专利名称：：3′-脱氧腺苷减肥、胰岛素增敏和改善脂代谢的用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及3'-脱氧腺苷在制备预防和/或治疗肥胖、胰岛素抵抗、脂代谢紊乱药物和/或保健品中的应用，特别涉及3'-脱氧腺苷在制备预防和/或治疗高胆固醇血症、混合型高脂血症及高、低密度脂蛋白代谢紊乱药物和/或保健品中的应用。
背景技术：
：肥胖是指因机体内脂肪细胞数目增多或体积增大，脂肪堆积过多或分布异常，导致体重增加的一种病理状态。世界卫生组织(WHO)明确认定肥胖是全球成年人最大的慢性疾病，被列为世界四大医学社会问题之一。肥胖是2型糖尿病、冠心病、高血压、子宫内膜癌/乳腺癌/结肠癌/直肠癌/前列腺癌、胆囊及胆管疾病、骨关节炎、睡眠-呼吸暂停综合征、静脉血栓等许多严重疾病的主要危险因素之一。目前，临床上治疗肥胖症的药物主要包括影响中枢儿茶酚胺类和/或5一羟色胺类的食欲抑制药、营养吸收抑制药、影响脂质代谢的药物和能量代谢促进药。胰岛素抵抗(insulinresistance,IR)指机体对胰岛素的反应性降低，是高血脂、糖尿病等代谢综合征共同的主要病理生理基础。胰岛素抵抗与糖耐量降低、2型糖尿病、肥胖症、血脂紊乱、非酒精性脂肪肝、冠心病等临床异常密切相关。目前临床上针对胰岛素抵抗的口服药物主要有噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂和二甲双胍等传统抗糖尿病药物。血脂是血液中所含脂类物质的总称，主要包括甘油三酯、胆固醇、磷脂和游离脂肪酸。正常成人血浆脂类含量在一定的波动范围内相对稳定。如果血浆一种或多种脂质持续高于正常值，则称为高脂血症(Hyperlipidemia,HP)，包括高胆固醇血症(Hypercholesterolemia)、高甘油三酯血症(Hypertriglyceridemia)及混合型高脂血症。脂质不溶或微溶于水，必须与蛋白质结合以脂蛋白形式存在，才能在血液循环中运转，因此，高脂血症常为高脂蛋白血症的反映。血浆中高密度脂蛋白降低也是一种血脂代谢紊乱，因此脂蛋白异常血症包括高密度脂蛋白降低和低密度脂蛋白升高。血脂异常及脂蛋白异常血症是脑卒中、冠心病、心脏猝死的重要危险因素，也是促进高血压、糖代谢紊乱的一个重要危险因素。血脂异常及脂蛋白异常血症还可导致脂肪肝、肝硬化、胆石症、胰腺炎、眼底出血、失明、周围血管疾病、跛行、高尿酸血症。目前，降血脂药物种类较多，主要分为他汀类(statin)等3-羟基3-甲基-戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂、贝特类(Fibrates)等过氧化物酶增殖因子激活受体a(PPARa)激动剂、考来烯胺(cholestyramine)等胆酸鳌合剂、以及烟酸类(NicotinicAcid，又名Niacin)等影响脂肪分解的药物。综上所述，目前虽然己有不少药物分别单独应用于临床预防和/治疗或肥胖、胰岛素抵抗、脂代谢紊乱特别是高胆固醇血症、混合型高血脂症及高、低密度脂蛋白代谢紊乱，但没有一种药物对代谢综合症的各个方面都有预防和治疗的作用，改善代谢综合症的药物还需要不断的进行优化，减少用药种类，降低毒副作用及减少医疗卫生成本。3'-脱氧腺苷(3-deoxyadenosine，又名虫草素Cordycepin)，分子式UH,具A，MW251，是从蛹虫草(Ccyc印s肌'？i^sr^)中分离得到核苷类物质，构巢曲霉U邵e2^7力/smWw7s/^)亦可产生此物质。其结构式如下现有技术中未见3'-脱氧腺苷具有预防和/或治疗肥胖、胰岛素抵抗、脂代谢紊乱中的高胆固醇血症、混合型高脂血症及高、低密度脂蛋白代谢紊乱功能的报道。
