专利名称：取代的羟吲哚衍生物、以及它们用作加压素受体配体的用途的制作方法
专利说明取代的羟吲哚衍生物、以及它们用作加压素受体配体的用途 本发明涉及新的取代的羟吲哚衍生物，包含它们的药物以及它们治疗疾病的用途。
加压素是一种内源性激素，其对器官和组织具有广泛地不同的作用。人们怀疑，加压素体系涉及多种病理状态，例如，心力衰竭和高血压。目前已知三种受体(V1a、V1b或V3和V2)，通过这些受体加压素调节它的许多作用。因此，研究这些受体的拮抗剂，以便尽可能地提供治疗疾病的新治疗方法(M.Thibonnier，Exp.Opin.Invest.Drugs1998，7(5)，729-740)。
本申请描述了在1位具有芳基磺酰基的新的取代羟吲哚。1-苯磺酰基-1，3-二氢-2H-吲哚-2-酮之前已经被描述为加压素受体的配体。在WO 93/15051、WO 95/18105、WO 98/25901、WO 01/55130、WO01/55134、WO 01/64668和WO 01/98295中描述了衍生物，所述衍生物源自于羟吲哚骨架并且在1位具有芳基磺酰基。这些化合物在3位的取代显著不同。
特别地，WO 93/15051和WO 98/25901描述了1-苯磺酰基-1，3-二氢-2H-吲哚-2-酮作为加压素受体的配体，其中该羟吲哚结构在3位被两个烷基取代，所述烷基还可以一起形式环烷基(螺连接)。或者，所述螺环可以包含杂原子如氧和氮(任选具有取代基)。
WO 95/18105描述了1-苯磺酰基-1，3-二氢-2H-吲哚-2-酮作为加压素受体的配体，其在3位具有氮原子。另外，选自烷基、环烷基、苯基和苄基(在每种情况下任选具有取代基)的基团在3位连接。
WO 03/008407描述了1-苯基磺酰基羟吲哚类化合物，其中在3位吡啶基哌嗪通过氧羰基连接到羟吲哚上。
WO 2005/030755的实施例108描述了氨基甲酸酯化合物4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酸5-氰基-1-(2，4-二甲氧基-苯磺酰基)-3-(2-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基酯(根据IUPAC命名5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-甲氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯)。
WO 06/005609描述了所述2-乙氧基苯基脲类化合物N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基苯基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺(作为实施例119)和N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基苯基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺(作为实施例128)。
除对加压素V1b受体的结合亲和力外，其它性质对治疗和/或预防加压素-依赖性疾病也可能是有利的，例如 1.)相对于加压素V1a受体来说，对加压素V1b受体具有选择性，即对V1a受体的结合亲和力(Ki(V1a)(以单位″纳摩尔(nM)″测定)和对V1b受体的结合亲和力(Ki(V1b))(以单位″纳摩尔(nM)″测定)的商。商Ki(V1a)/Ki(V1b)越大，V1b选择性越大； 2.)相对于加压素V2受体来说，对加压素V1b受体具有选择性，即对V2受体的结合亲和力(Ki(V2)(以单位″纳摩尔(nM)″测定)和对V1b受体的结合亲和力(Ki(V1b))(以单位″纳摩尔(nM)″测定)的商。商Ki(V2)/Ki(V1b)越大，V1b选择性越大； 3.)相对于催产素OT受体来说，对加压素V1b受体具有选择性，即对OT受体的结合亲和力(Ki(OT)(以单位″纳摩尔(nM)″测定)和对V1b受体的结合亲和力(Ki(V1b))(以单位″纳摩尔(nM)″测定)的商。商Ki(OT)/Ki(V1b)越大，V1b选择性越大； 4.)代谢稳定性，例如使用在各物种(例如大鼠或人)的肝脏微粒体中体外测得的半衰期进行确定； 5.)即使有，也是较少的，细胞色素P450(CYP)酶的抑制细胞色素P450(CYP)是具有酶(氧化酶)活性的血红素蛋白的超家族的名称。它们对哺乳动物有机体内外来物质，例如药物或生物异源物质的降解(代谢)也是特别重要的。人有机体中CYP型和亚型的最重要代表是CYP 1A2、CYP 2C9、CYP 2D6和CYP 3A4。当同时给予CYP 3A4抑制剂(例如葡萄柚汁、甲腈咪胍、红霉素)和通过这种酶系统降解并由此竞争该酶处相同结合位点的药物时，它们的降解可能被延迟，并且所给予的药物的作用和副作用可能以一种不希望的方式增加； 6.)在水中合适的溶解度(以mg/ml表示)； 7.)适宜的药物动力学(在血浆或组织如脑中的本发明化合物浓度的时间曲线)。药物动力学可以通过下列参数进行表述半衰期、分布体积、血浆清除率、AUC(″曲线下面积″，在浓度-时间曲线下的面积)、口服生物利用度、脑/血浆比例； 8.)存在附着于血浆蛋白质的某一比例的活性物质(药物/血浆蛋白结合(PPB)值)； 9.)没有或仅有少量的hERG通道阻滞阻滞hERG通道的化合物可能延长QT时间间隔，由此导致严重的节律不齐(例如″扭转型室性心动过速″)。使用在文献中所述的置换试验，使用放射活性标记的多菲菜德(G.J.Diaz等，Journal of Pharmacological and ToxicologicalMethods，50(2004)，187-199)，有可能测定阻滞hERG通道的化合物的潜力。在此“多菲菜德试验″中的IC50越低，hERG阻滞越有效。此外，hERG通道的阻滞可以通过电物理实验，使用被hERG通道转染的细胞通过″全细胞膜片钳″进行测定(G.J.Diaz等，Journal ofPharmacological and Toxicological Methods，50(2004)，187-199)。
本发明的一个目的是提供一种具有高活性和选择性活性的化合物，优选特别是对于加压素v1b受体具有高活性和选择性活性，用于治疗或预防各种加压素-依赖性疾病。此外，本发明的物质将具有上述1.)-9.)中的一个或多个优点，特别是相对于V1a受体对V1b受体具有适宜的选择性。
本发明的目的通过通式(I)的化合物实现
其中 R1是乙氧基； R2是氢； R3是氰基； R4是氢； R5是氢、甲氧基或乙氧基； R6是氢或甲氧基； R7是氢、甲基、乙基、正丙基或异丙基； X1是-NH-； X2是N或CH； X3是N或CH； 其中X2和X3不能同时是N(也就是说最多只有一个是氮原子)；及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
因此，本发明涉及通式(I)的化合物(下文也称为″化合物(I)″)，包括其互变异构体形式，以及化合物(I)的药学上可接受的盐和化合物(I)的前药。
本发明的一个优选主题是通式(I)的化合物， 其中 R1是乙氧基； R2是氢； R3是氰基； R4是氢； R5是氢或甲氧基，特别是甲氧基； R6是氢或甲氧基，特别是甲氧基； R7是氢、甲基、乙基、正丙基或异丙基； X1是-NH-； X2是N或CH； X3是N或CH； 其中X2和X3不能同时是氮原子； 及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
本发明的一个特别优选主题是通式(I)的化合物， 其中 R1是乙氧基； R2是氢； R3是氰基； R4是氢； R5是氢或甲氧基，特别是甲氧基； R6是氢或甲氧基，特别是甲氧基，特别是甲基或乙基； R7是氢、甲基或乙基； X1是-NH-； X2是N； X3是CH； 及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
本发明的另一个特别优选主题是通式(I)的化合物， 其中 R1是乙氧基； R2是氢； R3是氰基； R4是氢； R5是氢或甲氧基，特别是甲氧基； R6是氢或甲氧基，特别是甲氧基； R7是氢、甲基或乙基，特别是甲基或乙基； X1是-NH-； X2是CH； X3是N； 及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
本发明的另一个特别优选主题是通式(I)的化合物， 其中 R1是乙氧基； R2是氢； R3是氰基； R4是氢； R5是氢或甲氧基，特别是甲氧基； R6是氢或甲氧基，特别是甲氧基； R7是氢、甲基或乙基，特别是甲基或乙基； X1是-NH-； X2是CH； X3是CH； 及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
本发明的另一个特别优选主题是通式(I)的化合物， 其中 R1是乙氧基； R2是氢； R3是氰基； R4是氢； R5是甲氧基； R6是甲氧基； R7是甲基或乙基； X1是-NH-； X2是CH和X3是N；或 X2是N和X3是CH； 及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
本发明的优选实施方案的实例是通式(I)的化合物，及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药，其中 R1是乙氧基， R2是氢， R3是氰基， R4是氢， X1是NH， 以及其中基团X2、X3、R5、R6和R7在每种情况下具有下表1每列中所列的含义。
表1 特别地，本发明涉及下列式Ia的化合物(其相当于表1的实施例1化合物)
及Ia的药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
特别地，本发明还涉及表1实施例7的化合物及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
特别地，本发明还涉及表1实施例31的化合物及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
特别地，本发明还涉及表1实施例37的化合物及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
本发明的化合物(I)或(Ia)在2-羟吲哚环的3位具有手性中心。因此，本发明的通式(I)或(Ia)化合物可以以对映异构体(外消旋体)的1∶1混合物的形式存在，或可以以对映异构体的非外消旋混合物形式存在(其中两个对映异构体之一被富集，即或者是(左旋)对映异构体，其使线偏振光的偏振平面转向左(下称(-)-对映异构体)，或是(右旋)对映异构体，其使线偏振光的偏振平面转向右(下称(+)-对映异构体))，或是以基本上对映异构体纯的化合物(对映异构体过量ee＞90％)的形式存在，即以基本上对映异构体纯的(-)-对映异构体或(+)-对映异构体的形式存在。优选地，所述化合物以基本上对映异构体纯的化合物的形式存在。特别优选的是基本上对映异构体纯的(ee＞90％)化合物。
因此，本发明不仅提供纯的对映异构体以及它们的混合物，例如，一种对映异构体以富集形式存在的混合物，而且提供所述的外消旋体。本发明还提供(I)或(Ia)的纯的对映异构体的药学上可接受的盐、互变异构体和前药，以及以(I)或(Ia)的药学上可接受的盐、互变异构体和前药的形式存在的对映异构体混合物。
本发明的优选实施方案是如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物，其特征在于它们以旋光体存在，并且在每种情况下，它们都是游离碱形式的所述通式(I)化合物的对映异构体，或其药学上可接受的盐、互变异构体形式或前药，该对映异构体使偏振光的偏振平面向左旋(即左旋的对映异构体)。下文中，化合物(I)或(Ia)的左旋对映异构体也被称为(-)-对映异构体。
本发明的优选实施方案是如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物，其特征在于它们以旋光体形式存在，其中这些化合物的手性C-3环碳原子的绝对构型相当于游离碱形式的式(Ia)化合物的(-)-对映异构体的C-3处的绝对构型。这种构型在下文中也被称为″优选的构型″。X-射线结构分析表明，相对于羟吲哚环3位碳原子处的不对称性中心，式(Ia)化合物的(-)-对映异构体具有S构型。
根据本发明，优选如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物、其互变异构体、其药学上可接受的盐和其前药，其中相应的(-)-对映异构体以光学纯度(对映异构体过量，ee)大于50％存在。
根据本发明，优选如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物、其互变异构体、其药学上可接受的盐和其前药，其中在C-3环碳原子处具有优选绝对构型的对映异构体以大于50％的光学纯度(对映异构体过量，ee)存在。
根据本发明，优选如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物、其互变异构体、其药学上可接受的盐和其前药，其中相应的(-)-对映异构体以光学纯度(对映异构体过量，ee)大于90％存在。
根据本发明，优选如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物、其互变异构体、其药学上可接受的盐和其前药，其中在C-3环碳原子处具有优选绝对构型的对映异构体以大于90％的光学纯度(对映异构体过量，ee)存在。
