填至玻璃瓶中，以橡胶栓将其封口。最终的低油乳剂为半透明的鹅黄色液体。
进行研究以评估太平洋紫杉醇在此3.1％油乳剂中的稳定性(化学稳定性)和乳剂本身的稳定性(物理稳定性)。化学稳定性的测定是以乳剂中的太平洋紫杉醇浓度随时间的变化为基准。乳剂中的太平洋紫杉醇浓度是通过反相高压液相色谱(Hewlett Parkard Model 1050 HPLC)测定。物理稳定性的评估依据平均油滴直径和大液滴(大于5微米者)的数目。平均油滴直径的测定是通过激光散射光谱仪(Particle SizingSystem，Santa Barbara，CA的Model 370 Submicron Particle Sizer)；在光学显微镜下以血细胞计数器(Hausser Scientific，PA的Bright-Line)对大液滴进行计数。此乳剂的物理稳定性数据显示于表1.2中。
表1.2
化学稳定性的数据显示于表1.3中。
表1.3
表1.2和1.3中的数据表明新鲜的3.1％油乳剂有极小的平均滴径(100nm)，且无大液滴(大于5微米)。在正常的贮存条件(5℃和25℃)下，乳剂在一段长时期(10周)内维持这种小滴径而无任何大液滴(大于5微米)生成。太平洋紫杉醇在乳剂中也保持稳定；在5℃或25℃下10周以后并无观察到可测得的药物损失。总之，此低油乳剂以极小的滴径显示出优良的稳定性。
实施例2使用类似的制备方法制备三种其它低油乳剂，并以与实施例1中所述相同的试验方法评估其相对稳定性。制剂中还包括残留量(＜2％)的乙醇和丙二醇。
表2.1-1.85％油乳剂
表2.2-2.47％油乳剂
表2.3-3.09％油乳剂
得自乳剂滴径测定的物理稳定性数据列于表2.4中，且化学稳定性数据列于表2.5中。
表2.4
表2.5
总之，此实施例中所揭示的三种其它低油乳剂(1.85％、2.47％和3.09％总油含量)展现出较实施例1中所述制剂更佳的稳定性。
实施例3为证实低油乳剂相比高油乳剂(即总油含量高于10％的乳剂)的优越稳定性，将实施例1的油相与水相以不同比例加以混合得到如表3.1中所显示的含31％、15.5％和10.3％油的最终乳剂。其制备方法与实施例1中所述相同。
表3.1-高油乳剂
根据表3.1制得的最终乳剂为极浓稠、乳霜状并含有许多大液滴/颗粒。这些乳霜状乳剂无法滤过0.2-微米滤器且不可注射。将油含量成比例地提高至10％或以上，所形成的乳剂就不再可作为安全的非经肠药物输送载体。本实施例表明低油浓度对具有小滴径和良好稳定性的乳剂是必要的。
实施例4使用与实施例1中所述相同的方法，根据表4.1制得多西紫杉醇的低油(3.1％)乳剂。多西紫杉醇在酸性pH下较稳定，因此将该乳剂的pH调至pH4-7.0。其滴径和多西紫杉醇稳定性数据类似于实施例1中所示。
表4.1-3.1％多西紫杉醇的油乳剂
实施例5低油太平洋紫杉醇乳剂的长期稳定性和预测的保存期限根据实施例1制备一批(lot 20031219F12)太平洋紫杉醇低油(3.1％)乳剂，并于标准贮存条件(即遵循ICH稳定性指引)下研究其长期稳定性。实施一系列的物理和化学试验，包括太平洋紫杉醇浓度、乳剂滴径和乳剂外观。其数据如下所列表5.1低油乳剂中的太平洋紫杉醇的长期化学稳定性
结论太平洋紫杉醇的低油乳剂在2-8℃(冷藏)的贮存温度下稳定。其保存期限经推估不少于18个月。
实施例6天竺鼠的低油太平洋紫杉醇乳剂过敏症研究摘要目标此研究是评估含有太平洋紫杉醇的低油乳剂在天竺鼠体内诱发过敏症反应的潜力。
方法将如实施例1中所制备的太平洋紫杉醇的低油乳剂分两种剂量组(0.5mg/ml和0.25mg/ml)，以每两天3次经腹腔内给药0.5ml。再将各个剂量组分成两个小组(每个小组各3只)。在第一次的腹腔内给药后，将天竺鼠经静脉内给药1.0ml太平洋紫杉醇乳剂14天(小组1)或21天(小组2)，并观察其过敏症反应。
