专利名称：菝葜皂苷元在预防和治疗抑郁症药物中的新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，确切的说是菝葜皂苷元在预防和治疗抑郁症药物中的新用途。
背景技术：
抑郁症属情感障碍性疾病，其发病率逐年上升，严重危害人类的身心健康。目前，抑郁症的治疗仍以药物治疗为主，但是目前的抗抑郁药普遍存在有效率低，易复发的问题，且副作用多。因此，从天然植物中寻找、研制理想的抗抑郁药物，愈来愈引起国际的关注。
菝葜皂苷元(Sarsasapogenin)，又称知母皂苷元，为甾体皂苷类化合物，是中药知母的主要活性成分，具有改善学习记忆、降低血糖、抑制血小板聚集、促进神经前体细胞再生、抗氧化等多方面的药理作用。目前主要用于阿尔茨海默病和阿尔茨海默性老年痴呆的治疗。如中国专利号99806042.9公开的一种名称为“用于治疗阿尔茨海默病的异菝葜皂苷元和anzurogenin-D”的发明专利，申请人为英国植物药物公共有限公司。中国专利号93112451.4公开了一种名称为“对β肾上腺素受体和M胆碱受体有双向调节作用的药物及其制法”的发明专利，公开了菝葜皂苷元的制备方法及对受体的调节作用。
发明内容
本发明的目的是提供菝葜皂苷元在预防和治疗抑郁症药物中的新用途，它具有毒性小的特点，并且对抑郁症继发的学习记忆下降、免疫力降低等症状有明显的缓解作用。菝葜皂苷元及其药学上可接受的盐、酯或与糖所成的苷等，或以其作为活性成分组成的药用组合物等用于制备预防或治疗包括内源性抑郁症，反应性抑郁症，隐匿性抑郁症，药物引起的继发性抑郁症，更年期或产后抑郁症，脑外伤或脑卒中诱发的抑郁症以及抑郁性神经症等在内的各种抑郁症状的药物中的应用，以及用于制备预防和治疗抑郁症引起的继发性的学习记忆下降，快感缺乏，免疫功能低下以及性功能减退等症状的药物中的应用，其中所述病体为哺乳动物，菝葜皂苷元的有效剂量范围为0.02-200mg/kg。
具体实施例方式
下面的动物实验是对本发明的进一步详细说明，但并不意味着对本发明的任何限制。
1.对行为绝望的影响实验动物采用雄性昆明种小鼠，自由摄食饮水，体重20-24克。
菝葜皂苷元混悬于0.5％羧甲基纤维素钠中，灌胃给药14天，每天一次。
动物随机分组，每组12只。末次给药后1h将动物放入水深10cm的玻璃缸内(25cm高，10cm直径)，水温24℃。观察6min，记录比较各组后4min内的不动时间。
试验结果用平均值±标准差表示，以t检验统计处理。小鼠强迫游泳实验是经典的行为绝望模型，可以模拟人类的抑郁状态，广泛应用于抗抑郁药的临床前评价。结果如表1所示，与溶媒对照组相比，菝葜皂苷元(30、90mg/kg)可显著缩短强迫游泳实验中小鼠的不动时间，且呈现一定的量效关系。
表1菝葜皂苷元对小鼠强迫游泳不动时间的影响
与溶媒对照组比较**P＜0.01，*P＜0.052.对药物诱导抑郁状态的影响实验动物采用雄性昆明种小鼠，自由摄食饮水，体重20-24克。
菝葜皂苷元混悬于0.5％羧甲基纤维素钠中，灌胃给药14天，每天一次。
动物随机分组，每组12只。末次给药后1h，测定小鼠直肠1.5～2cm处温度，然后腹腔给予利血平(2.5mg/kg)，测定在给予利血平4h后的直肠温度，计算两次体温的差值。实验中保持室温恒定在(22±1)℃。
试验结果用平均值±标准差表示，以t检验统计处理。
利血平能使囊泡对单胺类递质的再摄取能力丧失进而被单胺氧化酶代谢，造成大脑和外周递质耗竭，进而引发很多异常的生理和行为反应，例如体温下降。结果如表2所示，与溶媒对照组相比，菝葜皂苷元(30、90mg/kg)可显著缩短减少利血平诱导的体温下降，且呈现一定的量效关系，证明其可以对抗药物诱导的抑郁状态。
表2菝葜皂苷元对利血平诱导的小鼠体温下降的影响
与溶媒对照组比较**P＜0.01，*P＜0.053.对雌激素撤除诱导抑郁状态的影响实验动物采用雌性昆明种小鼠，自由摄食饮水，体重20-24克。
菝葜皂苷元混悬于0.5％羧甲基纤维素钠中，灌胃给药14天，每天一次。
