专利名称：用于由局部缺血或局部缺血再灌注引起的心功能障碍或心肌损伤的预防或治疗剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及6-氟-2'，5'-二氧螺[苯并二氢吡喃-4,4'-咪唑烷-2-氨甲酰的新医药用途。
背景技术：
已知作为由局部缺血或局部缺血再灌注引起的疾病，特别是由急 性冠状动脉综合征引起的心脏病和心脏死亡如心肌梗塞和心绞痛，其 在许多情况中具有预后不良。这些疾病的药物治疗限于血压控制和血 液动力学的控制或维持，如血栓溶解，并且不存在用于保护心脏或心 肌的基础治疗剂。在日本，冠状动脉病(coronary aretery disease)的数量逐年递 增，且我们国家局部缺血性心脏病手术病例的数量在2000年已经超过 了 20000例。作为用于局部缺血性心脏病的冠状动脉重建术的方法， 已实施内部疗法的经皮穿过(血管)腔壁的冠状动脉成形术(PTCA)和 通过外科手术的冠状动脉旁路移植术(CABG)。其目的是防止发展成 心肌梗塞和突发性心脏死亡，和提高生命预后。据说通过PTCA的再 灌注治疗是有效的，但是在许多病例的早期呈现出再狭窄和再梗塞。 当病态导致末期局部缺血性心肌病时，采用心脏移植，但是在我们国 家，移植的应用非常困难，并且心脏移植中捐献者的缺乏在全球水平 上都是严重的问题。作为目前的药物治疗，己经尝试给药抗高血压药如钙阻断剂和血 管紧张素受体阻断剂，或高脂血症药如HMG-CoA还原酶抑制剂，其 是用于引起局部缺血性心脏病的高血压、高脂血或动脉粥样硬化的治 疗剂，来防止冠状动脉狭窄和梗塞。然而，目前没有发现这些药物治 疗的可靠有效性。此外，当病态导致心力衰竭时，据说强心剂是有效 的，但是提高了心肌的工作负荷，并且效果是暂时的。因此，当急性
心肌梗塞或心律不齐导致急性冠状动脉综合征时，不存在有效的治疗 剂，并且除了早期再灌注的进行，通过保护心肌的药物治疗的干预是 必要的。然而，在早期再灌注的进行中，在局部缺血持续和心肌细胞 损伤变得明显时进行再灌注的情况中，没有修复心肌损伤，而在一些 情况中却恶化了 (再灌注心肌损伤)。为此，相当关注怎样防止局部缺 血或局部缺血再灌注损伤的问题。作为心肌局部缺血或局部缺血再灌注损伤产生的发病机理，之前已经广泛提出了胞内ATP缺乏理论、Ca 超负荷理论和自由基理论。此外，在用于心脏瓣膜疾病的瓣膜替换术或瓣膜成形术中，或在 先天性心脏异常(室间隔缺损、房间隔缺损、肺动脉狭窄等)的治疗 中，进行使用人造心脏和肺的体外循环的心脏直视手术。因为心肌在 该心脏直视手术过程中是氧缺乏状态，因此限制手术时间以防止心肌 坏死。此外，因为在心脏直视手术后(局部缺血再灌注损伤)由心脏 直视手术负荷或再灌注损伤产生的严重心律不齐或心脏收縮功能降低 (心力衰竭状态)，给予抗心律不齐药或强心剂是必要的，并且重症监 护室中严格监控的必要性变成心脏直视手术中的大问题。最近，报道了是醛糖还原酶抑制剂的唑泊司他(zopolrestat)改 善了糖尿病性心肌病变患者心功效(Johnson BF: Diabetes Care 27， 448， 2004)。然而，此后，由于诸如肝功能紊乱的副作用的呈现，己 经停止了唑泊司他的药物研发。另一方面，本申请公司发现^2S，4S)-^氟-2'，5'-二氧與苯并二ft 吡喃-4，4'-咪唑烷]-2-氨甲酰(俗称非达司他(fidarestat),生产编号 SNK-860)已开发作为具有强烈醛糖还原酶抑制活性和即使长期服用 时具有高安全性的化合物，目前，全世界进行作为用于糖尿病性神经 病变的治疗剂的临床测试。