专利名称：：一种多烯紫杉醇纳米脂质载体及其制备方法
技术领域：
：本发明属于药物制剂领域，涉及一种多烯紫杉醇纳米脂质载体及其制备方法。更具体地说，本发明涉及一种具有稳定的多烯紫杉醇结构，有助于避免体内网状内皮系统的吞噬，且可稳定贮存的多烯紫杉醇纳米脂质载体及其制备方法。
背景技术：
：多烯紫杉醇(docetaxel)是近年开发的新一代紫杉烷类抗肿瘤药物，为有丝分裂抑制剂，多烯紫杉醇是半合成抗肿瘤新药，对多种实体瘤具有较强的抗肿瘤活性，体外实验提示多烯紫杉醇可以抑制SPCAl肺腺癌细胞的生长，而且随着剂量的增大抑制作用增强，这种作用与该药物诱导细胞发生GZM期阻滞有关。对在体Lewis肺癌的研究表明，多烯紫杉醇通过诱导Lewis肺癌细胞发生G2M期阻滞和凋亡抑制肿瘤组织的生长。多烯紫杉醇的作用机制与紫杉醇类似，但抗肺瘤活性是紫杉醇的1.3~12倍，对乳腺癌、非小细胞肺癌等癌症均有明显疗效。多烯紫杉醇难溶于水，即使配制成注射液，在临床应用中的毒副作用也较大，容易引起较多的并发症，如过敏反应、骨髓抑制、神经毒性、心血管毒性、脱发等等，同时药物的体内代谢迅速，需长期使用。目前对其结构改造以减少不良反应的尝试尚无大的进展。目前多烯紫杉醇主要是以聚氧乙烯氢化蓖麻油和乙醇等配制而成注射液，注射后对人体有毒副作用，特别是在使用多烯紫杉醇注射液前，必须先服用抗过敏药物或注射抗过敏药物来帮助緩解由于多烯紫杉醇注射液的使用而产生的严重过敏等毒副作用，常常给病人带来痛苦，直接影响了该药的使用。纳米脂质载体是由固体脂质纳米粒发展而来的一种能够有效避免放置过程中药物外排、包封率降低的新型载药系统。固体脂质纳米粒(SLN)存在的问题在于，SLN由单一脂质材料制成，在制备过程中经高压均质冷却后，脂质趋向于形成更规则的结晶，从而引起被包裹药物的外排或在SLN分散的水相中结晶析出。另外，高度有序的脂质结晶会限制其载药能力。而通过向固态脂质材料中加入与其化学差异性很大的液态油，使纳米粒的熔点降低，制成纳米脂质载体，就可改善SLN载药量小及放置中包封率降低的问题。纳米脂质载体具有SLN辅料相容性好、体外释放可控性强、易于大规模生产等优点，又避免了SLN由于形成规则结晶而带来的稳定性差的缺陷。固态脂质材料是多烯紫杉醇的载体，不同的药物成分需选用相应的脂质材料作为药物载体，而不同的药物载体需筛选不同的乳化剂及附加剂种类。液态油是确保载药纳米粒以非规则结晶形式存在，如以固态的结晶缺陷或无定型的形式存在。乳化剂和附加剂的作用是形成稳定的乳化剂膜包裹药物和脂质材料。同时，可以加入长循环辅料，作用是对纳米粒的表面进行修饰，使其可避免在体内被肝、脾网状内皮系统的吞噬。因此，研究开发出多烯紫杉醇的新剂型以克服上述问题是非常必要的。
发明内容本发明的一个目的是提供一种多烯紫杉醇的新剂型，即多烯紫杉醇纳米脂质载体，该制剂使多烯紫杉醇具有更高的化学稳定性，不受环境pH值的影响；并可避免体内网状内皮系统吞噬，从而达到对肿瘤组织被动靶向、提高生物利用度、改善患者顺应性的目的。本发明的另一个目的在于提供的多烯紫杉醇纳米脂质载体，可以克服固体脂质纳米粒放置过程中药物外排、.包封率降低的现象，使制剂可稳定贮存。本发明的又一个目的是提供一种制备本发明的多烯紫杉醇纳米脂质载体的方法。为实现上述目的，本发明提供了一种多烯紫杉醇纳米脂质载体，其基本上由治疗有效量的多烯紫杉醇、固态脂质材料、液态油、乳化剂、长循环辅料和注射用水组成。