一种制备载多西紫杉醇脂质超声微泡的方法
【专利摘要】本发明涉及一种多西紫杉醇脂质超声微泡的制备方法，该方法中主要使用的化学试剂有DPPC、DPPE、DSPA、胆固醇和PBS溶液，最终为肝癌的治疗提供一种新型、高效的给药途径。
【专利说明】一种制备载多西紫杉醇脂质超声微泡的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种制备载多西紫杉醇脂质超声微泡的方法，属于医药制剂【技术领域】。
【背景技术】
[0002]原发性肝癌是世界第六大常见的恶性肿瘤，在全世界范围内每年大约新增肝癌病人100万人，患者的5年生存率不到10%，失去手术机会的患者其中位生存时间仅为4-6个月，预后极差，居癌症引起的死亡原因的第三位。我国人群由于耶乂、此乂感染率高，肝癌发病率和死亡率居全球之首，因此，对于肝癌治疗的研究显得尤其重要和必要。目前肝癌首选的治疗方案仍是手术切除，然而，仅10% -15%的患者在确诊时尚有手术机会，且手术切除率低，术后复发率高；化疗常常是可供选择的主要治疗方法和手段，然而，化疗药物大多为细胞毒性药物，对肿瘤组织和正常组织缺乏靶向性，具有较大的毒副作用；选择性肝动脉化疗栓塞术(从⑶)因其全身毒副作用相对较小应用较广泛，但疗效仍欠佳，且术后可引起严重栓塞后综合征、上消化道出血、胆囊栓塞、严重血管痉挛，甚至急性肝衰竭等严重副反应，使患者耐受性和依从性差，而不能坚持治疗，且从⑶对患者和医务人员均有放射性危害，不宜进行重复治疗。因此，寻求一种有效、安全、靶向性高、毒副作用小的治疗手段迫在眉睫。
[0003]紫杉烷类药物是一类新的抗肿瘤药物，具有独特的抗肿瘤活性，近年来被认为是最具有潜力的抗恶性肿瘤药物之一，目前在临床上有多西紫杉醇和紫杉醇两种，两者抗肿瘤的机制相同，都是作用于微管/微管蛋白系统，通过加强微管蛋白聚合和拟制微管解聚作用，使微管稳定，破坏肿瘤细胞的有丝分裂，促使肿瘤细胞凋亡。而多西紫杉醇(简称000的抗肿瘤活性优于紫杉醇，多西紫杉醇可单独或联合其他化疗药物用于乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、肝癌、前列腺癌等的治疗。但由于多西紫杉醇的水溶性差，脂溶性较好，在临床使用中受限。
[0004]脂质体有由磷脂和胆固醇组成，具有类似生物膜双分子层的结构，交替间隔着水相和脂质双分子层，此种结构即可将亲水性药物包封于水相，又可将亲脂性的药物包封于脂质双分子层，因此，脂质体可用作脂溶性较好药物的载体，克服临床使用受限的技术问题。
[0005]自1968年成首次报道了超声造影剂的应用以来，其声学特性不断地为人们所认识并应用于实践。人们在利用微泡造影剂增强超声显像的同时，还发现微泡具有靶向运载作用，利用微泡在超声介导下的空化效应，可以靶向传输基因或药物，达到治疗疾病的目的。这无疑极大地拓展了超声造影剂的应用领域，并可能建立一种安全、有效、无创的超声介导祀向传输系。
[0006]近年来，有关超声造影剂靶向运载药物的研究日益增多。通过调整微泡本身的特性，可将药物或治疗性基因整合于微泡中，同时将高度特异的抗体或其他配体连接于微泡表面。经静脉注入携药的微泡后，用超声照射特定的部位，即可实现药物或治疗性基因的定向释放。超声微泡药物运载系统在溶栓治疗和抗肿瘤治疗方面起到了重要作用。超声靶向微泡爆破是一种新兴的靶向给药及基因转运方法，以超声微泡造影剂作为药物或基因转送的载体，主要作用机制是声孔作用，即胞膜上形成的瞬时孔。超声辐照于靶组织或靶器官，靶部位载基因或载药微泡后靶向释放出基因和药物，提高药物和基因转染率。
[0007]超声微泡的生物学特性使其成为一种理想的基因或药物递送载体。将少量携带基因或药物的微泡经外周静脉或局部注射后，微泡流经靶向部位时进行超声检查，即得到超声影像。当超声影像图证明超声准确定位于靶向部位时，增加声压使之达到一定强度，即可使微泡破裂产生空化效应，空化效应是指存在于液态物质中的微小空泡在高强度超声的作用下被激发，空化核急剧膨胀和收缩直至爆裂，此过程中空化核吸收了大量的声能，并将能量集中释放在极小的区域，核内局部温度和压力急剧升高，随之产生强大冲击波、内切力、高速微束射流及自由基等二次效应，不仅使微血管破裂，血管内皮细胞收缩，细胞间隙增宽，微血管壁的通透性增大，还可使细胞膜的完整性遭到破坏，产生暂时性、可逆性的小孔，增加了细胞膜的通透性，均能够增强载药微泡对基因或药物的转移。
[0008]介于此，本发明旨在通过制备载多西紫杉醇脂质超声微泡，通过对其性能进行考察、评价，为肝癌的化疗提供一种新型、高效的给药途径。
【发明内容】
[0009]本发明的目的在于，提供一种制备载多西紫杉醇脂质超声微泡的方法，该方法具有科学、闻效的特点。
[0010]本发明的又一目的在于，最终所制备的载多西紫杉醇脂质超声微泡在用于治疗肝癌药物中的应用。
[0011]本发明的技术方案，制备载多西紫杉醇脂质超声微泡的方法是:
[0012]取多西紫杉醇1-5呢、0？？0试剂0.5-2呢、0？？2试剂1-4呢、03？八试剂3-10呢和胆固醇适量，加入有机溶剂充分溶解，冷却至室温，加值彡7.0的？83溶液200-800^ 1、甘油40-609 1，胆固醇适量，充分混合后密封，置于40-601的恒温设备中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密闭容器中的空气，密闭置于银汞调和器振荡458，即得。
[0013]其中，优选的制备方法是:
[0014]取多西紫杉醇2呢、0？？0试剂1呢、0？？2试剂2呢、08？^试剂5呢和胆固醇适量，加入有机溶剂充分溶解，冷却至室温，加值等于7.0的？83溶液450 ^ 1，甘油50 ^ 1、胆固醇适量，充分混合后密封，置于501的恒温设备中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密闭容器中的空气，密闭置于银汞调和器振荡458，即得。
[0015]上述所制备的载多西紫杉醇脂质超声微泡，可用于在制备治疗肝癌药物中的应用。
[0016]有益效果
[0017]对于本发明所述的技术方案，我们对该技术所带来的创新性进行了全面的研究比对，其在超声应用的过程中能显著提高超声的消融作用，总结起来有益效果有以下两点:
[0018]1.造影功能:此种方法制备得到的微泡平均粒径为350鹽-75011111，外形整齐圆整，分布均匀。在超声造影模式给予动物一定剂量的该微泡，可以看到明显的造影功能，较清晰的显示出肝肿瘤的轮廓。
[0019]2.靶向释放药物出1冊与之联合使用，可达到定向爆破的功能，更能使得药物利用达到最大化，是超声诊断提高到治疗水平上重要的一步。
具体实施例
[0020]以下是本
【发明内容】
的具体实施例，用于阐述本申请文件中所要解决技术问题的技术方案，有助于本领域技术人员理解本
【发明内容】
，但本发明技术方案的实现并不限于这些实施例。实施例1
[0021]取多西紫杉醇2呢、0？？0试剂1呢、0？？2试剂2呢、08？^试剂5呢和胆固醇适量，加入有机溶剂充分溶解，冷却至室温，加四值为5.0的？83溶液450^ 1，甘油50^ 1、胆固醇适量，充分混合后密封，置于501的恒温设备中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密闭容器中的空气，密闭置于银汞调和器振荡308，即得。
[0022]实施例2
[0023]取多西紫杉醇1呢、试剂0.5呢、0？？2试剂1呢、03？八试剂3呢和胆固醇适量，加入有机溶剂充分溶解，冷却至室温，加值小于4.0的？83溶液200 4 1，甘油40^ 1、胆固醇适量，充分混合后密封，置于601的恒温设备中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密闭容器中的空气，密闭置于银汞调和器振荡358，即得。
[0024]实施例3
[0025]取多西紫杉醇5呢、0？？0试剂2呢、0？？2试剂4呢、08？^试剂10呢和胆固醇适量，加入有机溶剂充分溶解，冷却至室温，加值小于3.0的？83溶液800 4 1，甘油60^ 1、胆固醇适量，充分混合后密封，置于401的恒温设备中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密闭容器中的空气，密闭置于银汞调和器振荡408，即得。
[0026]实施例4
[0027]取多西紫杉醇2呢、0？？0试剂1呢、0？？2试剂2呢、08？^试剂5呢和胆固醇适量，加入有机溶剂充分溶解，冷却至室温，加四值为2.5的？83溶液450^ 1，甘油50^ 1、胆固醇适量，充分混合后密封，置于551的恒温设备中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密闭容器中的空气，密闭置于银汞调和器振荡458，即得。
[0028]实施例5
[0029]取多西紫杉醇2呢、0？？0试剂1呢、0？？2试剂2呢、08？^试剂5呢和胆固醇适量，加入有机溶剂充分溶解，冷却至室温，加值为6.5的？83溶液450 ^ 1，甘油55 ^ 1、胆固醇适量，充分混合后密封，置于501的恒温设备中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密闭容器中的空气，密闭置于银汞调和器振荡508，即得。
[0030]以上在本发明的所有技术方案中，所述的是:二棕榈酰磷脂酰胆碱，0？？2:二棕榈酰磷酯酰乙醇胺，08？^:二硬脂酰基磷脂酸，？88溶液:磷酸盐缓冲溶液，:高强度聚焦超声。
【权利要求】
1.一种制备载多西紫杉醇脂质超声微泡的方法，其特征在于: 取多西紫杉醇l-5mg、DPPC试剂0.5_2mg、DPPE试剂l_4mg、DSPA试剂3_10mg和胆固醇适量，加入有机溶剂充分溶解，冷却至室温，加PH值彡7.0的PBS溶液200-800 μ 1、甘油40-60 μ 1，胆固醇适量，充分混合后密封，置于40-60°C的恒温设备中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密闭容器中的空气，密闭置于银汞调和器振荡45s，即得。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于: 取多西紫杉醇2mg、DPPC试剂lmg、DPPE试剂2mg、DSPA试剂5mg和胆固醇适量，加入有机溶剂充分溶解，冷却至室温，加PH值为7.0的PBS溶液450 μ 1，甘油50 μ 1、胆固醇适量，充分混合后密封，置于50°C的恒温设备中孵育成薄膜，充入全氟丙烷替代密闭容器中的空气，密闭置于银汞调和器振荡45s，即得。
3.如权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于:最终所制成的载多西紫杉醇脂质超声微泡在制备治疗肝癌药物中的应用。
【文档编号】A61K9/00GK104368016SQ201310688779
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2013年12月12日 优先权日:2013年12月12日
【发明者】张悦 申请人:张悦