结果两种剂量的低油太平洋紫杉醇乳剂于静脉注射15分钟内均未引发天竺鼠的任何过敏反应。在相同的条件下，TaxolTM或其同类产品据报导会造成试验动物的严重过敏反应及死亡(参见TAXOLTM的“黑盒”警告标示)材料和方法。
动物天竺鼠(体重300±50g)是由实验动物研究所(Institute ofExperimental Animals)所供应。将其饲养于22±2℃的空调房间中并于研究前的一周使其自由取用标准实验室膳食和水。
化学物品和药物在本研究中使用如实施例1中制备的低油太平洋紫杉醇乳剂(lot8-2-22)。该乳剂含0.5mg/ml太平洋紫杉醇。使用注射用的0.9％NaCl溶液(500ml4.5g，Lot 03042881)作为稀释剂。蛋白蛋白质购自SIGMA Chemical，并以注射用的0.9％生理盐水溶液稀释成0.4％溶液。
过敏性研究供剂当天，以注射用的0.9％NaCl溶液将太平洋紫杉醇乳剂稀释至浓度为0.25mg/ml。将十八只天竺鼠(体重300±50g，9只雄鼠和9只雌鼠)随机分成3组(每组6只天竺鼠)。各组均经每两天3次腹腔内(IP)给予0.5ml浓度为0.5mg/ml、0.25mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂或0.4％蛋白蛋白质溶液。再将各组内的天竺鼠分成两个小组(每个小组3只天竺鼠)并于第一次经腹腔内注射太平洋紫杉醇乳剂后的第14天(小组1)或第21天(小组2)经静脉注射(IV)对接受0.5mg/ml IP组注射1.0ml浓度为0.5mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂、对接受0.25mg/ml IP组注射1.0ml浓度为0.5mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂，并对接受0.4％蛋白蛋白质IP组注射1.0ml的0.4％蛋白蛋白质溶液。
于IV注射之后15分钟内观察天竺鼠的过敏反应。若观察到两种或多种过敏征状，包括竖毛、呼吸困难、打喷嚏、呕吐、咳嗽、痉挛、虚脱和死亡，则判定过敏症反应为阳性。
结果于第一次IP注射后的第14或21天接受1ml的0.5mg/ml或0.25mg/ml太平洋紫杉醇乳剂IV注射组的天竺鼠均未观察到过敏症征状，但接受蛋白蛋白质的对照组中，所有动物均显现过敏反应，包括呼吸困难、痉挛、过敏性休克和死亡。
结论此项过敏症研究表明本文公开的含太平洋紫杉醇的低油乳剂并无过敏性，并且不会对于静脉内给予未经稀释的乳剂(0.5mg/ml太平洋紫杉醇)或经稀释的乳剂(0.25mg/ml太平洋紫杉醇)的天竺鼠造成过敏反应。
实施例7低油太平洋紫杉醇乳剂在兔子内的血管刺激潜力研究摘要使用体内的兔子耳部边缘血管模型评估如实施例1中制备的低油太平洋紫杉醇乳剂的血管刺激性。将两种剂量(0.5mg/ml和0.25mg/ml)的太平洋紫杉醇乳剂以1ml/分钟的输注速率以及8.0ml/kg的体积灌注至日本白兔的耳部边缘血管内。每日两次共输注七天。在第7天输注4和24小时后，以视觉评估白兔的受试耳朵的外观变化，再使用组织切片和电子显微镜进行血管组织的组织病理学检查。结果显示静脉内给予0.5mg/ml或0.25mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂并无血管或组织刺激现象，然而根据Bristol-myers Squibb的TaxolTM产品信息，TaxolTM据报导会造成13％患者的血管刺激。
