专利名称：：一种前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物的制作方法
技术领域：
：本发明属于药物制剂领域，涉及一种前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物。更具体地说，本发明涉及一种可提高药物包封率，减少刺激性，可滤过除菌、且可稳定贮存的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物其注射用胶束组合物及其制备方法。
背景技术：
：前列地尔(PGEi)，又名前列腺素Ei，是一种活性极强的内源性生理活性物质，有明显的扩张外周和冠脉血管、抑制血小板聚集、抑制动脉粥样脂质斑块形成等药理作用，用于治疗心肌梗死，血栓性静脉炎，闭塞性动脉硬化，慢性动脉闭塞症如血栓闭塞性脉管炎、慢性动脉粥样硬化症所致的肢体慢性溃疡，微血管循环障碍所致的四肢静息性疼痛，亦可用于血管移植术后的抗栓治疗。前列地尔为白色针状结晶，在乙醇中易溶，水中微溶。目前国内已有多家医药企业生产注射用前列地尔，但前列地尔在水中很不稳定，易发生降解，此外前列地尔也不少不良反应，使得其药理活性难以正常发挥。胆固醇是一种中性脂质，亦属于双亲分子，但亲油性强于亲水性，其结构与胆酸的结构存在一定的相似性，如化学式所示，阻酸胆固醇将胆固醇分子衍生后口J形成一亲水性基团而成为两性分子，共两性化方法是将分子中的羟基衍生成盐，通常可制成硫酸盐、磷酸盐及磺酸盐等。这种经过衍生后形成的胆固醇盐具有无毒、无刺激性的特点，结构上与胆盐存在着一定的相似性，在水中一些药物分子与两性化的胆固醇分子通过亲脂性部分的疏水力以及可能也通过亲水性部分的极性亲和力，而形成按照一定分子摩尔数比的多分子复合物。这种复合物具有如下特点1.所形成的这种复合物以胶体的形式均匀而稳定地分散于水性介质中，在一定范围内可任意浓縮，适合作为高剂量药物的载体。2.由于两性化的胆固醇分子与药物分子以一定的摩尔数比结合在一起，掩盖了药物分子的结构，避免了注射给药时药物分子与组织的直接接触，可解决药物的刺激性问题。3.这种复合物的粒径一般在100nm以下，外观为略带乳光的澄明溶液，容易被患者接受，而且由于复合物粒径小，可过滤灭菌，保证了经注射给药的安全性。4.在适当条件下，两性化的胆固醇分子可以与药物在水性介质中自动分散，无需特殊处理，制剂工艺简单，制剂成本低廉。5.具有良好的物理化学稳定性。本法提供的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物的制备工艺简单，制剂成本低廉，稳定性更强，药物不易从复合物系统中游离出来，有望解决药物在注射部位的刺激性。胆固醇硫酸盐及其类似物也可以和磷脂的亲水头部和两个疏水的尾部产生交连作用，增加前列地尔的载药量。
发明内容本发明的一个目的是提供一种前列地尔的新剂型，即一种前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，该制剂使前列地尔具有更高的化学稳定性，不易降解；降低了前列地尔的局部剌激性，提高患者顺应性，加入长循环辅料还可避免体内网状内皮系统吞噬，延长药物有效时间。-个H的是提供一种制备本发明的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物其注射用胶束组合物的方法。为实现上述目的，本发明提供了一种前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，由治疗有效量的前列地尔、磷脂、胆固醇硫酸盐或类似胆固醇衍生物、附加剂、长循环辅料和注射用水组成。在上述技术方案中，本发明提供的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物含有以下成分'前列地;磷脂0.0000015wt%0.000120wt%胆固醇硫酸盐或类似胆固醇衍生物0.000120wt%长循环辅料附加剂015wt%015wt%所述磷脂包括天然来源的磷脂与合成来源的磷脂，所述天然来源的磷脂为从植物或动物中通过物理加工方法提取出来的磷脂，如大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰肌醇、神经鞘磷脂、丝氨酸磷脂等；所述合成来源的磷脂为通过半合成或合成方法制得的磷脂，如氢化磷脂、多烯磷脂酰胆碱、DMPC、DPPC、DMPG、DPPG、DPPE、DSPE、DPPA、DSPA及其结构修饰物如PEG化衍生物DSPE-PEG2000等。优选的是，该磷脂为大豆卵磷脂。所述胆固醇硫酸盐或/和类似胆固醇衍生物包括胆固醇硫酸钠、胆固醇硫酸钾、胆固醇磷酸钠、胆固醇磷酸钾、胆固醇磺酸钠、胆固醇磺酸钾和其它方式修饰的上述胆固醇衍生物及其任意组合。优选的是该胆固醇硫酸盐为胆固醇硫酸钠。