关于非达司他，日本专利申请公开(JP-A) No.61-200991中描述了在糖尿病性神经病变中的用途，JP-ANo.6-135968中描述了在各种 伴随老化的疾病中的用途，JP-ANo.7-242547中描述了在单纯型糖尿 病视网膜病变中的用途，以及JP-ANo.8-231549中描述了在糖尿病角 膜病变中的用途。此外，关于具有相似结构的乙内酰脲衍生物，JP-A No.4-173791中描述了在循环疾病中的用途，但是在Journal of Technical Disclosure 2006-500058中报道的，非达司他不具有这种药 理学功效。专利文献1: JP-ANo.61-200991专利文献2: JP-ANo.6-135968专利文献3: JP-A No.7-242547专利文献4: JP-ANo.8-231549专利文献5: JP-ANo.4-173791非专禾U文献1: Johnson BF: Diabetes Care 27， 448， 2004 非专利文献2: Journal of Technical Disclosure 2006-500058发明内容本发明待解决的问题如上所述，对于局部缺血或局部缺血再灌注引起的心功能障碍或 心肌损伤，医学领域迫切寻求建立具有高度有效性和安全性的疗法。 特别地，从内部治疗和外科手术治疗的安全性观点看，目前迫切寻求 可以长期服用而具有高度安全性的治疗剂的出现。鉴于这样的背景进 行了本发明，其目的是提供用于由局部缺血或局部缺血再灌注引起的 心功能障碍或心肌损伤的预防或治疗剂，其通过不同于现有疗法的机 理呈现出有效性并可以长期服用。解决何题的方式于是，本发明者使用常用的心脏局部缺血再灌注失调模型评价了 (2S,4S)-6-氟-2',5'-二氧螺[苯并二氢吡喃-4,4'-咪唑垸-2-氨甲酰(俗称 非达司他)。结果，发现药物对于由局部缺血或局部缺血再灌注引起的 心功能障碍或心肌损伤是有效的。即，本发明是用于由局部缺血或局 部缺血再灌注引起的心功能障碍或心肌损伤的预防或治疗剂，含有6-氟-2',5'-二氧螺[苯并二氢吡喃-4，4'-咪唑烷]-2-氨甲酰(包括外消旋物) 作为活性成分。由局部缺血或局部缺血再灌注引起的心功能障碍或心肌损伤是心 脏中的局部缺血或局部缺血再灌注。特别地，实例包括再灌注心律不 齐、心脏病或心脏死亡。将这些归类为由急性冠状动脉综合征引起的
那些，如不稳定性心绞痛和心肌梗塞，由用于治疗其的经皮穿过(血管)腔壁的冠状动脉成形术(PTCA)引起的那些，由借助人造心脏和肺的 体外循环下心肌的局部缺血再灌注损伤引起的那些，和心脏直视手术 如没有使用人造心脏和肺的冠状动脉旁路移植术引起的那些。发明效果本发明的用于由局部缺血或局部缺血再灌注引起的心功能障碍或 心肌损伤的预防或治疗剂具有与其他AR抑制剂相比较以较低的剂量 而呈现显著效果的特征，并且不具有安全性的问题。即，本发明提供 了用于由局部缺血或局部缺血再灌注引起的心功能障碍或心肌损伤的 预防或治疗剂，其可以长期服用。
图1显示了实验方案。图2显示了野生型小鼠中AR抑制剂对LVEDP增加的作用。 图3显示了野生型小鼠中AR抑制剂对+dP/dt max降低的作用。 图4显示了野生型小鼠中AR抑制剂对心肌细胞的CK释放的作用。图5显示了 hAR-TG小鼠中AR抑制剂对LVEDP增加的作用。 图6显示了 hAR-TG小鼠中AR抑制剂对+dP/dt max降低的作用。 图7显示了 hAR-TG小鼠中AR抑制规对心肌细胞的CK释放的 作用。图8显示了 hAR-TG小鼠中AR抑制剂对心肌ATP含量的作用。