材料和方法动物Institute of Controlled Pharmaceutical Products供应的日本白兔(体重2.3-2.9kg，认证号码syxk2004-0034)。
化学物品和药物使用如实施例1中制备的低油太平洋紫杉醇乳剂(0.5mg/mL太平洋紫杉醇，lot 03042881)。使用注射用0.9％NaCl溶液作为稀释剂。
刺激性研究将十二(12)只兔子(6M/6F)随机分成3组(每组4只2M/2F兔)。连续七天，每天两次在各只兔子的右耳边缘血管的末端注射试验物质，并且不处理左耳。第1组(高剂量)接受0.5mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂，第2组(低剂量)接受0.25mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂，且第3组(对照组)3接受0.9％氯化钠溶液。在供剂当天，以0.9％NaCl将太平洋紫杉醇乳剂稀释至0.25mg/ml的浓度。静脉内输注速率为约1ml/分钟且供剂体积为8.0ml/kg。对照组接受与其它两组相同体积的0.9％NaCl。
在第7天输注后约4小时，先在各组取两(2)只兔子以视觉检查并比较受试耳朵与另一侧耳朵及对照组的血管和周围组织。再将兔子处死；在注射位置下游1-2厘米处取得血管组织样本。将该血管组织立刻置于10％福尔马林溶液内，使用组织切片和电子显微镜进行血管的病理性评估。其它两只兔子在输注24小时后以相同的方式处理。
结果在供剂最后一天输注4或24小时的后，试验及对照组均未显现明显的耳部刺激迹象。两组之间并未观察到视觉上的差异。
代表性的组织学结果显示于图1，且其观察结果说明于下对照组样本显现正常的耳毛细血管，明显且界限清楚的内皮，无肿胀。毛细动脉内皮和内部弹性膜清晰可辨。血管周围的组织内并无肿胀或发炎细胞的渗透。低剂量组样本在第7天输注4或24小时后显示并无异常的毛细血管生长，清晰可辨的血管或动脉层，无内皮肿胀，且血管周围的组织内并无发炎细胞的渗透。高剂量组在第7天输注4或24小时后显示并无异常的毛细血管生长，无内皮肿胀，血管周围的组织内无肿胀，且无慢性发炎细胞的渗透。
结论在每日两次连续七天接受8.0ml/kg的浓度为0.5mg/ml，0.25mg/ml的低油太平洋紫杉醇乳剂的兔子组中，第7天输注4或24小时后的外观和组织学检查并未显示兔耳有血管刺激现象。
实施例8溶血评估摘要本研究的目标是分析低油太平洋紫杉醇乳剂在体外是否会造成兔子红血细胞的溶血。以0.9％NaCl将低油太平洋紫杉醇乳剂稀释至浓度为0.5mg/ml和0.25mg/ml，并再与兔子红血细胞混合。观察红血细胞的溶血和结块。结果显示太平洋紫杉醇乳剂于0.5mg/ml或0.25mg/ml的试验浓度下不会造成溶血或结块。
材料和方法动物由Institute of Controlled Pharmaceutical Products供应的日本白兔(体重2.3-2.9kg，认证号码syxk2004-0034)。
化学物品和药物使用根据实例1制备的低油太平洋紫杉醇乳剂(lot 03042881)。使用注射用0.9％NaCl溶液作为稀释剂。
1.2％红血细胞悬浮液的制备自体重2.7kg的兔子的心脏取得三十(30)毫升的血液样本，将该血液样本收集于有玻璃珠的锥形瓶内并搅拌10分钟以去除纤维蛋白原。以0.9％NaCl将剩下的样本稀释10倍，并离心收集红血细胞。以0.9％NaCl洗涤红血细胞并离心4次，直至上澄液不再为红色为止。将所收集的红血细胞悬浮于0.9％NaCl至2％(v/v)浓度。