具体而言，在上述技术方案中，本发明提供的多烯紫杉醇纳米脂质载体含有以下成分0.01-5wt%0.5-15wt%0-15wt%0.1-15wt%0—15wt%多烯紫杉醇固态脂质材料液态油乳化剂长循环辅料附加剂0-15Wt%注射用水余量。所述固态脂质材料包括的甘油三酯类为三硬脂酸、三棕榈酸、三月桂酸、三油酸等中、长链脂肪酸的甘油酯；部分甘油酯为单硬脂酸甘油酯、含有单、二、三酰甘油酯的合成甘油酯等及其混合物；脂肪酸类为硬脂酸、棕榈酸、二十二碳烷酸等；蜡质类为鲸蜡醇十六酸酯、鯨蜡醇棕榈酸酯；固醇类如甾体类、胆固醇及其任意组合。优选的是，该固态脂质材料为三棕榈酸甘油酯、胆固醇、单硬脂酸甘油酯或山嵛酸甘油酯。所述液态油选自天然植物油，如大豆油、花生油、红花油、橄榄油；链长在C「d。之间的中等链长脂肪酸甘油酯(medium-chainglyceride,简称MCT);油酸；亚油酸；肉豆蔻酸异丙酯；维生素E;维生素A;维生素酯类；及其任意组合。优选的是，该液态油为大豆油、链长在"-d。之间的中等链长脂肪酸甘油酯或维生素E。所述乳化剂包括脂溶性乳化剂和水溶性乳化剂。所述脂溶性乳化剂选自磷脂类，如卵磷脂、大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化卵磷脂；脂肪酸山梨坦类，如Span60、Span80;聚山梨酯类，如Tween60、Tween80;及其任意组合。所述水溶性乳化剂选自聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物类，如Poloxamer系列；聚氧乙烯脂肪酸酯类；聚氧乙烯脂肪醇醚类；及其任意组合。优选的是，该乳化剂为卵磷脂、氢化卵磷脂、Poloxamer188、Span60、Span80或Tween80。所述长循环辅料为PEG分子量为PEG分子量为1000-10000的硬脂酸酯、PEG分子量为1000-10000维生素E琥珀酸酯、PEG硬脂酸酯与分子量为200-10000的PEG的混合物、Myrj类、Brij'类、PEG-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺、PEG-二棕榈酰磷脂酰胆碱、PEG-二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、神经节苷脂、聚丙烯酰胺、壳聚糖、分子量为200-10000的PEG、PVP或PVA及其任意组合。优选的是，PEG修饰的酯类为PEG分子量为1000-5000的硬脂酸酯或维生素E聚乙二醇琥珀酸酯。本发明提供的多烯紫杉醇纳米脂质载体进一步包括0-10wt%的附加剂，优选包括0-5wt乂的附加剂。所述附加剂可起到增加制剂稳定性、调节渗透压、抗氧化等作用，选自渗透压调节剂，如丙三醇、丙二醇、甘露醇等；界面膜稳定剂，如油酸、油酸钠等；金属离子络合剂，如EDTA、乙二按四乙酸二钠盐、钙盐等；防腐剂，如苯扎溴胺、苯扎氯胺、对羟基苯曱酸酯类、山梨酸等；抗氧剂，如维生素C、维生素E等；分子量为200-10000的PEG、PVP或PVA及其任意组合。优选的是，该附加剂为丙三醇、甘露醇、油酸钠、EDTA、苯扎溴胺、维生素C、维生素E、PEG及其任意组合。本发明提供的多烯紫杉醇纳米脂质载体，具有以下优点1、与多烯紫杉醇的注射液相比，本发明的制剂具有稳定的多烯紫杉醇结构，并且增加了多烯紫杉醇在不同pH值下的稳定性，进而改善了多烯紫杉醇的疗效。