发明内容为了克服现有技术中减肥药、胰岛素增敏剂和脂质调节药物的不足，本发明提供了如式(I)所示的3'-脱氧腺苷在制备预防和/或治疗肥胖、胰岛素抵抗、高胆固醇血症、混合型高脂血症及脂蛋白异常血症药物和/或保健品中的应用。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(I)具体讲，本发明的3'-脱氧腺苷能用于制备预防和/或治疗肥胖的药品和/保健品o肥胖是2型糖尿病、冠心病、高血压、子宫内膜癌/乳腺癌/结肠癌/直肠癌/前列腺癌、胆囊及胆管疾病、骨关节炎、睡眠-呼吸暂停综合征、静脉血栓等许多严重疾病的主要危险因素之一。因此，本发明的3'-脱氧腺苷能制备预防和/或治疗肥胖相关性疾病的药物和/或保健品。所述的肥胖相关性疾病优选是2型糖尿病、冠心病、高血压、子宫内膜癌/乳腺癌/结肠癌/直肠癌/前列腺癌、胆囊及胆管疾病、骨关节炎、睡眠-呼吸暂停综合征、静脉血栓。本发明的3'-脱氧腺苷能用于制备预防和/或治疗胰岛素抵抗药品和/保健品。胰岛素抵抗与糖耐量降低、2型糖尿病、肥胖症、血脂紊乱、非酒精性脂肪肝、冠心病等临床异常密切相关。因此，本发明的3'_脱氧腺苷能制备预防和/或治疗的胰岛素抵抗相关性疾病优选是糖耐量降低、2型糖尿病、肥胖症、血脂异常、非酒精性脂肪肝、冠心病。本发明的3'-脱氧腺苷的预防和/或治疗高胆固醇血症和/或混合型高血脂症及脂蛋白异常血症。所述的脂蛋白异常血症优选是高密度脂蛋白降低血症和/或低密度脂蛋白升高血症。高胆固醇血症和/或混合型高血脂症及脂蛋白异常血症是脑卒中、冠心病、心脏猝死的重要危险因素，也是促进高血压、糖代谢紊乱的一个重要危险因素。高胆固醇血症和/或混合型高血脂症及脂蛋白异常血症还可导致脂肪肝、肝硬化、胆石症、胰腺炎、眼底出血、失明、周围血管疾病、跛行、高尿酸血症。另外，摄入高脂肪和高胆固醇饮食会诱发动脉粥样硬化，在一部分有遗传性脂质代谢缺陷的人中表现比较明显。因此，本发明的3-脱氧腺苷能制备预防和/或治疗高胆固醇血症和/或混合型高血脂症及脂蛋白异常血症相关的心脑血管性疾病的药物/或保健品。所述的心脑血管性疾病优选是脑卒中、冠心病、心肌梗死、心脏猝死、高血压、动脉粥样硬化、周围血管疾病。本发明的3-脱氧腺苷也可以制备预防和/或治疗高胆固醇血症和/或混合型高血脂症及脂蛋白异常血症相关的糖耐量异常、糖尿病、脂肪肝、肝硬化、胆石症、胰腺炎、眼底出血、失明、跛行、高尿酸血症的药物和/或保健品。本发明的3-脱氧腺苷也可以用于制备治疗遗传性脂质代谢缺陷病人的血脂异常及脂蛋白异常血症的药物。服用3'-脱氧腺苷的肥胖模型(PF)小鼠的体重增加水平与PF模型组相比，3，-脱氧腺苷(IOOmg/kg)与非诺贝特(150mg/kg)作用相似，均可显著降低小鼠体重增加水平，且统计学表明两者有显著性差异；3，-脱氧腺苷(IOOmg/kg)与服用罗格列酮(15mg/kg)的作用相反。说明3'-脱氧腺苷(100mg/kg)与非诺贝特(150mg/kg)作用相似，可降低PF小鼠体重的增加，同时没有罗格列酮(15mg/kg)进一歩PF小鼠体重增加的副作用。服用3'-脱氧腺苷的具有胰岛素抵抗的肥胖模型(IRF)小鼠对外源性胰岛素的敏感性与IRF模型组相比，3'-脱氧腺苷(100mg/kg)和罗格列酮(15mg/kg)作用相似，均使胰岛素负荷后血糖降低幅度明显增大，血糖一时间曲线下面积(AUC)明显减少。说明3'-脱氧腺苷具有增加IRF小鼠对外源性胰岛素敏感性的作用。服用3'-脱氧腺苷的IRF小鼠对口服葡萄糖耐量实验(0GTT)的影响与IRF模型组相比，3，-脱氧腺苷(100mg/kg)组和罗格列酮(15mg/kg)组均使口服葡萄糖后的血糖峰值明显降低，血糖一时间曲线下面积(AUC)明显减少，分别减少21.5%和34.3%。说明3'-脱氧腺苷具有降低IRF小鼠对口服葡萄糖负荷后血糖的作用。与工RF模型组小鼠TC水平(163±21mg/dl)相比，3，-脱氧腺苷(100mg/kg)和非诺贝特(150mg/kg)可降低血清TC水平(135±21mg/dl)和(139士llmg/dl)，且统计学表明均有显著性差异，说明3，—脱氧腺苷具有降低IRF模型小鼠的血清TC的作用。与IRF模型组小鼠骨骼肌中的TG含量相比，3，-脱氧腺苷(100mg/kg)和非诺贝特(150mg/kg)可使其含量分别降低41.2%和77.7%，且统计学表明均有显著性差异，说明3'-脱氧腺苷具有降低IRF模型小鼠骨骼肌中TG含量的作用。与高脂血症模型组大鼠相比，口服给予3'-脱氧腺苷作用与非诺贝特相似，均可使高脂血症模型组大鼠血清中升高的TC、TG、LDL-C含量明显降低，且3'-脱氧腺苷高、中、低剂量组作用强度有一定的量效关系；高剂量3'-脱氧腺苷(50mg/kg)还可同时降低血浆肝脂酶、脂蛋白脂酶的活性，中、低剂量组则作用不明显。总的来说，表明3'-脱氧腺苷具有明显的降低高脂血症模型大鼠血脂的作用。