2.药物试验样品的制备以0.9％NaCl稀释太平洋紫杉醇乳剂至浓度为0.25mg/ml。
3.溶血试验根据下列表8.1和8.2，将2％红血细胞悬浮液加至7支试管内(各2.5ml)。以不同体积的0.9％NaCl稀释该悬浮液，并将该混合物于37℃下培养半小时。将0.5mg/ml或0.25mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂加至前5支试管中。在第6支试管中加入2.5ml 0.9％NaCl作为阴性对照组并于第7支试管加入2.5ml蒸馏水作为阳性对照组。混合后，将所有试管于37℃下培养，并于15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、3小时和4小时观察溶血或结块的迹象。
若该悬浮液变红及透明，则记录为药物诱导性溶血。若悬浮液中有红棕色块状沉淀物生成，即为观察到红血细胞结块。
如果(1)该块状沉淀物于搅拌时可再均匀分散或(2)将该块状沉淀物置于载玻片上并于显微镜下观察时，可随着加入2滴0.9％NaCl而再分散至盖玻片的边缘，则将结块认定为阴性(假结块)。
结果表8.1接受浓度为0.5mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂的试管
表8.2-接受浓度为0.25mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂的试管
表8.3-接受浓度为0.5mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂的试管中的溶血观察
表8.4-接受浓度为0.25mg/ml的太平洋紫杉醇乳剂的试管中的溶血观察
注(+)表示溶血或红血细胞结块(-)表示无溶血或红血细胞结块观察7号试管红色及透明溶液，有观察到溶血。
6号试管4小时后无溶血/结块的迹象。
1-5号试管未观察到溶血的迹象，无红色或红棕色凝块，与6号试管无显著差异。
将根据上述方法进行的研究重复一次，并观察到相同的结果。
结论此结果表明低油太平洋紫杉醇乳剂在0.5mg/ml或0.25mg/ml的试验浓度的下并不造成溶血或结块。
实施例9重复供剂后的毒性摘要进行此研究以测定重复每日供剂后的小鼠对低油太平洋紫杉醇乳剂的耐受性。所测定的健康影响包括死亡率、体重和食欲(食物和水消耗量)。作为对照，TaxolTM制剂(Bedford Labs的TaxolTM类产品)中的太平洋紫杉醇产品亦使用相同的供剂方案。此研究表明低油太平洋紫杉醇乳剂的毒性显著低于TaxolTM制剂。
材料和方法动物使用5-6周大的BALB/c小鼠。
试验物质使用实例1中制备的低油太平洋紫杉醇乳剂。将该乳剂和TaxolTM类药以生理食盐水加以稀释至使所有试验组均接受同样注射体积的浓度。以生理食盐水作为阴性对照组。
处理将50只5-6周大的BALB/c型小鼠分成5组，每组均有5只雄鼠与5只雌鼠并接受下列处理第1组盐水注射第2组TaxolTM类药，20mg/kg第3组低油太平洋紫杉醇乳剂，20mg/kg第4组低油太平洋紫杉醇乳剂，26mg/kg第5组低油太平洋紫杉醇乳剂，35mg/kg经由尾部血管每天一次共给药7天。每周测定体重、食物和水消耗量两次，共计两周。每天至少对动物观察一次。
结果在雄性小鼠中，TaxolTM制剂中的20mg/kg太平洋紫杉醇会造成40％死亡率(图2)，而20或26mg/kg的低油太平洋紫杉醇乳剂在研究结束时亦无死亡率，表明乳剂制剂的毒性明显低于TaxolTM。在雌性小鼠中，20mg/kg TaxolTM制剂或26mg/kg太平洋紫杉醇乳剂均未观察到死亡率(图3)。此似乎暗示太平洋紫杉醇对雌小鼠的毒性低于对雄小鼠者。