2、与多烯紫杉醇的乳剂、脂质体相比，本发明的制剂通过长循环辅料对纳米粒表面进行修饰，有助于避免体内肝脾网状内皮系统的吞噬，延长药物在体内的循环时间。采用透析法测定药物的体外释放度，结果显示纳米脂质载体表现出明显的緩释特点(参见图3)。3、本发明的制剂可克服固体脂质纳米粒放置过程中药物外排、包封率降低的现象，使制剂可稳定贮存。4、本发明的制剂可用生理盐水或葡萄糖注射液进行稀释或分散，用于静脉注射给药，优选技术方案中纳米粒粒度小(平均粒度小于200nm),分布较窄，且药物包封率高，有助于提高注射安全性。本发明还提供了一种本发明的多烯紫杉醇纳米脂质载体的制备方法，该方法包括以下步骤(1)将多烯紫杉醇、固态脂质材料、液态油、脂溶性乳化剂、脂溶性长循环辅料、附加剂溶于有机溶剂中，该有机溶剂选自二氯曱烷、氯仿、丙酮、甲醇、乙醇、四氢呋喃或异丙醇，然后通过减压旋转蒸发或/和真空干燥等方法除去有机溶剂，并加热至40-15(TC熔融以构成有才几相；(2)将水溶性长循环辅料、水溶性乳化剂、附加剂溶于注射用水中，并加热至40-IOO"C，以构成水相；(3)在40-10(TC的温度下，在搅拌或/和高剪切条件下将所述有机相和水相混合，以制备初乳；(4)对所述初乳进行超声或高压均质处理，从而制得多烯紫杉醇长循环纳米脂质载体。可进一步对制得的多烯紫杉醇纳米脂质载体进行冻千处理或置于4°C下密封保存。其中，对所得到的多烯紫杉醇纳米聘质载体进行冻干处理的工艺可为将l~40wt%(重量比)的冻干保护剂溶于本发明的多烯紫杉醇纳米脂质载体的水分散体中，该冻干保护剂选自海藻糖、甘露醇、蔗糖、葡萄糖、氯化钠、乳糖、山梨醇、右旋糖苷、甘油或甘氨酸及其任意组合，然后分装于西林瓶中，并置于冷冻干燥机中-45。C预冻3h，然后以5°C/h升温至-50°C,维持10h，再以5。C/h升温至(TC,维持8h，最后升温至l(TC保温10小时后出箱，加塞密封即可。图1为多烯紫杉醇纳米脂质载体的粒度分布图。图2为多烯紫杉醇纳米脂质载体的粒度分布图。图3为多烯紫杉醇纳米脂质载体的体外释放的释放百分率-时间曲线。具体实施方式实施例1取多烯紫杉醇600mg，单硬脂酸甘油酯10.Og，MCT8.0g,Tween802.Og加入适量无水乙醇溶解，减压旋转蒸干有才几溶剂，70。C加热溶解作为油相。Poloxamer1884.Og、溶于100ml注射用水中，加热至7(TC作为水相。在7(TC搅拌下将水相滴入油相，所得初乳以70°C高压均质法处理，得多烯紫杉醇纳米脂质载体，4。C密封保存。用生理盐水稀释后，以COULTERLS230粒径分析仪测定平径粒度，见图1。平均粒径-126nm,SD=17nm，包封率=90.3wt%。实施例2取多烯紫杉醇60mg，单硬脂酸甘油酯1.Og,MCT0.8g,磷脂0.4g加入适量氯仿溶解，旋转蒸干有机溶剂，70。C加热溶解作为油相。Poloxamer1880.3g溶于10ml注射用水中，加热至70。C作为水相。在70°C搅拌下将水相滴入油相，所得初乳以7(TC500W#:头超声2分钟，得多烯紫杉醇纳米脂质载体，4。C密封保存。用生理盐水稀释后，以COULTERLS230粒径分析仪测定平径粒度，见图2。平均粒径129nm，SD:18nm,包封率=87.5wt%。实施例3取多烯紫杉醇500mg,山l酸甘油酯8.0g，大豆油5.0g，Tween801.5g加入适量氯仿溶解，减压旋转蒸干有机溶剂，8(TC加热溶解作为油相。