专利名称：一种医用壳聚糖敷料及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种医用壳聚糖敷料，特别是涉及一种医用壳聚糖敷料及其应用于创伤止血、抑菌及创面修复。
背景技术：
壳聚糖是一种天然高分子聚阳离子多糖，生物相容性好，无免疫原性，无毒副作用，同时具有止血、抗菌、抗感染作用，并能促进创伤愈合，易于形成凝胶和制成膜片，这些都赋予了壳聚糖用作止血敷料、抑菌敷料、创伤修复敷料的良好性能。以壳聚糖为原料制备创伤止血材料、抗菌、促进创面愈合的材料已有报道。这些研究通常是将壳聚糖制成不溶于水的膜片或海绵，进行伤口的止血等作用。但是由于壳聚糖本身止血效果有限，对于较大的出血其止血效果不太理想。又有研究者将壳聚糖与其他止血剂复合使用，提高止血效果。复合使用的止血剂多数是凝血因子或褐藻酸钠或胶原，由此制成的这些不溶于水的壳聚糖膜片或海绵与皮肤组织的贴附性差，因此仍有待于进一步提高和改善其止血效果以及与皮肤组织的贴附性。
发明内容
本发明的目的是提供一种医用壳聚糖敷料，并将其用于创伤止血、抑菌抗感染和创面修复，以弥补现有技术的上述不足。
一种医用壳聚糖敷料，其特征是它含有壳聚糖和中药提取物或壳聚糖衍生物或金属离子，所述的壳聚糖与中药提取物的重量比例为100∶1～1000，所述的中药提取物是白及多糖、青黛中的一种；所述的壳聚糖与壳聚糖衍生物的重量比例为100∶1～1000，所述的壳聚糖衍生物是羟丙基甲壳素、羟丙基壳聚糖、琥珀酰壳聚糖、琥珀酰甲壳素、羧甲基壳聚糖、羧甲基甲壳素中的一种；所述的壳聚糖与金属离子的重量比例为100∶0.01～5，所述的金属离子是钙离子、锌离子中的一种。
所述的医用壳聚糖敷料在临床创伤治疗和修复中的止血、抑菌、抗菌、促进创伤愈合中的应用。
本发明的医用壳聚糖敷料具有促进创面愈合、止血的作用，同时能够抑制细菌的生长，与创面贴敷性好，制备工艺简单，是一种具有开发前景的医用敷料。
具体实施例方式
实施例1医用壳聚糖敷料A的制备(1)白及多糖的制备称取中药白及50g，研细，按《中药现代化研究与临床应用》(主编阴健，中医古籍出版社，1995年)第(2)册第120页中“白及胶的制备”中所述的方法，制备白及多糖，得白及多糖粉6g。本实施例所述的中药白及的质量符合《中华人民共和国药典》2005年一部第67-68页“白及”项下所述的质量标准。
(2)壳聚糖白及胶液的制备称取壳聚糖粉4g，置500ml洁净烧杯中，加入1％(V/V，下同)的醋酸水溶液150ml，搅拌溶解，得壳聚糖醋酸水溶液。称取上述白及多糖粉0.5 g，置于另一100ml洁净烧杯中，加入1％的醋酸水溶液50ml，搅拌溶解，得白及多糖醋酸水溶液。将上述壳聚糖醋酸水溶液和上述白及多糖醋酸水溶液合并，搅拌均匀，得壳聚糖白及胶液。
(3)膜片状壳聚糖敷料A的制备取上述壳聚糖白及胶液60ml，平均到在两张水平放置的边长为20cm×20cm的正方形洁净玻璃板上，用玻璃棒刮平，自然干燥，得膜片状壳聚糖敷料A。