与高脂血症模型组金黄地鼠相比，口服给予3'-脱氧腺苷作用与非诺贝特相似，均可使高脂血症模型组金黄地鼠血清中升高的TC、TG、LDL-C含量明显降低，且3'-脱氧腺苷高、中、低剂量组作用强度有一定的量效关系；高剂量3'-脱氧腺苷(50mg/kg)还可同时降低高脂血症金黄地鼠血浆肝脂酶、脂蛋白脂酶的活性，中、低剂量组则作用不明显。总的来说，表明3'-脱氧腺苷具有明显的降低高脂血症模型金黄地鼠血脂的作用。图l.3'-脱氧腺苷对IRF小鼠胰岛素负荷后血糖一时间曲线下面积的影响备注###p〈0.001与正常对照组相比;*p〈0.05,***p〈0.001，与IRF组相比。图2.3，-脱氧腺苷对IRF小鼠葡萄糖负荷后血糖一时间曲线下面积的影响备注，p<0.001与正常对照组相比；**p<0.01，彬p<0.001与IRF组相比。图3.3'-脱氧腺苷对IRF小鼠骨骼肌TG含量的影响备注:ftS#p〈0.001与正常对照组相比;*p〈0.05，***p〈0.OOl与IRF组相比。具体实施例方式下面的实施例用来进一歩说明本发明，但这并不意味着对本发明有任何限制。一、药效试验实施例1:3'-脱氧腺苷对PF小鼠体重增长的影响材料与方法4周龄C57BL小鼠，雄性，北京维通利华动物繁育中心(动物合格证号No.SCXK(京)。用高脂饲料喂养，自由饮食饮水。同时设给与基础饲料喂养的同批小鼠作为正常对照组。连续喂养20周后，挑选体重明显高于正常对照组的动物作为肥胖小鼠模型(PF)。3-脱氧腺苷(从蛹虫草子实体中分离得到，经分析纯度在99.9%以上)。基础饲料，含12%脂肪，62%糖类和26%蛋白质，总热量12.6kJ/g.。自制高脂饲料含60%脂肪，26%糖类和14%蛋白质，总热量21.0kJ/g.。非诺贝特为法国利博福尼制药公司产品(批号83844)。罗格列酮为北京高锰化工有限公司生产(纯度为99%)。速效胰岛素为丹麦诺和诺德公司产品(批号PW51688)。SPN150IF天平由梅特勒一托利多(常州)称重设备有限公司制造。小鼠随机分成五组正常对照组、肥胖小鼠模型(PF)组、3'-脱氧腺苷组(100mg/kg)、非诺贝特组(150mg/kg)、罗格列酮组(15mg/kg)，每组10只。正常对照组给予普通饲料，其他各组均给予高脂饲料。各给药组每天灌胃一次，各组给药体积为O.1ml/kg。连续给药5周。PF组和正常对照组每天给予等体积水。给药前及给药5周后，各组小鼠分别称重。并计算与自身对比动物体重的增加情况(g)。数据以平均值士标准差表示，数据分析采取t检验。用高脂饲料，喂养雄性幼年C57BL小鼠20周，形成体重和体脂含量明显增加的肥胖小鼠模型(PF)。将PF小鼠随机分4组PF、3，-脱氧腺苷、非诺贝特和罗格列酮组，分别口服水、3'-脱氧腺苷类化合物(IOOmg/kg)、非诺贝特(150mg/kg)和罗格列酮(15mg/kg)，灌胃给药5周。与给药前动物自身体重比较，观察动物体重的变化。同时，设给予正常饲料喂养的同批小鼠作为正常对照Con组。结果1.给药前，与正常对照组体重(32.0±3.1g)相比，PF组体重(51.l士2.4g)有极显著性差异，表明本实验PF小鼠模型造模成功。2.给药后，与PF组体重增加相比，3'-脱氧腺苷组可显著降低小鼠体重增加水平(P〈0.01)，表明3'-脱氧腺苷组有减少体重增加的作用；非诺贝特则具有明显的减少体重的作用。(见表l)。结论3'-脱氧腺苷口服给药对高脂饲料诱导的PF模型小鼠有一定的降低小鼠体重增加的作用。<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>备注、<0.001与」P:常对照组相比；"p<0.01,"p<0.001与RF组相比。实施例2:3'-脱氧腺苷对IRF小鼠的胰岛素敏感性的影响材料与方法l:实验动物]4周龄C57BL小鼠，雄性，北京维通利华动物繁育中心(动物合格证号No.SCXK(京)。用高脂词料喂养，自由饮食饮水。同时设给与基础饲料喂养的同批小鼠作为正常对照组。连续喂养20周后，挑选胰岛素耐量实验中具有明显胰岛素抵抗的肥胖小鼠作为模型动物(IRF)。3-脱氧腺苷(从蛹虫草子实体中分离得到，经分析纯度在99.9%以上)。基础饲料，含12%脂肪，62%糖类和26%蛋白质，总热量12.6kJ/g.。自制高脂饲料含60%脂肪，26%糖类和14%蛋白质，总热量21.0kJ/g.。非诺贝特为法国利博福尼制药公司产品(批号83844)。罗格列酮为北京高锰化工有限公司生产(纯度为99%)。