将PEG4005.0g、Poloxamer2.0g溶于100ml注射用水中，加热至8(TC作为水相。在8(TC搅拌下将水相滴入油相，所得初乳以7(TC高压均质处理，得多烯紫杉醇纳米脂质载体，4。C密封保存。采用透析法测定药物的释^L度以含1%Tween的pH值为7.4的磷酸盐緩沖液(PBS)1000ml为释放介质，搅拌速度为每分钟100转，温度为37±0.5"C。取样后进样20ju1进行HPLC测定，计算累积释药百分it,见图3。平均粒度-133nm，SD=20nm,包封率=89.6wt%。实施例4取多烯紫杉醇500mg,单硬脂酸甘油酯8.0g,鱼油4.0g,PEG2000-二棕桐酰磷脂酰胆碱l.0g,磷脂3.Qg加入适量乙醇溶解，旋转蒸千有机溶剂，70。C加热溶解作为油相。将Poloxamer2.Og，PEG2001.Og溶于100ml注射用水中，加热至80。C作为水相。在80。C搅拌下将水相趁热滴入油相，所得初乳80。C高压均质处理，得多烯紫杉醇纳米脂质载体，4'C密封保存。釆用透析法测定药物的释放度以含l%Tween的pH值为7.4的磷酸盐緩沖液(PBS)1000ml为释放介质，搅拌速度为每分钟IOO转，温度为37±0.5'C。取样后进样20nl进行HPLC测定，计算累积释药百分数，见图3。平均粒径=142咖，SD-19nm,包封率-84.7wt。/。。实施例5取多烯紫杉醇600mg,山裔酸甘油酯10.Og,MCT7.Og,磷脂3.Og,加入适量无水乙醇溶解，减压旋转蒸干有机溶剂，80°C加热溶解作为油相。将Poloxamer1.Og溶于100ml注射用水中，加热至80°C作为水相。在8(TC搅拌下将水相滴入油相，所得初乳以8(TC高压均质处理，得多烯紫杉醇纳米脂质载体，冻干。冻干工艺为取15wt%(重量比)的海藻糖与甘露醇(11)，溶解于纳米脂质载体的水M体中，搅拌均匀，分装于西林瓶中，置冷冻干燥机中-45。C预冻3h,然后以5°C/h升温至-50°C，维持10h,再以5。C/h升温至(TC,维持8h，最后升温至l(TC保温10小时后出箱，加塞密封即可。以生理盐水再分散后测定平均粒径-128nm,SD=18nm,包封率=87.1wt%。实施例6表l列举了几种多烯紫杉醇纳米脂质载体的处方(表中所列辅料为权利要求1-12所述)及冻干针剂和注射剂的规格(以多烯紫杉醇计)，但所用处方组成、各辅料配比及制剂规格不限于下表所列浓度。制备方法与工艺同实施例1-5。<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>权利要求1、一种多烯紫杉醇纳米脂质载体，其基本上由治疗有效量的多烯紫杉醇、固态脂质材料、液态油、乳化剂、PEG修饰的酯类和注射用水组成。2、才艮据权利要求1所述的多烯紫杉醇纳米脂质载体，其含有以下成分、.多烯紫杉醇固态脂质材料液态油乳化剂长循环辅料附加剂注射用水0.01-5wt0.5—15wt0—15wt0.1—15wt0_15wt0—15wt余量.3、根据权利要求1-2任一项所述的多烯紫杉醇纳米脂质载体，其中，所述固态脂质材料选自甘油三酯类、部分甘油酯、丙二醇单硬脂酸酯、丙二醇二硬脂酸酯、丙二醇单双硬脂酸酯、脂肪酸类、蜡质类、甾体类、固醇类及其任意组合。4、根据权利要求3所述的多烯紫杉醇纳米脂质载体，其中，所述甘油三酯类为三硬脂酸、三椋榈酸、三月桂酸、三油酸等中、长链脂肪酸的甘油酯；所述部分甘油酯为单硬脂酸甘油酯、含有单、二、三酰甘油酯的合成甘油酯等及其混合物；所述脂肪酸类为硬脂酸、棕榈酸、二十二碳烷酸等；所述蜡质类为鯨蜡醇十六酸酯、鯨蜡醇棕榈酸酯；所述固醇类如甾体类、胆固醇及其任意组合。