本发明的同样优选实施方案是如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物，其特征在于它们以非旋光体形式存在，也就是以外消旋体的形式存在，或者以该外消旋体的药学上可接受的盐、互变异构体形式或前药的形式存在。
本发明的另一主题涉及包含至少一种如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的药物。
本发明的另一主题涉及如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药用作药物。
本发明的另一主题涉及如上所定义的式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药用于治疗或预防疾病，所述疾病特别是加压素依赖性疾病或在本文中提及的疾病。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗和/或预防至少一种加压素依赖性疾病和/或用于制备用于治疗和/或预防至少一种加压素依赖性疾病的药物。加压素-依赖性疾病是那些，其中疾病的发展至少在某种程度上取决于加压素，即这样的疾病，其中加压素水平升高，加压素可以直接或间接地促成疾病像(disease picture)。
本发明还涉及本发明的化合物(I)或(Ia)和/或其药学上可接受的盐或前药用于治疗和/或预防疾病的用途，其中所述疾病的发展至少在某种程度上取决于加压素，即这样的疾病，其中加压素水平升高，加压素可以直接或间接地促成疾病像。本发明还涉及本发明的化合物(I)或(Ia)和/或其药学上可接受的盐或前药在制备用于治疗和/或预防这样的疾病的药物中的用途。
本发明特别涉及至少一种如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药用于治疗和/或预防至少一种疾病的用途，所述疾病选自糖尿病，特别是尿崩症、胰岛素抗性、夜遗尿、失禁、出现凝血障碍的疾病和/或延迟排尿的疾病，以及在制备用于治疗和/或预防至少一种所述疾病的药物中的用途。
本发明特别涉及至少一种如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药用于治疗和/或预防至少一种疾病的用途，所述疾病选自高血压、肺动脉高血压、心力衰竭、心肌梗死、冠状动脉痉挛、不稳定心绞痛、PTCA(经皮腔内冠状动脉成形术)、心脏缺血、肾脏体系紊乱、浮肿、肾血管痉挛、肾皮质坏死、低钠血症、低钾血症、Schwartz-Bartter综合征、胃肠道紊乱、胃炎性血管痉挛(gestritic vasospasm)、肝硬化、胃肠溃疡、呕吐、化疗期间的呕吐和/或旅行病(travel sickness)，以及在制备用于治疗和/或预防至少一种所述疾病的药物中的用途。
本发明的化合物(I)或(Ia)、它们的盐、它们的互变异构体和它们的前药还能够用于治疗各种加压素-依赖性疾病，其表现出中枢性神经病因或HPA轴(下丘脑脑垂体肾上腺轴)改变，例如用于治疗情感障碍如抑郁症和双相性精神障碍。这些包括例如精神抑郁症(dythymicdisorders)、恐怖症、创伤后精神紧张性(精神)障碍、一般焦虑症、惊恐性障碍、季节性抑郁症和睡眠障碍。
本发明的化合物(I)或(Ia)、它们的盐、它们的互变异构体和它们的前药同样能够用于治疗焦虑症和与应激反应有关的焦虑症，例如，一般焦虑症、恐怖症、外伤后的焦虑症、惊恐性焦虑症、强迫性焦虑症、与急性应激反应有关的焦虑症和社交恐怖症。本发明的化合物还能够用于治疗记忆缺陷、阿尔茨海默氏病、精神病、精神障碍、睡眠障碍和/或库兴综合征以及所有与应激反应相关的疾病。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗情感障碍和/或用于制备用于治疗情感障碍的药物。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗焦虑症和/或与应激反应有关的焦虑症和/或用于制备用于治疗焦虑症和/或与应激反应有关的焦虑症的药物。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗记忆缺陷和/或阿尔茨海默氏病和/或用于制备用于治疗记忆缺陷和/或阿尔茨海默氏病的药物。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗精神病和/或精神障碍和/或用于制备用于治疗精神病和/或精神障碍的药物。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗库兴综合征或其它与应激反应有关的疾病和/或用于制备用于治疗库兴综合征或其它与应激反应有关的疾病的药物。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗睡眠障碍和/或用于制备用于治疗睡眠障碍的药物。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗抑郁症和/或用于制备用于治疗抑郁症的药物。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗儿童期起病的心境障碍和/或用于制备用于治疗儿童期起病的心境障碍的药物。术语″儿童期起病的心境障碍″被理解为是指早在儿童期就开始的心境障碍和抑郁症。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗血管舒缩症状和/或体温调节功能障碍，例如，″热潮红″症状。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗和/或预防精神作用物质依赖(drug dependencies)、药物依赖(medicamentdependencies)，和/或由其它因素介导的依赖性，用于治疗和/或预防由调节依赖性的一种或多种因素的戒除所引起的应激反应，和/或用于治疗和/或预防应激反应引起的精神作用物质依赖、药物依赖和/或由其它因素介导的依赖性的复发。
本发明的另一主题涉及如上所定义的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药的用途，用于治疗和/或预防精神分裂症和/或精神病。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗和/或预防下面至少一种疾病的方法，所述疾病选自糖尿病，特别是尿崩症(diabetes insipidus)、胰岛素抗性、夜遗尿、失禁、出现凝血障碍的疾病和延迟排尿，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗和/或预防下面至少一种疾病的方法，所述疾病选自高血压、肺动脉高血压、心力衰竭、心肌梗死、冠状动脉痉挛、不稳定心绞痛、PTCA(经皮腔内冠状动脉成形术)、心脏缺血、肾脏体系紊乱、浮肿、肾血管痉挛、肾皮质坏死、低钠血症、低钾血症、Schwartz-Bartter综合征、胃肠道紊乱、胃炎性血管痉挛、肝硬化、胃肠溃疡、呕吐、化疗期间的呕吐和旅行病，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗和/或预防情感障碍的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗和/或预防焦虑症和/或与应激反应有关的焦虑症的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗和/或预防记忆缺陷和/或阿尔茨海默氏病的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗和/或预防精神病和/或精神障碍的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗库兴综合征的方法，其特征在于给予该患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗睡眠障碍的方法，其特征在于给予该患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗抑郁症的方法，其特征在于给予该患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗和/或预防血管舒缩症状和/或温度调节功能障碍例如″热潮红″症状的方法，其特征在于给予该患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗和/或预防精神作用物质依赖、药物依赖和/或由其它因素介导的依赖性的方法，用于治疗和/或预防由调节依赖性的一种或多种因素的戒除所引起应激反应的方法，和/或用于治疗和/或预防在精神作用物质依赖、药物依赖和/或由其它因素介导的依赖性中由应激反应引起的复发的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及在患者中治疗和/或预防精神分裂症和/或精神病的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种通式(I)或(Ia)的化合物和/或其药学上可接受的盐或前药。
本发明的另一主题涉及如上所定义的方法，其特征在于所述患者是哺乳动物，优选是人或非人类哺乳动物或非人类转基因哺乳动物。
如上所定义的通式(I)或(Ia)的化合物，它们的药学上可接受的盐和前药可以由本领域技术人员根据本发明的技术教导在本身已知的方法步骤的设备和/或类似设备中进行制备。
另一优选实施方案涉及如上所述的通式(I)或(Ia)的化合物、它们的互变异构体、它们的前药和它们的药学上可接受的盐，其特征在于它们对加压素受体亚型V1b相对于至少一种密切相关的加压素/催产素受体亚型(例如加压素V1a，加压素V2和/或催产素)是选择性的。
另一优选实施方案涉及如上所述的通式(I)或(Ia)的化合物、它们的互变异构体、它们的前药和它们的药学上可接受的盐，其特征在于它们具有改善的代谢稳定性。
化合物的代谢稳定性可以被测定，例如，将此化合物的溶液与特定物种(例如大鼠、狗或人类)的肝微粒体一起培养，然后在这些条件下测定所述化合物的半衰期(RS Obach，Curr Opin Drug Discov Devel.2001，4，36-44)。观察到较长的半衰期有可能得出该化合物的代谢稳定性得到改善的结论。在人肝微粒体存在下的稳定性是特别使人感兴趣的，因为它能够预测在人肝脏中该化合物的代谢分解。因此，具有增加代谢稳定性的化合物(在肝微粒体测试中进行测定)或许在肝脏中也会更慢地分解。在肝脏中的缓慢代谢分解可以导致化合物在体内的较高和/或更长时间保持的浓度(有效水平)，由此提高本发明化合物的消除半衰期(elimination half-life)。提高的和/或更长时间持续的有效水平可以导致该化合物在治疗或预防各种与加压素相关的疾病中的更好效果。此外，改善的代谢稳定性还可以导致在口服给药后生物利用度提高，这是因为所述化合物在肠内吸收后在肝脏中发生较低的代谢分解(所谓的首过效应)。因为该化合物的浓度(有效水平)提高了，提高的口服生物利用度可以导致口服给药后该化合物的效果更好。
另一优选实施方案涉及如上所述的通式(I)的化合物，其特征在于，与由现有技术已知的羟吲哚类化合物相比，所述化合物在患者中或者能够对治疗应用预测性报告的相关动物模型中，具有改善的药理学活性。
所述这些变量的优选定义的每一个可与任何其它变量的定义组合。
本发明特别涉及选自下列实施例的通式(I)的化合物，1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89和90，以及它们的互变异构体形式、它们的前药，特别是它们的生理学上可接受的盐和它们的非盐形式如水合物和/或溶剂合物。特别优选游离碱形式或酸加成盐形式的上述化合物。
本发明还特别涉及通式(I)的选自下列的实施例1-90化合物的(-)-对映异构体，1B、2B、3B、4B、5B、6B、7B、8B、9B、10B、11B、12B、13B、14B、15B、16B、17B、18B、19B、20B、21B、22B、23B、24B、25B、26B、27B、28B、29B、30B、31B、32B、33B、34B、35B、36B、37B、38B、39B、40B、41B、42B、43B、44B、45B、46B、47B、48B、49B、50B、51B、52B、53B、54B、55B、56B、57B、58B、59B、60B、61B、62B、63B、64B、65B、66B、67B、68B、69B、70B、71B、72B、73B、74B、75B、76B、77B、78B、79B、80B、81B、82B、83B、84B、85B、86B、87B、88B、89B和90B，以及式(I)化合物的互变异构体形式、前药，特别是它们的生理学上可接受的盐和非盐形式如水合物和/或溶剂合物。特别优选游离碱形式或酸加成盐形式的上述化合物。
术语″前药″被理解为是指那些化合物，其在体内被代谢为本发明的化合物。前药的典型例子描述在C.G.Wermeth(Ed.)The Practice ofMedicinal Chemistry，Academic Press，San Diego，1996，第671-715页中。它们包括，例如，磷酸酯、氨基甲酸酯或氨基酸、酯等。在本发明中，式I化合物的适宜前药是式I的化合物，其中携带R7的氮原子是酰胺/肽基团的一部分，即所述氮携带酰基如C1-C4-烷基羰基如乙酰基、丙酰基、正丁酰基(正丙基羰基)、异丁酰基、正丁基羰基或叔丁基羰基(新戊酰基)、苯甲酰基、来源于氨基酸的CO结合基团例如来源于甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸等的CO结合基团。适宜的前药还包括烷基羰氧基烷基氨基甲酸酯，其中式I中的基团R7是式-C(＝O)-O-CHRa-O-C(＝O)-Rb部分，其中Ra和Rb互相独立地选自C1-C4-烷基。这些氨基甲酸酯已经由J.Alexander，R.Cargill，S.R.Michelson，H.Schwam，J.Medicinal Chem.1988，31(2)，318-322作了概括性描述。这些基团在代谢条件下被裂解，得到式I的化合物，其中R7是氢。