速效胰岛素为丹麦诺和诺德公司产品(批号PW51688)。美国Bio-Tek公司生产的uQuant酶标仪。小鼠分为四组正常对照组、具有胰岛素抵抗的肥胖模型(IRF)组、罗格列酮组(15mg/kg)、3，-脱氧腺苷组(100mg/kg)，每组10只。正常对照组给予普通饲料，其他各组均给予高脂饲料。各给药组每天灌胃一次，给药体积为0.1ml/kg。，连续给药4周。正常对照组和IRF组每天给予等体积水。以ITT实验，评价机体对胰岛素的敏感性。即分别于皮下注射O.4U/kg胰岛素前、注射后20min、40min，90min取血，以葡萄糖氧化酶法测定血糖水平。[数据分析]数据以平均值土标准差表示，数据分析采取t检验。结果1.与正常对照组ITT实验结果比较，IRF模型组小鼠显示明显的胰岛素抵抗，其皮下注射0.4U/kg胰岛素后的血糖水平基本上没有变化，血糖一时间曲线下面积(AUC)明显增加，表明本实验造模成功。(见表2，图1)2.与IRF模型组相比，3，-脱氧腺苷(100mg/kg)组和罗格列酮(15mg/kg)组均使胰岛素负荷后血糖降低幅度明显增大，血糖一时间曲线下面积(AUC)明显减少(见图l)。说明3'-脱氧腺苷与罗格列酮的作用类似，均具有增加胰岛素抵抗小鼠对外源性胰岛素敏感性的作用。结论3'-脱氧腺苷口服给药对高脂饲料诱导的IRF模型小鼠具有增加对外源性胰岛素敏感性的作用。表2.3'-脱氧腺苷对IRF小鼠胰岛素负荷后血糖水平的影响指标_血糖水平(mg/dl)_组另廿_0min20min40min90min正常对照组101±650±441±466±10IRF组93±2273±12,79±10,88±20##3'-脱氧腺苷组79±1562±10*64±12*79±10罗格列酮组75±8*34±8鹏32±7W44±12*"备注*p<0.01,咖p〈0.001与正常对照组相比；*p<0.05，"p<0.01，与IRF组相比。实施例3:3'-脱氧腺苷对IRF小鼠口服葡萄糖耐量(0GTT)的影响材料与方法4周龄C57BL小鼠，雄性，北京维通利华动物繁育中心(动物合格证号No.SCXK(京)。用高脂饲料喂养，自由饮食饮水。同时设给与基础伺料喂养的同批小鼠作为正常对照组。连续喂养20周后，挑选胰岛素耐量实验中具有明显胰岛素抵抗的肥胖小鼠作为模型动物(IRF)。3-脱氧腺苷(从蛹虫草子实体中分离得到，经分析纯度在99.9%以上)。基础词料，含12%脂肪，62%糖类和26%蛋白质，总热量12.6kJ/g.。自制高脂词料含60%脂肪，26%糖类和14%蛋白质，总热量21.0kJ/g.。非诺贝特为法国利博福尼制药公司产品(批号83844)。罗格列酮为北京高锰化工有限公司生产(纯度为99%)。速效胰岛素为丹麦诺和诺德公司产品(批号PW51688)。美国Bio-Tek公司生产的yQuant酶标仪。小鼠分为四组正常对照组、具有胰岛素抵抗的肥胖模型(IRF)组、罗格列酮组(15mg/kg)、3'-脱氧腺苷组(100!118/1^)，每组10只。正常对照组给予普通饲料，其他各组均给予高脂高糖饲料。各给药组每天灌胃一次，给药体积为0.1ml/kg。，连续给药6周。正常对照组和IRF组每天给予等体积水。6周后，行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)，即灌胃2g/kg葡萄糖负荷前，及负荷后30min、60min，120min分别取血，以葡萄糖氧化酶法测定血糖水平。并计算血糖一时间曲线下面积(AUC)。数据以平均值士标准差表示，数据分析采取t检验。口服葡萄糖前后各时间点血糖水平采用配对t检验。结果1.与正常对照组相比，IRF模型组小鼠显示明显的葡萄糖耐量减低，其口服葡萄糖后的血糖峰值明显升高，血糖一时间曲线下面积(AUC)明显增加，表明本实验造模成功。(见表3，图2)2.与IRF模型组相比，3，-脱氧腺苷(100mg/kg)组和罗格列酮(15mg/kg)组均使口服葡萄糖后的血糖峰值明显降低，血糖一时间曲线下面积(AUC)明显减少，分别减少21.5%和34.3%。(见表3，图2)。说明3'-脱氧腺苷与罗格列酮的作用类似，均具有改善胰岛素抵抗小鼠口服葡萄糖耐量的作用。结论3'-脱氧腺苷口服给药对高脂饲料诱导的IRF模型小鼠具有改善胰口服葡萄糖耐量的作用。