如同其它细胞毒性药物，太平洋紫杉醇在重复供剂后会造成小鼠的体重减轻。两种制剂均导致类似的体重减轻趋势(图4和5)。然而，在雄小鼠(图4)和雌小鼠(图5)二者中，TaxolTM制剂内的20mg/kg太平洋紫杉醇所造成的体重减轻相当于26mg/kg乳剂。体重的变化对应于动物对食物和水的消耗减少。
根据死亡率和体重变化，可在重复供剂后估算出太平洋紫杉醇的最大耐受剂量(MTD)，其在乳剂制剂中为≥26mg/kg，而在TaxolTM制剂中为≤20mg/kg。
公知太平洋紫杉醇对CNS有毒，其在重复供剂后会发展出临床上的严重神经变性征状。在本研究中，观察到第2组的小鼠(20mg/kg的TaxolTM)在第8天时后脚发展出不协调性运动并失去平衡，并在第11天时后脚变成完全瘫痪。相比之下，第3组(20mg/kg的乳剂)和第4组(26mg/kg的乳剂)在第14天时观察到其后脚仅有极轻微的不协调性运动征兆。至于第5组(35mg/kg的乳剂)，在第8天后脚开始完全瘫痪。此观察结果似乎表明该乳剂制剂可降低太平洋紫杉醇的神经毒性。
结论本发明的太平洋紫杉醇的低油乳剂的毒性显著低于TaxolTM制剂。通过使用该乳剂，可增加30％以上的太平洋紫杉醇供剂而不增加毒性。这部分容许的额外剂量对癌症患者增添了显著的效果，此外还可能减少神经毒性。
所有本说明书中提到和/或列于申请数据表中的上述美国专利、美国专利申请公开、美国专利申请、外国专利、外国专利申请和非专利公开文献，均在本文中全文引入作为参考。
由前述可知，虽然为说明目的，本文描述了本发明的特定实施方案，但在不脱离本发明的精神及范围的前提下可对其作出各种修饰。因此，本发明并不受除所附权利要求书以外的任何限制。
权利要求
1.水包油型可注射乳剂，其包含(a)紫杉烷药物，其浓度至少为约0.03％重量比，(b)油成分，其浓度至多为约6％重量比，其中该油成分包含植物油，(c)磷脂成分，其浓度为约1.2％至约5％重量比，以及(d)水。
2.如权利要求1所述的可注射乳剂，其进一步包含中链三酸甘油酯，其中(i)所述油成分进一步包含中链三酸甘油酯，及(ii)所述植物油与所述中链三酸甘油酯的重量比为约9∶1至约1∶1。
3.如权利要求1所述的可注射乳剂，其中该紫杉烷药物为具有以下结构的多西紫杉醇 或具有以下结构的太平洋紫杉醇
4.如权利要求1所述的可注射乳剂，其中所述紫杉烷药物的浓度为约0.05％重量比。
5.如权利要求1所述的可注射乳剂，其中所述植物油为豆油、杏仁油、琉璃苣油、黑醋栗种子油、蓖麻油、玉米油、红花油、芝麻油、棉籽油、花生油、橄榄油、油菜籽油、可可油、棕榈油或芥花籽油。
6.如权利要求2所述的可注射乳剂，其中所述中链三酸甘油酯为Miglyol 210、Miglyol 812、Crodamol GTCC-PN或Neobees M-5油。
7.如权利要求1所述的可注射乳剂，其中所述磷脂成分包含大豆卵磷脂或蛋卵磷脂。
8.如权利要求1所述的可注射乳剂，其进一步包含稳定剂。
9.如权利要求8所述的可注射乳剂，其中所述稳定剂是甘氨酸，且所述甘氨酸的浓度为约0.1％至约2.5％重量比。
10.如权利要求8所述的可注射乳剂，其中所述稳定剂为乙二胺-四乙酸(EDTA)，且所述EDTA的浓度为约0.001％至约0.01％重量比。
11.如权利要求1所述的可注射乳剂，其进一步包含渗透性改性剂。
12.如权利要求11所述的可注射乳剂，其中所述渗透性改性剂为甘油，且所述甘油的浓度为约0.5％至约2.5％重量比。
13.如权利要求1所述的可注射乳剂，其中所述乳剂内的油滴的平均直径小于约200nm。