此外，本发明涉及式I化合物的药学上可接受的盐，其也被称为生理学上可接受的盐。所述盐通常可由本发明化合物(I)的游离碱与适宜的酸反应获得。适宜的酸例如列在Fortschritte derArzneimittelforschung″[Advances in Drug Research]，1966，
Verlag，Vol.10，pp.224-285中。它们包括，例如，盐酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、磷酸、甲磺酸、乙酸、甲酸、马来酸和富马酸。
本发明的化合物通过各种途径给药后都是有效的。所述给药途径例如可以是静脉内、肌内、皮下、局部、气管内、鼻内、经皮、阴道、直肠、舌下、口腔或口服，并且通常可以是静脉内、肌内或特别是口服。
本发明还涉及药物组合物，其包含本发明的化合物(I)和/或其互变异构体和/或其药学上可接受的盐和/或其前药以及适宜的制药载体(药物载体)。化合物I在药物组合物中的数量可以取决于该组合物的剂型并且例如可以在0.0001mg/g-1g/g该组合物的范围，特别是可以在范围0.001mg/g-0.5g/g该组合物。
这些药物载体根据药物形式和所期望的给药方式进行选择。
本发明的通式(I)化合物或，如果合适的话，这些化合物的适宜的盐能够用于制备口服、舌下、口腔、皮下、肌内、静脉内、局部、气管内、鼻内、经皮、阴道或直肠给药的药物组合物，所述药物组合物可以以单位剂型的形式与常规药物载体混合给予动物或人，用于预防或治疗上述障碍或疾病。
适宜的一贯的给药形式(单位剂型)包括用于口服给药的形式，例如片剂、胶囊、粉剂、粒剂、口服摄取的溶液或悬浮液，用于舌下、口腔、气管内或鼻内给药的形式，气雾剂，植入物，皮下、肌内或静脉内给药的形式以及直肠给药的形式。
对于局部给药，本发明的化合物能够以乳剂、膏剂或洗剂的形式使用。
为了达到所需的预防或治疗效果，该活性化合物的剂量可以在0.01至50mg/kg体重/日的范围内变化。
每单位剂量可以包含0.05至5000mg，优选1-1000mg的活性化合物和药物载体。此单位剂量可以每日给药1-5次，这样给予0.5-25000mg，优选1-5000mg的日剂量。
如果制备的是片剂形式的固体组合物，那么将该活性化合物与药物载体如明胶、淀粉、乳糖、硬脂酸镁、滑石、二氧化硅等混合。
所述片剂可以用蔗糖、纤维素衍生物或其它合适物质包衣或者进行其它处理，以使其具有持久或延迟的活性，并使得连续释放出预定量的活性化合物。
胶囊形式制剂通过将活性化合物与增量剂混合并将所得混合物容纳在软或硬胶囊中获得。
糖浆或酏剂形式的制剂或者以滴剂形式给药的制剂可以含有活性化合物以及甜味剂，优选不含卡路里的甜味剂、作为防腐剂的对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯、调味剂和适宜的着色剂。
水可分散性粉剂或粒剂可以包含与分散剂、润湿剂或悬浮剂如聚乙烯吡咯烷酮以及甜味剂或矫味剂混合的活性化合物。
直肠或阴道给药通过使用栓剂实现，栓剂使用在肛温融化的粘合剂进行制备，所述粘合剂例如是可可脂或聚乙二醇。肠胃外给药通过使用含水悬浮液、等渗盐溶液或无菌和可注射溶液起作用，其包含药理学适宜的分散剂和/或润湿剂，例如丙二醇或聚乙二醇。
所述活性化合物还能够配制成微胶囊或中心体(centrosomes)的形式，如果适宜的话，与一种或多种载体或添加剂一起进行配制。
除通式(I)的化合物或它们的药学上可接受的盐或前药外，本发明的组合物可以包含其它活性化合物，所述其它活性化合物对治疗如上所述的损害或疾病是有益的。
因此，本发明还涉及药物组合物，其包含多种活性化合物，其中这些活性化合物中的至少一种是本发明的化合物(I)或其互变异构体、盐或前药。
本发明化合物的制备 制备本发明的羟吲哚衍生物的合成路线的例子描述如下。
本发明的羟吲哚的制备能够通过如合成方案1和2中所示的不同途径进行。在这些合成方案中，所述变量具有如通式(I)中相同的含义。
所述3-羟基-1，3-二氢吲哚-2-酮IV可以通过将金属化的杂环III加入到靛红(isatins)II的3-酮基中得到。该金属化的杂环，例如，相应的格利雅(Mg)化合物或有机锂化合物，可以以常规方式由卤素或烃化合物获得。示范性的方法可以在Houben-Weyl，Methoden derOrganischen Chemie[Methods of organic chemistry]，Vol.13，1-2，Chap.Mg和Li化合物中找到。所述靛红II或者是市场上可买到的或者以类似于文献(Advances in Heterocyclic Chemistry，A.R.Katritzky和A.J.Boulton，Academic Press，New York，1975，18，2-58；J.Brazil.Chem.Soc.12，273-324，2001)中所述的方法制备。
使用KCN或Zn(CN)2以及Pd(O)催化剂在溶剂如二甲基甲酰胺或四氢呋喃中，如果合适的话还加入碱例如K2CO3或其它碳酸盐和胺，在高温下，有可能将在6-元芳族环中含有碘取代基，例如基团R3或R4的3-羟基羟吲哚IV转化为类似的含氰基-的3-羟基-羟吲哚IV。适合作为Pd(O)盐使用的是，例如，由PdCl2或PdOAc2通过加入膦，例如三(邻甲苯基)膦，原位制得的过渡金属配合物。还可能使用商业的钯配合物，例如，催化剂四(三苯基膦)钯(O)和/或附加的膦配体。
所述3-羟基羟吲哚IV能够转化为在3位携带离去基团LG’的化合物V，其中所述离去基团LG’可以是常规离去基团，例如，卤化物、甲磺酸酯基(mesylate)或甲苯磺酸酯基(tosylate)。所述中间体V其中，例如，LG’＝氯，能够通过醇IV用亚硫酰氯在碱如吡啶存在下处理进行制备。或者，使用甲磺酰氯在碱如三乙胺存在下通过转化成甲磺酸酯，可能获得醇IV。随后，化合物V与胺如氨水反应，在取代反应后，得到类似的胺VI。然后，通过用磺酰氯VII处理，化合物如VI在用强碱如叔丁醇钾或氢化钠在DMF中脱质子化反应后，被转化为产物VIII。所使用的磺酰氯VII或者是市场上可买到的，或者能够以与已知方法类似的方式进行制备(参见，例如，J.Med.Chem.40，1149(1997))。
通过与衍生氨基的试剂如氯甲酸酯、异氰酸酯或氨基甲酰氯通过常规方法进行反应，化合物VIII被转化为化合物IX(参见J.March，Advanced Organic Chemistry，1992，4th版，Wiley，New York，p.417-421；499；903)。例如，作为离去基团的LG在化合物IX中可以是O苯基，其通过VIII与氯甲酸苯酯在碱如吡啶存在下反应获得。
随后与胺X反应，如果合适的话在高温下并加入辅助的碱如三乙胺或二异丙基乙胺，得到本发明通式(I)的化合物。该胺X或者是市场上可买到的或者可以通过参考文献中已知的方法制备。
制备胺X的另一种方法是胺与醛或酮在还原剂如氰基硼氢化钠或乙酰氧基硼氢化钠存在下反应，即进行还原性胺化反应(J.March，AdvancedOrganic Chemistry，1992，4th版，Wiley，New York，第411；898页)。
合成方案1
如合成方案2中所述，类似于上面的合成方案1，制备本发明的化合物I的合成步骤的顺序可以重新安排。因此，首先，化合物VI中的氨基例如使用氯甲酸苯酯进行衍生化反应，得到化合物XIa和/或XIb。在过量胺X存在下或借助于辅助碱，可以制得脲衍生物XII，该脲衍生物XII在随后的反应中，在常规条件下通过使用强碱如氢化钠或叔丁醇钾使化合物XII脱质子化，并随后用在DMF中的磺酰氯VII处理，可以转化为本发明的化合物I。
合成方案2
下面，本发明使用实施例进行更详细地说明，所述实施例不构成对本发明范围的限制。
本发明的化合物能够通过多种合成途径制备。因此，在合成方案1和2中所述的方法，仅基于所提及的实施例进行更详细地举例说明，而不受合成途径1或2或所提及的类似方法的限制。
实验部分 实施例1 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺 1a)3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-3-羟基-5-碘-1，3-二氢-2H-吲哚-2-酮 在冰浴冷却下，将20.86g(76.40mmol)5-碘靛红在400ml无水四氢呋喃(THF)中进行搅拌，接着加入3.22g(80.50mmol，60％w/w)氢化钠，每次加入少许，将温度保持在0-10℃之间。在冰浴冷却下，将所述悬浮液搅拌1小时，在此期间，制得吡啶格氏试剂。在室温下，20g(80.30mmol)2-乙氧基-3-碘吡啶溶于400ml无水THF中，接着用5-10分钟的时间，冷却下，在22至15℃之间将95.6ml(在THF中的1M溶液，95.60mmol)溴化乙基镁加入到此溶液中。将所述溶液搅拌20分钟，在此期间，溶液颜色从无色变为轻微浅黄色。
然后，用5-10分钟时间，将所述吡啶格氏试剂的溶液加入到在冰浴中冷却的该5-碘靛红钠盐的溶液中，所述温度在5至18℃之间波动。所述格氏试剂加毕后，除去冰浴，接着再将反应混合物在室温下搅拌2小时。加入过量饱和氯化铵溶液，随后加入乙酸乙酯，将该混合物再搅拌5分钟。移出水相并用乙酸乙酯萃取(2x)。将合并的有机相用水(2x)洗涤，接着在减压下除去溶剂。首先，未反应的5-碘靛红从稀溶液中沉淀析出并被除去，进一步浓缩后，产物也结晶析出。将该悬浮液储存在5℃冰箱中2小时，然后滤出略浅黄色的固体并用少量乙酸乙酯洗涤。在40℃干燥后，分离得到所需的3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-3-羟基-5-碘-1，3-二氢-2H-吲哚-2-酮(17.1g，43.16mmol，57％)。
ESI-MS[M+H+]＝397.05 计算值C15H13IN2O3＝396.19 1b)5-氰基-3-羟基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-1，3-二氢吲哚-2-酮 在氮气氛中，将7.1g(17.92mmol)3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-3-羟基-5-碘-1，3-二氢-2H-吲哚-2-酮在100ml无水THF中在室温下进行搅拌。加入2.1g(17.92mmol)氰化锌，接着加入0.51g(0.45mmol)四(三苯基膦)钯(O)。将所述反应混合物直接转移到在100℃预热的油浴中。将所述混合物在100℃(油浴温度)搅拌30分钟后，加入另外0.51g(0.45mmol)的催化剂。将所述混合物总共搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，并加入过量的水。所述混合物用乙酸乙酯(3x)萃取，将合并的有机相用水(3x)洗涤。在减压下将溶剂蒸发至干，接着用少量的乙酸乙酯使残余物变成淤浆。过滤出略浅黄色的固体，用乙酸乙酯洗涤并在真空烘箱中干燥。能分离得到3.7g(12.44mmol，69.4％)所需产物5-氰基-3-羟基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-1，3-二氢吲哚-2-酮。
ESI-MS[M+H+]＝296.05 计算值C16H13N3O3＝295.30 1c)3-氯-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代二氢吲哚-5-腈 在氮气氛中，将6.00g(20.32mmol)5-氰基-3-羟基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-1，3-二氢吲哚-2-酮悬浮在60ml无水二氯甲烷(分子筛干燥过)中。然后，加入2.30ml(28.45mmol)吡啶。将反应混合物冷却至0℃，然后滴加2.06ml(28.45mmol)纯的亚硫酰氯(放热反应)。将所述混合物在室温下搅拌1小时。观察到生成一种黄色悬浮液。反应进程通过薄层层析(TLC)监测(硅胶，95∶5的二氯甲烷/甲醇)。将所述反应混合物小心地倾倒到冰-水中。搅拌15分钟后，移出有机相。水相用二氯甲烷(2x)萃取。合并所有的有机相，用硫酸镁干燥，过滤，并在减压下除去溶剂。得到无定形固体形式的5.70g(18.17mmol，89％)产物3-氯-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代二氢吲哚-5-腈，其在没有进一步提纯的情况下就用于下一步反应中。
ESI-MS[M+H+]＝314.1 计算值C16H12ClN3O2＝313.75 1d)3-氨基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代二氢吲哚-5-腈 将5.70g(18.17mmol)3-氯-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代二氢吲哚-5-腈溶于50ml二氯甲烷中。在氮气氛中，将14ml(98.11mmol)7N甲醇氨溶液缓慢滴加到冷却的反应溶液中。溶液的颜色变为淡黄色，接着将所述溶液在室温下搅拌过夜，在此期间产物缓慢地结晶出来。反应进程通过TLC监测(硅胶，9∶1的二氯甲烷/甲醇)。在减压下除去溶剂，将残余物再一次导出并溶于二氯甲烷中。然后，混合物用水萃取。分离相，接着将在相之间生成的油脂相加入到水相中。水相用乙酸乙酯萃取，直到油脂相溶解为止。合并获得的所有有机相，接着在减压下除去溶剂。所述残余物用乙醚研制，形成一种固态物质，将该固态物质滤出并在真空烘箱中在中等温度(35℃)进行干燥。得到4.54g(15.43mmol，85％)固体形式的3-氨基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代二氢吲哚-5-腈。