表3.3'-脱氧腺苷对IRF小鼠口服葡萄糖耐量的影响SS~~血糖水平(mg/dl)组另lj_0min30min60min120min正常对照组81±1099±23113±14111±20IRF组97±20#219±33,146±41#105±233'-脱氧腺苷组85±12172±48*102±32*98±10罗格列酮组79±14*109±14^96±13"98±9备注'p<0.05，脚p〈0.001与正常对照组相比；*p<0.05，"p<0.01，"VO.001与IRF组相比。实施例4:3，-脱氧腺苷对IRF小鼠高胆固醇血症的影响材料与方法4周龄C57BL小鼠，雄性，北京维通利华动物繁育中心(动物合格证号No.SCXK(京)。用高脂词料喂养，自由饮食饮水。同时设给与基础饲料喂养的同批小鼠作为正常对照组。连续喂养20周后，挑选胰岛素耐量实验中具有明显胰岛素抵抗的肥胖小鼠作为模型动物(IRF)。3-脱氧腺苷(从蛹虫草子实体中分离得到，经分析纯度在99.9%以上)。基础饲料，含12%脂肪，62%糖类和26%蛋白质，总热量12.6kJ/g.。自制高脂饲料含60%脂肪，26%糖类和14%蛋白质，总热量21.01(J/g.。非诺贝特为法国利博福尼制药公司产品(批号83844)。罗格列酮为北京高锰化工有限公司生产(纯度为99%)。速效胰岛素为丹麦诺和诺德公司产品(批号PW51688)。总胆固醇TC的测定试剂盒购自中生北控生物科技股份有限公司(批号:070421)。美国Bio-Tek公司生产的uQuant酶标仪。小鼠分为四组正常对照组、IRF组、非诺贝特组(150mg/kg)、3'-脱氧腺苷组(100mg/kg)，每组10只。正常对照组给予普通饲料，其他各组均给予高脂饲料。各给药组每天灌胃一次，给药体积为O.1ml/kg，连续给药5周。IRF组和正常对照组每天给予等体积水。5周后，小鼠尾静脉取血测定血总胆固醇TC含量，测定方法按照CHO试剂盒说明书进行，以酶标仪在500nm波长下测定吸光度。按下列公式计算TC含量TC(mg/dl)一则定管吸光度/标准管吸光度"93(mg/dl)。数据以平均值土标准差表示，数据分析采取t检验。结果1.与正常对照组TC水平(68±15mg/dl)相比，IRF模型组小鼠CHO水平(163±21mg/dl)明显升高，统计学计算有极显著性差异，表明本实验造模成功。(见表4)。2.与IRF模型组小鼠TC水平(163±21mg/dl)相比，3，-脱氧腺苷(100mg/kg)和非诺贝特(150mg/kg)可降低血TC水平(135±21mg/dl)和(139±11mg/dl)，且统计学计算表明均有显著性差异，说明3'-脱氧腺苷与与非诺贝特作用类似，均具有降低IRF模型小鼠血TC的作用。(见表4)。结论3-脱氧腺苷口服给药对高脂饲料诱导的IRF模型小鼠具有降低血总胆固醇的作用。表4.3，-脱氧腺苷对IRF小鼠TC水平的影响组别TC(mg/dl)正常对照组68±15IRF组163±21###3'-脱氧腺苷组135±2r非诺贝特组139±1广各注ssp<o.ooi与rr.常对照组相比；*P<o.05,"P<o.oi与irf组相比。实施例5:3'-脱氧腺苷对IRF小鼠骨骼肌脂肪含量的影响材料与方法4周龄C57BL小鼠，雄性，北京维通利华动物繁育中心(动物合格证号No.SCXK(京)。用高脂饲料喂养，自由饮食饮水。同时设给与基础饲料喂养的同批小鼠作为正常对照组。连续喂养20周后，挑选胰岛素耐量实验中具有明显胰岛素抵抗的肥胖小鼠作为模型动物(IRF)。3-脱氧腺苷(从蛹虫草子实体中分离得到，经分析纯度在99.9%以上)。基础词料，含12%脂肪，62%糖类和26%蛋白质，总热量12.6kJZg.。自制高脂饲料含60%脂肪，26%糖类和14%蛋白质，总热量21.0kJ/g.。非诺贝特为法国利博福尼制药公司产品(批号83844)。罗格列酮为北京高锰化工有限公司生产(纯度为99%)。速效胰岛素为丹麦诺和诺德公司产品(批号PW51688)。总胆固醇TC的测定试剂盒购自中生北控生物科技股份有限公司(批号:070421)。美国Bio-Tek公司生产的(iQuant酶标仪。[分组与给药]小鼠分为四组正常对照组、具有胰岛素抵抗的肥胖模型(IRF)组、罗格列酮组(15mg/kg)、3-脱氧腺苷组(100mg/kg)，每组10只。正常对照组给予普通饲料，其他各组均给予高脂高糖饲料。各给药组每天灌胃一次，给药体积为0.1ml/kg。，连续给药6周。正常对照组和IRF组每天给予等体积水。