5、冲艮据权利要求1-2任一项所述的多烯紫杉醇纳米脂质载体，其中，所述液态油选自天然植物油，链长在C8-d。之间的中等链长脂肪酸甘油酯、油酸、亚油酸、肉豆蔻酸异丙酯、维生素E、维生素A、维生素酯类及其任意组合；所述乳化剂包括脂溶性乳化剂和水溶性乳化剂，所述脂溶性乳化剂选自磷脂类、脂肪酸山梨坦类、聚山梨酯类及其任意组合；所述水溶性乳化剂选自聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物类、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯脂肪醇醚类及其任意组合。6、根据权利要求1-2任一项所述的多烯紫杉醇纳米脂质载体，其中，所述长循环辅料为PEG分子量为1000-10000的硬脂酸酯、PEG分子量为1000-10000的维生素E、琥珀酸酯、PEG硬脂酸酯与分子量为200-10000的PEG的混合物、Myrj类、Brij类、PEG-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺、PEG-二棕榈酰磷脂酰胆碱、PEG-二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、神经节苷脂、聚丙烯酰胺、壳聚糖、分子量为200-10000的PEG、PVP或PVA及其任意组合；所述附加剂选自渗透压调节剂、界面膜稳定剂、金属离子络合剂、防腐剂、抗氧剂、分子量为200-10000的PEG、PVP或PVA及其任意组合。7、一种制备权利要求1-6中任一项所述的多烯紫杉醇纳米脂质载体的方法，该方法包括以下步骤(l)将多烯紫杉醇、固态脂质材料、液态油、脂溶性乳化剂、长循环辅料溶于有机溶剂中，然后减压旋转蒸发或/和真空干燥除去有才几;容剂，并力口热至40-150。C熔融，以构成有才几相；(2)将长循环辅料、水溶性乳化剂、附加剂溶于注射用水中，并加热至40-100°C，以构成水相；(3)在40-100。C的温度下，在搅拌或/和高剪切条件下将所述有机相和水相混合，以制备初乳；(4)对所述初乳进行超声或高压均质处理，从而制得多烯紫杉醇纳米脂质载体。8、根据权利要求7所述的制备多烯紫杉醇纳米脂质载体的方法，其中，所述有机溶剂选自二氯曱烷、氯仿、丙酮、曱醇、乙醇、四氢吹喃或异丙醇。9、根据权利要求7所述的制备多烯紫杉醇纳米脂质载体的方法，其中，向所述制得的多烯紫杉醇纳米脂质载体进一步加入冻干保护剂以制成冻干制剂。10、根据权利要求9所述的制备多烯紫杉醇纳米脂质载体的方法，其中所述冻干保护剂选自海藻糖、甘露醇、蔗糖、葡萄糖、氯化钠、乳糖、山梨醇、右旋糖苷、甘油或甘氨酸及其任意组合。全文摘要本发明属于药物制剂领域，涉及一种多烯紫杉醇纳米脂质载体及其制备方法。该多烯紫杉醇纳米脂质载体基本上由治疗有效量的多烯紫杉醇、固态脂质材料、液态油、乳化剂、PEG修饰的酯类和注射用水组成。本发明提供的多烯紫杉醇纳米脂质载体具有稳定的多烯紫杉醇结构，有助于避免体内网状内皮系统的吞噬，且可稳定贮存。文档编号A61P35/00GK101439020SQ20071015846公开日2009年5月27日申请日期2007年11月22日优先权日2007年11月22日发明者飒徐,德瑞克·王,翔李申请人:沈阳沃森药物研究所