ESI-MS[M+H+]＝295.3 计算值C16H14N4O2＝294.32 1e)3-氨基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代二氢吲哚-5-腈 将3.54g(12.03mmol)3-氨基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代二氢吲哚-5-腈溶于80ml无水二甲基甲酰胺(分子筛干燥过)中。在氮气氛中并使用冰浴冷却下，每次少量地加入1.49g(13.23mmol)叔丁醇钾。反应混合物的颜色发生变化，将该棕色溶液在0℃下再搅拌1小时以确保脱质子化反应完全。在低温下，加入3.16g(13.23mmol)2，4-二甲氧基苯磺酰氯，将该混合物在0℃下再搅拌2小时。反应进程通过TLC监测(硅胶，9∶1的二氯甲烷/甲醇)。将所述反应混合物倾倒到冰-水中，然后用乙酸乙酯萃取。有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥，蒸除溶剂。将残余物悬浮在乙醚中，搅拌直到析出固体形式的产物为止，并可通过过滤移出。除去溶剂后，母液再次用乙醚(2x)处理直到最终为止，干燥后，得到4.67g(9.44mmol，79％)所需的固体形式的3-氨基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代二氢吲哚-5-腈。
ESI-MS[M+H+]＝495.15 计算值C24H22N4O6S＝494.53 1f)[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]氨基甲酸苯酯 将4.67g(9.44mmol)3-氨基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代二氢吲哚-5-腈溶于120ml吡啶中并使用冰浴冷却至0℃。加入1.30ml(10.39mmol)纯的氯甲酸苯酯，并将反应混合物在0℃下搅拌2小时。反应进程通过TLC监测(硅胶，95∶5的二氯甲烷/甲醇)。在减压下除去溶剂，尤其是吡啶，将残余物用水稀释并用乙酸乙酯(3x)萃取。将合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，用硫酸镁干燥并过滤，接着在减压下除去溶剂。通过反复加入甲苯并在旋转蒸发仪上蒸发，除去痕量的吡啶。将乙醚加入到分离的残余物中，固体结晶过夜，得到5.62g(9.14mmol，97％)所需产物[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]氨基甲酸苯酯。
ESI-MS[M+H+]＝615.15 计算值C31H26N4O8S＝614.64 1g)N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺 将1.00g(1.63mmol)[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]氨基甲酸苯酯，596mg(3.25mmol)1-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪和8ml干燥THF混合，并将该混合物在室温下搅拌24小时。借助于分析HPLC(RP，洗脱液乙腈/水，0.01％TFA)检测反应是否结束。除去溶剂，残余物用制备性HPLC在Chromolith柱(正相，来自默克)上提纯，使用二氯甲烷和6％甲醇作为洗脱液。重复柱色谱后，可以分离230mg(0.33mmol，21％)N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺。
或者，反应结束后，可以如下进行后处理和提纯除去溶剂。将粗物质溶于乙酸乙酯中，并用1N HCl萃取。在有机相中检测出杂质，产物在酸性水相中。因此，水相用2N NaOH溶液中和并用乙酸乙酯萃取。用硫酸镁干燥后，过滤并在减压下除去乙酸乙酯，所述产物可以用乙醚结晶。获得收率＞50％的N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺。
ESI-MS[M+H+]＝704.2 计算值C35H41N7O7S＝703.82 1H-NMR([D6]-DMSO，400MHz)δ[ppm]＝8.12(d，1H，J＝4.8Hz)，7.88(d，1H，J＝8.8Hz)，7.87(d，1H，J＝8.7Hz)，7.81(d，1H，J＝8.5Hz)，7.72(d，1H，J＝7.6Hz)，7.67(s，1H)，7.64(s，1H)，7.02(dd，1H，J＝5.0Hz，J＝7.5Hz)，6.69(d，1H，J＝8.9Hz)，6.65(s，1H)，4.15(m，2H)，3.85(s，3H)，3.44(s，3H)，3.20(m，4H)，2.76(m，2H，J＝11.1Hz)，2.34(m，4H)，2.11(m，4H)，1.81(m，2H，J＝11.3Hz)，1.64(m，2H，J＝10.7Hz)，1.37(m，2H)，1.06(t，1H，J＝7.0Hz)。
实施例5 N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-1-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基}-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺 5a)5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-3-[(苯氧羰基)氨基]二氢吲哚-2-羧酸苯酯 将2.78g(9.43mmol)3-氨基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代二氢吲哚-5-腈(根据实施例1，方法步骤1a)-1c)制备)悬浮在25ml二氯甲烷中，并用冰浴冷却至0℃。加入7.63ml(94.34mmol)吡啶，然后缓慢滴加2.37ml(18.87mmol)氯甲酸苯酯，以便温度不超过5-10℃。在冰浴融化的情况下，将反应在室温下搅拌过夜，然后沉淀析出略带颜色的固体。反应混合物用二氯甲烷稀释，加入水后，固体返回到溶液中。分离相，水相再次用二氯甲烷(1x)萃取。合并的有机相首先用水(3x)洗涤，然后用饱和氯化钠溶液(1x)洗涤。用硫酸镁干燥后，过滤并在减压下蒸除溶剂，将残余物溶解在乙醚中，加入10倍数量的戊烷。生成一种白色沉淀，将该沉淀抽吸滤出，用戊烷洗涤，并在真空烘箱中在40℃干燥。分级结晶后，总共分离得到4.46g(8.35mmol，89％)5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-3-[(苯氧羰基)氨基]二氢吲哚-1-羧酸苯酯。
ESI-MS[M+H+]＝535.15 计算值C30H22N4O6＝534.53 5b)N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺 在室温下，首先将760mg(1.42mmol)5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-3-[(苯氧羰基)氨基]二氢吲哚-1-羧酸苯酯加入到5ml THF中，并在未稀释下加入1.42g(5.69mmol)1-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪。将反应混合物搅拌过夜，反应通过TLC检测(硅胶，二氯甲烷/甲醇15∶5)以确定反应进程。该反应用乙酸乙酯稀释并用水(1x)和饱和氯化钠溶液(1x)洗涤。将有机相用硫酸镁干燥并过滤，并在减压下除去溶剂。将残余物导入少量乙醚中，加入6倍数量的环己烷。沉淀析出一种无色固体，其包含615mg(1.22mmol，86％)纯的N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺。
ESI-MS[M+H+]＝504.25 计算值C27H33N7O3＝503.61 5c)N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-1-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺 80.0mg(0.16mmol)N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺溶于二甲基甲酰胺中，并在0℃下加入7.63mg(0.19mmol，60％w/w)氢化钠。为使1，3-二氢-2H-吲哚-2-酮衍生物脱质子化，将混合物搅拌10分钟，然后加入39.4mg(0.19mmol)4-甲氧基苯磺酰氯。然后，将混合物温热至室温并搅拌30分钟。反应进程通过TLC监测(硅胶，二氯甲烷/甲醇1∶1)。将饱和碳酸氢钠溶液和乙酸乙酯加入到该反应混合物中，然后分离相。水相再用乙酸乙酯(1x)萃取。合并的有机相用水(1x)和饱和氯化钠溶液(1x)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，并在减压下除去溶剂。残余物用制备性MPLC(ISCO Companion，4g NP柱)使用移动相二氯甲烷/甲醇(5-20％)提纯。分离得到27.3mg(0.04mmol，23％收率，90％纯度)的N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-1-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺。
ESI-MS[M+H+]＝674.2 计算值C34H39N7O6S＝673.80 粗混合物结晶的可供选择的提纯方法包括正相常规柱色谱(NP-SiO2柱，Chromabond)使用流动相二氯甲烷/甲醇进行提纯，或者通过制备性HPLC(RP，流动相乙腈/水，0.01％TFA或0.01％乙酸)进行提纯。
实施例2-4和6-30 实施例2-4和6-30的化合物能够以与实施例1和/或实施例5类似的制备方式使用适宜的起始原料进行制备。
实施例2 N-{5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-1-[(2-甲氧基苯基)磺酰基]-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基}-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝674.05 计算值C34H39N7O6S＝673.80 实施例3 N-[5-氰基-1-[(2-乙氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺三氟乙酸盐 ESI-MS[M+H+]＝688.3 计算值C35H41N7O6S＝687.82 实施例4 N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-1-(苯磺酰基)-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝644.2 计算值C33H37N7O5S＝643.77 实施例31 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 首先将100mg(0.16mmol)[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]氨基甲酸苯酯(根据实施例1，方法步骤1a)-1f)制备)加入到8ml无水四氢呋喃(分子筛干燥过)中，并加入44.7mg(0.24mmo1)1-甲基-4-(哌啶-4-基)哌嗪。将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应进程通过TLC(硅胶，9∶1的二氯甲烷/甲醇)和LCMS(RP，乙腈/水作为洗脱液和0.01％TFA)监测。在减压下除去溶剂，将残余物导入到二氯甲烷中并用2N氢氧化钠溶液(1x)萃取。将合并的有机相用硫酸镁干燥并过滤，并在减压下除去溶剂。所述粗混合物用柱色谱(5g NP-SiO2柱体Chromabond)提纯两次，使用99∶1-80∶20的二氯甲烷/甲醇作为洗脱液。分离得到53.8mg(0.08mmol，47％)纯的N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺。
ESI-MS[M+H+]＝704.25 计算值C35H41N7O7S＝703.82 1H-NMR([D6]-DMSO，400MHz)δ[ppm]＝8.13(dd，1H，J＝1.4Hz，J＝4.8Hz)，7.88(d，1H，J＝8.5Hz)，7.87(d，1H，J＝8.8Hz)，7.81(dd，1H，J＝1.6Hz，J＝8.6Hz)，7.71(dd，1H，J＝1.4Hz，J＝7.6Hz)，7.68(d，1H，J＝1.3Hz)，7.65(s，1H)，7.02(dd，1H，J＝4.9Hz，J＝7.6Hz)，6.68(d，1H，J＝8.9Hz)，6.65(s，1H)，4.17(m，2H)，3.85(s，3H)，3.80(m，2H)，3.44(s，3H)，2.62(m，2H)，2.41-2.12(m，9H)，2.12(s，3H)，1.61(m，2H)，1.16(m，2H)，1.09(t，3H，J＝7.0Hz). 实施例32-36 实施例32-36的化合物能够以与实施例1、5和/或31类似的制备方式使用适宜的起始原料进行制备。