给药6周后，断头处死小鼠，快速取腓肠肌，液氮速冻，一80°C保存。以PBS制成匀浆，氯仿甲醇溶液(氯仿甲醇=2:1)抽提匀浆中的甘油三脂TG;挥发有机溶剂后，用PBS复溶TG，以酶反应法测定TG的含量。数据以平均值士标准差表示，数据分析采取t检验。结果1.与正常对照组小鼠骨骼肌中的TG含量相比，IRF模型组小鼠骨骼肌中的TG含量增加了164.9%，统计学计算表明有极显著性差异，表明本实验造模成功。(见图3)。2.与IRF模型组小鼠骨骼肌中的TG含量相比，3，-脱氧腺苷(IOOmg/kg)和非诺贝特(150mg/kg)可使其含量分别降低41.2%和77.7%，且统计学计算表明均有显著性差异，说明3'-脱氧腺苷与与非诺贝特作用类似，均具有降低IRF模型小鼠骨骼肌中TG含量的作用(见图3)。结论3-脱氧腺苷口服给药对高脂饲料诱导的IRF模型小鼠具有降低骨骼肌中TG含量的作用。实施例6:3'-脱氧腺苷对高脂血症模型大鼠血脂的影响材料及方法雄性健康清洁级Wistar大鼠，150180g;购自吉林大学基础医学院实验动物中心，合格证号SCXK-吉2003-0007。3-脱氧腺苷(从蛹虫草子实体中分离得到，经分析纯度在99.9%以上)。基础饲料与高脂饲料，词料基础饲料与高脂饲料，均由中国医学科学院实验动物研究所提供，许可证号京动许字003，合格证号00157卯。基础饲料配方20%面粉，10%米粉，20%玉米，20%豆粉，25%麸皮，2%骨粉，2%鱼粉。高脂词料配方85.5%基础饲料，10%猪油，4%胆固醇，0.2%甲基硫氧嘧啶(北京福星化工厂，批号951010)。非诺贝特，非诺贝特片，法国利博福尼制药公司，批准文号H20050004,批号87517甘油三酯(TG)试剂盒，总胆固醇(CHO)试剂盒，低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)试剂盒，高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)试剂盒,胆固醇，上海惠世生化试剂有限公司；丙硫氧嘧啶片，上海复星朝晖药业有限公司；脱氧胆酸钠，北京奥博星生物技术有限责任公司；TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT检测试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司；SOD检测试剂盒，长春汇力生物技术有限公司；丙二醛、总脂酶、游离脂肪酸、考马斯亮兰蛋白检测试盒，南京建成生物工程研究所。SeperateMax190酶标仪，MolecularDevicesCorporationSunnyvale,CA.大鼠以普通饲料喂养适应实验环境1周后眼眶静脉采血，测定血清TC和TG含量。兼顾体重血清TC和TG和含量，进行分层随机分组。大鼠分成六组正常对照组，高脂模型组，非诺贝特组(40mg/kg)，3，-脱氧腺苷50mg/kg组，3，-脱氧腺苷25mg/kg组，3'-脱氧腺苷12.5mg/kg组，每组8只。正常对照组大鼠给予普通词料，其他各组给高脂饲料，连续4周，均无限量供给。同时各给药组每天灌胃一次，各组给药体积均为1.0ml/100g体重，连续给药4周。正常对照组及高脂模型对照组每天给予等体积生理盐水。各组动物给药4周后禁食12h后，眼眶静脉取血，常规制备血清，以试剂盒测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量。并计算高密度脂蛋白与低密度脂蛋白的比值(HDL/1DL)。测定方法按照试剂盒说明书进行，以酶标仪(波长500nm)测定吸光度。极低密度脂蛋白(VLDL-C)由CHO-LDL-C计算得出。另外，各组动物给药4周后禁食14h，动物以45mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，再按IOOU/kg体重尾静脉注射肝素。15min内，腹主动脉取血，分离血浆用于检测脂蛋白酯酶(LPL)、肝脂酶(HL)活性。结果以每毫升血浆每小时在反应系统中产生1微摩尔的游离脂肪酸为1个酶活性单位表示。数据以平均值土标准差表示，所有数据按方差分析行统计学处理。结果1.