(4)海绵状壳聚糖敷料A的制备取上述壳聚糖白及胶液80ml，到入水平放置的4个规格为5cm×5cm×5mm的不锈钢托盘模具中，到满，置于-20℃冰箱中冷冻24h，置于-56℃冷冻干燥机中真空冷冻干燥48h，得海绵状壳聚糖敷料A。
(5)粉状壳聚糖敷料A的制备称取上述壳聚糖粉5g，称取上述白及多糖粉0.2g，置于研钵中研细，并混合均匀，得粉状壳聚糖敷料A。
本实施例中，壳聚糖敷料A含有壳聚糖和白及多糖，壳聚糖与白及多糖的重量比例可为100∶1～1000。白及多糖也叫做白及胶。壳聚糖敷料A可以是膜片状、海绵状和粉状。本实施例中，白及多糖可以改为青黛粉，也能达到同样的效果。
实施例2医用壳聚糖敷料B的制备(1)壳聚糖羟丙基甲壳素胶液的制备称取壳聚糖粉4.0g，置500ml洁净烧杯中，加入1％的醋酸水溶液150ml，搅拌溶解，得壳聚糖醋酸水溶液。称取羟丙基甲壳素粉1.0g，置另一100ml洁净烧杯中，加入1％的醋酸水溶液50ml，搅拌溶解，得羟丙基甲壳素醋酸水溶液。将壳聚糖醋酸水溶液和羟丙基甲壳素醋酸水溶液合并，搅拌均匀，得壳聚糖羟丙基甲壳素胶液。
(2)膜状壳聚糖敷料B的制备取上述壳聚糖羟丙基甲壳素胶液60ml，按实施例1之(3)的步骤制备膜状壳聚糖敷料B，得膜状壳聚糖敷料B。
(3)海绵状壳聚糖敷料B的制备取上述壳聚糖羟丙基甲壳素胶液80ml，按实施例1之(4)的步骤制备海绵状壳聚糖敷料B，得海绵状壳聚糖敷料B。
(4)粉状壳聚糖敷料B的制备称取上述壳聚糖粉2g，称取上述羟丙基甲壳素粉0.5g，置于研钵中研细，并混合均匀，得粉状壳聚糖敷料B。
本实施例中，壳聚糖敷料B含有壳聚糖和羟丙基甲壳素，壳聚糖与羟丙基甲壳素的重量比例可为100∶1～1000。羟丙基甲壳素还可以改为羟丙基壳聚糖、琥珀酰壳聚糖、琥珀酰甲壳素、羧甲基壳聚糖、羧甲基甲壳素中的一种，均可达到同样的效果。
实施例3医用壳聚糖敷料C的制备(1)壳聚糖锌的制备称取壳聚糖粉10g，置于250ml洁净烧杯中，加入去离子水150ml，搅拌悬浮，搅拌下缓慢加入0.2g醋酸锌，室温下搅拌30min，过滤，得固形物I。将固形物I用150ml去离子水洗涤3次，每次20分钟，过滤，得固形物II。将固形物II于60～70℃干燥，得壳聚糖锌粉。
(2)粉状壳聚糖敷料C的制备称取上述壳聚糖锌粉4g，置研钵中，研细，得粉状壳聚糖敷料C。
(3)膜状壳聚糖敷料C的制备称取上述壳聚糖锌粉2g，置250ml烧杯中，加入2％的醋酸水溶液100ml，搅拌溶解，得壳聚糖锌胶体溶液，按实施例1之(3)的步骤制备膜状壳聚糖敷料C，得膜状壳聚糖敷料C。
(4)海绵状壳聚糖敷料C的制备称取上述壳聚糖锌粉2g，置250ml烧杯中，加入2％的醋酸水溶液100ml，搅拌溶解，得壳聚糖锌胶体溶液，按实施例1之(4)的步骤制备海绵状壳聚糖敷料C，得海绵状壳聚糖敷料C。
本实施例中，所用醋酸锌可以改为氯化锌、硝酸锌、葡萄糖酸锌、乳酸锌中的一种，均能到达同样的效果。壳聚糖敷料C含有壳聚糖和锌，壳聚糖与锌的重量比例可为100∶0.01～5。