实施例32 N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-1-[(2-甲氧基苯基)磺酰基]-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝674.8 计算值C34H39N7O6S＝673.80 实施例33 N-[5-氰基-1-[(2-乙氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺三氟乙酸盐 ESI-MS[M+H+]＝688.2 计算值C35H41N7O6S＝687.82 实施例34 N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-1-(苯磺酰基)-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝644.7 计算值C33H37N7O5S＝643.77 实施例35 N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-1-[(4-甲氧基苯基)磺酰基]-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺三氟乙酸盐 ESI-MS[M+H+]＝674.2 计算值C34H39N7O6S＝673.80 实施例37 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-乙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 首先加入溶于8ml无水四氢呋喃(分子筛干燥过)中的100mg(0.16mmol)[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]氨基甲酸苯酯(根据实施例1，方法步骤1a)-1f)制备)。将74.9mg(0.24mmol)1-乙基-4-哌啶-4-基哌嗪和0.07ml三乙胺一起加入到反应混合物中，然后将其在室温下搅拌过夜。为了加速反应和实现完全的转化，将所述混合物再次加热到50℃。反应进程通过TLC(硅胶，9∶1的二氯甲烷/甲醇)和LCMS(RP，乙腈/水作为洗脱液和0.01％TFA)监测。在减压下除去溶剂，将残余物导入到二氯甲烷中并用2N氢氧化钠溶液(1x)萃取。将合并的有机相用硫酸镁干燥并过滤，并在减压下除去溶剂。粗混合物首先用硅胶柱色谱提纯(柱子20x200mm)，使用二氯甲烷和2％甲醇作为洗脱液。将合并的、稍微有点杂质的产物馏分用制备性HPLC在Chromolith柱(正相，来自Merck)上进行再次提纯，使用二氯甲烷和甲醇(用15min甲醇的梯度0-10％体积)洗脱。得到20mg(0.03mmol，17％)所需的N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-乙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺。
ESI-MS[M+H+]＝718.25 计算值C36H43N7O7S＝717.85 1H-NMR([D6]-DMSO，400MHz)δ[ppm]＝8.13(dd，1H，J＝1.2Hz，J＝4.6Hz)，7.88(d，1H，J＝8.2Hz)，7.87(d，1H，J＝8.7Hz)，7.81(dd，1H，J＝1.4Hz，J＝8.6Hz)，7.72(dd，1H，J＝1.3Hz，J＝7.6Hz)，7.68(d，1H，J＝1.1Hz)，7.66(s，1H)，7.02(dd，1H，J＝4.9Hz，J＝7.6Hz)，6.68(dd，1H，J＝2.0Hz，J＝8.8Hz)，6.65(d，1H，J＝2.2Hz)，4.17(m，2H)，3.85(s，3H)，3.81(m，2H)，3.44(s，3H)，2.62(m，2H)，2.43-2.29(m，11H)，1.61(m，2H)，1.15(m，2H)，1.09(t，3H，J＝7.0Hz)，0.97(t，3H，J＝7.1Hz). 实施例38-90 实施例38-90的化合物能够以与实施例1、5、31、37、55、61和/或67类似的制备方式使用适宜的起始原料进行制备。
实施例40 N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-1-(苯磺酰基)-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-乙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝658.25 计算值C34H39N7O5S＝657.79 实施例43 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-丙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺ESI-MS[M+H+]＝732.3 计算值C37H45N7O7S＝731.88 实施例55 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-哌嗪-1-基哌啶-1-羧酰胺 55a)4-[1-({[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]氨基}羰基)哌啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯 首先将100mg(0.16mmol)[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]氨基甲酸苯酯(根据实施例1，方法步骤1a)-1f)制备)加入到8ml无水四氢呋喃(分子筛干燥过)中，并加入65.8mg(0.24mmol)4-哌啶-4-基哌嗪-1-羧酸叔丁酯。然后，混合物在室温下搅拌过夜。反应进程通过TLC(硅胶，CH2Cl2/MeOH 9∶1)和LCMS(RP，移动相乙腈/水和0.01％TFA)监测。在减压下除去溶剂，将残余物导入到二氯甲烷中并用2N氢氧化钠溶液(1x)萃取。将合并的有机相用硫酸镁干燥并过滤，并在减压下除去溶剂。粗混合物用柱色谱提纯(5g NP-SiO2柱，Chromabond)使用98∶2的二氯甲烷/甲醇作为流动相。得到55.3mg(0.07mmol，43％)所需产物，其直接用于下一步反应中进行Boc脱保护。
ESI-MS[M+H+]＝790.30 计算值C39H47N7O9S＝789.91 55b)N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-哌嗪-1-基哌啶-1-羧酰胺 首先，将55.3mg(0.07mmol)4-[1-({[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]氨基}羰基)哌啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯加入到4ml甲醇中，并加入1.0ml5-6M在异丙醇中的盐酸。将所述混合物在室温下搅拌。反应进程通过TLC监测(硅胶，CH2Cl2/MeOH 9∶1)。完全转化后，除去醇溶剂，接着将残余物导入到二氯甲烷中，使用1N氢氧化钠水溶液通过萃取将pH值调节到9。有机相与水相分离，水相用二氯甲烷再萃取(2x)。将合并的有机相用硫酸镁干燥，并在减压下除去溶剂。将残余物用乙醚结晶。或者，该残余物还可以通过正相常规柱色谱(NP-SiO2柱，Chromabond)使用二氯甲烷/甲醇作为移动相进行提纯，或者通过制备性HPLC(RP，移动相乙腈/水，0.01％TFA)进行提纯。结晶后，分离得到15.9mg(0.023mmol，33％)N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-哌嗪-1-基哌啶-1-羧酰胺。
ESI-MS[M+H+]＝690.45 计算值C34H39N7O7S＝689.80 实施例25-30和56-60和85-90 实施例25-30和56-60和85-90的化合物还能够以与实施例1、5、31、37和/或55制备方法类似的方式使用适宜的起始原料进行制备。
实施例25 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-哌啶-4-基哌嗪-1-羧酰胺二(三氟乙酸盐) ESI-MS[M+H+]＝690.15 计算值C34H39N7O7S＝689.80 实施例85 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4，4’-联哌啶-1-羧酰胺二(三氟乙酸盐) ESI-MS[M+H+]＝689.25 计算值C35H40N6O7S＝688.81 在本发明的化合物(I)中，还可以根据合成方案1或2，随后通过还原性胺化反应引入取代基R7，其以举例的方式使用实施例61和67进行举例说明 实施例61 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-1’-甲基-4，4’-联哌啶-1-羧酰胺 首先将100mg(0.138mmol)4-[1-({[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]氨基}羰基)哌啶-4-基]氯化哌啶(相当于实施例85的氯化物盐)(根据实施例1，方法步骤1a)-1f)和实施例55，方法步骤55a)-55b)制备)加入到10ml二氯甲烷中。加入20μl(0.207mmol)甲醛水溶液(37％浓度)，并将反应混合物搅拌5分钟。该溶液变得稍微混浊。加入98mg(0.69mmol)硫酸钠和20μl(0.279mmol)冰乙酸，并将该混合物搅拌1.5h。每次少量加入48.7mg(0.207mmol)氢化试剂乙酰氧基硼氢化钠，15分钟后，该反应混合物变得澄清，然后不久反应混合物再次变得混浊。将混合物在室温下搅拌过夜并温热至40℃又1小时。反应混合物首先用30ml二氯甲烷稀释，然后用饱和碳酸氢钠溶液(3x)萃取。将合并的有机相用硫酸镁干燥并过滤，并在减压下蒸发溶剂。分离得到75mg粗产物，该粗产物用制备性HPLC在Chromolith柱(RP-18e，来自Merck，移动相乙腈/水，0.01％乙酸)上提纯。分离得到5mg(0.007mmol，5％)所需的N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-1′-甲基-4，4′-联哌啶-1-羧酰胺(相应地以乙酸盐的形式存在)。
ESI-MS[M+H+]＝703.2 计算值C36H42N6O7S＝702.83 实施例67 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-1’-乙基-4，4’-联哌啶-1-羧酰胺三氟乙酸盐 ESI-MS[M+H+]＝717.30 计算值C37H44N6O7S＝716.86 实施例1-90的外消旋化合物的外消旋体拆分 在一种示范性方式中，使用实施例1，通过在制备性手性柱上分离，所述外消旋体如下述被分离成它的对映异构体(实施例1A和1B) A.)实施例1的外消旋化合物的外消旋体拆分 100mg(0.14mmol)外消旋的N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺(实施例1)在手性制备柱上(Chiralcell OD，流速55ml/min)使用正庚烷/乙醇(700∶300)作为洗脱液进行分离。能够分离得到19mg(0.03mmol，19％)首先洗脱出的对映异构体，具有正旋光度(实施例1A)，和随后的8mg(0.01mmol，8％)具有负旋光度的对映异构体(实施例1B)。
实施例1A (+)-N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝704.25 计算值C35H41N7O7S＝703.82 HPLC(Chiralcel OD 0.46cm x 25cm；正庚烷/乙醇7∶3)Rf＝9.04min 旋光度α(22℃，589nm，CHCl3，1mg/ml)＝右旋 1H-NMR([D6]-DMSO，500MHz)δ[ppm]＝8.13(dd，1H，J＝1.6Hz，J＝4.9Hz)，7.89(d，1H，J＝8.9Hz)，7.88(d，1H，J＝8.6Hz)，7.82(dd，1H，J＝1.7Hz，J＝8.6Hz)，7.72(dd，1H，J＝1.5Hz，J＝7.7Hz)，7.68(d，1H，J＝1.6Hz)，7.65(s，1H)，7.02(dd，1H，J＝4.9Hz，J＝7.6Hz)，6.69(dd，1H，J＝2.2Hz，J＝8.9Hz)，6.66(d，1H，J＝2.1Hz)，4.17(m，2H)，3.86(s，3H)，3.45(s，3H)，3.21(m，4H)，2.77(m，2H，J＝11.0Hz)，2.34(m，4H)，2.12(m，4H)，1.82(m，2H，J＝10.9Hz)，1.64(m，2H，J＝10.8Hz)，1.37(m，2H)，1.08(t，3H，J＝7.0Hz). 实施例1B (-)-N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝704.25 计算值C35H41N7O7S＝703.82 HPLC(Chiralcel OD 0.46cm x 25cm；正庚烷/乙醇7∶3)Rf＝25.73min 旋光度α(22℃，589nm，CHCl3，1mg/ml)＝左旋 1H-NMR([D6]-DMSO，500MHz)δ[ppm]＝8.13(dd，1H，J＝1.2Hz，J＝4.7Hz)，7.88(d，1H，J＝8.9Hz)，7.87(d，1H，J＝8.5Hz)，7.81(dd，1H，J＝1.5Hz，J＝8.5Hz)，7.72(dd，1H，J＝1.1Hz，J＝7.6Hz)，7.68(s，1H)，7.64(s，1H)，7.01(dd，1H，J＝4.9Hz，J＝7.6Hz)，6.69(dd，1H，J＝1.9Hz，J＝9.0Hz)，6.66(d，1H，J＝1.9Hz)，4.16(m，2H)，3.85(s，3H)，3.45(s，3H)，3.20(m，4H)，2.77(m，2H，J＝11.5Hz)，2.34(m，4H)，2.12(m，4H)，1.82(m，2H，J＝11.3Hz)，1.64(m，2H，J＝11.5Hz)，1.37(m，2H)，1.07(t，3H，J＝7.0Hz)。