与正常对照组相比，高脂血症模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C含量明显增高，HDL/LDL比值明显降低，血浆肝脂酶、脂蛋白脂酶活性均明显降低，且统计学表明有显著性差异，表明高脂血症模型大鼠复制成功。(见表5)。2.与高脂血症模型组大鼠相比，口服给予3'-脱氧腺苷作用与非诺贝特相似，均可使髙脂血症模型组大鼠血清中升高的TC、TG、LDL-C含量明显降低，且3'-脱氧腺苷高、中、低剂量组作用强度有一定的量效关系；高剂量3'-脱氧腺苷(50mg/kg)还可同时降低血浆肝脂酶、脂蛋O脂酶的活性，中、低剂量组则作用不明显。总的来说，表明3'-脱氧腺苷具有明显的降血脂作用。(见表5)。结论3-脱氧腺苷对喂高脂词料形成的高脂血症模型大鼠有较好的降低向.清TC、TG、LDI,-C含量及血浆肝脂酶、脂蛋白脂酶活性的作用。表5.3-脱氧腺苷类对高脂<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>冬注*p<0.05,^p〈0.0Ql与正常对照组相比^p〈0.05,**p<0.01,'"p〈0.001与高脂血症模型组组相比。实施例7:3'-脱氧腺苷对高脂血症模型金黄地鼠血脂水平的影响材料及方法金黄地鼠，金黄地鼠56只，雄性，90110g，购自长春高新医学动物实验研究中心，合格证号SCXK-吉2003-0004。3-脱氧腺苷(从蛹虫草子实体中分离得到，经分析纯度在99.9%以上)。基础饲料与高脂饲料，高脂饲料配方79.8%普通基础饲料，20%猪油，0.2%胆固醇。饲料基础饲料与卨脂饲料，均由中国医学科学院实验动物研究所提供，许可证号京动许字003，合格证号0015790。基础饲料配方20%面粉，10%米粉，20°/。玉米，20%豆粉，25%麸皮，2%骨粉，2%鱼粉。高脂饲料配方85.5%基础词料，10%猪油，4%胆固醇，0.2%甲基硫氧嘧啶(北京福星化工厂，批号951010)。非诺贝特，非诺贝特片，法国利博福尼制药公司，批准文号H20050004，批号87517甘油三酯(TG)试剂盒，总胆固醇(TC)试剂盒，低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)试剂盒，高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)试剂盒，均购自北京中生北控试剂公司，TC:070172、070381;TG:071472、071571;HDL-C:061204、070308;LDL-C:070108、070407;ALT:070631胆固醇，上海惠世生化试剂有限公司；丙硫氧嘧啶片，上海复星朝晖药业有限公司；脱氧胆酸钠，北京奥博星生物技术有限责任公司；TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT检测试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司；SOD检测试剂盒，长春汇力生物技术有限公司，批号2007001;丙二醛(批号20070402)、总脂酶(批号070118、070814)、游离脂肪酸(批号20070721)、考马斯亮兰蛋白检测试盒(批号070514)南京建成生物工程研究所。SeperateMax190酶标仪，MolecularDevicesCorporationSunnyvale,CA.金黄地鼠以普通饲料喂养适应实验环境1周后眼眶静脉采血，测定血清TC和TG含量。兼顾体重血清TC和TG和含量，进行分层随机分组。大鼠分成六组正常对照组，高脂模型组，非诺贝特组(40mg/kg)，3'-脱氧腺苷50mg/kg组，3'-脱氧腺苷25mg/kg组，3'-脱氧腺苷12.5mg/kg组，每组8只。正常对照组大鼠给予普通饲料，其他各组给高脂饲料，连续4周，均无限量供给。同时各给药组每天灌胃一次，各组给药体积均为1.0ml/100g体重，连续给药4周。正常对照组及高脂血症模型组每天给予等体积生理盐水。各组动物给药4周后禁食12h后，眼眶静脉取血，常规制备血清，以试剂盒测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量。并计算高密度脂蛋白与低密度脂蛋白的比值(HDL/LDL)。测定方法按照试剂盒说明书进行，以酶标仪(波长500mn)测定吸光度。