14.如权利要求1所述的可注射乳剂，其中在约2-8℃下贮存6个月后，所述乳剂内的油滴的平均直径增加不超过25％。
15.如权利要求1所述的可注射乳剂，其中所述紫杉烷药物为太平洋紫杉醇，且在约2-8℃的下贮存6个月后，所述乳剂内的太平洋紫杉醇浓度减少不超过10％。
16.水包油型可注射乳剂，其包含(a)浓度为约0.03％重量比或以上的紫杉烷药物，(b)浓度为约1％至约3％重量比的中链三酸甘油酯，(c)浓度为约1％至约3％重量比的豆油，(d)浓度为约1％至约5％重量比的大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，(e)浓度为约0.5-1％重量比的甘氨酸，(f)浓度为约1.5-2.5％重量比的甘油，(g)可选包含浓度为约0.005％重量比的EDTA，以及(h)水。
17.水包油型可注射乳剂，其包含(a)浓度为约0.05％重量比的多西紫杉醇，(b)浓度为约1％至约3％重量比的中链三酸甘油酯，(c)浓度为约1％至约3％重量比的豆油，(d)浓度为约1％至约5％重量比的大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，(e)浓度为约0.5-1％重量比的甘氨酸，(f)浓度为约1.5-2.5％重量比的甘油，(g)可选包含浓度为约0.005％重量比的EDTA，(h)将pH调至约3.5和7.0的氢氧化钠和/或盐酸，以及(i)水。
18.水包油型可注射乳剂，其包含(a)浓度为约0.05％重量比的太平洋紫杉醇，(b)浓度为约1％至约3％重量比的中链三酸甘油酯，(c)浓度为约1％至约3％重量比的豆油，(d)浓度为约1％至约5％重量比的大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，(e)浓度为约0.5-1％重量比的甘氨酸，(f)浓度为约1.5-2.5％重量比的甘油，(g)可选包含浓度为约0.005％重量比的EDTA，(h)将pH调至约6和7的氢氧化钠和/或盐酸，以及(i)水。
19.水包油型可注射乳剂，其包含(a)浓度为约0.05％重量比的多西紫杉醇，(b)浓度为约1％至约6％重量比的豆油，(c)浓度为约1％至约5％重量比的大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，(d)浓度为约0.5-1％重量比的甘氨酸，(e)浓度为约1.5-2.5％重量比的甘油，(f)可选包含浓度为约0.005％重量比的EDTA，(g)将pH调至约3.5和7.0的氢氧化钠和/或盐酸，以及(h)水。
20.水包油型可注射乳剂，其包含(a)浓度为约0.05％重量比的太平洋紫杉醇，(b)浓度为约1％至约6％重量比的豆油，(c)浓度为约1％至约5％重量比的大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，(d)浓度为约0.5-1％重量比的甘氨酸，(e)浓度为约1.5-2.5％重量比的甘油，(f)可选包含浓度为约0.005％重量比的EDTA，(g)将pH调至约6和7的氢氧化钠和/或盐酸，以及(h)水。
21.水包油型可注射乳剂，其包含(a)治疗剂量至多为500mg的水不溶性药物，其浓度为约0.03％重量比或以上，(b)浓度为约1％至约3％重量比的中链三酸甘油酯，(c)浓度为约1％至约3％重量比的豆油，(d)浓度为约1％至约5％重量比的大豆卵磷脂或蛋卵磷脂，(e)浓度为约0.5-1％重量比的甘氨酸，(f)浓度为约1.5-2.5％重量比的甘油，(g)可选包含浓度为约0.005％重量比的的EDTA，以及(h)水。