B.)实施例31的外消旋化合物的外消旋体拆分 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 (实施例31)在手性制备柱上(Chiralcell OD，流速55ml/min)使用正庚烷/乙醇(700∶300)作为洗脱液进行分离。首先洗脱出的对映异构体具有正旋光度(实施例31A)，以及随后洗脱出的对映异构体具有负旋光度(实施例31B)。
实施例31A (+)-N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝704.80 计算值C35H41N7O7S＝703.82 HPLC(Chiralcel OD 0.46cm x 25cm；正庚烷/乙醇7∶3)Rf＝9.60min 旋光度α(22℃，589nm，CHCl3，1mg/ml)＝右旋 1H-NMR([D6]-DMSO，500MHz)δ.[ppm]＝8.12(dd，1H，J＝1.6Hz，J＝4.8Hz)，7.87(d，1H，J＝8.5Hz)，7.86(d，1H，J＝8.8Hz)，7.81(dd，1H，J＝1.7Hz，J＝8.6Hz)，7.73(dd，1H，J＝1.5Hz，J＝7.7Hz)，7.69(s，1H)，7.67(d，1H，J＝1.5Hz)，7.02(dd，1H，J＝4.9Hz，J＝7.6Hz)，6.67(dd，1H，J＝2.2Hz，J＝8.9Hz)，6.65(d，1H，J＝2.1Hz)，4.14(m，2H)，3.83(s，3H)，3.80(m，2H)，3.42(s，3H)，2.60(m，2H)，2.39-2.10(m，9H)，2.10(s，3H)，1.60(m，2H)，1.12(m，2H)，1.06(t，3H，J＝7.0Hz). 实施例31B (-)-N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝704.80 计算值C35H41N7O7S＝703.82 HPLC(Chiralcel OD 0.46cm x 25cm；正庚烷/乙醇7∶3)Rf＝34.31min 旋光度α(22℃，589nm，CHCl3，1mg/ml)＝左旋 1H-NMR([D6]-DMSO，500MHz)δ[ppm]＝8.12(dd，1H，J＝1.6Hz，J＝4.9Hz)，7.86(d，1H，J＝8.7Hz)，7.85(d，1H，J＝8.8Hz)，7.81(dd，1H，J＝1.6Hz，J＝8.6Hz)，7.72(dd，1H，J＝1.4Hz，J＝7.6Hz)，7.69(s，1H)，7.67(d，1H，J＝1.6Hz)，7.02(dd，1H，J＝4.9Hz，J＝7.6Hz)，6.67(dd，1H，J＝2.2Hz，J＝8.9Hz)，6.64(d，1H，J＝2.0Hz)，4.13(m，2H)，3.83(s，3H)，3.80(m，2H)，3.42(s，3H)，2.60(m，2H)，2.42-2.10(m，9H)，2.10(s，3H)，1.60(m，2H)，1.12(m，2H)，1.06(t，3H，J＝7.0Hz). C.)实施例37的外消旋化合物的外消旋体拆分 N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-乙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺(实施例37)在手性制备柱上(Chiralcell OD，流速55ml/min)使用正庚烷/乙醇(700∶300)作为洗脱液进行分离。首先洗脱出的对映异构体具有正旋光度(实施例37A)，以及随后洗脱出的对映异构体具有负旋光度(实施例37B)。
实施例37A (+)-N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-乙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝718.30 计算值C36H43F3N7O7S＝717.85 HPLC(Chiralcel OD 0.46cm x 25cm；正庚烷/乙醇7∶3)Rf＝7.29min 旋光度α(22℃，589nm，CHCl3，1mg/ml)＝右旋 1H-NMR([D6]-DMSO，500MHz)δ[ppm]＝8.13(dd，1H，J＝1.7Hz，J＝4.9Hz)，7.89(d，1H，J＝8.6Hz)，7.88(d，1H，J＝8.8Hz)，7.82(dd，1H，J＝1.8Hz，J＝8.6Hz)，7.72(dd，1H，J＝1.7Hz，J＝7.7Hz)，7.69(d，1H，J＝1.7Hz)，7.67(s，1H)，7.02(dd，1H，J＝4.9Hz，J＝7.7Hz)，6.69(dd，1H，J＝2.2Hz，J＝8.9Hz)，6.66(d，1H，J＝2.2Hz)，4.18(m，2H)，3.85(s，3H)，3.81(m，2H)，3.44(s，3H)，2.62(m，2H)，2.42-2.24(m，11H)，1.62(m，2H)，1.15(m，2H)，1.09(t，3H，J＝7.1Hz)，0.96(t，3H，J＝7.2Hz). 实施例37B (-)-N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-乙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝718.25 计算值C36H43F3N7O7S＝717.85 HPLC(Chiralcel OD 0.46cm x 25cm；正庚烷/乙醇7∶3)Rf＝12.41min 旋光度α(22℃，589nm，CHCl3，1mg/ml)＝左旋 1H-NMR([D6]-DMSO，500MHz)δ[ppm]＝8.12(dd，1H，J＝1.6Hz，J＝4.9Hz)，7.88(d，1H，J＝8.5Hz)，7.87(d，1H，J＝8.8Hz)，7.80(dd，1H，J＝1.7Hz，J＝8.6Hz)，7.71(dd，1H，J＝1.5Hz，J＝7.7Hz)，7.68(d，1H，J＝1.5Hz)，7.66(s，1H)，7.00(dd，1H，J＝4.9Hz，J＝7.6Hz)，6.67(dd，1H，J＝2.2Hz，J＝8.9Hz)，6.65(d，1H，J＝2.1Hz)，4.16(m，2H)，3.84(s，3H)，3.80(m，2H)，3.44(s，3H)，2.61(m，2H)，2.41-2.23(m，11H)，1.60(m，2H)，1.14(m，2H)，1.08(t，3H，J＝7.1Hz)，0.95(t，3H，J＝7.2Hz). D.)外消旋化合物2-30、21-36和38-90的外消旋体拆分 以与外消旋化合物1、31和37的外消旋体拆分类似的方式，可以进行外消旋体2-30、32-36和38-90的分离，得到相应的(+)-对映异构体2A，3A，4A，5A，6A，7A，8A，9A，10A，11A，12A，13A，14A，15A，16A，17A，18A，19A，20A，21A，22A，23A，24A，25A，26A，27A，28A，29A，30A和32A，33A，34A，35A和38A，39A，40A，41A，42A，43A，44A，45A，46A，47A，48A，49A，50A，51A，52A，53A，54A，55A，56A，57A，58A，59A，60A，61A，62A，63A，64A，65A，66A，67A，68A，69A，70A，71A，72A，73A，74A，75A，76A，77A，78A，79A，80A，81A，82A，83A，84A，85A，86A，87A，88A，89A和90A 以及相应的(-)-对映异构体2B，3B，4B，5B，6B，7B，8B，9B，10B，11B，12B，13B，14B，15B，16B，17B，18B，19B，20B，21B，22B，23B，24B，25B，26B，27B，28B，29B，30B和32B，33B，34B，35B和38B，39B，40B，41B，42B，43B，44B，45B，46B，47B，48B，49B，50B，51B，52B，53B，54B，55B，56B，57B，58B，59B，60B，61B，62B，63B，64B，65B，66B，67B，68B，69B，70B，71B，72B，73B，74B，75B，76B，77B，78B，79B，80B，81B，82B，83B，84B，85B，86B，87B，88B，89B和90B。
对映异构体A和B也能够使用对映异构体纯的前体和中间体进行制备，例如类似于合成方案1或2，优选通过合成方案1。外消旋混合物分离成(+)-对映异构体和(-)-对映异构体可以通过手性制备色谱进行，优选通过相应的胺结构单元VI。
实施例7B (-)-N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(1-乙基哌啶-4-基)哌嗪-1-羧酰胺三氟乙酸盐 ESI-MS[M+H+]＝718.25 计算值C36H43N7O7S＝717.85 实施例40B (-)-N-[5-氰基-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-1-(苯磺酰基)-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-4-(4-乙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酰胺 ESI-MS[M+H+]＝658.25 计算值C34H39N7O5S＝657.79 实施例61B (-)-N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基)-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-1’-甲基-4，4’-联哌啶-1-羧酰胺三氟乙酸盐 ESI-MS[M+H+]＝703.30 计算值C36H42N6O7S＝702.83 1H-NMR([D6]-DMSO，500MHz)δ[ppm]＝9.26(1H，TFA的质子化，8.12(dd，1H，J＝1.7Hz，J＝4.9Hz)，7.87(dd，2H，J＝1.3Hz，J＝8.7Hz)，7.80(dd，1H，J＝1.8Hz，J＝8.5Hz)，7.80(m，2H)，7.66(s，1H)，7.00(dd，1H，J＝4.9Hz，J＝7.6Hz)，6.68(dd，1H，J＝2.2Hz，J＝8.9Hz)，6.65(d，1H，J＝2.1Hz)，4.16(m，2H)，3.85(s，6H)，3.44-3.41(m，5H)，2.85(m，2H)，2.73(m，2H)，2.57(m，2H)，1.81(m，2H)，1.55(m，2H)，1.34-1.22(m，4H)，1.08(t，3H，J＝7.0Hz)，0.92(m，2H). 实施例67B (-)-N-[5-氰基-1-[(2，4-二甲氧基苯基)磺酰基]-3-(2-乙氧基吡啶-3-基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-3-基]-1′-乙基-4，4′-联哌啶-1-羧酰胺三氟乙酸盐 ESI-MS[M+H+]＝717.35 计算值C37H44N6O7S＝716.86 通式X的胺能够根据合成方案1或2通过还原性胺化反应进行制备。在下文中，使用胺化合物1-乙基-4-哌啶-4-基哌嗪的制备作为例子进行说明 实施例911-乙基-4-哌啶-4-基哌嗪 91a)4-(4-乙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯 在冰冷却下，首先将29.2g(256mmol)N-乙基哌嗪和50.0g(256mmol)4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(相当于1-Boc-4-哌啶酮)加入到800ml乙醇中，并加入15.4g(256mmol)冰乙酸。然后，每次少量地将16.1g(256mmol)的乙酰氧基硼氢化钠加入到冷却的反应混合物中。开始，稍微有气体放出，在加入2/3的还原剂后，可以观察到泡沫。将反应混合物在室温下搅拌过夜。对于后处理，冷却下将200ml 2N氢氧化钠水溶液加入到反应溶液中，蒸除溶剂乙醇，然后将剩余的反应混合物用水稀释。所述混合物用乙醚(2x)萃取并用饱和氯化钠溶液洗涤(1x)，合并的有机相用硫酸镁干燥，过滤，并在减压下除去溶剂。获得黄色油状的所需产物，其随后在填充有硅胶的41 Nutsche过滤器上进行色谱分离，使用二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱液。总共得到40g(135mmol，53％)4-(4-乙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。