按实施例3的方法，使用氯化钙、葡萄糖酸钙、乳酸钙中的一种，制备壳聚糖钙，再使用壳聚糖钙制备壳聚糖敷料，该壳聚糖敷料中壳聚糖与钙的重量比例可为100∶0.01～5，均能达到同样的效果。
将实施例1至实施例3中制备的壳聚糖敷料A、壳聚糖敷料B、壳聚糖敷料C经高压蒸汽灭菌或60Co辐照灭菌或环氧乙烷熏蒸灭菌，均能得到无菌壳聚糖敷料。
实施例4 壳聚糖敷料对大白鼠的止血和伤口愈合的影响试验采用Wistar大白鼠作为试验动物，大白鼠40只，雌雄兼半，体重250g±20。试验分4组棉纱布对照组、壳聚糖敷料A试验组、壳聚糖敷料B试验组、壳聚糖敷料C试验组，每组10只。分别以30mg/Kg体重腹腔注射2％(重量百分比，下同)戊巴比妥钠麻醉，将大白鼠背部朝上固定在手术架上，用剃须刀片将背部剃去1cm×2cm面积的毛发，并用新洁尔灭棉球进行皮肤消毒。用消毒的刀片在背部去毛部位做1.5cm长、2mm深的切口，有血流出。各试验组进行下列处理(1)棉纱布对照组大鼠切口暴露；(2)壳聚糖敷料A试验组大鼠在切口处贴敷1cm×2cm的无菌膜状壳聚糖敷料A；(3)壳聚糖敷料B试验组大鼠在切口处贴敷1cm×2cm的无菌膜状壳聚糖敷料B；(4)壳聚糖敷料C试验组大鼠在切口处贴敷1cm×2cm的无菌膜状壳聚糖敷料C。手术中观察每只大鼠创面出血情况，记录凝血时间，以评价壳聚糖敷料对手术刀口创伤的止血效果。术后各组大鼠均用无菌纱布包扎，正常饲养，每天观察大鼠刀口愈合情况，以评价壳聚糖敷料对大鼠伤口愈合的影响。结果列于下表
以上试验结果证明，壳聚糖敷料的止血效果和促进伤口愈合效果明显优于棉纱布，因此壳聚糖敷料作为一种新型止血敷料或伤口愈合敷料进行开发，前景广阔。
实施例5 壳聚糖敷料的抗菌试验(1)无菌营养琼脂培养基和无菌双倍营养琼脂培养基的制备按《中华人民共和国药典》2005年版二部(国家药典委员会编)附录XIH无菌检查法项下的培养基的制备(附录89-附录90)中所述的方法，按比例配制营养琼脂培养基150ml置于带棉塞的500ml三角瓶中。再按该方法，按比例将其中的水减少一半，分别配制双倍营养琼脂培养基75ml3份；分别置于3个带棉塞的500ml三角瓶中。营养琼脂培养基和双倍营养琼脂培养基均于121℃下压力蒸汽灭菌25分钟，得无菌营养琼脂培养基和无菌双倍营养琼脂培养基。
(2)无菌条件下分别称取无菌壳聚糖敷料A粉剂0.75g、无菌壳聚糖敷料B粉剂0.75g、无菌壳聚糖敷料C粉剂0.75g，分别放置在150ml无菌带棉塞的三角瓶中，各加入无菌蒸馏水75ml，分别配制成75ml 1％(重量百分比，下同)的壳聚糖敷料A溶液、75ml 1％的壳聚糖敷料B溶液、75ml 1％的壳聚糖敷料C溶液，置于45℃恒温水浴中备用。
(3)分别取长有大肠杆菌的斜面1支、长有金黄葡萄球菌的斜面1支，无菌条件下分别用5ml无菌生理盐水洗下菌苔，置带盖的试管中。分别取15mm×150mm规格的带盖试管，用生理盐水分别将大肠杆菌和金黄葡萄球菌稀释至10-7，备用。