动物随机分为空白对照组、卵巢摘除+溶媒对照组以及卵巢摘除+药物治疗组，每组12只。
动物行双侧卵巢摘除术后第二天开始给药，末次给药后1h将动物放入水深10cm的玻璃缸内(25cm高，10cm直径)，水温24℃。观察6min，记录比较各组后4min内的不动时间。
试验结果用平均值±标准差表示，以t检验统计处理。
很多临床证据表明产后以及更年期易产生抑郁状态，这是由于产后以及更年期雌激素水平降低，因此我们利用雌性动物卵巢摘除与强迫游泳实验相结合来建立产后抑郁症及更年期抑郁症的动物模型。结果如表3所示，与空白对照组相比，去卵巢动物的游泳不动时间明显增加，提示抑郁模型建立成功。菝葜皂苷元(10、30、90mg/kg)可逆转卵巢摘除诱导的不动时间增加，缩短不动时间，且呈现一定的量效关系。
表3 菝葜皂苷元雌激素撤除诱导抑郁状态的影响
与空白对照组比较#P＜0.05；与卵巢摘除+溶媒对照组比较**P＜0.01，*P＜0.054.对脑缺血再灌注诱导抑郁状态的影响实验动物采用雄性昆明种小鼠，自由摄食饮水，体重20-24克。
菝葜皂苷元混悬于0.5％羧甲基纤维素钠中，灌胃给药14天，每天一次。
动物随机分为空白对照组、缺血再灌+溶媒对照组以及缺血再灌+药物治疗组，每组12只。
将动物麻醉，经颈正中切口，分离双侧颈动脉并套以“0”号丝线，将双侧颈动脉同时结扎阻断并确定无血流通过后，30min后切断丝线灌流10min，再次阻断30min后，放开线，使血流再通。阻断的同时，在距尾尖1.5cm处剪断放血，放血量小于体重的6％，以造成全脑低灌流，放血后热凝止血。
动物行缺血再灌术后第二天开始给药，末次给药后1h将动物放入水深10cm的玻璃缸内(25cm高，10cm直径)，水温24℃。观察6min，记录比较各组后4min内的不动时间。
试验结果用平均值±标准差表示，以t检验统计处理。
经大量的临床观察，已公认抑郁是脑中风后最常见的并发症之一，可极大阻碍肢体功能的康复，已成为近年来较为热门的研究课题。本实验利用脑缺血再灌注模拟卒中状态，并结合强迫游泳实验建立卒中后诱发的抑郁症模型。结果如表4所示，与空白对照组相比，缺血再灌动物的游泳不动时间明显增加，提示卒中诱导的抑郁模型建立成功。菝葜皂苷元(30、90mg/kg)可逆转缺血再灌诱导的不动时间增加，缩短不动时间，且呈现一定的量效关系。
表4 菝葜皂苷元对脑缺血再灌注诱导抑郁状态的影响
与空白对照组比较##P＜0.05；与缺血再灌+溶媒对照组比较**P＜0.01，*P＜0.055.对抑郁症继发的快感缺乏、学习记忆下降、免疫力低下的影响实验动物采用雄性昆明种小鼠，自由摄食饮水，体重20-24克。
菝葜皂苷元混悬于0.5％羧甲基纤维素钠中，自造模第15天起灌胃给药14天，每天一次。
动物随机分为空白对照组、慢性应激+溶媒对照组以及慢性应激+药物治疗组，每组12只。
小鼠(空白对照组除外)每天随机给予不同的应激刺激，包括高速水平震荡1min、禁食12h、禁水12h、夹尾1min、45℃热刺激5min、4℃冷刺激5min、悬吊5min、昼夜颠倒、45°倾斜饲养12h、潮湿饲养12h，平均每种刺激各3次。在末次给药后测定动物自蔗糖水消耗量、学习记忆能力以及免疫功能。
学习记忆能力测定采用避暗法。本试验在暗室内进行，避暗箱的明室上方20cm处安置40W的灯泡，试验时将灯打开，暗室底部的铜栅通以交流电。给药第14天，将小鼠面部背向洞口放入明室，小鼠一进入暗室立即关上洞门，电击1s(40V)后将动物取出，该实验为训练过程。24h后重做此实验，记录各鼠自放入明室至进入暗室遇到电击所需的时间(潜伏期)。
免疫功能测定采用小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的测定。于末次给药后尾静脉注射印度墨汁，在注射后2分钟和8分钟分别用肝素处理过的毛细管刺入眼内眦取血20μl，加至含0.1％Na2CO3液作为空白对照。末次取血后，处死小鼠，取肝脏和脾脏，分别称重记录。并以下列公式计算清除速度和吞噬指数。