91b)氯化物盐形式的1-乙基-4-哌啶-4-基哌嗪 为了除去保护基，首先将40g(135mmol)4-(4-乙基哌嗪-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯加入到200ml甲醇和1.8L二氯甲烷中，并加入100ml在异丙醇中的5-6M HCl溶液。所述溶液变成一种悬浮液，并观察到有轻微气体放出。将反应混合物在40℃(水浴温度)搅拌1小时，接着在室温下搅拌过周末。为了完成脱保护以获得所需产物，加入另外50ml的在异丙醇中的5-6M HCl溶液，接着将该混合物在40℃进行搅拌。在旋转蒸发仪上蒸出二氯甲烷，加入另外200ml甲醇和30ml在异丙醇中的5-6M HCl溶液。在回流下搅拌1小时后，在强气体放出下生成一种白色悬浮液。随后，生成一种低粘性的悬浮液，将其冷却至室温。抽吸滤出沉淀，用甲醇和乙醚洗涤。干燥后，分离得到氯化物盐形式的36g(117mmol，87％)1-乙基-4-哌啶-4-基哌嗪。
1H-NMR(D2O，400MHz)δ[ppm]＝3.74-3.47(m，11H)，3.28(q，2H，J＝7.3Hz)，3.06(dt，2H，J＝2.2Hz，J＝13.2Hz)，2.38(m，2H，J＝13.6Hz)，1.89(dq，2H，J＝4.1Hz，J＝13.3Hz)，1.30(t，3H，J＝7.3Hz). 实施例1-90化合物(外消旋体)和相应的右旋(+)-对映异构体(实施例号1-90并附有字母″A″例如，1A、2A等)和相应的左旋(-)-对映异构体(实施例号1-90并附有字母″B″，例如1B、2B等)的化学结构表示在下表2中
生物学活性的测定方法 加压素V1b受体结合试验 物质 将试验物质以10-2M的浓度溶于DMSO中，并在DMSO中进一步稀释到5x10-4M至5x10-9M的浓度。这些DMSO预稀释系列用试验缓冲液以1∶10稀释。在试验混合物(2％DMSO在该混合物中)中，将物质浓度再次以1∶5稀释。
膜制备 采集具有稳定表达的人加压素V1b受体(克隆3H2)的CHO-K1细胞，并在50mM Tris-HCl中和在蛋白酶抑制剂(Roche complete Mini#1836170)存在下使用Polytron匀浆器在中间位置匀化2x10秒，随后以40000xg离心1h。所述膜沉淀再次如上所述进行匀化和离心，然后导入到50mM Tris-HCl，pH 7.4中，匀化并在-190℃等份冷冻保存在液氮中。
结合试验 结合试验基于Tahara等人(Tahara A等人，Brit.J.Pharmacol.125，1463-1470(1998))的方法进行。该培养缓冲液是50mM Tris，10mMMgCl2，0.1％BSA，pH 7.4。
在该试验混合物(250μl)中，具有稳定表达人V1b受体(细胞系hV1b_3H2_CHO)的CHO-K1细胞的膜(50μg/ml蛋白在培养缓冲液中)与在培养缓冲液(50mMTris，10mM MgCl2，0.1％BSA，pH7.4)中的1.5nM 3H-AVP(8-Arg-加压素，PerkinElmer#18479)(完全结合)一起进行培养，或者另外加入增加浓度的试验物质(顶替实验)进行培养。非特异性结合用1μM AVP(Bachem#H1780)测定。全部测定一式三份。培养(在室温下60分钟)后，通过真空过滤(Skatron细胞收集器7000)穿过Wathman GF/B玻璃纤维滤纸垫过滤出游离的放射性配体，并将滤纸转移到闪烁管中。液体闪烁测定在Tricarb型2000或2200CA仪(Packard)中进行。借助于标准猝灭系列将测得的cpm转化为dpm。
评价 结合参数通过SAS中的非线性回归分析进行计算。程序算法类似于LIGAND分析程序进行(Munson PJ和Rodbard D，AnalyticalBiochem.107，220-239(1980))。对于重组体人V1b受体的3H-AVP的Kd是0.4nM，其用于确定Ki值。
该试验表明，本发明的化合物通常对V1b受体具有高的亲合力，其以Ki(h-V1b)值表示，并且通常低于150nM，特别是至多50nM，尤其是至多10nM。结果在表3中给出。
加压素V1a受体结合试验 物质 该测试物质以10-2M浓度溶于DMSO中。这些DMSO溶液在培养缓冲液(50mM Tris，10mM MgCl2，0.1％BSA，pH 7.4)中进一步稀释。
膜制备 采集具有稳定表达的人加压素V1a受体(克隆5)的CHO-K1细胞，并在50mM Tris-HCl中和在蛋白酶抑制剂(Roche complete Mini#1836170)存在下使用Polytron匀浆器在中间位置匀化2x10秒，随后以40000xg离心1h。所述膜沉淀再次如上所述进行匀化和离心，然后导入到50mM Tris-HCl，pH 7.4中，匀化并在-190℃等份冷冻保存在液氮中。
结合试验 结合试验基于Tahara等人的方法进行(Tahara A等人，Brit.J.Pharmacol.125，1463-1470(1998))。
该培养缓冲液是50mM Tris，10mM MgCl2，0.1％BSA，pH 7.4。
在该试验混合物(250μl)中，具有稳定表达人V1a受体(细胞系hV1a 5CHO)的CHO-K1细胞的膜(20μg/ml蛋白在培养缓冲液中)与在培养缓冲液(50mM Tris，10mM MgCl2，0.1％BSA，pH7.4)中的0.04nM 125I-AVP(8-Arg-加压素，NEX 128)(完全结合)一起进行培养，或者另外加入增加浓度的试验物质(顶替实验)进行培养。非特异性结合用1μM AVP(Bachem#H1780)进行测定。一式三份进行测定。
培养(在室温下60分钟)后，通过真空过滤(Skatron细胞收集器7000)穿过Wathman GF/B玻璃纤维滤纸垫过滤出游离的放射性配体，并将滤纸转移到闪烁管中。
液体闪烁测定在Tricarb型2000或2200CA仪(Packard)中进行。借助于标准猝灭系列将测得的cpm转化为dpm。
评价 结合参数通过SAS中的非线性回归分析进行计算。程序算法类似于LIGAND分析程序进行(Munson PJ和Rodbard D，AnalyticalBiochem.107，220-239(1980))。针对重组体hV1a受体的125I-AVP的Kd在饱和实验中进行测定。1.33nM的Kd用来确定Ki值。
该试验表明，与V1a受体相比，本发明的化合物对V1b受体通常具有选择性，其，以Ki(h-V1a)/Ki(h-V1b)值表示，通常超过10，并且经常至少15，特别是至少50，以及尤其是至少100。结果在表3中给出。
加压素V2受体结合试验 物质 该测试物质以10-2M浓度溶于DMSO中。这种DMSO溶液在培养缓冲液(50mM Tris，10mM MgCl2，0.1％BSA，pH 7.4)中进一步稀释。
膜制备 采集具有稳定表达的人加压素V2受体(克隆23)的CHO-K1细胞，并在50mM Tris-HCl中和在蛋白酶抑制剂(Roche complete Mini#1836170)存在下使用Polytron匀浆器在中间位置匀化2x10秒，随后以40000x g离心1h。所述膜沉淀再次如上所述进行匀化和离心，然后导入到50mM Tris-HCl，pH 7.4中，匀化并在-190℃等份冷冻保存在液氮中。
结合试验 结合试验基于Tahara等人的方法进行(Tahara A等人，Brit.J.Pharmacol.125，1463-1470(1998))。
该培养缓冲液是50mM Tris，10mM MgCl2，0.1％BSA，pH 7.4。
在该试验混合物(250μl)中，具有稳定表达人V2受体(细胞系hV2_23_CHO)的CHO-K1细胞的膜(50μg/ml蛋白在培养缓冲液中)与在培养缓冲液(50mM Tris，10mM MgCl2，0.1％BSA，pH7.4)中的1-2nM 3H-AVP(8-Arg-加压素，PerkinElmer#18479)(完全结合)一起进行培养，或者另外加入增加浓度的试验物质(顶替实验)进行培养。非特异性结合用1μM AVP(Bachem#H1780)测定。全部测定一式三份。
培养(在室温下60分钟)后，通过真空过滤(Skatron细胞收集器7000)穿过Wathman GF/B玻璃纤维滤纸垫过滤出游离的放射性配体，并将滤纸转移到闪烁管中。
液体闪烁测定在Tricarb型2000或2200CA仪(Packard)中进行。借助于标准猝灭系列将测得的cpm转化为dpm。
评价 结合参数通过SAS中的非线性回归分析进行计算。程序算法类似于LIGAND分析程序进行(Munson PJ和Rodbard D，AnalyticalBiochem.107，220-239(1980))。对于重组体hV2受体的3H-AVP的Kd是2.4nM，其用于确定Ki值。
该试验表明，与V2受体相比，本发明的化合物对V1b受体通常具有选择性，其，以Ki(h-V2)/Ki(h-V1b)值表示，通常超过10，并且经常至少15，特别是至少25，以及尤其是至少50。
催产素受体结合试验 物质 将物质以10-2M的浓度溶于DMSO中并用培养缓冲液(50mMTris，10mM MgCl2，0.1％BSA，pH 7.4)稀释。
细胞制备 具有瞬时表达的重组人催产素受体的融合HEK-293细胞以750xg在室温下离心5分钟。将残余物导出到冰冷的溶胞缓冲液(50mMTris-HCl，10％甘油，pH 7.4和Roche Complete蛋白酶抑制剂)中，并在4℃经历渗透压休克20分钟。然后，将溶胞中的细胞以750xg在4℃离心20分钟，将残余物导出到培养缓冲液中，制得107细胞/ml的等分试样。该等分试样在使用前冷冻于-80℃下。
结合试验 在实验的当天，将细胞解冻，用培养缓冲液稀释并使用MultipetteCombitip(Eppendorf，Hamburg)匀化。0.250ml的反应混合物由2-5x104重组细胞、3-4nM 3H-催产素(PerkinElmer，NET 858)在测试物质(抑制图)存在下或仅仅在培养缓冲液(全部结合)存在下组成。非特异性结合用10-6M催产素(Bachem AG，H2510)进行测定。测定一式三份进行。结合的和游离的放射性配体通过真空过滤使用Skatron细胞收集器7000用Whatman GF/B玻璃纤维滤纸过滤进行分离。结合放射性通过Tricarbβ计数器2000型或2200CA(Packard)的液体闪烁测定。
评价 结合参数通过非线性回归分析(SAS)进行计算，类似于Munson和Rodbard的LIGAND程序(Analytical Biochem 1980；107220-239)。对于重组体hOT受体的3H-催产素的Kd是7.6nM，其用于确定Ki值。
该试验表明，与催产素受体相比，本发明的化合物对V1b受体通常具有选择性，其，以Ki(h-OT)/Ki(h-V1b)值表示，通常超过10，并且经常至少15，特别是至少25，以及尤其是至少50。结果在表3中给出。
表3 Ki(h-V1b)Ki(h-V1a)/Ki(h-V1b) Ki(h-OT)/Ki(h-V1b) + ＞50-150nM 15-5015-25 ++ 10-50nM ＞50-100 ＞25-50 +++＜10nM ＞100＞50 微粒体半衰期的测定 本发明化合物的代谢稳定性在下面试验中进行测定。
试验物质以0.5μM浓度如下培养 0.5μM试验物质与各种物种(大鼠、人或其它物种)的肝微粒体(0.25mg微粒体蛋白/ml)在0.05M磷酸钾缓冲液pH 7.4中在微量滴定板中于37℃一起预培养5min。通过加入NADPH(1mg/ml)开始反应。在0、5、10、15、20和30min之后，取出50μl等分试样，并立即经等体积的乙腈终止反应并冷却。将样品冷冻直到进行分析为止。使用MSMS，测定未分解试验物质的剩余浓度。由试验物质信号/时间单位曲线的增加测定半衰期(T1/2)，其中假定一级动力学，由随时间化合物浓度的减少可以计算试验物质的半衰期。微粒体清除率(mCl)以mCl＝ln2/T1/2/(微粒体蛋白的含量mg/ml)x 1000[ml/min/mg]的形式计算(根据参考文献进行修改Di，The Society for BiomoleculaurScreening，2003，453-462；Obach，DMD，1999 vol 27.N 11，1350-1359)。
该试验表明，本发明的化合物通常具有高的代谢稳定性，其导致人微粒体清除率值通常至多220μlmin-1mg-1，经常120μlmin-1mg-1，以及特别是至多60μl min-1mg-1。结果在表4中给出。
表4 人微粒体清除率 + ＞120-220μl min-1mg-1 ++ 60-120μl min-1mg-1 +++＜60μl min-1mg-1 通过平衡透析法测定血浆蛋白结合(PPB) 将加入1或10μM试验物质的150μl大鼠或人血浆移入到96孔透析室的一侧，将150μl PPS缓冲液移入到该96孔透析室的另一侧。所述透析室通过6-8000道尔顿截留分子量的透析膜进行分离。
将该96孔透析室盖上并轻轻地摇动过夜。
第二天早上，移取10μl血浆并用90μl PPS缓冲液稀释，接着使用200μl乙腈析出蛋白。离心除去该析出的蛋白，100μl上清液用于MSMS分析。从缓冲液一侧移取100μl进行MSMS分析。还参见下列参考文献Banker，Journal of Pharmaceutical Sciences Vol.92，5，967-974，2003。
细胞色素P450(CYP)抑制的体外测定方法 2C9和3A4的荧光底物 将0.4mg/ml人肝微粒体与待试验物质(0-20μM)、CYP特异性底物一起在0.05M磷酸钾缓冲液pH 7.4中在37℃预培养10分钟。CYP2C9的Cyp-特异性底物是荧光素H，CYP 3A4的Cyp-特异性底物是荧光素BE。通过加入NADPH开始反应。于RT培养30min后，加入荧光素检测试剂，并测定所得荧光信号(根据参考文献进行修改Promega，Technical Bulletin P450-GLO TM Assays)。