(4)将无菌营养琼脂培养基加热至溶化，倒6个平板，冷却至凝固。将3份双倍营养琼脂加热至溶化，分别与75ml 1％的壳聚糖敷料A溶液、75ml 1％的壳聚糖敷料B溶液、75ml 1％的壳聚糖敷料C溶液混合均匀，分别到6个平板，冷却至凝固，分别得6个壳聚糖敷料A营养琼脂平板、6个壳聚糖敷料B营养琼脂平板、6个壳聚糖敷料C营养琼脂平板。
(5)分别取10-5、10-6、10-7三个稀释度的大肠杆菌生理盐水悬浮液各0.2ml、金黄葡萄球菌生理盐水悬浮液各0.2ml，分别涂布于相应平板上，实验方法见下表。
将全部平板置35℃恒温培养箱中培养48h后，观察大肠杆菌和金黄葡萄糖球菌的生长情况。实验结果表明，3个涂布有大肠杆菌的营养琼脂平板长满了大肠杆菌，3个涂布有金黄葡萄球菌的营养琼脂平板长满了金黄葡萄球菌，而所有壳聚糖敷料A营养琼脂平板、壳聚糖敷料B营养琼脂平板、壳聚糖敷料C营养琼脂平板均无菌落生长。实验结果表明，壳聚糖敷料A、壳聚糖敷料B、壳聚糖敷料C具有抑制细菌生长的作用。
权利要求
1.一种医用壳聚糖敷料，其特征是它含有壳聚糖和中药提取物或壳聚糖衍生物或金属离子，所述的壳聚糖与中药提取物的重量比例为100∶1～1000，所述的中药提取物是白及多糖、青黛中的一种；所述的壳聚糖与壳聚糖衍生物的重量比例为100∶1～1000，所述的壳聚糖衍生物是羟丙基甲壳素、羟丙基壳聚糖、琥珀酰壳聚糖、琥珀酰甲壳素、羧甲基壳聚糖、羧甲基甲壳素中的一种；所述的壳聚糖与金属离子的重量比例为100∶0.01～5，所述的金属离子是钙离子、锌离子中的一种。
2.如权利要求1所述的医用壳聚糖敷料，其特征是所述的敷料是粉状、膜状或海绵状。
3.权利要求1所述的医用壳聚糖敷料在临床创伤治疗和修复中的止血、抑菌、抗菌、促进面愈合中的应用。
4.如权利要求4所述的应用，其特征是所述的创面为腹腔手术、胸腔手术、骨科手术、妇科手术、口腔科手术创面和皮肤溃疡、皮肤烧伤、皮肤烫伤、皮肤机械伤创面。
全文摘要
一种医用壳聚糖敷料，其特征是它含有壳聚糖和中药提取物或壳聚糖衍生物或金属离子，所述的壳聚糖与中药提取物的重量比例为100∶1～1000，所述的中药提取物是白及多糖、青黛中的一种；所述的壳聚糖衍生物是羟丙基甲壳素、羟丙基壳聚糖、琥珀酰壳聚糖、琥珀酰甲壳素、羧甲基壳聚糖、羧甲基甲壳素中的一种；所述的壳聚糖与壳聚糖衍生物的重量比例为100∶1～1000；所述的壳聚糖与金属离子的重量比例为100∶0.01～5。本发明的医用壳聚糖敷料具有促进创面愈合、止血的作用，同时能够抑制细菌的生长，与创面贴敷性好，制备工艺简单，是一种具有开发前景的医用敷料。
文档编号A61L15/26GK1887358SQ20061004544
公开日2007年1月3日 申请日期2006年7月14日 优先权日2006年7月14日
发明者顾其胜, 刘万顺, 韩宝芹 申请人:青岛博益特生物材料有限公司