另外，各组动物给药4周后禁食14h，动物以45mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，再按IOOU/kg体重尾静脉注射肝素。15min内，腹主动脉取血，分离血浆用于检测脂蛋白酯酶(LPL)、肝脂酶(HL)活性。结果以每毫升血浆每小时在反应系统中产生1微摩尔的游离脂肪酸为1个酶活性单位表示。数据以平均值土标准差表示，所有数据按方差分析行统计学处理。结果1.与正常对照组相比，高脂血症模型组金黄地鼠血清TC、TG、LDL-C含量明显增高，HDL/LDL比值明显降低，血浆肝脂酶、脂蛋白脂酶活性均明显降低，且统计学表明有显著性差异，表明高脂血症金黄地鼠模型复制成功。(见表5)。2.与高脂血症模型组金黄地鼠相比，口服给予3'-脱氧腺苷作用与非诺贝特相似，均可使高脂血症模型组金黄地鼠血清屮升高的TC、TG、LDL-C含量明显降低，且3'-脱氧腺苷高、中、低剂量组作用强度有一定的量效关系；高剂量3'-脱氧腺苷(50mg/kg)还可同时降低高脂血症金黄地鼠血浆肝脂酶、脂蛋白脂酶的活性，中、低剂量组则作用不明显。总的来说，表明3'-脱氧腺苷具有明显的降血脂作用。(见表6)。结论3-脱氧腺苷对喂高脂饲料形成的高脂血症高脂血症金黄地鼠模型有较好的降低血清TC、TG、LDL-C含量及血浆肝脂酶、脂蛋Q脂酶活性的作用。<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>备注e=p<0.01,战p〈0.001与正常对照组相比；*p<0.05,**p〈0.01,"*[K0.OOl与高脂血症模型组组相比。权利要求1.如式(I)所示的3’-脱氧腺苷在制备预防和/或治疗肥胖及肥胖相关性疾病的药物和/或保健品中的应用2.根据权利要求l所述的应用，其特征在于，所述的肥胖相关性疾病是2型糖尿病、冠心病、高血压、子宫内膜癌/乳腺癌/结肠癌/直肠癌/前列腺癌、胆囊及胆管疾病、骨关节炎、睡眠-呼吸暂停综合征、静脉血栓。3.如式(I)所示的3'-脱氧腺苷在制备预防和/或治疗胰岛素抵抗及其相关性疾病的药物和/或保健品中的应用(1)。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的胰岛素抵抗及其相关性疾病是糖耐量降低、2型糖尿病、肥胖症、血脂异常、非酒精性脂肪肝、冠心病。5.如式(I)所示的3'_脱氧腺苷在制备预防和/或治疗高胆固醇血症和/或混合型高脂血症及脂蛋白异常血症药物和/或保健品中的应用(1)。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的脂蛋白异常血症是指高密度脂蛋白降低和/或低密度脂蛋白升高。7.如式(I)所示的3'-脱氧腺苷在制备预防和/或治疗高胆固醇血症和/或混合型高脂血症及脂蛋白异常血症相关的心脑血管疾病药物中的应用<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(1)。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的心脑血管性疾病是脑卒中、冠心病、心脏猝死、高血压、动脉粥样硬化、周围血管疾病。9.如式(I)所示的3'-脱氧腺苷在制备预防和/或治疗高胆固醇血症和/或混合型高脂血症及脂蛋白异常血症相关的糖耐量异常、2型糖尿病、脂肪肝、肝硬化、胆石症、胰腺炎、眼底出血、失明、跛行、高尿酸血症的药物的应用<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(1)。10.如式(I)所示的3'-脱氧腺苷在制备预防和/或治疗遗传性脂质代谢缺陷病人血脂异常及脂蛋白异常血症药物中的应用<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>(1)。全文摘要本发明公开了3′-脱氧腺苷减肥、胰岛素增敏和改善脂代谢的用途，具体而言，涉及如式(I)所示的3′-脱氧腺苷作为减肥药、胰岛素增敏剂和血脂调节剂在药物和/或保健品中的用途，特别是3′-脱氧腺苷预防和治疗高胆固醇血症、混合型高脂血症和脂蛋白异常血症中的用途。文档编号A61P9/12GK101574144SQ20081010602公开日2009年11月11日申请日期2008年5月7日优先权日2008年5月7日发明者菲叶,平朱,朱海波申请人:中国医学科学院药物研究所