具体实施方式
以下将更详细地解释本发明。本发明的化合物可以口服，例如，作为片剂、胶囊、粉末、颗粒、 液体或糖浆，或可以非肠道给药，作为注射剂或栓剂，其通过常规制 药技术来形成。对于药物制造，在固体制剂的情况中，可以使用药物 学上可接受的赋形剂，如淀粉、乳糖、精制白糖、葡萄糖、结晶纤维 素、羧基纤维素、羧甲基纤维素、羧乙基纤维素、磷酸钙、硬脂酸镁、 阿拉伯树胶等，如果需要，可以掺入润滑剂、粘合剂、崩解剂、涂层 剂、着色剂等。此外，在液体制剂的情况中，可以使用稳定剂、增溶 剂、悬浮剂、乳化剂、缓冲液、防腐剂等。剂量将根据症状、年龄、 给药方法、剂型等而不同，并且在正常情况中，就本发明的化合物而言，优选将制剂以1至200mg每天给药于成人，优选1至100mg每 天，连续几天， 一天一次或几次。实施例在本发明中，不仅使用野生型小鼠，而且使用制备的用于在小鼠 中遗传地过表达人类型AR的人AR转基因小鼠(hAR-TG)来预测在 人类中的有效性，其对于这样治疗剂的研发是重要的。作为与SNK-860 比较的对照，使用依帕司他(epalrestat)和唑泊司他。1.药理学测试的材料和方法在实验测试中，使用7至9周大的野生型小鼠(BDF-1 )和hAR-TG 的心脏。从这些小鼠，在腹腔注射50mg/kg戊巴比妥的麻醉下分离心 脏，并置于冰冷盐水中。使用Langendorff装置(Model IH-1 Type 844， HUGO SACHS ELEKTRONIK，德国)在70mmHg的灌注压下对分 离的心脏灌注20分钟，并使其稳定。此后，在心功能测量下灌注30 分钟后，将灌注溶液完全停止30分钟，并进行再灌注60分钟，因此， 进行局部缺血-局部缺血再灌注负荷。作为灌注瘠液，使用含有5.55mM 葡萄糖和2mM丙酮酸钠的Krebs-Henseleit (KH)缓冲液。通过左心 室舒张末期压(LVEDP)和左心室收縮压的峰一阶导数(+dP/dt max) 来测定心功效。使用连接插入左心室的气囊的压力传感器在3伏、420 搏动/分钟的心脏起博的条件下测量这些，电极置于右心室顶部上，并 使用四通道记录装置(OMUNIACE RT-3300， NEC，日本)计算其数 据。从全部局部缺血开始之前15分钟将AR抑制剂加入灌注溶液中持 续10分钟，如图1中所示的。将每种抑制剂(1nMSNK-860: SNK， 1-10jjM唑泊司他ZOP， 10|jM依帕司他EPA)溶解于DMSO中， 并将灌注溶液中的DMSO终浓度调节至0.05%。还将相同浓度的 DMSO加入对照实验的灌注溶液中。分别使用60分钟再灌注的总肌酸
酐激酶(CK)释放指数来测定心肌损伤，并通过生物发光方法(Sigma-Aldrich， St. Louis, MO)使用荧光素酶测定60分钟再灌注 后的心肌ATP含量。对于hAR-TG小鼠，将同窝出生仔畜(LM: hAR非-表达小鼠)用作没有使用药物治疗的对照小鼠。2. 结果(i) 对野生型小鼠的作用 在使用野生型小鼠的实验研究中，局部缺血-局部缺血再灌注后公认的分离心脏的对照中左心室舒张末期压(LVEDP)的显著增加在1ijM SNK-860或1pM唑泊司他添加组中分离的心脏中显著提高(图2)。