22.如权利要求1所述的水包油型可注射乳剂，其中所述乳剂可不经稀释直接注射，或于注射前先在水、葡萄糖溶液、生理盐水稀释剂或其它静脉内稀释剂中稀释。
23.如权利要求1所述的水包油型可注射乳剂，其中所述乳剂中药物以外的所有独立成分一般是经药物管理机构认定可安全使用于静脉内注射的成分。
24.如权利要求1-23中任一项所述的可注射乳剂，其中所述乳剂不含足以使乳剂中的油滴于冻干期间稳定的量的抗冻剂，并且不经冷冻干燥。
25.如权利要求1-24中任一项所述的可注射乳剂，其中所述乳剂不包含一种或任一种选自如下的组份脂肪族或芳香族酸类、胺类、蛋白质类、聚乙二醇连结的脂类、丙二醇、正甲基吡咯烷酮、聚乙二醇类、非离子性表面活性剂、聚乙二醇改性的磷脂酰乙醇胺类、环糊精、生育酚类、生育三烯酚类，和生育酚类及生育三烯酚类的衍生物。
26.如权利要求1-25中任一项所述的可注射乳剂，其中所述乳剂不含结晶药物颗粒或微脂体药物颗粒。
27.制备权利要求1或2所述的水包油型可注射乳剂的方法，其包括(a)形成含有适量下列成分的混合物(i)紫杉烷药物，(ii)植物油，(iii)可选包含的中链三酸甘油酯，和(iv)磷脂；以及(b)以步骤(a)的混合物和水性溶液生成水包油型乳剂。
28.如权利要求29所述的方法，其中所述紫杉烷药物为多西紫杉醇或太平洋紫杉醇。
29.如权利要求30所述的方法，其进一步包括将多西紫杉醇乳剂的pH调至约3.4至约7.0，或将太平洋紫杉醇乳剂的pH调至约6至约7。
30.如权利要求28所述的方法，其中所述可注射乳剂中紫杉烷药物的浓度约为0.05％重量比。
31.如权利要求27所述的方法，其进一步包括以高剪切力将步骤(b)的乳剂均质化，以提供平均滴径小于约200nm的乳剂。
32.如权利要求31所述的方法，其进一步包括通过过滤对平均滴径小于约200nm的乳剂进行除菌。
33.如权利要求27所述的方法，其中所述乳剂包含中链三酸甘油酯，且所述植物油与中链三酸甘油酯的比例为约9∶1至约1∶1。
34.如权利要求27所述的方法，其中所述水性溶液包含稳定剂。
35.如权利要求34所述的方法，其中所述稳定剂为甘氨酸。
36.如权利要求35所述的方法，其中所述稳定剂为EDTA。
37.如权利要求27所述的方法，其中所述水性溶液包含渗透性改性剂。
38.如权利要求37所述的方法，其中所述渗透性改性剂为甘油。
39.如权利要求27所述的方法，其中所述可注射乳剂并非高过敏性或血管刺激性。
40.如权利要求27所述的方法，其中在约2-8℃下贮存至少6个月后，所述乳剂内的油滴平均直径增加不超过25％。
41.如权利要求27所述的方法，其中在约2-8℃下贮存6个月后，所述乳剂内的紫杉烷药物浓度减少不超过10％。
42.如权利要求27所述的方法，其中步骤(a)通过如下方式进行(i)以乙醇溶解所述紫杉烷药物，(ii)将已溶解的紫杉烷药物与包含下列成分的组合物混合(1)植物油，(2)可选包含的中链三酸甘油酯，和(3)磷脂，以及(iii)去除乙醇至其残留量少于紫杉烷药物、植物油、中链三酸甘油酯和磷脂总重的10％。
43.如权利要求27所述的方法，其中步骤(b)通过将水性溶液经机械式均质化加至步骤(a)的混合物中来进行。
44.治疗癌症的方法，包括对需要治疗的个体给予医药有效量的权利要求1-26中任一项所述的乳剂。
45.如权利要求44所述的方法，其中所述水包油型乳剂经静脉内给药。
全文摘要
本发明提供可注射的紫杉烷药物或其它水不溶性药物的水包油型乳剂。本发明亦提供用以制备及使用该水包油型乳剂的方法。
文档编号A61K9/48GK101094646SQ200580032897
公开日2007年12月26日 申请日期2005年9月28日 优先权日2004年9月28日
发明者陈献 申请人:陈献