咪达唑仑CYP 3A4与时间有关的抑制 该试验由两部分组成。在第一部分中，该试验物质与肝微粒体(含NADPH)一起进行预培养＝预培养，接着加入所述底物；在第二部分中，底物和试验物质同时加入＝共培养。
预培养 将0.05mg/ml微粒体蛋白(人肝微粒体)与0-10μM(或50μM)试验物质一起在50mM磷酸钾缓冲液中预培养5min。使用NADPH开始反应。30min后，加入4μM咪达唑仑(最终浓度)，将该混合物再培养10min。10min后，移取75μl反应溶液并用150μl乙腈溶液淬灭。
共培养 将0.05mg/ml微粒体蛋白(人肝微粒体)、4μM咪达唑仑(最终浓度)和0-10μM(或50μM)试验物质在50mM磷酸钾缓冲液中预培养5min。使用NADPH开始反应。10min后，移取75μl反应溶液并用150μl乙腈溶液淬灭。用MSMS分析前将样品一直冷冻(根据参考文献改变 Obdach，Journal of Pharmacology&Experimental Therapeutics，Vol316，1，336-348，2006；Walsky，Drug Metabolism and Disposition Vol 32，6，647-660，2004)。
水溶解度(mg/ml)的测定方法 本发明化合物的水溶解度例如可以根据所谓的″shake flask″方法(根据ASTM InternationalE 1148-02，Standard test methods formeasurement of aqueous solubility，Book of Standards Volume 11.05.)进行测定。在此，将过量固体化合物加入到具有某一pH值(例如磷酸盐缓冲液pH 7.4)的缓冲溶液中，并将所得混合物摇动或搅拌直到达到稳定状态为止(典型地24或48小时，有时甚至直至7天)。然后，过滤或离心除去不溶固体，通过UV光谱或高压液相色谱分析(HPLC)使用适宜的校准曲线测定溶解化合物的浓度。
权利要求
1.通式(I)的化合物
其中
R1是乙氧基；
R2是氢；
R3是氰基；
R4是氢；
R5是氢、甲氧基或乙氧基；
R6是氢或甲氧基；
R7是氢、甲基、乙基、正丙基或异丙基；
X1是-NH-；
X2是N或CH；
X3是N或CH；
其中X2和X3不能同时是N；
及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
2.权利要求1的化合物，其中R5是氢或甲氧基。
3.权利要求1的化合物，其中R7是氢、甲基或乙基。
4.权利要求1-3任一项的化合物，其中
R5是氢或甲氧基；
R7是氢、甲基或乙基；
X1是-NH-；
X2是N；和
X3是CH。
5.权利要求1-3任一项的化合物，其中
R5是氢或甲氧基；
R7是氢、甲基或乙基；
X1是-NH-；
X2是CH；和
X3是N。
6.权利要求1-3任一项的化合物，其中
R5是甲氧基；
R6是甲氧基；
R7是甲基或乙基；
X1是-NH-；
X2是CH和X3是N；或
X2是N和X3是CH。
7.权利要求1-3任一项的化合物，其中
R5是甲氧基；
R6是甲氧基；
R7是甲基；
X1是-NH-；
X2是N；和
X3是CH。
8.权利要求1-3任一项的化合物，其中
R5是甲氧基；
R6是甲氧基；
R7是甲基；
X1是-NH-；
X2是CH；和
X3是N。
9.权利要求1-3任一项的化合物，其中
R5是甲氧基；
R6是甲氧基；
R7是乙基；
X1是-NH-；
X2是CH；和
X3是N。
10.权利要求1-9任一项的通式(I)的化合物，其特征在于它们以旋光体存在并且它们是游离碱形式的所述通式(I)化合物的(左旋的)(-)-对映异构体，及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和/或前药，该(-)-对映异构体使线偏振光的偏振平面向左旋。
11.权利要求1-9任一项的通式(I)的化合物，其特征在于它们以旋光体形式存在，其中手性C-3环碳原子的绝对构型相当于游离碱形式的式(Ia)化合物的(左旋的)(-)-对映异构体及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药的C-3处的绝对构型，
该(-)-对映异构体使线偏振光的偏振平面向左旋。
12.权利要求10的旋光体形式的通式(I)的化合物，其特征在于该相应的左旋的(-)-对映异构体及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药以大于50％的光学纯度(对映异构体过量，ee)存在。
13.权利要求11的旋光体形式的通式(I)的化合物，其特征在于在C-3环碳原子处具有优选绝对构型的对映异构体及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药以大于50％的光学纯度(对映异构体过量，ee)存在。
14.权利要求10的旋光体形式的通式(I)的化合物，其特征在于相应的左旋的(-)-对映异构体及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药以大于90％的光学纯度(对映异构体过量，ee)存在。
15.权利要求11的旋光体形式的通式(I)的化合物，其特征在于在C-3环碳原子处具有优选绝对构型的对映异构体及其药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药以大于90％的光学纯度(对映异构体过量，ee)存在。
16.以外消旋体形式的权利要求1-9任一项的通式(I)的化合物及通式(I)化合物的外消旋体的药学上可接受的盐、互变异构体形式和前药。
17.药物，包含至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或至少一种其药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
18.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药作为药物的用途。
19.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗和/或预防至少一种加压素-依赖性疾病。
20.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗和/或预防至少一种疾病，所述疾病选自糖尿病、胰岛素抗性、夜遗尿、失禁、出现凝血障碍的疾病和/或延迟排尿。
21.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗和/或预防至少一种疾病，所述疾病选自高血压、肺动脉高血压、心力衰竭、心肌梗死、冠状动脉痉挛、不稳定心绞痛、PTCA(经皮腔内冠状动脉成形术)、心脏缺血、肾脏体系紊乱、浮肿、肾血管痉挛、肾皮质坏死、低钠血症、低钾血症、Schwartz-Bartter综合征、胃肠道紊乱、胃炎性血管痉挛、肝硬化、胃肠溃疡、呕吐、化疗期间的呕吐和/或旅行病。
22.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗情感障碍。
23.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗焦虑症和/或与应激反应有关的焦虑症。
24.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗记忆缺陷和/或阿尔茨海默氏病。
25.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗精神病和/或精神障碍。
26.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗库兴综合征或其它与应激反应有关的疾病。
27.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗睡眠障碍。
28.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗抑郁症。
29.权利要求28的用途，用于治疗和/或预防儿童期发病的心境障碍。
30.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗血管舒缩症状和/或温度调节功能障碍，例如，″热潮红″症状。
31.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗和/或预防精神作用物质依赖、药物依赖和/或由其它因素介导的依赖性，用于治疗和/或预防由调节依赖性的一种或多种因素的戒除所引起应激反应，和/或用于治疗和/或预防精神作用物质依赖、药物依赖和/或由其它因素介导的依赖性中由应激反应引起的复发。
32.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药的用途，用于治疗和/或预防精神分裂症和/或精神病。
33.在患者中用于治疗和/或预防至少一种疾病的方法，所述疾病选自糖尿病、胰岛素抗性、夜遗尿、失禁、出现凝血障碍的疾病和/或延迟排尿，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
34.在患者中用于治疗和/或预防至少一种疾病的方法，所述疾病选自高血压、肺动脉高血压、心力衰竭、心肌梗死、冠状动脉痉挛、不稳定心绞痛、PTCA(经皮腔内冠状动脉成形术)、心脏缺血、肾脏体系紊乱、浮肿、肾血管痉挛、肾皮质坏死、低钠血症、低钾血症、Schwartz-Bartter综合征、胃肠道紊乱、胃炎性血管痉挛、肝硬化、胃肠溃疡、呕吐、化疗期间的呕吐和/或旅行病，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
35.在患者中用于治疗和/或预防情感障碍的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
36.在患者中用于治疗焦虑症和/或与应激反应有关的焦虑症的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
37.在患者中用于治疗记忆缺陷和/或阿尔茨海默氏病的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
38.在患者中用于治疗精神病和/或精神障碍的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
39.在患者中用于治疗库兴综合征的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
40.在患者中用于治疗睡眠障碍的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
41.在患者中用于治疗抑郁症的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
42.权利要求41的方法，用于治疗和/或预防儿童期起病的心境障碍。
43.在患者中用于治疗和/或预防血管舒缩症状和/或体温调节功能障碍，例如，“热潮红“症状的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
44.在患者中用于治疗和/或预防精神作用物质依赖、药物依赖和/或由其它因素介导的依赖性，用于治疗和/或预防由调节依赖性的一种或多种因素的戒除所引起应激反应，和/或用于治疗和/或预防在精神作用物质依赖、药物依赖和/或由其它因素介导的依赖性中由应激反应引起的复发的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
45.在患者中用于治疗和/或预防精神分裂症和/或精神病的方法，其特征在于给予所述患者有效量的至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)的化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药。
46.权利要求33-45任一项的方法，其特征在于所述患者是一种哺乳动物，优选是人或非人类哺乳动物或非人类转基因哺乳动物。
47.至少一种权利要求1-16任一项的通式(I)化合物的制备方法，其特征在于它可以由本领域熟练技术人员根据本发明的技术教导在本身已知的方法步骤的设备和/或类似设备中进行制备。
48.权利要求1-7任一项的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、互变异构体形式或前药，用于治疗和/或预防疾病或障碍。
49.权利要求48所述的化合物，用于治疗和/或预防权利要求19-32任何一项中所述的疾病或障碍。
50.权利要求1-7任一项的式(I)化合物或其至少一种药学上可接受的盐、一种互变异构体形式或一种前药，在用于制备用于治疗和/或预防疾病或障碍的药物中的用途。
51.权利要求50所述的用途，其中所述疾病或障碍是如权利要求19-32任一项中所述的疾病或障碍。
全文摘要
本发明涉及新的通式(I)的羟吲哚衍生物，以及包含它们的药物以及它们用于预防和/或治疗加压素依赖性疾病的用途。
文档编号A61P7/00GK101611028SQ200780051459
公开日2009年12月23日 申请日期2007年12月28日 优先权日2006年12月30日
发明者A·尼茨, T·乌斯特, H·格尼斯特, W·M·布拉杰, W·沃内特, L·昂杰, W·霍恩伯格, W·卢比希 申请人:艾博特股份有限两合公司