所述长循环辅料为PEG分子量为PEG分子量为100010000的硬脂酸酯、PEG分子量为100010000维生素E琥珀酸酯、PEG硬脂酸酯与分子量为20010000的PEG的混合物、Myrj类、Brij类、PEG—二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺、PEG—二棕榈酰磷脂酰胆碱、PEG—二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、神经节苷脂、聚丙烯酰胺、壳聚糖、聚乙二醇聚十六烷基腈基丙酸酯、分子量为20010000的PEG、PVP或PVA及其任意组合。优选的是神经节苷脂、PEG—二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺、PEG—二棕榈酰磷脂酰胆碱及其任意组合。本发明提供的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物进一步包括015wt^的附加剂，优选包括05wt^的附加剂。所述附加剂可起到增加制剂稳定性、调节渗透压、抗氧化等作用，选自渗透压调节剂，如丙三醇、丙二醇、甘露醇等；界面膜稳定剂，如油酸、油酸钠等；金属离子络合剂，如EDTA、乙二按四乙酸二钠盐、钙盐等；防腐剂，如苯扎溴胺、苯扎氯胺、对羟基苯甲酸酯类、山梨酸等；抗氧剂，如维生素C、维生素E等；分子量为20010000的PEG、PVP或PVA及其任意组合。优选的是，该附加剂为丙三醇、甘露醇、油酸钠、EDTA、维生素C、维生素E、PEG及其任意组合。本发明提供的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，具有以下优点1、与前列地尔的注射液相比，本发明的制剂使前列地尔包裹在脂质复合物中，减少药物与水的接触，且可滤过除菌，降低高温灭菌导致的前列地尔失活，使之稳定性增加且刺激性降低。2、与前列地尔的乳剂、脂质体相比，本发明的制剂通过长循环辅料对脂质复合物表面进行修饰，有助于避免体内肝脾网状内皮系统的吞噬，延长药物在体内的循环时间。3、本发明的制剂可用生理盐水或葡萄糖注射液进行稀释或分散，用于静脉注射给药，优选技术方案中脂质复合物粒度小(平均粒度小于100nm)，分布较窄，可滤过除菌，且药物包封率高，有助于提高注射安全性。本发明还提供了一种本发明的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物的制备方法，该方法包括以下步骤(1)将处方量的前列地尔、磷脂、胆固醇硫酸盐或类似胆固醇衍生物或、长循环辅料、附加剂分散于有机溶剂中，以构成有机相；(2)将长循环辅料、附加剂溶于注射用水中，以构成水相；(3)在060"C的温度下，在搅拌或/和高剪切条件下将所述有机相和水相混合，再采用减压蒸发等方法除去有机溶剂，从而制得前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物。(4)将所得前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物用0.22wm的滤膜滤过除菌，分装。可进一步对制得的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物进行冻干处理或置于4°C下密封保存。其中，对所得到的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物进行冻干处理的工艺可为将l40wt%(重量比)的冻干保护剂溶于本发明的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物的水分散体中，该冻干保护剂选自海藻糖、甘露醇、蔗糖、葡萄糖、氯化钠、乳糖、山梨醇、右旋糖苷、甘油或甘氨酸及其任意组合，然后分装于西林瓶中，并置于冷冻干燥机中-45。C预冻3h，然后以5。C/h升温至-50°C，维持10h，再以5。C/h升温至0。C，维持8h，最后升温至1(TC保温10小时后出箱，加塞密封即可。图1为前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物的粒度分布图。图2为NaCl注射液阴性对照组血管刺激性试验切片结果图3为市售注射用前列地尔组血管刺激性试验切片结果图4为前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物组血管刺激性试验切片结果具体实施例方式实施例1取前列地尔10mg，蛋黄卵磷脂2.0g，胆固醇硫酸钠400mg，维生素E10mg，溶解于3(TC的甲醇中作为有机相；将PEG4000.5g溶于90ml注射用水中，加热至3(TC作为水相，在3(TC搅拌下将有机相注入水相，持续搅拃5min，再减压旋转蒸去甲醇，得带蓝色乳光的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，加注射用水补至总体积为100ml，用0.22um的微孔滤膜滤过除菌。