清除速度＝(1gOD1-1gOD2)/(t2-t1)吞噬指数＝体重/(肝重+脾重)×3K1/2试验结果用平均值±标准差表示，以t检验统计处理。
大量的临床观察显示，长期应激和抑郁症都能导致快感缺乏、学习记忆能力下降以及免疫功能减退。慢性温和应激模型是公认的目前最接近临床抑郁状态的动物模型，本文建立慢性温和应激模型，考察菝葜皂苷元对模型动物上述指标的影响。结果如表5-7所示，慢性温和应激导致快感缺乏、学习记忆能力下降以及免疫功能减退，给予菝葜皂苷元治疗后动物状态显著好转，蔗糖水消耗量增加，学习记忆损伤有所改善，单核巨噬细胞吞噬功能有所增强。
以上实验证明菝葜皂苷元具有明显的对抗各种病因诱发的抑郁症的作用，并且显著改善了抑郁症继发的快感缺乏、记忆力下降以及免疫功能低下，因而，可用于制备预防和治疗抗抑郁的药物以及抗抑郁症继发疾病的药物。
表4 菝葜皂苷元对脑缺血再灌注诱导抑郁状态的影响
与空白对照组比较##P＜0.05；与缺血再灌+溶媒对照组比较**P＜0.01，*P＜0.05表5 菝葜皂苷元对抑郁症继发的快感缺乏的影响
与空白对照组比较##P＜0.05；与慢性应激+溶媒对照组比较**P＜0.01表6 菝葜皂苷元对抑郁症继发的记忆力下降的影响
与空白对照组比较##P＜0.05；与慢性应激+溶媒对照组比较**P＜0.01，*P＜0.05表7 菝葜皂苷元对抑郁症继发的免疫力低下的影响
与空白对照组比较##P＜0.05；与慢性应激+溶媒对照组比较**P＜0.01，*P＜0.05。
权利要求
1.菝葜皂苷元在预防和治疗抑郁症药物中的新用途，其特征在于菝葜皂苷元可在制备抗抑郁药物中应用。
2.根据权利要求1所述的菝葜皂苷元在预防和治疗抑郁症药物中的新用途，其特征在于菝葜皂苷元及其药学上可接受的盐、酯或与糖所成的苷等用于制备预防和治疗抑郁状态的药物中应用。
3.根据权利要求1所述的菝葜皂苷元在预防和治疗抑郁症药物中的新用途，其特征在于含菝葜皂苷元及其药学上可接受的盐、酯或与糖所成的苷等的药物组合物，包括与药用载体组合，用于制备预防和治疗抑郁状态的药物中应用。
4.根据权利要求1-3所述的任一药物或药物组合物在预防和治疗抑郁症药物中的新用途，其特征在于可以用于制备预防和治疗包括内源性抑郁症，反应性抑郁症，隐匿性抑郁症，药物引起的继发性抑郁症，更年期或产后抑郁症，脑外伤或脑卒中诱发的抑郁症以及抑郁性神经症的各种抑郁症状的药物。
5.根据权利要求1所述的各种应用，其特征在于包括菝葜皂苷元及其药学上可接受的盐、酯或与糖所成的苷等，或以其作为活性成分组成的药用组合物在防止各类抑郁症引起的继发性的学习记忆下降，快感缺乏，免疫功能低下以及性功能减退等症状中的应用。
6.根据权利要求1-5所述的任一药物或药物组合物在预防和治疗抑郁症及其继发病症药物中的新用途，其特征在于其中所述病体为哺乳动物。
7.根据权利要求1-6任一所述的应用，菝葜皂苷元的有效剂量范围为0.02-200mg/kg。
全文摘要
本发明提供了菝葜皂苷元在预防和治疗抑郁症药物中的新用途，它具有毒性小的特点，并且对抑郁症继发的学习记忆下降、免疫力降低等症状有明显的缓解作用。菝葜皂苷元及其药学上可接受的盐、酯或与糖所成的苷等，或以其作为活性成分组成的药用组合物等用于制备预防或治疗包括内源性抑郁症，反应性抑郁症，隐匿性抑郁症，药物引起的继发性抑郁症，更年期或产后抑郁症，脑外伤或脑卒中诱发的抑郁症以及抑郁性神经症等在内的各种抑郁症状的药物中的应用，以及用于制备预防和治疗抑郁症引起的继发性的学习记忆下降，快感缺乏，免疫功能低下以及性功能减退等症状的药物，其中所述病体为哺乳动物，菝葜皂苷元的有效剂量范围为0.02－200mg/kg。
文档编号A61K36/8964GK101019870SQ20071001063
公开日2007年8月22日 申请日期2007年3月19日 优先权日2007年3月19日
发明者吴英良, 任利翔 申请人:沈阳药科大学