再灌注后不久左心室收縮压(+dP/dt max)的峰一阶导数的降低 在三种AR抑制剂的任何添加组中显著提高，在1|JM SNK-860-添加组 中观察到最显著的作用(图3)。关于心肌细胞ck的释放，在10ijM依柏司他和1ijM snk-860-添加组中观察到显著降低，但是在1[JM唑泊司他添加组中没有观察到 作用(图4)。(ii) 对hAR-TG小鼠的作用。如图5至8中所示的，在hAR-TG (TG)小鼠中，再灌注中观察 到的心功效的降低(LVEDP增加，+dP/dt max降低)、CK释放进入 灌注溶液中的和心肌ATP含量降低与LM相比较各自显著加剧。 hAR-TG心脏中的AR活性显示出约是LM的活性的1.7倍。在hAR-TG (TG)中，关于LVEDP的增加和+dP/dt max的降低， 在1ijMSNK-860、 10|jM唑泊司他或10|jM依帕司他添加组中观察到 显著改善(图5、 6)。另一方面中，关于CK释放进入灌注溶液中的和 心肌ATP含量的降低，在10ijM唑泊司他添加组中没有观察到显著改 善，而在1mM SNK-860添加组中，观察到等于10ijM依帕司他添加 组的改善效果(图7、 8)。3. 结论这些结果显示出SNK-860完全抑制了由于非糖尿病状态中也存在 的心脏中的局部缺血再灌注损伤引起的心功效恶化和心肌损坏。此外， 尽管在高浓度的其他AR抑制剂如唑泊司他和依帕司他中只观察到部 分作用，SNK-860显示出在较低浓度的完美效果，并且关于作用强度 也非常好。
权利要求
1.用于由局部缺血或局部缺血再灌注引起的心功能障碍或心肌损伤的预防或治疗剂，其含有作为活性成分的6-氟-2’，5’-二氧螺[苯并二氢吡喃-4，4’-咪唑烷]-2-氨甲酰。
2. 根据权利要求1的预防或治疗剂，其中由局部缺血或局部缺血 再灌注引起的心功能障碍或心肌损伤是再灌注心律不齐、心脏病或心 脏死亡。
3. 根据权利要求1的预防或治疗剂，其中由局部缺血或局部缺血 灌注引起的心功能障碍或心肌损伤是由急性冠状动脉综合征如不稳定 性心绞痛和心肌梗塞引起的，或由用于其治疗的经皮穿过(血管)腔壁的 冠状动脉成形术(PTCA)引起的。
4. 根据权利要求1的预防或治疗剂，其中由局部缺血或局部缺血 灌注引起的心功能障碍或心肌损伤是由人造心脏和肺的体外循环中的 心肌局部缺血再灌注损伤引起的，或由心脏直视手术如没有使用人造 心脏和肺的冠状动脉旁路移植术引起的。
5. 根据权利要求1至4任意一项的预防或治疗剂，其中化合物是 (2S，4S)-6-氟-2',5'二氧螺[苯并二氢吡喃-4，4'-咪唑烷]-2-氨甲酰(俗名非达司他)。
全文摘要
本发明的目的是提供用于由局部缺血或局部缺血再灌注引起的心功能障碍或心肌损伤的预防或治疗剂，其通过不同于现有治疗的机理呈现出有效性，并可以长期服用。本发明是用于由局部缺血或局部缺血再灌注引起的心功能障碍或心肌损伤的预防或治疗剂，其含有6-氟-2’，5’-二氧螺[苯并二氢吡喃-4，4’-咪唑烷]-2-氨甲酰作为活性物质，特别地，含有非达司他作为活性物质。由局部缺血或局部缺血再灌注引起的心功能障碍或心肌损伤的实例包括再灌注心律不齐、心脏病、心脏死亡等。
文档编号A61P9/00GK101128197SQ200680005700
公开日2008年2月20日 申请日期2006年2月21日 优先权日2005年2月22日
发明者岩田和实, 矢部千寻 申请人:株式会社三和化学研究所;矢部千寻