将所得的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物水分散体中加入5%(w/v)的海藻糖，无菌操作下冷冻干燥，分装即得。将冻干后的制剂用生理盐水稀释，测其平均粒径为72.8±19.8nm(见附图1)。实施例2取前列地尔20mg，大豆卵磷脂3.0g，胆固醇硫酸钠500mg，溶解于35。C的无水乙醇中作为有机相；将PEG2001.0g溶于90ml注射用水中，加热至35。C作为水相，在35。C搅拌下将有机相注入水相，持续搅拌10min，再减压旋转蒸去乙醇，得带蓝色乳光的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，加注射用水补至总体积为100ml，用0.22iim的微孔滤膜滤过除菌，分装即得。实施例3取前列地尔500mg，大豆卵磷脂10g，胆固醇磺酸钠5g，溶解丁-35"C的四氢呋喃中作为有机相;将poloxamer1885g溶于950ml注射用水中，加热至35"C作为水相，在35"C搅拌下将有机相注入水相，持续搅拌10min，再减压旋转蒸去四氢呋喃，得带蓝色乳光的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，加注射用水补至总体积为1000ml，用O.22tim的微孔滤膜滤过除菌。将所得的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物水分散体中加入5%(w/v)的海藻糖，无菌操作下冷冻千燥，分装即得。实施例4表1列举了几种前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物胶束组合物的处方及冻干针剂和注射剂的规格(以前列地尔计)，但所用处方组成、各辅料配比及制剂规格不限于下表所列浓度。制备方法与工艺同实施例l-3。表1前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物处方<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>明显炎症细胞浸润，管壁内未见血栓形成等病变。见附图2。2)右耳阳性对照(注射用前列地尔)组的各取材点血管明显扩张为"++"，内皮细胞肿胀、坏死为"++"，见血栓形成为"++"，管辟及宵周见出血及炎症细胞没润为"+++，，。见附图3。3)右耳前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物组的各取材点耳缘静脉管壁完整，血管无明显扩张。管腔内未见血栓形成等病变。前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物组形态学明显好丁-市t!l注射用前列地尔组，无明显刺激性。见附图4。试验结果表明，前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物对家兔耳静脉血管未见叨显刺激作用。(2)溶血性试验取家兔血10mL，置于涂有肝素的离心试管中，4000rpm离心5min，弃去上层血浆，将血.细胞用生理盐水10mL冲洗多次，每次冲洗后离心除去上清液，直至上清液不呈红色为止，然后吸取一定量红细胞，按体积比稀释制备2%的红细胞混悬液，4'C冰箱中冷藏备用。记录方式"一一"凝集不溶血，但出现红细胞凝聚成团，摇晃后能重新分开。"一"不溶血红细胞全部下沉，上层为淡黄色略微混浊的溶液。"+"部分溶血溶液呈淡黄色或浅红色，试管底部有少量红细胞残留。"++"溶血溶液呈红色，试管底部无红细胞残留。表2溶血性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>结果显示，所制的前列地尔脂质复合物注射用胶束组合物溶液未引起红细胞的溶血反应，符合静脉注射的标准。(3)过敏性试验将实施例1所制的前列地尔脂质复合物注射用胶束组合物加用0.9%氯化钠注射液稀释，制成供试品溶液。采用临床推荐剂量lug/ml/kg，给豚鼠腹腔注射该供试品溶液0.5ml，隔日一次，共三次，给药后第14天及第21天分别股静脉注射该供试品溶液1.0ml,结果均未见豚鼠有过敏反应。给予2%新鲜蛋清的豚鼠在给予蛋清后第14天及第21天分别经股静脉注射蛋清后均出现过敏反应，且皆于15min内死亡。结果显示，所制前列地尔脂质复合物注射用胶束组合物溶液不引起豚鼠过敏反应，符合静脉注射的标准。权利要求1、一种前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，由治疗有效量的前列地尔、磷脂、胆固醇硫酸盐或/和类似胆固醇衍生物、附加剂和注射用水组成。2、根据权利要求1所述的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，含冇以下成分-前列地尔0.0000015wt%磷脂胆固醇硫酸盐或/和类似迪固醇衍生物长循环辅料附加剂注射用水0.000120wt%0.000120wt%015wt%015wt%余量,3、根据权利要求12任一项所述的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，其中所述磷脂选自所有天然来源和合成来源的磷脂及其任意组合。4、根据权利要求3所述的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物.，其中所述天然来源的磷脂为从植物或动物中通过各种加工方法提取出来的磷脂，如大豆磷脂、蛋黄磷脂、脑磷脂、磷脂酰肌醇、神经鞘磷脂、丝氨酸磷脂；所述合成来源的磷脂为通过半合成或合成方法制得的磷脂，如氢化磷脂、多烯磷脂酰胆碱、DMPC、DPPC、DMPG、DPPG、DPPE、DSPE、DPPA、DSPA及其结构修饰物如PEG化衍生物DSPE-PEG2000。，5、根据权利要求12任一项所述的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，其中所述胆固醇硫酸盐或/和类似胆固醇衍生物包括胆固醇硫酸钠、胆固醇硫酸钾、胆固醇磷酸钠、胆固醇磷酸钾、胆固醇磺酸钠、胆固醇磺酸钾和其它方式修饰的上述胆固醇衍生物及其任意组合。6、根据权利要求12任一项所述的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，其中所述长循环辅料为PEG分子量为100010000的硬脂酸酯、PEG分子量为100010000维生素E琥珀酸酯、PEG硬脂酸酯与分子量为20010000的PEG的混合物、Myrj类、Brij类、PEG—二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺、PEG—二棕榈酰磷脂酰胆碱、PEG一二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、神经节苷脂、聚丙烯酰胺、壳聚糖、聚乙二醇聚十六烷基腈基丙酸酯、分子量为20010000的PEG、PVP或PVA及其任意组合。7、根据权利要求12任一项所述的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物，其中所述附加剂选自渗透压调节剂、界面膜稳定剂、金属离子络合剂、防腐剂、抗氧剂、分子量为20010000的PEG、PVP或PVA及其任意组合。8、一种制备权利要求17中任一项所述的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物的方法，该方法包括以下步骤(1)将处方量的前列地尔、磷脂、胆固醇硫酸盐或类似胆固醇衍生物或、长循环辅料、附加剂分散于有机溶剂中，以构成有机相；(2)将长循环辅料、附加剂溶于注射用水中，以构成水相；(3)在060'C的温度下，在搅拌或/和高剪切条件下将所述有机相和水相混合，再采用减压蒸发等方法除去有机溶剂，从而制得前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物。(4)将所得前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物用0.22lim的滤膜滤过除菌，分装。9、根据权利要求8所述的方法，其中所述有机溶剂选自二氯甲烷、氯仿、丙酮、甲醇、乙醇、乙醚、四氢呋喃或异丙醇及其任意组合；向所述制得的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物进一步加入冻干保护剂以制成冻干制剂。10、根据权利要求8或9所述的方法，其中所述冻干保护剂选自海藻糖、甘露醇、蔗糖、葡萄糖、氯化钠、乳糖、山梨醇、右旋糖苷、甘氨酸及其任意组合。全文摘要本发明属于药物制剂领域，涉及一种前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物及其制备方法。该前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物由治疗量的前列地尔、磷脂、胆固醇硫酸盐或/和类似胆固醇衍生物、附加剂与注射用水组成。本发明提供的前列地尔脂质复合物及其注射用胶束组合物具有副作用小，血管刺激性低，载药量高，粒径分布窄、可滤过除菌，药物稳定性好等优点。文档编号A61P7/02GK101439037SQ20071015846公开日2009年5月27日申请日期2007年11月22日优先权日2007年11月22日发明者飒徐,德瑞克·王,贺晓玲申请人:沈阳沃森药物研究所